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新城疫病毒F_(48)E_(9)株HN基因的克隆与酶切分析
被引量：
10
1
作者
曹殿军
刘春丽
+2 位作者
王莉林
张莹
卢景良
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
1997年第4期326-330,共5页
为深入探讨新城疫病毒（ＮＤＶ）的结构与功能的关系，扩增和克隆了Ｆ４８Ｅ９株ＮＤＶ的ＨＮ基因。首先以提取的Ｆ４８Ｅ９株ＮＤＶ基因组ＲＮＡ为模板逆转录合成第一链ｃＤＮＡ，然后用ＨＮ基因特异性引物作ＰＣＲ扩增ＨＮｃＤＮＡ，...
为深入探讨新城疫病毒（ＮＤＶ）的结构与功能的关系，扩增和克隆了Ｆ４８Ｅ９株ＮＤＶ的ＨＮ基因。首先以提取的Ｆ４８Ｅ９株ＮＤＶ基因组ＲＮＡ为模板逆转录合成第一链ｃＤＮＡ，然后用ＨＮ基因特异性引物作ＰＣＲ扩增ＨＮｃＤＮＡ，结果得到１条分子量约１．８ｋｂ的ＤＮＡ带，与ＮＤＶＨＮ基因的大小一致。Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交进一步证实其为ＨＮ特异性ｃＤＮＡ。随后采用平端连接法将其克隆到ｐＳＶ·Ｓｐｏｒｔｌ质粒中，应用限制性内切酶ＥｃｏＲＩ、ＳｃａⅠ、ＭｌｕⅠ、ＡｐａⅠ、ＰｓｔⅠ、和ＳｍａⅠ对ＮＤＶＦ４８Ｅ９株ＨＮｃＤＮＡ重组质粒作单酶或双酶切，结果表明，ＮＤＶＦ４８Ｅ９株ＨＮ基因较ＨｉｔｃｈｎｅｒＢ１株的ＨＮ基因缺少１个ＭｌｕⅠ位点（７０５ｂｐ左右），多１个ＰｓｔⅠ位点（８０２ｂｐ左右）。
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关键词
新城疫病毒
HN基因
克隆
与
鉴定
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职称材料
华癸中生根瘤菌共生基因exo56的克隆和功能初步分析
被引量：
2
2
作者
程国军
陈大松
+2 位作者
李友国
谢福莉
周俊初
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期483-486,共4页
利用Tn5-sacB转座子随机插入突变的方法,从Mesorhizobium huakuii7653R的400个突变株中筛选获得1个共生缺失突变株HK56。使用热不对称交错PCR(TAIL-PCR)的方法从M.huakuii7653R中克隆了exo56序列。exo56全长969 bp,编码322个氨基酸,其...
利用Tn5-sacB转座子随机插入突变的方法,从Mesorhizobium huakuii7653R的400个突变株中筛选获得1个共生缺失突变株HK56。使用热不对称交错PCR(TAIL-PCR)的方法从M.huakuii7653R中克隆了exo56序列。exo56全长969 bp,编码322个氨基酸,其编码产物Exo56与糖基转移酶2个家族的成员有很高的相似性,糖基转移酶为胞外多糖合成所必需。盆栽结果表明,exo56基因突变株只能形成少量的不固氮根瘤。
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关键词
华癸中生根瘤菌
共生基因
克隆
与
鉴定
胞外多糖
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职称材料
花生多胺氧化酶基因的克隆与鉴定(英文)
被引量：
2
3
作者
万小荣
夏永坚
+1 位作者
郑奕雄
何生根
《花生学报》
2010年第1期28-32,共5页
多胺作为一类新型植物生理活性物质,对植物生长发育起着重要作用,在细胞工程与农业生产中具有广阔的应用价值。多胺氧化酶(Polyamine oxidase,PAO)是催化多胺降解的关键酶之一,对调控植物细胞中多胺浓度非常重要,影响植物的生长发育、...
多胺作为一类新型植物生理活性物质,对植物生长发育起着重要作用,在细胞工程与农业生产中具有广阔的应用价值。多胺氧化酶(Polyamine oxidase,PAO)是催化多胺降解的关键酶之一,对调控植物细胞中多胺浓度非常重要,影响植物的生长发育、形态建成过程。根据国际DNA数据库中已报道的PAO蛋白的保守结构域,设计简并引物(degenerate pri mer),通过RT-PCR方法首次从花生(仲恺花1号)中克隆PAO基因cDNA序列,并利用BLASTn、BLASTp及多重序列排比(Multiple Sequence Alignment)等生物信息学方法对所克隆的cDNA进行序列分析与鉴定,初步确定已从花生中克隆到PAO基因的同系物(homolog)。根据克隆的花生PAOcDNA序列(AhPAO1)设计特异引物,通过半定量RT-PCR方法检测花生胚根、胚芽和幼叶中AhPAO1基因的表达,结果发现胚根中AhPAO1基因表达最强,胚芽和幼叶中的表达无明显差异。本研究为进一步了解花生种子萌发和幼苗生长发育过程中多胺氧化酶基因表达的时空特异性奠定实验基础,并对进一步利用植物基因工程技术综合调控花生体内多胺水平有重要实践意义。
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关键词
花生
基因
克隆
与
鉴定
多胺氧化酶
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职称材料
题名
新城疫病毒F_(48)E_(9)株HN基因的克隆与酶切分析
被引量：
10
1
作者
曹殿军
刘春丽
王莉林
张莹
卢景良
机构
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室
出处
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
1997年第4期326-330,共5页
基金
国家自然科学基金和"八五"攀登计划资助项目
文摘
为深入探讨新城疫病毒（ＮＤＶ）的结构与功能的关系，扩增和克隆了Ｆ４８Ｅ９株ＮＤＶ的ＨＮ基因。首先以提取的Ｆ４８Ｅ９株ＮＤＶ基因组ＲＮＡ为模板逆转录合成第一链ｃＤＮＡ，然后用ＨＮ基因特异性引物作ＰＣＲ扩增ＨＮｃＤＮＡ，结果得到１条分子量约１．８ｋｂ的ＤＮＡ带，与ＮＤＶＨＮ基因的大小一致。Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交进一步证实其为ＨＮ特异性ｃＤＮＡ。随后采用平端连接法将其克隆到ｐＳＶ·Ｓｐｏｒｔｌ质粒中，应用限制性内切酶ＥｃｏＲＩ、ＳｃａⅠ、ＭｌｕⅠ、ＡｐａⅠ、ＰｓｔⅠ、和ＳｍａⅠ对ＮＤＶＦ４８Ｅ９株ＨＮｃＤＮＡ重组质粒作单酶或双酶切，结果表明，ＮＤＶＦ４８Ｅ９株ＨＮ基因较ＨｉｔｃｈｎｅｒＢ１株的ＨＮ基因缺少１个ＭｌｕⅠ位点（７０５ｂｐ左右），多１个ＰｓｔⅠ位点（８０２ｂｐ左右）。
关键词
新城疫病毒
HN基因
克隆
与
鉴定
Keywords
NDV
HN gene
cloning and identification
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
华癸中生根瘤菌共生基因exo56的克隆和功能初步分析
被引量：
2
2
作者
程国军
陈大松
李友国
谢福莉
周俊初
机构
华中农业大学农业微生物学国家重点实验室
出处
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期483-486,共4页
基金
科技部教学实验用微生物资源平台建设项目(2005DKA21208-6)
中南民族大学自然科学基金重点项目(YZZ06013)资助
文摘
利用Tn5-sacB转座子随机插入突变的方法,从Mesorhizobium huakuii7653R的400个突变株中筛选获得1个共生缺失突变株HK56。使用热不对称交错PCR(TAIL-PCR)的方法从M.huakuii7653R中克隆了exo56序列。exo56全长969 bp,编码322个氨基酸,其编码产物Exo56与糖基转移酶2个家族的成员有很高的相似性,糖基转移酶为胞外多糖合成所必需。盆栽结果表明,exo56基因突变株只能形成少量的不固氮根瘤。
关键词
华癸中生根瘤菌
共生基因
克隆
与
鉴定
胞外多糖
Keywords
Mesorhizobium huakuii
symbiotic gene
cloning and identification
exopolysaccharides
分类号
S154.38 [农业科学—土壤学]
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职称材料
题名
花生多胺氧化酶基因的克隆与鉴定(英文)
被引量：
2
3
作者
万小荣
夏永坚
郑奕雄
何生根
机构
仲恺农业工程学院生命科学学院
仲恺农业工程学院农业与园林学院
出处
《花生学报》
2010年第1期28-32,共5页
基金
国家自然科学基金(30800077)
广东省自然科学基金(8251022501000002)
仲恺农业工程学院创新基金(H1408028)资助
文摘
多胺作为一类新型植物生理活性物质,对植物生长发育起着重要作用,在细胞工程与农业生产中具有广阔的应用价值。多胺氧化酶(Polyamine oxidase,PAO)是催化多胺降解的关键酶之一,对调控植物细胞中多胺浓度非常重要,影响植物的生长发育、形态建成过程。根据国际DNA数据库中已报道的PAO蛋白的保守结构域,设计简并引物(degenerate pri mer),通过RT-PCR方法首次从花生(仲恺花1号)中克隆PAO基因cDNA序列,并利用BLASTn、BLASTp及多重序列排比(Multiple Sequence Alignment)等生物信息学方法对所克隆的cDNA进行序列分析与鉴定,初步确定已从花生中克隆到PAO基因的同系物(homolog)。根据克隆的花生PAOcDNA序列(AhPAO1)设计特异引物,通过半定量RT-PCR方法检测花生胚根、胚芽和幼叶中AhPAO1基因的表达,结果发现胚根中AhPAO1基因表达最强,胚芽和幼叶中的表达无明显差异。本研究为进一步了解花生种子萌发和幼苗生长发育过程中多胺氧化酶基因表达的时空特异性奠定实验基础,并对进一步利用植物基因工程技术综合调控花生体内多胺水平有重要实践意义。
关键词
花生
基因
克隆
与
鉴定
多胺氧化酶
Keywords
Arachis hypogaea
gene cloning and characterization
polyamine oxidase
分类号
S565.2 [农业科学—作物学]
Q781 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
新城疫病毒F_(48)E_(9)株HN基因的克隆与酶切分析
曹殿军
刘春丽
王莉林
张莹
卢景良
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
1997
10
下载PDF
职称材料
2
华癸中生根瘤菌共生基因exo56的克隆和功能初步分析
程国军
陈大松
李友国
谢福莉
周俊初
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
2
下载PDF
职称材料
3
花生多胺氧化酶基因的克隆与鉴定(英文)
万小荣
夏永坚
郑奕雄
何生根
《花生学报》
2010
2
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
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