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Klotho、Caspase-3、Bcl-2表达水平评估急性脑梗死疾病发展程度的诊断价值 被引量：8
1
作者 徐文武 汪昆 《国际检验医学杂志》 CAS 2021年第16期2030-2032,2048,共4页
目的探讨克老素(Klotho)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)表达水平评估急性脑梗死(ACI)患者疾病发展程度的诊断价值。方法选取2015年3月至2017年3月在该院急诊科接受诊断和治疗的110例ACI患者作为研究组,同时... 目的探讨克老素(Klotho)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)表达水平评估急性脑梗死(ACI)患者疾病发展程度的诊断价值。方法选取2015年3月至2017年3月在该院急诊科接受诊断和治疗的110例ACI患者作为研究组,同时选取在该院进行体检的100例不合并脑部疾病者作为对照组。通过磁共振扫描检测脑梗死病灶的体积,采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)对所有研究对象神经缺损情况进行评价。采用酶联免疫吸附试验检测ACI患者入院当天和入院后12 h、1 d、5 d和10 d及对照组体检当天血清Klotho、Caspase-3、Bcl-2表达水平。结果研究组患者梗死后血清Klotho水平明显降低,而Bcl-2和Caspase-3水平均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组Klotho、Caspase-3和Bcl-2水平均在1 d左右达到峰值,而后在10 d内恢复至与对照组相似水平。大梗死组和中梗死组血清Klotho水平均明显低于小梗死组,而Bcl-2和Caspase-3水平均明显高于小梗死组,差异均有统计学意义(P<0.05)。神经功能重度缺损组血清Klotho水平明显低于轻中度缺损组,而Bcl-2和Caspase-3水平均明显高于轻中度缺损组,差异均有统计学意义(P<0.05)。相关性分析结果显示,血清Klotho水平与梗死体积和NIHSS评分均呈负相关(P<0.05),而Bcl-2和Caspase-3水平与梗死体积和NIHSS评分均呈正相关(P<0.05)。结论Klotho、Caspase-3、Bcl-2水平可用于评估ACI患者疾病发展程度,且评估价值确切。 展开更多
关键词 急性脑梗死 克老素 半胱氨酸蛋白酶-3 B细胞淋巴瘤-2基因
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Klotho基因3个位点单核苷酸多态性与冠心病相关性研究 被引量：6
2
作者 尤宁 刘晓林 +1 位作者 田小春 马厚勋 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期579-584,共6页
目的:通过研究克老素(Klotho,KL)基因3个单核苷酸多态性,揭示其与冠心病(Coronary heart disease,CHD)的相关性。方法:随机选取CHD患者317例为实验组,同期随机选取正常健康人301例正常对照组。提取外周血白细胞基因组DNA,应用单一等位... 目的:通过研究克老素(Klotho,KL)基因3个单核苷酸多态性,揭示其与冠心病(Coronary heart disease,CHD)的相关性。方法:随机选取CHD患者317例为实验组,同期随机选取正常健康人301例正常对照组。提取外周血白细胞基因组DNA,应用单一等位基因特异性引物PCR技术检测KL基因3个SNP位点的基因型,分析其各等位基因与CHD的相关性。结果:CHD组KL G-395A SNP AA等位基因频率较正常对照组增高,差异有统计学意义(P<0.05);按性别分层研究发现CHD男性亚组AA等位基因频率较正常对照组增高(P<0.05)。KL C370S SNP CC等位基因频率较对照组增高(P<0.05),而其CS等位基因频率较对照组低(P<0.05);按性别分层研究发现,CHD男性亚组CC频率较对照组偏高,差异有统计学意义(P<0.05),而其CS频率较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。未发现CHD组F-352V基因型多态性FF、FV和VV频率与对照组比较差异有统计学意义(P>0.05)。组合分布研究发现:CHD组KL G-395A+F352V+C370C、KL A-395A+F352V+C370C与KL A-395A+F352V+C370S组合基因型分布频率较正常对照组明显增高(P<0.05),而其KL G-395A+F352V+C370S组合基因型分布频率较正常对照组低(P<0.05)。按性别分层研究发现在CHD组男性患者中KL G-395A+F352V+C370C、KL A-395A+F352V+C370C组合基因型频率亦较正常对照男性亚组明显增高(P<0.05),而KL G-395A+F352V+C370S组合基因型分布频率则较正常对照男性亚组低(P<0.05);同时还发现在CHD女性亚组患者KL A-395A+F352V+C370S组合分布基因型分布频率较正常对照女性亚组明显增高(P<0.05)。结论:研究发现KL基因型G-395A SNP AA男性携带者易患CHD,而KL C370S SNP突变CS杂合子男性携带者则不易患CHD。组合分布研究还发现KL G-395A+F352V+C370C、KL A-395A+F352V+C370C男性携带者与KL A-395A+F352V+C370S女性携带者易患CHD,而KL G-395A+F352V+C370S男性携带者则不易患CHD。 展开更多
关键词 克老素 单核苷酸多态性 冠心病 组合基因
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Klotho蛋白抑制POCD老年大鼠脑组织及小胶质细胞中FGF23/NF-κB p65的表达 被引量：2
3
作者 段海霞 王翀鹤 +2 位作者 王庆辉 姜万维 黄学洙 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2022年第5期548-554,561,共8页
目的以POCD老年大鼠及BV2小胶质细胞作为研究对象,探究Klotho蛋白对POCD的治疗作用及机制。方法SD老年大鼠45只,随机分为control组,七氟醚麻醉组(sevo组)、七氟醚麻醉手术组(sevo+surgery组)。采用水迷宫评估大鼠认知状态,HE、TUNEL染色... 目的以POCD老年大鼠及BV2小胶质细胞作为研究对象,探究Klotho蛋白对POCD的治疗作用及机制。方法SD老年大鼠45只,随机分为control组,七氟醚麻醉组(sevo组)、七氟醚麻醉手术组(sevo+surgery组)。采用水迷宫评估大鼠认知状态,HE、TUNEL染色和ELISA检测大鼠海马组织病变、凋亡及促炎介质的表达水平。Western blot检测大鼠海马组织和BV2细胞中相关蛋白表达。细胞免疫荧光检测BV2细胞中NF-κB p-P65表达。结果sevo组和sevo+surgery组老年大鼠出现明显认知障碍,海马区受损,炎症因子表达增加,大量神经元细胞凋亡,Klotho蛋白表达下调,而FGF23/NF-κB通路蛋白表达上调。LPS和七氟醚诱导BV2细胞炎症因子表达增加,FGF23/NF-κB通路蛋白表达上调,然而Klotho治疗降低了上述蛋白和炎症因子的表达。结论Klotho可能在POCD的防治中成为新的靶点,其机制可能与Klotho蛋白抑制小胶质细胞中FGF23/NF-κB的表达有关。 展开更多
关键词 七氟醚 术后认知功能障碍 克老素 小胶质细胞 成纤维细胞生长因子23 核因子-κB
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克老素抑制地塞米松诱导的MC3T3-E1成骨细胞凋亡 被引量：3
4
作者 黄倩 李宝善 +2 位作者 梁霄 刘丹 马厚勋 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期570-576,共7页
目的探究体外转染克老素(Klotho,KL)基因对地塞米松(dexamethason,DEX)诱导的MC3T3-E1成骨细胞凋亡的影响。方法用携带KL基因的重组腺病毒(Ad-KL)及携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒(Ad-GFP)感染细胞,并建立DEX诱导凋亡的细胞模型。运... 目的探究体外转染克老素(Klotho,KL)基因对地塞米松(dexamethason,DEX)诱导的MC3T3-E1成骨细胞凋亡的影响。方法用携带KL基因的重组腺病毒(Ad-KL)及携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒(Ad-GFP)感染细胞,并建立DEX诱导凋亡的细胞模型。运用荧光倒置显微镜观察重组腺病毒的转染效果,qPCR与Western blot法分析KL mRNA和蛋白表达情况;CCK-8法检测不同浓度DEX作用于MC3T3-E1细胞后的存活率及各研究组细胞的生存情况;流式细胞仪分析各研究组细胞的凋亡率;qPCR与Western blot分析凋亡标志物的mRNA、蛋白表达;免疫荧光分析caspase-9的荧光蛋白表达情况。结果重组腺病毒成功感染MC3T3-E1成骨细胞,KL组和KL+DEX组的KL mRNA与蛋白表达量较非转染组明显升高。CCK-8法检测出DEX的适宜干预浓度为2.0 mmol·L^(-1)。DEX组、GFP+DEX组较其余组细胞存活率明显降低、凋亡率明显增加,Bax、Bcl-2的mRNA与蛋白表达分别表现出增加和降低趋势;KL组细胞存活率、凋亡率,以及Bcl-2、Bax mRNA与蛋白表达较DEX组及KL+DEX组均明显改善。结论大剂量DEX的运用能够诱发MC3T3-E1成骨细胞凋亡,上调KL表达具有抵抗DEX诱导成骨细胞凋亡的作用,提示上调KL表达可改善糖皮质激素诱导性骨质疏松,为大剂量使用糖皮质激素所致医源性骨质疏松的治疗提供新的靶点。 展开更多
关键词 克老素 地塞米松 MC3T3-E1成骨细胞 凋亡 Bcl-2 BAX CASPASE-9
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重组腺相关病毒介导克老素基因表达对2型糖尿病大鼠肾脏纤维化的作用及其机制 被引量：2
5
作者 邓明洪 马厚勋 +4 位作者 罗玉梅 李运奎 吴平 王艳娇 李宝善 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第11期1593-1598,共6页
目的观察重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus,rAAV)介导的克老素(klotho,KL)基因表达对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠肾脏纤维化的影响及其机制。方法将SD大鼠随机分为4组,随机选3组建立T2DM大鼠模型,... 目的观察重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus,rAAV)介导的克老素(klotho,KL)基因表达对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠肾脏纤维化的影响及其机制。方法将SD大鼠随机分为4组,随机选3组建立T2DM大鼠模型,分别经尾静脉注射rAAV.mKL(T2DM-mKL组)、rAAV.GFP(T2DM-GFP组)和PBS(T2DM-PBS组),正常对照(SD-PBS组)大鼠经尾静脉注射PBS,12周后,处死动物,收集肾脏组织标本,冰冻切片观察GFP,Masson染色观察肾脏组织病理变化及胶原纤维表达;免疫组化法检测各组大鼠肾脏组织中KL和波形蛋白(vimentin,VIM)的表达;RT-PCR法检测各组大鼠肾脏组织中Rho激酶(Rho associated coiled-coilforming protein kinase,ROCK)基因mRNA转录水平;Western blot法检测各组大鼠肾脏组织中ROCKⅠ蛋白活性。结果 T2DM-GFP组、T2DM-mKL组大鼠肾脏组织中GFP表达较强;T2DM-mKL组大鼠肾小球基底膜结构较清晰完整,肾小球系膜区及肾小管间质区胶原纤维明显较T2DM-PBS组和T2DM-GFP组减少;T2DM-mKL组KL蛋白的表达明显高于其他各组(P<0.01),VIM蛋白的表达明显低于其他各组,与T2DM-PBS组和T2DM-GFP组VIM蛋白的表达相比,差异有统计学意义(P<0.01);T2DM-mKL组ROCKⅠmRNA转录水平及其蛋白活性均明显低于T2DM-PBS组(P均<0.05)。结论 rAAV.mKL转染可明显增加T2DM大鼠肾脏中KL基因的表达,延缓糖尿病肾纤维化进程,其机制可能与KL抑制ROCK信号通路活性相关。 展开更多
关键词 克老素 腺相关病毒 糖尿病 2型 肾脏纤维化 波形蛋白 蛋白激酶
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老年高血压患者克老素基因单核苷酸多态性与其左心室肥厚的相关性研究 被引量：1
6
作者 蒋宜 刘晓林 +2 位作者 田晓春 马厚勋 吴平 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期891-895,共5页
目的:研究老年高血压人群克老素(klotho,KL)基因3个位点单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与其左心室肥厚(left ventricle hypertrophy,LVH)的相关性。方法:选择362例老年高血压患者作为研究对象,提取外周血白细胞基... 目的:研究老年高血压人群克老素(klotho,KL)基因3个位点单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与其左心室肥厚(left ventricle hypertrophy,LVH)的相关性。方法:选择362例老年高血压患者作为研究对象,提取外周血白细胞基因组DNA,应用单一等位基因特异性引物PCR技术检测KL基因3个SNP位点的基因型,同时通过心脏彩超测量相应指标包括左心室舒张末期直径、左心室后壁、室间隔厚度,并测定其身高与体质量等指标。结果:老年高血压病中LVH组KL G-395A SNP GG等位基因频率较无LVH组低(P<0.05),按性别分层研究发现高血压病女性患者中LVH组KL G-395A SNP GG等位基因频率亦较无LVH组明显降低(P<0.05);高血压病LVH组其KL G-395A SNP AA等位基因频率较无LVH组明显增高(P<0.05),而按性别分层研究却未发现存在性别差异性。高血压病LVH组KLF352V FF、FV、VV及KLC 370S CC、CS、SS等位基因型频率与无LVH组相比较均无统计学意义(P>0.05)。结论:老年高血压患者KL基因G-395A SNP与其LVH有相关性,并发现老年高血压女性患者中GG等位基因携带者可能不易发生LVH。 展开更多
关键词 克老素 单核苷酸多态性 高血压 左心室肥厚 老年
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克老素在脊髓损伤中的表达及相关性分析
7
作者 杨宁 董彬 +5 位作者 傅莉 王嘉钰 黄煜 任丽莉 金梅花 韩东河 《解剖学杂志》 CAS CSCD 2018年第1期34-36,74,共4页
目的:观察大鼠脊髓损伤模型中克老素的表达变化,分析克老素的表达与神经损伤之间的相关性。方法:利用钳夹法制备大鼠脊髓损伤模型(SCI),并随机分为正常对照组(Sham)、损伤1周、2周、4周组。应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、免疫荧光... 目的:观察大鼠脊髓损伤模型中克老素的表达变化,分析克老素的表达与神经损伤之间的相关性。方法:利用钳夹法制备大鼠脊髓损伤模型(SCI),并随机分为正常对照组(Sham)、损伤1周、2周、4周组。应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、免疫荧光染色和蛋白印迹方法检测各实验组脊髓组织中克老素mRNA及蛋白的表达,利用ELISA法检测组织8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量,并分析其相关性。结果:克老素在脊髓组织中表达,且损伤组脊髓组织中克老素mRNA及蛋白表达水平明显低于假手术组,且随病程延长而降低。ELISA检测结果显示,损伤组脊髓组织中8-OHdG含量明显高于假手术组,且随病程延长而增加,与克老素蛋白表达呈负相关关系。结论:克老素的表达变化与大鼠脊髓损伤之间呈负相关,提示克老素可能参与脊髓损伤后神经细胞退变的病理过程。 展开更多
关键词 克老素 脊髓损伤 氧化损伤 大鼠
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