目的观察柴胡皂苷D对非小细胞肺癌(NSCLC)H460细胞增殖、凋亡的影响,并探讨可能机制。方法取对数期H460细胞,随机分为对照组,实验A、B、C组,对照组常规培养,实验A组加入柴胡皂苷D(20μmol/L),实验B组加入colivelin[Janus蛋白酪氨酸激酶2...目的观察柴胡皂苷D对非小细胞肺癌(NSCLC)H460细胞增殖、凋亡的影响,并探讨可能机制。方法取对数期H460细胞,随机分为对照组,实验A、B、C组,对照组常规培养,实验A组加入柴胡皂苷D(20μmol/L),实验B组加入colivelin[Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导及转录激活子3(STAT3)通路激活剂](0.5μmol/L),实验C组加入柴胡皂苷D(20μmol/L)与colivelin(0.5μmol/L)。MTT法检测细胞增殖能力;双染法检测细胞凋亡率;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测细胞白介素-2(IL-2)、白介素-10(IL-10)mRNA表达量;Western blotting法检测细胞p-JAK2、JAK2、p-STAT3、STAT3蛋白表达量。结果与对照组比较,实验A组24、48、72 h MTT实验吸光度值、细胞IL-10 mRNA表达量、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3降低,细胞凋亡率、IL-2 mRNA表达量升高(P<0.05),实验B组24、48、72 h MTT实验吸光度值、细胞IL-10 mRNA表达量、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3升高,细胞凋亡率、IL-2 mRNA表达量降低(P<0.05);与实验A组比较,实验C组24、48、72 h MTT实验吸光度值、细胞IL-10 mRNA表达量、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3升高,细胞凋亡率、IL-2 mRNA表达量降低(P<0.05);与实验B组比较,联合组24、48、72 h MTT实验吸光度值、细胞IL-10 mRNA表达量、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3降低,细胞凋亡率、IL-2 mRNA表达量升高(P<0.05)。结论柴胡皂苷D可抑制NSCLC细胞增殖,促进其凋亡,其作用机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路有关。展开更多
目的探讨星形胶质细胞外泌体(Astrocyte exosomes,Ast-exos)对癫痫大鼠小胶质细胞活化及Janus激酶2(Janus kinase,JAK2)/信号转导与转录激活子3(Signal transducer and activator of transcription,STAT3)通路的影响。方法将雄性SD大鼠...目的探讨星形胶质细胞外泌体(Astrocyte exosomes,Ast-exos)对癫痫大鼠小胶质细胞活化及Janus激酶2(Janus kinase,JAK2)/信号转导与转录激活子3(Signal transducer and activator of transcription,STAT3)通路的影响。方法将雄性SD大鼠用随机数字表法分为正常对照组、模型组、Ast-exos组(尾静脉注射Ast-exos,0.5 mg/kg)、Coumermycin A1组(JAK2通路激活剂,4.0 mg/kg)、Ast-exos+Coumermycin A1组,每组各10只;腹腔注射戊四氮(35 mg/kg)建立大鼠癫痫模型,各组给药14 d后观察大鼠行为,对癫痫症状进行评分;处死大鼠,取海马组织,免疫组化法检测小胶质细胞活化数目;酶联免疫吸附测定法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测海马组织炎性因子-白细胞介素(Interleukin,IL)-1β、IL-6及神经递质γ氨基丁酸水平;尼氏及原位末端标记法(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)染色观察海马组织神经元损伤及凋亡状况;免疫荧光共定位法检测JAK2磷酸化蛋白(Phosphorylated JAK2,p-JAK2)与活化小胶质细胞共表达数目;蛋白免疫印迹法(Western blot)法检测JAK2/STAT3通路磷酸化蛋白p-JAK2、磷酸化STAT3(Phosphorylated STAT3,p-STAT3)、通路下游炎症相关蛋白IL-1β、IL-6、凋亡靶蛋白-半胱氨酸天冬氨酸酶-3(Cysteyl aspartate specific protease,Caspase-3)表达水平。结果与正常对照组比较,模型组大鼠癫痫发作频率及发作等级评分升高,海马神经元损伤及凋亡加重,海马组织中炎性因子表达、小胶质细胞活化数目、p-JAK2与活化小胶质细胞阳性共表达数目均升高,JAK2/STAT3磷酸化活化蛋白及其介导的下游炎症及凋亡途径相关蛋白表达水平升高(P<0.05);Ast-exos可改善癫痫发作症状,缓解癫痫大鼠海马神经元损伤及凋亡,抑制JAK2/STAT3磷酸化活化及其介导的下游炎症及凋亡途径激活,降低p-JAK2在活化小胶质细胞中表达,降低小胶质细胞活化数目及炎症因子表达水平(P<0.05);JAK2通路激活剂-Coume展开更多
目的分析磷酸化转录信号转导子及激活子3(phosphorylated signal transducer and activator of transcription-3,p-STAT3)/磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-AKT)信号通路及其靶基因细胞周期素D1(cyclinD1)在基底细胞...目的分析磷酸化转录信号转导子及激活子3(phosphorylated signal transducer and activator of transcription-3,p-STAT3)/磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-AKT)信号通路及其靶基因细胞周期素D1(cyclinD1)在基底细胞癌(basal cell carcinoma,BCC)皮损中的表达及其临床意义。方法选取2010年1月—2019年8月在山东省济南市人民医院皮肤科就诊且经组织病理及免疫组化确诊为BCC的60例患者石蜡标本,以及在本院接受外科整形手术并留存的正常皮肤组织标本的患者,分别纳入BBC组及正常组。分别采用免疫组化法、PCR法、Western印迹实验检测皮损处p-STAT3、p-AKT及cyclinD1表达,并分析BCC患者皮损处p-STAT3 mRNA、p-AKT mRNA、cyclinD1 mRNA与临床病理的关系。结果BCC组p-STAT3、p-AKT、cyclinD1平均光密度值,p-STAT3 mRNA、p-AKT mRNA、cyclinD1 mRNA及p-STAT3蛋白、p-AKT蛋白、cyclinD1蛋白表达显著高于正常组(P<0.05);且IBCC型BCC患者皮损中p-STAT3 mRNA、p-AKT mRNA、cyclinD1 mRNA表达显著高于NIBCC患者(P<0.05);BCC皮损中p-STAT3 mRNA、p-AKT mRNA、cyclinD1 mRNA表达与病理类型有显著相关性(P<0.01)。结论BCC皮损处存在p-STAT3、p-AKT、cyclinD1高表达现象,且IBCC型BCC患者皮损处p-STAT3 mRNA、p-AKT mRNA、cyclinD1 mRNA表达更高,值得临床重视。展开更多
目的敲低宫颈癌HeLa细胞中信号转导与转录激活子3(signal transducers and activators of tran-scription 3,STAT3)的表达,观察肿瘤细胞超微结构变化,并检测化疗药物诱导肿瘤细胞凋亡的情况。方法利用在线设计软件小分子干扰核糖核酸(sm...目的敲低宫颈癌HeLa细胞中信号转导与转录激活子3(signal transducers and activators of tran-scription 3,STAT3)的表达,观察肿瘤细胞超微结构变化,并检测化疗药物诱导肿瘤细胞凋亡的情况。方法利用在线设计软件小分子干扰核糖核酸(small interfering RNA,siRNA)Target Finder设计一对STAT3短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)的上下游引物,在宫颈癌HeLa细胞中特异性敲低STAT3的表达,通过透射电子显微镜观察对照组及STAT3敲低组HeLa细胞内染色体分布情况,并利用流式细胞术检测化疗药物多柔比星诱导对照组及STAT3敲低组细胞凋亡情况的差异。结果免疫印记表明,STAT3特异性shRNA可在HeLa细胞中显著敲低STAT3的表达;电镜观察发现,在HeLa细胞中敲低STAT3表达可显著诱导染色体边集现象;流式细胞术检测表明,敲低STAT3表达可显著增强多柔比星诱导的细胞凋亡。结论敲低STAT3表达可诱导宫颈癌细胞发生超微结构的改变,并增强宫颈癌细胞对化疗药物的敏感性。展开更多
文摘目的观察柴胡皂苷D对非小细胞肺癌(NSCLC)H460细胞增殖、凋亡的影响,并探讨可能机制。方法取对数期H460细胞,随机分为对照组,实验A、B、C组,对照组常规培养,实验A组加入柴胡皂苷D(20μmol/L),实验B组加入colivelin[Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导及转录激活子3(STAT3)通路激活剂](0.5μmol/L),实验C组加入柴胡皂苷D(20μmol/L)与colivelin(0.5μmol/L)。MTT法检测细胞增殖能力;双染法检测细胞凋亡率;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测细胞白介素-2(IL-2)、白介素-10(IL-10)mRNA表达量;Western blotting法检测细胞p-JAK2、JAK2、p-STAT3、STAT3蛋白表达量。结果与对照组比较,实验A组24、48、72 h MTT实验吸光度值、细胞IL-10 mRNA表达量、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3降低,细胞凋亡率、IL-2 mRNA表达量升高(P<0.05),实验B组24、48、72 h MTT实验吸光度值、细胞IL-10 mRNA表达量、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3升高,细胞凋亡率、IL-2 mRNA表达量降低(P<0.05);与实验A组比较,实验C组24、48、72 h MTT实验吸光度值、细胞IL-10 mRNA表达量、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3升高,细胞凋亡率、IL-2 mRNA表达量降低(P<0.05);与实验B组比较,联合组24、48、72 h MTT实验吸光度值、细胞IL-10 mRNA表达量、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3降低,细胞凋亡率、IL-2 mRNA表达量升高(P<0.05)。结论柴胡皂苷D可抑制NSCLC细胞增殖,促进其凋亡,其作用机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路有关。
