保幼激素的代谢 被引量：27

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作者 李胜 蒋容静 曹梅讯 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期389-393,共5页

保幼激素的代谢由保幼激素酯酶、保幼激素环氧水解酶和保幼激素二醇激酶等共同催化完成。在这些代谢酶的作用下 ,保幼激素代谢成保幼激素酸、保幼激素二醇、保幼激素酸二醇和保幼激素二醇磷酸。作者总结了保幼激素代谢的研究方法 ;按实... 保幼激素的代谢由保幼激素酯酶、保幼激素环氧水解酶和保幼激素二醇激酶等共同催化完成。在这些代谢酶的作用下 ,保幼激素代谢成保幼激素酸、保幼激素二醇、保幼激素酸二醇和保幼激素二醇磷酸。作者总结了保幼激素代谢的研究方法 ;按实验室和昆虫种类为线索 ,归纳和概括了每一种保幼激素代谢酶的研究进程 ;对保幼激素酯酶和保幼激素环氧水解酶作了序列分析 ; 展开更多

关键词 保幼激素 代谢 保幼激素酯酶 保幼激素环氧水解酶 保幼激素二醇激酶

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小麦吸浆虫保幼激素酯酶和保幼激素环氧水解酶基因的克隆及在滞育和变态发育过程中的表达动态 被引量：4

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作者 王晶晶 梁婷婷 +1 位作者 成卫宁 朱克岩 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期401-412,共12页

【目的】保幼激素(juvenile hormone, JH)在小麦吸浆虫Sitodiplosis mosellana滞育诱导及滞育后静息状态的维持中发挥着重要作用。保幼激素酯酶(hormone esterase, JHE)和保幼激素环氧水解酶(juvenile hormone epoxide hydrolase, JHEH... 【目的】保幼激素(juvenile hormone, JH)在小麦吸浆虫Sitodiplosis mosellana滞育诱导及滞育后静息状态的维持中发挥着重要作用。保幼激素酯酶(hormone esterase, JHE)和保幼激素环氧水解酶(juvenile hormone epoxide hydrolase, JHEH)是调控JH滴度的重要降解酶。本研究旨在探讨JHE和JHEH在小麦吸浆虫滞育和变态发育中潜在功能。【方法】通过RT-PCR和RACE技术从小麦吸浆虫滞育前幼虫克隆JHE和JHEH全长cDNA序列;利用生物信息学软件分析其核苷酸及编码蛋白特性;采用qPCR技术分析其在小麦吸浆虫滞育不同时期(滞育前、滞育期、滞育后静息期和滞育后发育)3龄幼虫及1龄幼虫到成虫不同发育阶段(1-2龄幼虫、预蛹、初蛹、中蛹、后蛹、雌成虫和雄成虫)中的表达水平。【结果】克隆获得了cDNA全长分别为3 102和1 980 bp的小麦吸浆虫SmJHE和SmJHEH基因(GenBank登录号分别为MG876768和MG876769),其开放阅读框分别长1 740和1 371 bp,分别编码579和456个氨基酸,预测蛋白分子量分别为65.67和51.65 kD。SmJHE蛋白含有5个JHE家族特有的保守模块,SmJHEH含有催化三联体Asp228, Asp404和His431及组成阴氧离子洞的两个Tyr(Tyr299和Tyr374)和HGWP花样结构。序列比对和进化分析表明,SmJHE和SmJHEH均与双翅目(Diptera)长角亚目(Nematocera)昆虫同源蛋白氨基酸序列一致性较高,亲缘关系最近。不同滞育时期的表达模式表明,SmJHE和SmJHEH在滞育前期(1龄到滞育前的3龄幼虫早期)表达量变化不明显,进入滞育后表达量基本维持恒定,但均在滞育后静息阶段的当年12月至翌年1月最低。发育表达模式表明,幼虫恢复发育后SmJHE表达量逐渐升高,预蛹期达到最高,在雌成虫中的表达量显著低于雄成虫中的;SmJHEH表达量则在预蛹期最低,在雌成虫中最高。【结论】SmJHE和SmJHEH参与小麦吸浆虫滞育调控,其表达量的降低与滞育后静息阶段JH的累积有关;SmJHE在发育过程� 展开更多

关键词 小麦吸浆虫 保幼激素酯酶 保幼激素环氧水解酶 基因克隆 滞育 变态 发育

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化学放射法测定蜜蜂保幼激素酯酶活性 被引量：3

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作者 颜伟玉 许标 +1 位作者 谢宪兵 曾志将 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 2004年第5期785-786,共2页

蜜蜂保幼激素(JH)是由蜜蜂咽侧体(CA)合成和分泌的一种氧化物。保幼激素酯酶是对蜜蜂体内呈游离态或结合态的保幼激素进行专化性降解的特异性酯酶。采用放射化学法(RC)测定了西方蜜蜂(ApismelliferaL.)不同日龄工蜂体内保幼激素酯酶(JHE... 蜜蜂保幼激素(JH)是由蜜蜂咽侧体(CA)合成和分泌的一种氧化物。保幼激素酯酶是对蜜蜂体内呈游离态或结合态的保幼激素进行专化性降解的特异性酯酶。采用放射化学法(RC)测定了西方蜜蜂(ApismelliferaL.)不同日龄工蜂体内保幼激素酯酶(JHE)的活性。结果表明,工蜂体内保幼激素酯酶活性随着日龄的增大而下降。 展开更多

关键词 放射化学法 西方蜜蜂 保幼激素酯酶

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烟粉虱MED隐种保幼激素酯酶cDNA片段克隆、序列分析及在不同发育阶段的表达 被引量：4

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作者 龙楚云 郭建洋 万方浩 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期234-242,共9页

昆虫卵黄发生及其内分泌调控机理一直是昆虫生殖生理学的研究热点。由保幼激素代谢通路关键分子介导的调控系统是影响昆虫卵黄发生的关键途径。研究激素代谢通路关键调控因子的功能将为明确生殖调控机理提供理论依据。保幼激素酯酶(juve... 昆虫卵黄发生及其内分泌调控机理一直是昆虫生殖生理学的研究热点。由保幼激素代谢通路关键分子介导的调控系统是影响昆虫卵黄发生的关键途径。研究激素代谢通路关键调控因子的功能将为明确生殖调控机理提供理论依据。保幼激素酯酶(juvenile hormone esterase,JHE)是降解昆虫体内保幼激素的关键酶之一,具有调控昆虫发育、变态和生殖等功能。本实验以烟粉虱Bemisia tabaci MED隐种为研究对象,采用反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)和cDNA末端快速扩增PCR(rapid amplification of cDNA ends PCR,RACE-PCR)技术克隆获得编码552个氨基酸的烟粉虱MED隐种保幼激素酯酶基因的部分cDNA序列,将其命名为Btjhe(GenBank登录号为KC422259)。同源序列比对发现,该基因与菜叶蜂Athalia rosae、西方蜜蜂Apis mellifera的保幼激素酯酶基因推导的氨基酸一致性较高,且具有昆虫保幼激素酯酶共有的5个氨基酸保守模块,其中包括对保幼激素酯酶活性起关键作用的长疏水结合域GxSxG。由此推测,Btjhe为烟粉虱MED隐种的保幼激素酯酶基因,其编码蛋白参与烟粉虱体内保幼激素的特异性降解。实时荧光定量PCR检测结果表明,Btjhe在烟粉虱若虫、成虫阶段都有表达,在成虫阶段表达量较高,且在羽化后11d达到峰值,其表达模式与卵黄原蛋白基因(vg)类似。本研究结果为明确烟粉虱的生殖调控机理奠定基础。 展开更多

关键词 烟粉虱MED隐种 保幼激素酯酶 CDNA克隆 序列分析 实时荧光定量PCR

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保幼激素酯酶的生化及结构特性研究进展 被引量：2

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作者 马兰 刘念 信超 《陕西农业科学》 2012年第4期108-112,共5页

JHE是大多数昆虫中最主要的一种保幼激素代谢酶。不论有无JH结合蛋白,JHE水解JH都具有在纳摩尔范围内的表观Km。JHE代谢JH的速度相对缓慢。但是由于低Km,JHE针对JH的特异性常数(kcat/Km比值)却很高。高效的、选择性的JHE抑制剂可用于JH... JHE是大多数昆虫中最主要的一种保幼激素代谢酶。不论有无JH结合蛋白,JHE水解JH都具有在纳摩尔范围内的表观Km。JHE代谢JH的速度相对缓慢。但是由于低Km,JHE针对JH的特异性常数(kcat/Km比值)却很高。高效的、选择性的JHE抑制剂可用于JHE生理作用及内源性底物JH的研究。许多氨基酸序列基序(RF、DQ、GQSAG、E、GxxHxxD/E、R/Kx(6)R/KxxxR和T)在JHE序列中都是高度保守的。JHE在蛋白质N-末端编码一个分泌信号肽。 展开更多

关键词 保幼激素酯酶 保幼激素 抑制剂 一级序列 三维结构

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苜蓿夜蛾保幼激素酯酶cDNA的克隆、序列分析及表达研究 被引量：2

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作者 张欢 郭博智 樊东 《应用昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期143-152,共10页

【目的】研究苜蓿夜蛾Heliothis viriplaca保幼激素酯酶(Juvenile hormone esterase,JHE)的功能和作用机理。【方法】本试验提取苜蓿夜蛾的总RNA,并利用RT-PCR和RACE技术,扩增得到苜蓿夜蛾保幼激素酯酶基因的全长c DNA序列,命名为Hvjhe(... 【目的】研究苜蓿夜蛾Heliothis viriplaca保幼激素酯酶(Juvenile hormone esterase,JHE)的功能和作用机理。【方法】本试验提取苜蓿夜蛾的总RNA,并利用RT-PCR和RACE技术,扩增得到苜蓿夜蛾保幼激素酯酶基因的全长c DNA序列,命名为Hvjhe(Gen Bank登录号:JQ901384)。【结果】该基因含有3 106 bp,包括一个1 746 bp的开放阅读框,编码一个含581个氨基酸的多肽,分子量约为63.9 ku,多肽的等电点为5.11,且氨基酸序列具含有5个保幼激素酯酶特有的氨基酸保守模块。推导的氨基酸序列与烟芽夜蛾Heliothis virescens和棉铃虫Helicoverpa armigera中获得的保幼激素酯酶相似性较高,分别达到83%和82%。荧光定量PCR结果表明,该基因在苜蓿夜蛾不同发育时期和不同组织中都有m RNA水平的特异性表达,且在预蛹期表达量相对较高,取食期、蛹期期和成虫期表达量相对较低;在中肠和脂肪体内的表达量相对于其它组织较高。该基因在大肠杆菌Escherich coli表达系统中进行了诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot检测结果表明,表达出与预测的蛋白分子量相符的融合蛋白。【结论】研究结果表明本试验获得了苜蓿夜蛾中一个新的保幼激素酯酶基因的c DNA序列。 展开更多

关键词 苜蓿夜蛾 保幼激素酯酶 克隆 序列分析 表达

原文传递

昆虫JHE基因结构及与甲基化相关的CpG O/E值分析

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作者 张梅 周晓穗 +3 位作者 陈佳林 梁士可 李广宏 王方海 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2014年第5期705-710,共6页

本研究选择西方蜜蜂Apis mellifera、黑腹果蝇Drosophila melanogaster、致倦库蚊Culex quinquefasciatus和家蚕Bombyx mori 4种昆虫为例,以降解保幼激素的特异性酯酶(juvenile hormone esterase,JHE)为研究对象,首先运用NCBI的Spidey... 本研究选择西方蜜蜂Apis mellifera、黑腹果蝇Drosophila melanogaster、致倦库蚊Culex quinquefasciatus和家蚕Bombyx mori 4种昆虫为例,以降解保幼激素的特异性酯酶(juvenile hormone esterase,JHE)为研究对象,首先运用NCBI的Spidey在线软件将各昆虫的JHE基因与其相应的基因组序列作比对,分别确定各昆虫JHE基因的上游2000 bp的具体序列和外显子及内含子区域。发现西方蜜蜂JHE基因含有7个外显子和6个内含子,而其余三种昆虫的JHE基因均含有6个外显子和5个内含子。接着,分别统计基因各区域的CpG,G,C位点的占有量,并计算出CpG O/E值(CpG位点的实际值与期望值之间的比值),发现各区域CpG O/E平均值的大小依次为:基因上游2000 bp区>内含子区>外显子区,基因上游2000 bp区的CpG O/E平均值大于1.0,而第1到第4外显子的CpG O/E平均值均只有0.8左右。表明在昆虫JHE基因中,若有CpG甲基化位点发生,应主要发生在第1到第4外显子区域。 展开更多

关键词 保幼激素酯酶 DNA甲基化 基因结构 CPG O/E值 外显子

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生物防治

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《生物技术通报》 CAS CSCD 1994年第4期88-90,共3页

941555遗传工程病毒杀虫剂:改良表型的新型杀虫剂[会,英]/Posspe,R.D.…∥Pestic.Sci.-1993,39(2).-109～115[译自DBA,1993,12(26),93-15210] 为改良生防因子毒株,将外源基因掺入杆状病毒基因组中。讨论内容包括:(1)状杆病毒,特别是核... 941555遗传工程病毒杀虫剂:改良表型的新型杀虫剂[会,英]/Posspe,R.D.…∥Pestic.Sci.-1993,39(2).-109～115[译自DBA,1993,12(26),93-15210] 为改良生防因子毒株,将外源基因掺入杆状病毒基因组中。讨论内容包括:(1)状杆病毒,特别是核多角体病毒,的复制;(2) 展开更多

关键词 生防因子 病毒杀虫剂 核多角体病毒 杆状病毒 讨论内容 苜蓿银纹夜蛾 昆虫病毒 球形芽孢杆菌 苏云金芽孢杆菌 保幼激素酯酶

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赤眼蜂寄生后亚洲玉米螟卵内保幼激素酯酶活力与蜕皮激素滴度的变化 被引量：8

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作者 戴华国 姜金林 +1 位作者 李元喜 符文俊 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期31-34,共4页

采用放射化学法 (RC)与放射免疫法 (RIA)分别测定了被玉米螟赤眼蜂 (Trichogrammaostriniae)寄生的亚洲玉米螟 (Ostriniafurnacalis)卵内保幼激素酯酶活力与蜕皮激素滴度的变化。结果发现 ,被寄生的卵内 ,保幼激素酯酶活力和蜕皮激素滴... 采用放射化学法 (RC)与放射免疫法 (RIA)分别测定了被玉米螟赤眼蜂 (Trichogrammaostriniae)寄生的亚洲玉米螟 (Ostriniafurnacalis)卵内保幼激素酯酶活力与蜕皮激素滴度的变化。结果发现 ,被寄生的卵内 ,保幼激素酯酶活力和蜕皮激素滴度的变化在很大程度上反映了玉米螟赤眼蜂从卵到蛹的个体发育过程中体内激素的动态变化 ,与玉米螟卵内激素变化显著不同。说明早期被寄生的玉米螟卵内进行的是玉米螟赤眼蜂的个体发育 。 展开更多

关键词 玉米螟 赤眼蜂 亚洲玉米螟 寄生 卵内保幼激素酯酶 蜕皮激素 滴度变化 活力

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重组保幼激素酯酶的纯化和生物学效应 被引量：3

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作者 章东方 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期743-747,共5页

培养昆虫细胞生产重组昆虫保幼激素酯酶时细胞培养液的蛋白质浓度为 15 3 2～ 188 0 μg mL。批量处理纯化重组保幼激素酯酶时酶蛋白活力回收率 33% ,效果与梯度分离方法相当 ,但简便快速 ,可作为大量分离纯化的第一步。重组保幼激素酯... 培养昆虫细胞生产重组昆虫保幼激素酯酶时细胞培养液的蛋白质浓度为 15 3 2～ 188 0 μg mL。批量处理纯化重组保幼激素酯酶时酶蛋白活力回收率 33% ,效果与梯度分离方法相当 ,但简便快速 ,可作为大量分离纯化的第一步。重组保幼激素酯酶对烟草天蛾Manducasexta幼虫的生物学活性测定结果验证了重组保幼激素酯酶对烟草天蛾幼虫和自身天然酶有相似的生物学活性。 展开更多

关键词 重组保幼激素酯酶 纯化 生物学效应 生物测定 烟草天蛾 离子交换层析

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拟穴青蟹保幼激素酯酶结合蛋白(JHEBP)基因的克隆与表达分析 被引量：1

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作者 赵俊霞 赵明 +4 位作者 张凤英 蒋科技 马春艳 王伟 马凌波 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1086-1095,共10页

甲基法尼酯(MF)是甲壳类的保幼激素(JH), MF的代谢可能主要由保幼激素酯酶(JHE)催化完成,保幼激素酯酶结合蛋白(JHEBP)能紧密结合JHE,在JHE的代谢中具有重要作用,研究JHEBP对于MF降解通路的探究具有一定促进作用。本研究获得了拟穴青蟹J... 甲基法尼酯(MF)是甲壳类的保幼激素(JH), MF的代谢可能主要由保幼激素酯酶(JHE)催化完成,保幼激素酯酶结合蛋白(JHEBP)能紧密结合JHE,在JHE的代谢中具有重要作用,研究JHEBP对于MF降解通路的探究具有一定促进作用。本研究获得了拟穴青蟹JHEBP基因的cDNA全序列,命名为Sp-JHEBP。Sp-JHEBP序列全长为1647 bp,包含一个891 bp的开放阅读框(ORF),可编码296个氨基酸,预测相对分子质量33.79 kD,等电点8.63。利用Target P预测Sp-JHEBP定位于线粒体, Mitoprot预测Sp-JHEBP的前31个氨基酸组成的肽段为线粒体定位信号肽。多重序列比对分析发现, Sp-JHEBP的氨基酸序列与多齿新米虾(Neocaridina denticulata)的一致度最高(67%),其次为黑脉金斑蝶(Danaus plexippus)(43%)。系统发育树分析JHEBP与物种分化并不一致,这表明JHEBP随着物种分化,功能上可能也出现了分化。Sp-JHEBP在所检测的9个组织中均有表达,在卵巢中的表达量远高于其它组织,其次是鳃、血淋巴、肝胰腺。在幼体发育过程中, Sp-JHEBP在受精卵时期最高,从Z1至Z5期逐渐升高,到Z5期达到最高,随后逐渐下降到C1期。体外处理MF和法尼酸(FA)显示Sp-JHEBP受高浓度MF上调,在0.1~5 μmol/L 之间随着FA浓度升高Sp-JHEBP表达量升高。综合分析我们认为Sp-JHEBP可能通过降解JHE来参与MF的代谢,该研究结果对青蟹MF降解分子网络的研究具有一定的推动作用。 展开更多

关键词 拟穴青蟹 甲基法尼酯 保幼激素酯酶结合蛋白 保幼激素酯酶 基因表达

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重组杆状病毒介导甜菜夜蛾ptth和jhe的RNAi及其效应分析

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作者 侯守才 周吟 +1 位作者 类承凤 孙修炼 《华中昆虫研究》 2015年第1期309-309,共1页

杆状病毒是一种环境友好型的生物杀虫剂,应用前景广泛,但是,其杀虫速度慢,对高龄幼虫杀虫活性低的缺点限制了其更大范围的应用。本文以甜菜夜蛾的促前胸腺激素基因(ptth)和保幼激素酯酶基因(jhe)为靶标,利用RNAi技术构建重组杆状病毒,... 杆状病毒是一种环境友好型的生物杀虫剂,应用前景广泛,但是,其杀虫速度慢,对高龄幼虫杀虫活性低的缺点限制了其更大范围的应用。本文以甜菜夜蛾的促前胸腺激素基因(ptth)和保幼激素酯酶基因(jhe)为靶标,利用RNAi技术构建重组杆状病毒,以期提高杆状病毒的杀虫效果。以双链RNAi的方法构建了含有ptth和jhe不同保守片段正反向重复序列的重组苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV):AcPTTHa、AcPTTHb、AcJHEb和AcJHEc,以及只含有回复多角体蛋白基因的对照病毒Ac-ph。与对照病毒Ac-ph相比,感染AcPTTHb后甜菜夜蛾体内的ptth转录水平明显下调;感染Ac—JHEc后,甜菜夜蛾体内的jhe的转录水平也明显下调。在细胞水平上,含有ptth和jhe正反向重复干扰序列的pFastBacR—PTTHa和pFastBacR—PTTHb能够抑制pIB—EGFP-PTTH载体EGFP-PTTH融合蛋白的转录表达,造成绿色荧光蛋白的表达量降低。生物活性测定结果表明Ac—PTTHa,Ac-PTTHb和Ac—JHEc的半数致死浓度(LC50)比对照病毒Ac—ph分别降低了3.1倍,5.45倍和2.84倍,而Ac—J-HEb相对于对照病毒Ac—ph的LC50没有显著性差异。本文的结果表明,以杆状病毒为载体对昆虫生长发育十分重要的ptth和加基因进行干扰是一条可行的途径,为以后研究昆虫某些基因功能以及开发新型的生物农药开辟了新的途径。 展开更多

关键词 苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒 促前胸腺激素 保幼激素酯酶 RNAI

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