以人自发性永生化角质形成细胞系(Ha Ca T)细胞为材料,通过CCK8和蛋白印迹法分别测定不同剂量长波紫外线(ultraviolet A,UVA)、不同浓度丹参酮ⅡA(tanshinoneⅡA,TSⅡA),以及UVA和TSⅡA共同作用下的细胞活力和促分裂素原活化蛋白激酶(mi...以人自发性永生化角质形成细胞系(Ha Ca T)细胞为材料,通过CCK8和蛋白印迹法分别测定不同剂量长波紫外线(ultraviolet A,UVA)、不同浓度丹参酮ⅡA(tanshinoneⅡA,TSⅡA),以及UVA和TSⅡA共同作用下的细胞活力和促分裂素原活化蛋白激酶(mitogenactivated protein kinase,MAPK)信号通路蛋白(p38,JNK和Erk)磷酸化水平.结果表明:在10 J/cm2的UVA照射下,细胞活力为对照组的70%左右,在20 J/cm2的UVA照射下,细胞活力仅为对照组的55%左右;低浓度的TSⅡA在正常情况下对细胞活力无影响,高浓度(85μmol/L)TSⅡA处理组的细胞活力约为对照组的70%左右.与TSⅡA或UVA单独处理相比,二者共同作用下细胞活力大大降低且差异极其显著.UVA照射提高了MAPK信号通路中的p38和JNK磷酸化水平,但是对Erk磷酸化水平没有影响;而TSⅡA可以显著提高低辐射剂量(2 J/cm2)UVA诱导下的p38和JNK的磷酸化水平.这说明UVA促进Ha Ca T细胞凋亡是通过提高p38和JNK磷酸化水平来实现的;而TSⅡA可以提高p38和JNK磷酸化水平,进一步加速UVA诱导的Ha Ca T细胞凋亡.展开更多
克隆鉴定了一个水稻促分裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases, MAPK）基因OsMPK4．OsMPK4基因cDNA全长1483bp，包含一个1131bp的开放阅读框，编码一个由376个氨基酸组成的蛋白，预测分子量为42．8kD．OsMPK4基因位于...克隆鉴定了一个水稻促分裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases, MAPK）基因OsMPK4．OsMPK4基因cDNA全长1483bp，包含一个1131bp的开放阅读框，编码一个由376个氨基酸组成的蛋白，预测分子量为42．8kD．OsMPK4基因位于水稻第10号染色体上，由6个外显子和5个内含子组成．OsMPK4蛋白具有MAPK的11个保守结构域及磷酸化位点TEY模体．系统进化树分析表明，OsMPK4属于B组MAPK成员，与已知水稻MAPK蛋白有56％～74％的一致性．原核表达了OsMPK4基因，纯化获得重组OsMPK4融合蛋白，并构建OsMPK4的转基因双元载体，用于OsMPK4的生化功能及其生物学功能研究．展开更多
文摘以人自发性永生化角质形成细胞系(Ha Ca T)细胞为材料,通过CCK8和蛋白印迹法分别测定不同剂量长波紫外线(ultraviolet A,UVA)、不同浓度丹参酮ⅡA(tanshinoneⅡA,TSⅡA),以及UVA和TSⅡA共同作用下的细胞活力和促分裂素原活化蛋白激酶(mitogenactivated protein kinase,MAPK)信号通路蛋白(p38,JNK和Erk)磷酸化水平.结果表明:在10 J/cm2的UVA照射下,细胞活力为对照组的70%左右,在20 J/cm2的UVA照射下,细胞活力仅为对照组的55%左右;低浓度的TSⅡA在正常情况下对细胞活力无影响,高浓度(85μmol/L)TSⅡA处理组的细胞活力约为对照组的70%左右.与TSⅡA或UVA单独处理相比,二者共同作用下细胞活力大大降低且差异极其显著.UVA照射提高了MAPK信号通路中的p38和JNK磷酸化水平,但是对Erk磷酸化水平没有影响;而TSⅡA可以显著提高低辐射剂量(2 J/cm2)UVA诱导下的p38和JNK的磷酸化水平.这说明UVA促进Ha Ca T细胞凋亡是通过提高p38和JNK磷酸化水平来实现的;而TSⅡA可以提高p38和JNK磷酸化水平,进一步加速UVA诱导的Ha Ca T细胞凋亡.
文摘克隆鉴定了一个水稻促分裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases, MAPK）基因OsMPK4．OsMPK4基因cDNA全长1483bp，包含一个1131bp的开放阅读框，编码一个由376个氨基酸组成的蛋白，预测分子量为42．8kD．OsMPK4基因位于水稻第10号染色体上，由6个外显子和5个内含子组成．OsMPK4蛋白具有MAPK的11个保守结构域及磷酸化位点TEY模体．系统进化树分析表明，OsMPK4属于B组MAPK成员，与已知水稻MAPK蛋白有56％～74％的一致性．原核表达了OsMPK4基因，纯化获得重组OsMPK4融合蛋白，并构建OsMPK4的转基因双元载体，用于OsMPK4的生化功能及其生物学功能研究．
