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单核细胞增生李斯特氏菌依赖解旋酶DNA恒温扩增检测方法的建立
被引量:
8
1
作者
王建广
雷质文
+7 位作者
石琰璟
付静芸
祝素珍
房保海
姜英辉
刘云国
张健
杨大伟
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期130-132,共3页
为建立单核细胞增生李斯特氏菌(Lm)的依赖解旋酶DNA恒温扩增(HDA)检测方法,本研究以Lm的iap基因为目的片段设计特异性引物,建立了可在65℃恒温扩增快速(90 min)检测Lm的HDA检测方法,分别对反应体系中的MgAc2、Bst聚合酶、UvrD解旋酶、dN...
为建立单核细胞增生李斯特氏菌(Lm)的依赖解旋酶DNA恒温扩增(HDA)检测方法,本研究以Lm的iap基因为目的片段设计特异性引物,建立了可在65℃恒温扩增快速(90 min)检测Lm的HDA检测方法,分别对反应体系中的MgAc2、Bst聚合酶、UvrD解旋酶、dNTPs以及引物等的浓度进行优化,进行了特异性和灵敏度试验,并与普通PCR方法进行了比较。结果表明,所建立起的检测法最低检测限为7.8×103 cfu/mL,灵敏度与普通PCR方法相当。Lm的HDA检测方法具有普通PCR的特异、灵敏等特点,并且对仪器要求更低,具有良好的应用前景。
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关键词
单核细胞增生李斯特氏菌
检测
依赖
解旋酶
dna
恒温
基因
扩增
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职称材料
题名
单核细胞增生李斯特氏菌依赖解旋酶DNA恒温扩增检测方法的建立
被引量:
8
1
作者
王建广
雷质文
石琰璟
付静芸
祝素珍
房保海
姜英辉
刘云国
张健
杨大伟
机构
青岛科技大学
山东出入境检验检疫局
中国海洋大学
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期130-132,共3页
基金
国家质检总局科研项目(2008IK140)
山东出入境检验检疫局科研项目(SK200821)
文摘
为建立单核细胞增生李斯特氏菌(Lm)的依赖解旋酶DNA恒温扩增(HDA)检测方法,本研究以Lm的iap基因为目的片段设计特异性引物,建立了可在65℃恒温扩增快速(90 min)检测Lm的HDA检测方法,分别对反应体系中的MgAc2、Bst聚合酶、UvrD解旋酶、dNTPs以及引物等的浓度进行优化,进行了特异性和灵敏度试验,并与普通PCR方法进行了比较。结果表明,所建立起的检测法最低检测限为7.8×103 cfu/mL,灵敏度与普通PCR方法相当。Lm的HDA检测方法具有普通PCR的特异、灵敏等特点,并且对仪器要求更低,具有良好的应用前景。
关键词
单核细胞增生李斯特氏菌
检测
依赖
解旋酶
dna
恒温
基因
扩增
Keywords
Listeria monocytogenes
Detection
Helicase-dependent isothermal
dna
amplification
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
单核细胞增生李斯特氏菌依赖解旋酶DNA恒温扩增检测方法的建立
王建广
雷质文
石琰璟
付静芸
祝素珍
房保海
姜英辉
刘云国
张健
杨大伟
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
8
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