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单核细胞增生李斯特氏菌依赖解旋酶DNA恒温扩增检测方法的建立 被引量:8
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作者 王建广 雷质文 +7 位作者 石琰璟 付静芸 祝素珍 房保海 姜英辉 刘云国 张健 杨大伟 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期130-132,共3页
为建立单核细胞增生李斯特氏菌(Lm)的依赖解旋酶DNA恒温扩增(HDA)检测方法,本研究以Lm的iap基因为目的片段设计特异性引物,建立了可在65℃恒温扩增快速(90 min)检测Lm的HDA检测方法,分别对反应体系中的MgAc2、Bst聚合酶、UvrD解旋酶、dN... 为建立单核细胞增生李斯特氏菌(Lm)的依赖解旋酶DNA恒温扩增(HDA)检测方法,本研究以Lm的iap基因为目的片段设计特异性引物,建立了可在65℃恒温扩增快速(90 min)检测Lm的HDA检测方法,分别对反应体系中的MgAc2、Bst聚合酶、UvrD解旋酶、dNTPs以及引物等的浓度进行优化,进行了特异性和灵敏度试验,并与普通PCR方法进行了比较。结果表明,所建立起的检测法最低检测限为7.8×103 cfu/mL,灵敏度与普通PCR方法相当。Lm的HDA检测方法具有普通PCR的特异、灵敏等特点,并且对仪器要求更低,具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特氏菌 检测 依赖解旋酶dna恒温基因扩增
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