类似S-层蛋白的苏云金芽胞杆菌伴胞晶体蛋白基因的克隆 被引量：13

1

作者 孙明 朱晨光 喻子牛 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期141-147,共7页

芽胞杆菌CTC菌株被鉴定为苏云金芽胞杆菌 ,鞭毛血清型H2 ,幕虫亚种 ;产生卵圆形伴胞晶体 ,伴胞晶体蛋白为 1 0 0kD ;测定了该蛋白的N 末端序列 ,该序列与炭疽芽胞杆菌的细胞表面S 层蛋白具 92 %～ 93%相似性 ;根据Southern杂交制作了该... 芽胞杆菌CTC菌株被鉴定为苏云金芽胞杆菌 ,鞭毛血清型H2 ,幕虫亚种 ;产生卵圆形伴胞晶体 ,伴胞晶体蛋白为 1 0 0kD ;测定了该蛋白的N 末端序列 ,该序列与炭疽芽胞杆菌的细胞表面S 层蛋白具 92 %～ 93%相似性 ;根据Southern杂交制作了该晶体蛋白基因ctc所在位置的限制性酶切图谱 ,分别克隆了该基因 5′和 3′端所在的 2 9kbXbaI片段和 3 1kbClaIDNA片段 ,彼此间具 0 6kb重叠 ,通过拼接获得含完整ctc基因的克隆。含该基因的大肠杆菌与表达S 层蛋白的大肠杆菌具相似生长特征。初步表明CTC菌株的伴胞晶体由细胞表面S 层蛋白组成。苏云金芽胞杆菌区别于蜡状芽胞杆菌和炭疽芽胞杆菌的唯一标准是能形成伴胞晶体 ,由于S 层是细胞表面的结构成分 。 展开更多

关键词 细胞表面S-层 伴胞晶体 苏云金芽胞杆菌 蜡状芽胞杆菌群 基因克隆 蛋白质

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苏云金芽胞杆菌CTC菌株的S-层蛋白可以形成伴胞晶体 被引量：5

2

作者 朱晨光 孙明 喻子牛 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期670-674,共5页

苏云金芽胞杆菌 (Bacillusthuringiensis)CTC菌株产生卵圆形伴胞晶体 ,晶体蛋白分子量为 1 0 0kD ;透射电子显微镜观察结果表明该菌株有S 层结构 ,而且在母细胞内可以形成伴胞晶体和S 层的初体结构 ;其蛋白基因导入苏云金芽胞杆菌无晶... 苏云金芽胞杆菌 (Bacillusthuringiensis)CTC菌株产生卵圆形伴胞晶体 ,晶体蛋白分子量为 1 0 0kD ;透射电子显微镜观察结果表明该菌株有S 层结构 ,而且在母细胞内可以形成伴胞晶体和S 层的初体结构 ;其蛋白基因导入苏云金芽胞杆菌无晶体突变株BMB1 71后 ,扫描电子显微镜观察结果表明转化子能形成晶体 ,而其形状与CTC菌株的相同 ;转化子晶体蛋白的分子量大小也与CTC菌株的相同 ,为 1 0 0kD。以上实验结果结合以前晶体蛋白N 末端测序和基因核苷酸序列 ,表明苏云金芽胞杆菌CTC菌株的S 展开更多

关键词 苏云金芽胞杆菌 S—层 伴胞晶体 电子显微镜

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苏云金芽孢杆菌的筛选和初步鉴定 被引量：7

3

作者 李凤梅 李平 +2 位作者 闫敏 郑爱萍 孙惠青 《生物技术》 CAS CSCD 2003年第6期34-36,共3页

采集四川温江昆虫孳生地的土壤样本 94份 ,利用醋酸钠 -抗生素法分离、筛选 ,共获得苏云金芽孢杆菌 9株。镜检可观察到大菱形、小菱形、方形、圆形等四种主要形态的伴胞晶体 ;采用cryI、cryII、cryIII、cryV基因的通用对 9株Bt分离菌进... 采集四川温江昆虫孳生地的土壤样本 94份 ,利用醋酸钠 -抗生素法分离、筛选 ,共获得苏云金芽孢杆菌 9株。镜检可观察到大菱形、小菱形、方形、圆形等四种主要形态的伴胞晶体 ;采用cryI、cryII、cryIII、cryV基因的通用对 9株Bt分离菌进行的PCR检测结果表明 :9株菌全部含cryⅠ和cryV基因 ,2株菌含cryII基因 ,5株菌含cryⅢ基因 ,而且各菌株均包含 2～ 3个基因型。利用这些菌株对菜青虫进行了室内和室外生物毒力测定 ,达到了较好的杀虫效果。 展开更多

关键词 苏云金芽孢杆菌 筛选 鉴定 伴胞晶体 菜青虫 杀虫微生物

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化学杀虫剂对苏云金杆菌芽孢及伴胞晶体的影响 被引量：6

4

作者 曹伟平 冯书亮 +2 位作者 范秀华 王容燕 杨更亮 《农药学学报》 CAS CSCD 2003年第1期39-44,共6页

研究了 7种常用化学杀虫剂对苏云金杆菌芽孢及伴胞晶体的影响及作用 ,结果表明 ,常用浓度下 ,2 .5 %溴氰菊酯乳油、4 8%毒死蜱乳油对苏云金杆菌芽孢及伴胞晶体无影响 ,可与苏云金杆菌制剂事先做成混剂 ;4 .5 %高效氯氰菊酯乳油、2 .5 %... 研究了 7种常用化学杀虫剂对苏云金杆菌芽孢及伴胞晶体的影响及作用 ,结果表明 ,常用浓度下 ,2 .5 %溴氰菊酯乳油、4 8%毒死蜱乳油对苏云金杆菌芽孢及伴胞晶体无影响 ,可与苏云金杆菌制剂事先做成混剂 ;4 .5 %高效氯氰菊酯乳油、2 .5 %高效氯氟氰菊酯乳油、2 0 %灭多威和 4 0 %辛硫磷在短时期内对芽孢及伴胞晶体无明显影响 ,可与苏云金杆菌制剂现混现用 ;80 %敌敌畏乳油(5 0 0倍稀释 )对苏云金杆菌伴胞晶体有明显损伤作用 。 展开更多

关键词 苏云金杆菌 化学杀虫剂 芽孢 伴胞晶体

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cry4Aa、cry4Ba和cry11Aa基因在苏云金杆菌无晶体型菌株中的表达 被引量：3

5

作者 孙钒 袁志明 +2 位作者 李田勇 蔡全信 张用梅 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期61-64,共4页

利用穿梭载体pBU4,将苏云金杆菌以色列亚种 (Bti)的cry4Aa、cry4Ba和cry1 1Aa基因分别转入Bti无晶体突变株 4Q7中 ,获得了转化菌株Bt B60 1、Bt B61 1和Bt B640。SDS PAGE结果显示 :Cry4Aa、Cry4Ba和Cry1 1Aa蛋白均分别获得了表达。透... 利用穿梭载体pBU4,将苏云金杆菌以色列亚种 (Bti)的cry4Aa、cry4Ba和cry1 1Aa基因分别转入Bti无晶体突变株 4Q7中 ,获得了转化菌株Bt B60 1、Bt B61 1和Bt B640。SDS PAGE结果显示 :Cry4Aa、Cry4Ba和Cry1 1Aa蛋白均分别获得了表达。透射电镜下观察 ,转化菌株能产生球形或菱形伴胞晶体。转化菌株对敏感和抗性致倦库蚊及白纹伊蚊幼虫的生物测定结果显示 :Cry4Aa、Cry4Ba和Cry1 1Aa蛋白对库蚊和伊蚊的毒力较低 。 展开更多

关键词 苏云金杆菌以色列亚种 球形芽孢杆菌 毒素 基因表达 交叉抗性 杀蚊毒素蛋白 伴胞晶体

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苏云金杆菌伴胞晶体蛋白基因工程菌制剂及转基因抗虫植物遗传工程的研究应用进展

6

作者 王伟新 吴中华 《安徽农业科学》 CAS 1996年第S1期47-48,58,共3页

本文就苏云金杆菌伴胞晶体蛋白的遗传基因工程及抗虫植物遗传工程的研究和应用进展进行了综述．

关键词 苏云金杆菌 伴胞晶体 遗传工程 进展

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由苏云金芽胞杆菌胞晶混合物直接提取原毒素的方法 被引量：2

7

作者 周学永 陈守文 +1 位作者 孙宇 梁宝臣 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期535-536,共2页

采用室内实验技术,研究了直接从苏云金芽胞杆菌胞晶混合物提取原毒素的方法。胞晶混合物依次用0.5mol·L-1NaCl和无菌去离子水洗涤3次,洗涤后的沉淀物用0.05mol·L-1NaOH+0.1mmol·L-1PMSF溶液溶解10min,10000r·min-1... 采用室内实验技术,研究了直接从苏云金芽胞杆菌胞晶混合物提取原毒素的方法。胞晶混合物依次用0.5mol·L-1NaCl和无菌去离子水洗涤3次,洗涤后的沉淀物用0.05mol·L-1NaOH+0.1mmol·L-1PMSF溶液溶解10min,10000r·min-1离心15min去除不溶物。上清液以25%乙酸调至pH4.4,得原毒素蛋白沉淀,冷冻干燥。SDS-PAGE电泳扫描结果表明,原毒素分子量为130kDa,在提取过程中没有发生降解。该提取方法具有操作简便、成本低、效率高等优点。 展开更多

关键词 苏云金芽胞杆菌 伴胞晶体 芽胞 原霉幕

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抗生素类作为防腐剂对苏云金杆菌芽孢及伴胞晶体的影响 被引量：1

8

作者 曹伟平 冯书亮 +2 位作者 杨更亮 范秀华 王容燕 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期46-51,共6页

报道了 1 4种抗生素作为防腐剂对苏云金杆菌CH菌株芽孢萌发的抑制作用和对伴胞晶体的影响。结果表明 ,红霉素、盐酸环丙沙星对CH菌株芽孢萌发有较强的抑制作用 ,在 0 5μg/mL低剂量下可抑制芽孢的萌发 ;氧氟沙星和麦迪霉素抑制作用稍... 报道了 1 4种抗生素作为防腐剂对苏云金杆菌CH菌株芽孢萌发的抑制作用和对伴胞晶体的影响。结果表明 ,红霉素、盐酸环丙沙星对CH菌株芽孢萌发有较强的抑制作用 ,在 0 5μg/mL低剂量下可抑制芽孢的萌发 ;氧氟沙星和麦迪霉素抑制作用稍差 ,在 5μg/mL的剂量下抑制作用随时间延长而减弱 ,96h后基本丧失抑制作用。其它几种抗生素对苏云金杆菌芽孢萌发的抑制终浓度均在 30 μg/mL以上 ;SDS -PAGE分析和生物测定表明 ,红霉素、盐酸环丙沙、氧氟沙星和麦迪霉素对伴胞晶体均无明显损伤作用 ,其中氧氟沙星 45oC条件下放置 4d,发酵液毒力保持率为 96 2 %。 展开更多

关键词 抗生素类 防腐剂 苏云金杆菌 芽孢 伴胞晶体 悬浮剂 稳定性

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产生伴胞晶体的芽胞杆菌CTC菌株的16S-23SrRNA间隔区分析 被引量：1

9

作者 谭珊娜 孙明 喻子牛 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期169-175,共7页

根据能形成伴胞晶体的特征,芽胞杆菌CTC菌株被鉴定为苏云金芽胞杆菌幕虫亚种。但该菌株明显不同于典型的苏云金芽胞杆菌,因为其伴胞晶体蛋白并不是由杀虫晶体蛋白基因编码,而是编码细胞表面S 层蛋白基因的产物,且伴胞晶体蛋白没有检测... 根据能形成伴胞晶体的特征,芽胞杆菌CTC菌株被鉴定为苏云金芽胞杆菌幕虫亚种。但该菌株明显不同于典型的苏云金芽胞杆菌,因为其伴胞晶体蛋白并不是由杀虫晶体蛋白基因编码,而是编码细胞表面S 层蛋白基因的产物,且伴胞晶体蛋白没有检测到对昆虫的毒性。本研究基于对CTC菌株及参照菌的16S-23SrRNA间隔区、编码S 层蛋白的基因进行扩增并测序,从系统发育水平检测到CTC菌株明显与苏云金芽胞杆菌幕虫亚种典型菌株T02存在差异,表明芽胞杆菌CTC菌株更接近蜡状芽胞杆菌。 展开更多

关键词 CTC菌株 16S-23S rRNA间隔区 伴胞晶体

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B．t．制剂的质量分析方法 被引量：1

10

作者 陈景芬 姜辉 +3 位作者 顾宝根 喻子牛 罗曦霞 钟连胜 《农药科学与管理》 CAS 1994年第4期26-29,共4页

Ｂ．ｔ．制剂的质量分析方法陈景芬，姜辉，顾宝根喻子牛，罗曦霞钟连胜（农业部农药检定所１０００２６）（华中农业大学４３００７０）（湖北农学院４３００６４）编者按近几年我国Ｂ．ｔ．等生物制剂生产应用发展很快。其中，Ｂ．ｔ... Ｂ．ｔ．制剂的质量分析方法陈景芬，姜辉，顾宝根喻子牛，罗曦霞钟连胜（农业部农药检定所１０００２６）（华中农业大学４３００７０）（湖北农学院４３００６４）编者按近几年我国Ｂ．ｔ．等生物制剂生产应用发展很快。其中，Ｂ．ｔ．由１９９０年生产的３千多吨猛增到... 展开更多

关键词 质量分析 组织培养 毒力效价 活芽孢 伴胞晶体 分析方法 制剂 标准品 效价测定法 校正死亡率

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转基因抗虫是怎么回事?

11

作者 周子珊 张杰 《科学世界》 2015年第1期72-77,共6页

将一种细菌体内的抗虫基因,通过生物技术的手段转入植物体内表达,就能让植物得到抗虫性状,免受特定害虫的侵扰。这种抗虫基因是哪里来的,如何发挥出作用的?到底对人体有没有害处呢?苏云金芽胞杆菌(又称苏云金杆菌,Bacillus thuringiensi... 将一种细菌体内的抗虫基因,通过生物技术的手段转入植物体内表达,就能让植物得到抗虫性状,免受特定害虫的侵扰。这种抗虫基因是哪里来的,如何发挥出作用的?到底对人体有没有害处呢?苏云金芽胞杆菌(又称苏云金杆菌,Bacillus thuringiensis),简称Bt,是一类可产生芽胞的革兰氏阳性细菌。Bt被广泛用于农业,特别是有机农业,以及转基因农业。它们广泛分布于世界各地的土壤、尘埃中,无论在海滩、沙漠还是冻土带,均有它们的活动踪迹。当周围环境中的营养物质缺乏的时候,营养期的Bt就开始形成芽胞,并在体内产生伴胞晶体。这种晶体主要由被称为"Cry内毒素"的蛋白质组成;而Cry内毒素,则得名于英文Crystal(晶体)的字头"Cry"。 展开更多

关键词 抗虫基因 苏云金芽胞杆菌 细菌体 苏云金杆菌 抗虫性 杀虫晶体蛋白 营养期 有机农业 伴胞晶体 体内表达

原文传递

生物防治

12

《生物技术通报》 CAS CSCD 1996年第2期82-85,共4页

960665 利用从贮藏苹果上分离的芽孢杆菌品种防治苹果采后病害[英]/Sholberg, P.L.…∥Can.J.Microbiol.-1995,41(3).-247～252[译自DBA,1995,14(12),95-07143] 在所测的77个苹果中,有38个苹果含有细菌菌丛,从中分离出95种分离物。在营... 960665 利用从贮藏苹果上分离的芽孢杆菌品种防治苹果采后病害[英]/Sholberg, P.L.…∥Can.J.Microbiol.-1995,41(3).-247～252[译自DBA,1995,14(12),95-07143] 在所测的77个苹果中,有38个苹果含有细菌菌丛,从中分离出95种分离物。在营养肉汤,右旋糖和V8果汁液上得到的分离物数量最高。 展开更多

关键词 几丁质酶 杆状病毒 枯草杆菌 苏云金芽胞杆菌 慢生型花生根瘤菌 晶体蛋白 伴胞晶体 蛋白基因 突变体 共生固氮效率

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苹果园常用药剂推介

13

作者 窦连登 张红军 《果树实用技术与信息》 2011年第6期27-30,共4页

1生物杀虫剂 （1）苏云金杆菌苏云金杆菌是当今国内外研究最多、应用最广的一种细菌杀虫剂，杀虫的主要成分是伴胞晶体。由苏云金杆菌所产生的晶体毒素能溶于碱性溶液，而许多鳞翅目幼虫的胃液是碱性的，当它们吞入菌剂时，菌剂中的晶... 1生物杀虫剂 （1）苏云金杆菌苏云金杆菌是当今国内外研究最多、应用最广的一种细菌杀虫剂，杀虫的主要成分是伴胞晶体。由苏云金杆菌所产生的晶体毒素能溶于碱性溶液，而许多鳞翅目幼虫的胃液是碱性的，当它们吞入菌剂时，菌剂中的晶体在消化道内经胃液分解产生毒素，最终引起虫体败血而死亡。 展开更多

关键词 常用药剂 苹果园 苏云金杆菌 生物杀虫剂 伴胞晶体 碱性溶液 晶体毒素 细菌杀虫剂

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对棉铃虫高杀虫活性苏云金芽胞杆菌菌株的筛选

14

作者 关鹏 代小娟 +1 位作者 秦培钢 宋金东 《陕西农业科学》 2018年第11期35-38,共4页

采用生物活性测定方法对实验室分离保存的73株Bt菌株进行杀棉铃虫幼虫的筛选,获得了3株对棉铃虫具有显著杀虫活性的菌株,其胞晶混合物对棉铃虫幼虫的LC50值为413. 43～574. 30μg·m L-1。对这3株Bt菌株研究发现,其产生的伴胞晶体... 采用生物活性测定方法对实验室分离保存的73株Bt菌株进行杀棉铃虫幼虫的筛选,获得了3株对棉铃虫具有显著杀虫活性的菌株,其胞晶混合物对棉铃虫幼虫的LC50值为413. 43～574. 30μg·m L-1。对这3株Bt菌株研究发现,其产生的伴胞晶体类型包括菱形和方形,伴胞晶体蛋白编码基因的类型主要有cry1Aa、cry1Ab、cry1Ac、cry1Ia、cry2Ac、cry2Ah、cry4Ba、cry9Ea、cyt2Aa等,这些Bt菌株均表达约60 k Da和130k Da伴胞晶体蛋白。这3株Bt菌株的鉴定为棉铃虫的生物防治提供新的菌株资源和基因资源。 展开更多

关键词 苏云金芽胞杆菌 棉铃虫 杀虫活性 筛选 伴胞晶体

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苏云金芽孢杆菌伴胞晶体产生菌BZ-1的分离筛选及鉴定

15

作者 孔芳 高勇 +2 位作者 朱霁晖 薛正莲 杨超英 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第9期1153-1157,1163,共6页

目的从被污染的蝴蝶兰初代培养基中分离筛选苏云金芽孢杆菌伴胞晶体产生菌,并进行鉴定。方法分离自被污染的蝴蝶兰初代培养基的苏云金芽孢杆菌经富集后,筛选伴胞晶体产生菌BZ-1,显微镜观察进行鉴定;采用PCR法分析菌株BZ-1的16S rDNA和... 目的从被污染的蝴蝶兰初代培养基中分离筛选苏云金芽孢杆菌伴胞晶体产生菌,并进行鉴定。方法分离自被污染的蝴蝶兰初代培养基的苏云金芽孢杆菌经富集后,筛选伴胞晶体产生菌BZ-1,显微镜观察进行鉴定;采用PCR法分析菌株BZ-1的16S rDNA和脂肽抗生素合成相关基因,SDS-PAGE分析菌株的伴胞晶体;制备菌株发酵粗提液,提取活性物质,分别置于不同温度(50、60、80、100℃)30 min、用不同的蛋白酶(蛋白酶K、胰蛋白酶)于37℃处理30 min,以枯草芽孢杆菌作为指示菌检测菌株的抑菌活性;并检测菌株对小菜蛾的毒力。结果菌株BZ-1能产生芽孢,并在芽孢旁形成多个无规则伴胞晶体;该菌株的16S rDNA扩增产物测序结果经与GenBank中登录的16S rDNA核苷酸序列进行BLAST比对,与B.anthracis str.Ames(NR_074453)、B.cereus(NR_074540)和B.thuringiensis Bt407(NR_102506)菌株相似度达99%,表明菌株BZ-1属于芽孢杆菌属,结合扫描电镜观察结果,可初步确定该菌株为苏云金芽孢杆菌;该菌株可扩增出脂肽抗生素合成相关基因sfp、mycB、ituA、fenB;该菌株从培养2 d芽孢形成后开始分泌相对分子质量约130 000的晶体蛋白,4 d时蛋白表达量增加,6 d后蛋白表达量基本达到稳定;该菌株具有一定的热稳定性,对蛋白酶K具有一定的耐受性;该菌株于30℃培养6 d,对小菜蛾表现出较高的毒力。结论从被污染的蝴蝶兰初代培养基中分离筛选的苏云金芽孢杆菌伴胞晶体产生菌BZ-1所产的抗菌物质主要抑制革兰阳性细菌,具有较高的毒力,可作为原始菌株发酵进行田间生物防治,也可为构建杀虫基因工程菌以及培育抗虫转基因植物提供高毒力的候选基因,具有较好的应用前景。 展开更多

关键词 苏云金芽孢杆菌 伴胞晶体 脂肽抗生素 抑菌活性 毒力

原文传递

含SLH的苏云金芽胞杆菌菌株的筛选

16

作者 宋晓娟 《河南预防医学杂志》 2018年第4期258-261,271,共5页

本实验通过采集河边、污水池边、草坪上和花坛中的土壤样本,利用平板划线法分离和纯化目标菌株,获得菌落形态类似于苏云金芽胞杆菌菌株。再通过相差镜检观察其是否形成透明的芽胞及致密的深色的伴胞晶体,以及利用SDS-PAGE检测晶体蛋白... 本实验通过采集河边、污水池边、草坪上和花坛中的土壤样本,利用平板划线法分离和纯化目标菌株,获得菌落形态类似于苏云金芽胞杆菌菌株。再通过相差镜检观察其是否形成透明的芽胞及致密的深色的伴胞晶体,以及利用SDS-PAGE检测晶体蛋白的表达来筛选苏云金芽胞杆菌。提取菌种的基因组DNA并进行PCR,扩增S-层蛋白特异性的保守SLH序列,获得的阳性菌株即为含SLH的苏云金芽胞杆菌,最后筛选到5株包含SLH的苏云金芽胞杆菌。 展开更多

关键词 苏云金芽胞杆菌 SLH蛋白 芽胞 伴胞晶体

原文传递

苏云金芽胞杆菌SG3-7菌株的鉴定及杀虫活性研究

17

作者 关鹏 代小娟 +2 位作者 秦培刚 宋金东 贺志有 《陕西农业科学》 2019年第10期34-36,70,共4页

苏云金芽胞杆菌SG3-7菌株是一株从秦岭山区灌木丛土壤中分离得到的产不规则伴胞晶体的野生菌,本研究对该菌株的伴胞晶体形态、杀虫基因的类型以及杀虫活性等方面进行研究。分析结果表明:SG3-7菌株的内生质粒携带有3个cry基因(cry2Ab、cr... 苏云金芽胞杆菌SG3-7菌株是一株从秦岭山区灌木丛土壤中分离得到的产不规则伴胞晶体的野生菌,本研究对该菌株的伴胞晶体形态、杀虫基因的类型以及杀虫活性等方面进行研究。分析结果表明:SG3-7菌株的内生质粒携带有3个cry基因(cry2Ab、cry4A、cry9Ea),以及1个cyt1Aa型基因。其主要产生130 kDa和60 kDa分子量大小的伴胞晶体蛋白,对鳞翅目的甜菜夜蛾和菜青虫幼虫具有显著的杀虫活性,其LC50分别为29.31μg·mL-1和47.11μg·mL-1,但对棉铃虫幼虫无杀虫活性。 展开更多

关键词 苏云金芽胞杆菌 伴胞晶体 杀虫活性 甜菜夜蛾 菜青虫 棉铃虫

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苏云金芽孢杆菌中华亚种CT-43菌株伴胞晶体蛋白的特性 被引量：22

18

作者 孙明 喻子牛 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期303-306,共4页

苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)为革兰氏阳性细菌,在其芽孢形成过程中可产生一种对鳞翅目、双翅目和鞘翅目幼虫有高毒力的蛋白质伴胞晶体,近来又发现它对动、植物寄生线虫以及扁形动物门的一些种类有毒,现已成为芽孢杆菌的第... 苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)为革兰氏阳性细菌,在其芽孢形成过程中可产生一种对鳞翅目、双翅目和鞘翅目幼虫有高毒力的蛋白质伴胞晶体,近来又发现它对动、植物寄生线虫以及扁形动物门的一些种类有毒,现已成为芽孢杆菌的第二大研究对象。 展开更多

关键词 苏云金杆菌 中华亚种 CT-43菌株 伴胞晶体蛋白

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海南岛热带雨林区芽孢杆菌收集及Bt菌鉴定 被引量：13

19

作者 张文飞 全嘉新 +6 位作者 谢柳 王茜 易艳桃 丰玫玫 朱麟 王锐萍 方宣钧 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期265-274,共10页

本研究系统地对海南岛热带雨林自然保护区进行了土壤样品的采集、芽孢杆菌的分离收集和Bt菌株的鉴定。从尖峰岭热带雨林区、五指山热带雨林区、吊罗山热带雨林区、霸王岭热带雨林区总共采集了土壤样品1882份,采用醋酸钠培养基结合高温... 本研究系统地对海南岛热带雨林自然保护区进行了土壤样品的采集、芽孢杆菌的分离收集和Bt菌株的鉴定。从尖峰岭热带雨林区、五指山热带雨林区、吊罗山热带雨林区、霸王岭热带雨林区总共采集了土壤样品1882份,采用醋酸钠培养基结合高温方法分离出芽孢杆菌3924份,鉴定出Bt分离株158份,Bt菌株的分离率和出菌率分别为4.03%和8.40%。结果分析表明,海南岛热带雨林区芽孢杆菌及Bt菌株分布对环境和生态表现出一定的规律性,一般海拔900m至1400m的Bt菌株含量高、植被覆盖率高,土壤腐殖质含量高的热带沟谷雨林带Bt菌株含量最高。显微观察发现,获得的Bt菌株其伴胞晶体有菱形、球形、方形、椭球形、不定性等多种形状。利用SDS-PAGE方法对获得的Bt分离株进行了伴胞晶体进行分析,发现伴胞晶体的分子量有20kD到150kD不等。进一步利用PCR-RFLP技术对Bt分离株进行了cry基因型的分析,初步发现这些Bt菌株含有cry1、cry3、cry4、cry6、cry30、cry40等基因型。我们还利用鳞翅目昆虫小菜蛾和鞘翅目昆虫椰心叶甲进行部分Bt分离株的生物测定,初步结果显示本研究鉴定出的Bt分离株具有不同的抗虫靶标,对同一靶标昆虫也表现出不同的杀虫活性。整体而言,本研究结果显示出海南岛热带热带雨林自然保护区因其独特的热带地理生境、自然的生物演化系统,使得热带雨林区蕴藏了Bt菌株资源多样化,值得期待挖掘出一些新的菌株和新的基因资源。 展开更多

关键词 芽孢杆菌 苏云金芽孢杆菌 伴胞晶体蛋白 cry基因型 海南岛热带雨林区

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14株苏云金芽孢杆菌伴胞晶体蛋白对猪蛔虫第3期幼虫的毒性比较 被引量：11

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作者 邓干臻 姚宝安 +5 位作者 冯汉莉 袁林茂 周艳琴 李继州 郭玉红 喻子牛 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期338-340,共3页

14株苏云金芽孢杆菌经培养提取伴胞晶体蛋白并测定其蛋白含量。感染性蛔虫卵经胃感染小鼠 ,3d后宰杀并从小鼠肝脏内分离蛔虫第 3期幼虫 (L 3)。设置空白对照 ,将不同剂量的 Bt伴胞晶体蛋白与 L 3置于培养孔在 37℃的二氧化碳培养箱中 (... 14株苏云金芽孢杆菌经培养提取伴胞晶体蛋白并测定其蛋白含量。感染性蛔虫卵经胃感染小鼠 ,3d后宰杀并从小鼠肝脏内分离蛔虫第 3期幼虫 (L 3)。设置空白对照 ,将不同剂量的 Bt伴胞晶体蛋白与 L 3置于培养孔在 37℃的二氧化碳培养箱中 (含 5 % CO2 )培养 ,间隔 12 h检查幼虫活性 ,计算死亡率、校正死亡率及半数致死量。L D50 随着作用时间的延长而逐渐减小。14株细菌伴胞晶体蛋白对 L 3的毒力差异很大。 0 17株对 L 3的杀虫作用快速而持久、毒力最强 ,其 L D50 是所有 14个菌株中最小的 ,作用 12、2 4和 36 h时分别为 1.135 7、0 .2 32 2和 0 .15 32 g/ L。 展开更多

关键词 苏云金芽孢杆菌 幼虫 毒力 伴胞晶体蛋白 猪 蛔虫 毒性

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