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霉菌Y3菌丝球培养条件的优化 被引量：4
1
作者 马放 张斯 +1 位作者 山丹 高敏 《哈尔滨工业大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第8期38-41,共4页
为找到一种菌丝球培养的快捷、经济的系统方法,以用于工程上菌丝球的批量生产,通过对环境因子的逐一筛选,进而对菌丝球的培养条件进行优化.结果表明:在孢子龄20～26d、接种量104个/L、培养温度37℃、培养基初始pH为5、摇床转速160r/min... 为找到一种菌丝球培养的快捷、经济的系统方法,以用于工程上菌丝球的批量生产,通过对环境因子的逐一筛选,进而对菌丝球的培养条件进行优化.结果表明:在孢子龄20～26d、接种量104个/L、培养温度37℃、培养基初始pH为5、摇床转速160r/min、CaCl2质量分数0.02%、无表面活性剂(tween80)的条件下,形成的菌丝球综合性能最佳,对中性黄的脱色效果最好,达99%以上.同时,对菌丝碎片作为菌丝球传代手段的可行性研究证明,菌丝球在1800r/min粉碎机中粉碎30s,所形成的菌丝碎片碎度最佳. 展开更多
关键词 菌丝球 传代方法 脱色
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人胚胎海马神经干细胞体外培养方法的建立 被引量：2
2
作者 赵春礼 孙晓红 +5 位作者 鲁强 刘玉军 李敏 姜传涛 杨慧 徐群渊 《首都医科大学学报》 CAS 2004年第2期144-146,共3页
为建立人胚胎海马神经干细胞的体外培养方法 ,防止神经干细胞在培养过程中的分化 ,确立最佳的传代时机和方法 ,分离 1 6周人胚海马组织 ,采用无血清培养基对所分离的神经干细胞进行体外培养 ,比较不同培养条件与方法所获得的神经球数量... 为建立人胚胎海马神经干细胞的体外培养方法 ,防止神经干细胞在培养过程中的分化 ,确立最佳的传代时机和方法 ,分离 1 6周人胚海马组织 ,采用无血清培养基对所分离的神经干细胞进行体外培养 ,比较不同培养条件与方法所获得的神经球数量的差异。结果 :建立了人胚胎海马神经干细胞体外培养的优化条件 ,确立了最佳传代方法与时机。提示 :人胚胎海马神经干细胞在体外抑制分化的条件下可以长期处于未分化状态增生 ,并且可多次传代。 展开更多
关键词 人胚胎海马 神经干细胞 体外培养 传代方法
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不同方法对旋毛虫传代效果影响的研究
3
作者 李沐森 呼显生 +3 位作者 付连军 叶永铭 吴斌 姜成 《黑龙江畜牧兽医（下半月）》 CAS 2014年第9期74-75,共2页
为了为实现旋毛虫在保种、传代、维持生活循环等操作步骤上的标准化,保障所藏虫种生物性状的稳定性,通过用500蚴的肌旋毛虫感染小白鼠、大白鼠、家兔,与应用含青霉素、链霉素(各1 000 U/mL)和20%小牛血清的Emtm培养液体外培养传代两种... 为了为实现旋毛虫在保种、传代、维持生活循环等操作步骤上的标准化,保障所藏虫种生物性状的稳定性,通过用500蚴的肌旋毛虫感染小白鼠、大白鼠、家兔,与应用含青霉素、链霉素(各1 000 U/mL)和20%小牛血清的Emtm培养液体外培养传代两种方法进行比较试验。结果表明:活体传代技术优于体外培养,说明应该使用小鼠与大鼠一起保种的原则。 展开更多
关键词 肌旋毛虫 保种 传代 传代方法 传代效果
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兔原始生殖细胞体外培养的研究 被引量：1
4
作者 吕海淼 朱邯豫 +5 位作者 彭展 闫琛博 杨德新 胡文举 丁雪粉 王新庄 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期2443-2452,共10页
旨在探索兔原始生殖细胞(primordial germ cells, PGCs)体外分离培养的最佳条件,从而建立成熟稳定的兔PGCs体外分离培养方法。本研究首先通过两种不同的体外分离法(胰酶消化法、机械法)和3种不同的传代法(胰酶消化法、机械法、连同饲养... 旨在探索兔原始生殖细胞(primordial germ cells, PGCs)体外分离培养的最佳条件,从而建立成熟稳定的兔PGCs体外分离培养方法。本研究首先通过两种不同的体外分离法(胰酶消化法、机械法)和3种不同的传代法(胰酶消化法、机械法、连同饲养层消化法)探索第14~18天胎兔的PGCs体外分离传代的最佳方式,另将培养液分为A、B、C、D 4组,以D组为对照组,探究不同细胞因子浓度对兔PGCs形态变化及集落形成的影响。其次,利用碱性磷酸酶染色(alkaline phosphatase staining, AKP)法对兔PGCs进行鉴定染色;实时荧光定量(real-time polymerase chain reaction, RT-PCR)检测转录因子Oct-4的表达。结果表明,机械法分离得到的兔PGCs集落数量是酶消化法分离的2.2倍,而兔PGCs经不同的消化法传代发现,酶消化法、连同饲养层消化法、机械法在兔胚胎成纤维细胞(rabbit embryo fibroblast, REF)饲养层上分别成功传至P2、P2、P4代。B组PGCs培养液(基础液+10%胎牛血清(fetal bovine serum, FBS)+2 ng·mL^-1转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)+4 ng·mL^-1碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)+10 ng·mL^-1白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor, LIF))所获得的集落数量最多,具有较好的集落形态,保持未分化的时间较长。AKP染色结果显示,PGCs集落呈红黑色;RT-PCR结果显示,体外分离培养的兔PGCs表达转录因子Oct-4。结果显示,兔原代PGCs最适采用机械分离法和机械传代法进行体外分离传代,适宜浓度的细胞因子添加至兔PGCs培养液中有利于兔PGCs在体外保持较多的集落数量和较长时间的未分化状态。本研究通过筛选和优化兔PGCs体外培养方法,为进一步建立稳定成熟兔PGCs细胞系奠定技术基础。 展开更多
关键词 兔 原始生殖细胞 分离方法 传代方法 细胞因子
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昆明白小鼠胚胎生殖细胞的分离与培养
5
作者 赵向远 李洋 +3 位作者 刘延玲 董焕声 王红军 董晓 《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2019年第2期85-90,102,共7页
胚胎生殖细胞(embryonic germ cells,EG)是来源于原始生殖细胞(primordial germ cells,PGC)的多潜能干细胞。本研究旨在优化昆明白小鼠EG细胞的培养条件。以昆明白小鼠10.5dpc胚胎PGC为材料,以丝裂霉素C处理的小鼠成纤维细胞(mouse embr... 胚胎生殖细胞(embryonic germ cells,EG)是来源于原始生殖细胞(primordial germ cells,PGC)的多潜能干细胞。本研究旨在优化昆明白小鼠EG细胞的培养条件。以昆明白小鼠10.5dpc胚胎PGC为材料,以丝裂霉素C处理的小鼠成纤维细胞(mouse embryonic germcells,MEF)为饲养层,培养小鼠EG细胞,以对影响小鼠EG细胞传代的因素进行探讨。用ELISA试剂盒定量检测MEF自身分泌生长因子SCF、bFGF、LIF的浓度;以培养液是否添加生长因子,观察PGC/EG的培养效果;比较了机械分割法、胰酶消化法和胶原酶Ⅳ消化法对EG传代培养的影响;对获得的EG进行多能性鉴定。结果表明,培养3d的饲养层上清液中含75.7ng/LSCF、125.7ng/LbFGF、196.6ng/LLIF,培养5d的饲养层上清液中含76.2ng/LSCF、136.2ng/LbFGF、214.2ng/LLIF;培养液添加生长因子显著提高了EG的克隆数、传代数(P<0.05);机械分割法与酶消化法对EG传代差异显著(P<0.05),而两种酶法对EG传代无显著影响(P>0.05);所分离的EG细胞显示AKP染色强阳性;EG体外培养时会自分化为神经样细胞、上皮样细胞;EG细胞呈Oct4、SSEA-1的免疫荧光检测阳性。结果提示,饲养层自身能分泌少量生长因子,但培养液中添加生长因子可显著改善昆明白小鼠EG培养效果,酶消化法更适合于昆明白小鼠EG的传代培养。 展开更多
关键词 胚胎生殖细胞 饲养层 生长因子 传代方法 分化
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传染病
6
《中国中西医结合儿科学》 1992年第6期327-330,共4页
921915 幼儿急疹病因病毒的分析研究/宋艾芝…∥中华儿科杂志.-1992,30(1).-14～15本组13例,年龄2～13个月。用病毒分离和传代方法。通过间接免疫荧光试验(IFA)。结果:从13例外周血淋巴细胞中分离出12株病毒,从4份血浆中分离出2株病毒... 921915 幼儿急疹病因病毒的分析研究/宋艾芝…∥中华儿科杂志.-1992,30(1).-14～15本组13例,年龄2～13个月。用病毒分离和传代方法。通过间接免疫荧光试验(IFA)。结果:从13例外周血淋巴细胞中分离出12株病毒,从4份血浆中分离出2株病毒。应用间接免疫荧光试验,对其中4例患儿进行血清抗体测定,结果恢复期血清抗体效价与急性期相比呈4倍升高,证明所分离的病毒为幼儿急疹病因病毒。 展开更多
关键词 幼儿急疹 血清抗体效价 中华儿科杂志 急性期 传代方法 肠道内感染 皮肤出血点 肠道外感染 小儿细菌性痢疾 白细胞干扰素
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哈医大利用小神经球传代法扩充干细胞来源
7
《生物医学工程研究》 2013年第3期157-157,共1页
哈尔滨医科大学第一临床学院科研人员利用小神经球传代方法在体外培养神经干细胞，可在10个月时间内传代25代，从单一的细胞扩增至10万个细胞。目前，这一方法已在哈医大卫生部细胞移植重点实验室普遍应用，并已发表多篇学术论文。 　... 哈尔滨医科大学第一临床学院科研人员利用小神经球传代方法在体外培养神经干细胞，可在10个月时间内传代25代，从单一的细胞扩增至10万个细胞。目前，这一方法已在哈医大卫生部细胞移植重点实验室普遍应用，并已发表多篇学术论文。 　　临床上，脊髓损伤后的轴突再生和功能恢复仍是难以逾越的障碍，对伤者而言脊髓损伤的破坏性是严重和持久的。目前，很多学者对发育的干细胞培养和应用潜力有着浓厚的研究兴趣，因为这些细胞可以提供神经元，神经元细胞作为再生轴突的靶点，能促进神经环路的重建。 展开更多
关键词 细胞来源 传代方法 神经干细胞 小神经球 哈医大
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