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构建MDCK Ⅱ-hMDR1-hCYP3A4共表达体系
1
作者
黄洁琼
徐云婷
+2 位作者
李佳俊
汪维鹏
张洪建
《药物生物技术》
CAS
2017年第4期289-293,共5页
构建MDCK-hMDR1-CYP3A4双转表达体系,研究CYP3A4和P-gp之间的相互作用。根据基因文库合成CYP3A4基因编码片段,连接到pc DNA3.1/Hypgro表达载体,进行测序。验证正确的重组质粒pc DNA3.1/Hypgro/h CYP3A4转染MDCK-MOCK细胞以及MDCK-hMDR1...
构建MDCK-hMDR1-CYP3A4双转表达体系,研究CYP3A4和P-gp之间的相互作用。根据基因文库合成CYP3A4基因编码片段,连接到pc DNA3.1/Hypgro表达载体,进行测序。验证正确的重组质粒pc DNA3.1/Hypgro/h CYP3A4转染MDCK-MOCK细胞以及MDCK-hMDR1细胞,经潮霉素B(Hygromycin B)加压筛选阳性克隆,获得稳定高表达人CYP3A4的MDCK-h CYP3A4单转以及MDCK-hMDR1-h CYP3A4双转稳转细胞株。结果显示相比于空白细胞(MDCK-MOCK)以及阴性细胞(MDCK-MDR1),CYP3A4在MDCK-h CYP3A4、MDCK-hMDR1-h CYP3A4细胞中的表达更稳定并且活性显著增强。MTT结果表明,在MOCK、MDCK-MDR1、MDCK-CYP3A4以及MDCK-MDR1-CYP3A4 4种细胞系中,苏尼替尼的IC_(50)值分别为2.832,5.717,3.628,6.561μmol/L,而伯舒替尼的IC_(50)值分别为0.712 6,4.413,2.184,7.010μmol/L。由于苏尼替尼和博苏替尼是CYP3A4以及P-gp的共同底物,CYP3A4的代谢活性以及P-gp的外排功能共同作用使得苏尼替尼和博苏替尼毒性降低,因而MDCK-hMDR1-h CYP3A4双转细胞株IC_(50)值比MDCK-hMDR1、MDCK-h CYP3A4明显增大。以上结果说明了构建的稳定单转MDCK-h CYP3A4以及MDCK-hMDR1-h CYP3A4双转细胞株是具有功能的,并且CYP3A4与P-gp之间的作用是相互影响的,同时该模型的建立也为药物的转运与代谢研究提供更全面的研究技术与思路。
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关键词
P-糖蛋白
代谢
酶
cyp
3
A
4
共表达
MDCKⅡ细胞
细胞毒性
相互作用
原文传递
多奈哌齐血药浓度及其代谢酶CYP3A4基因多态性在轻中度Alzheimer's病治疗中的应用
被引量：
1
2
作者
李倩
马文颖
+3 位作者
汤凡宇
肖红
赵连东
石静萍
《临床神经病学杂志》
CAS
2022年第5期366-369,共4页
目的探讨多奈哌齐(DNP)治疗轻中度Alzheimer’s病(AD)患者的有效血药浓度及代谢酶CYP3A4基因多态性对DNP血药浓度的影响。方法对70例首诊的轻中度AD患者进行MMSE测评,随后予DNP治疗。服药6月后进行DNP血药浓度及代谢酶CYP3A4基因多态性...
目的探讨多奈哌齐(DNP)治疗轻中度Alzheimer’s病(AD)患者的有效血药浓度及代谢酶CYP3A4基因多态性对DNP血药浓度的影响。方法对70例首诊的轻中度AD患者进行MMSE测评,随后予DNP治疗。服药6月后进行DNP血药浓度及代谢酶CYP3A4基因多态性检测,并行MMSE量表复评和临床印象变化量表(CIBIC-plus)评定。根据量表结果确定有效组,分析其DNP血药浓度和CYP3A4基因多态性,探讨DNP治疗AD的有效血药浓度及CYP3A4基因多态性对DNP血药浓度的影响。结果有效组中,患者DNP平均血药浓度为(52.17±7.13)ng/ml,其中服药5 mg患者平均血药浓度为(47.63±8.13)ng/ml,服药10 mg患者平均血药浓度为(52.80±6.85)ng/ml。携带等位基因CYP3A4*18B-G和/或CYP3A4*1G-T者的DNP血药浓度高于未携带者,在服药10 mg组中差异更显著。结论DNP治疗轻中度AD的有效血药浓度为45~59 ng/ml;CYP3A4基因多态性影响DNP血药浓度。血药浓度监测和CYP3A4基因多态性检测为指导AD患者DNP个体化治疗提供参考。
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关键词
多奈哌齐
Alzheimer’s病
血药浓度
代谢
酶
cyp
3
A
4
基因
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职称材料
题名
构建MDCK Ⅱ-hMDR1-hCYP3A4共表达体系
1
作者
黄洁琼
徐云婷
李佳俊
汪维鹏
张洪建
机构
苏州农业职业技术学院
苏州大学药学院
出处
《药物生物技术》
CAS
2017年第4期289-293,共5页
基金
国家自然科学基金(No.81473278)
文摘
构建MDCK-hMDR1-CYP3A4双转表达体系,研究CYP3A4和P-gp之间的相互作用。根据基因文库合成CYP3A4基因编码片段,连接到pc DNA3.1/Hypgro表达载体,进行测序。验证正确的重组质粒pc DNA3.1/Hypgro/h CYP3A4转染MDCK-MOCK细胞以及MDCK-hMDR1细胞,经潮霉素B(Hygromycin B)加压筛选阳性克隆,获得稳定高表达人CYP3A4的MDCK-h CYP3A4单转以及MDCK-hMDR1-h CYP3A4双转稳转细胞株。结果显示相比于空白细胞(MDCK-MOCK)以及阴性细胞(MDCK-MDR1),CYP3A4在MDCK-h CYP3A4、MDCK-hMDR1-h CYP3A4细胞中的表达更稳定并且活性显著增强。MTT结果表明,在MOCK、MDCK-MDR1、MDCK-CYP3A4以及MDCK-MDR1-CYP3A4 4种细胞系中,苏尼替尼的IC_(50)值分别为2.832,5.717,3.628,6.561μmol/L,而伯舒替尼的IC_(50)值分别为0.712 6,4.413,2.184,7.010μmol/L。由于苏尼替尼和博苏替尼是CYP3A4以及P-gp的共同底物,CYP3A4的代谢活性以及P-gp的外排功能共同作用使得苏尼替尼和博苏替尼毒性降低,因而MDCK-hMDR1-h CYP3A4双转细胞株IC_(50)值比MDCK-hMDR1、MDCK-h CYP3A4明显增大。以上结果说明了构建的稳定单转MDCK-h CYP3A4以及MDCK-hMDR1-h CYP3A4双转细胞株是具有功能的,并且CYP3A4与P-gp之间的作用是相互影响的,同时该模型的建立也为药物的转运与代谢研究提供更全面的研究技术与思路。
关键词
P-糖蛋白
代谢
酶
cyp
3
A
4
共表达
MDCKⅡ细胞
细胞毒性
相互作用
Keywords
P-glycoprotein
Cytochrome P
4
50
3
A
4
MDCKⅡ cells
Double-transfection
Cell variability
Interplay
分类号
Q7 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
多奈哌齐血药浓度及其代谢酶CYP3A4基因多态性在轻中度Alzheimer's病治疗中的应用
被引量：
1
2
作者
李倩
马文颖
汤凡宇
肖红
赵连东
石静萍
机构
徐州医科大学附属淮安医院神经内科
南京医科大学附属脑科医院神经内科
南京医科大学附属脑科医院神经精神病防治研究所
出处
《临床神经病学杂志》
CAS
2022年第5期366-369,共4页
文摘
目的探讨多奈哌齐(DNP)治疗轻中度Alzheimer’s病(AD)患者的有效血药浓度及代谢酶CYP3A4基因多态性对DNP血药浓度的影响。方法对70例首诊的轻中度AD患者进行MMSE测评,随后予DNP治疗。服药6月后进行DNP血药浓度及代谢酶CYP3A4基因多态性检测,并行MMSE量表复评和临床印象变化量表(CIBIC-plus)评定。根据量表结果确定有效组,分析其DNP血药浓度和CYP3A4基因多态性,探讨DNP治疗AD的有效血药浓度及CYP3A4基因多态性对DNP血药浓度的影响。结果有效组中,患者DNP平均血药浓度为(52.17±7.13)ng/ml,其中服药5 mg患者平均血药浓度为(47.63±8.13)ng/ml,服药10 mg患者平均血药浓度为(52.80±6.85)ng/ml。携带等位基因CYP3A4*18B-G和/或CYP3A4*1G-T者的DNP血药浓度高于未携带者,在服药10 mg组中差异更显著。结论DNP治疗轻中度AD的有效血药浓度为45~59 ng/ml;CYP3A4基因多态性影响DNP血药浓度。血药浓度监测和CYP3A4基因多态性检测为指导AD患者DNP个体化治疗提供参考。
关键词
多奈哌齐
Alzheimer’s病
血药浓度
代谢
酶
cyp
3
A
4
基因
Keywords
Donepezil
Alzheimer’s disease
plasma concentration
metabolic enzyme
cyp
3
A
4
gene
分类号
R749.1 [医药卫生—神经病学与精神病学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
构建MDCK Ⅱ-hMDR1-hCYP3A4共表达体系
黄洁琼
徐云婷
李佳俊
汪维鹏
张洪建
《药物生物技术》
CAS
2017
0
原文传递
2
多奈哌齐血药浓度及其代谢酶CYP3A4基因多态性在轻中度Alzheimer's病治疗中的应用
李倩
马文颖
汤凡宇
肖红
赵连东
石静萍
《临床神经病学杂志》
CAS
2022
1
下载PDF
职称材料
已选择
0
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