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激活蛋白2家族基因真核表达载体的构建及其功能鉴定
1
作者 米月 蒋琦炜 +2 位作者 沈雁婕 张德宇 叶棋浓 《基础医学与临床》 2022年第12期1829-1834,共6页
目的构建激活蛋白2(AP-2)家族真核表达载体,探究AP-2α、AP-2β、AP-2γ对人肝癌细胞系HepG2增殖及迁移的影响。方法模板为人卵巢文库,通过PCR扩增AP-2α、AP-2β以及AP-2γ,并与载体pCDNA3.0-FLAG连接得到真核表达载体pCDNA3.0-FLAG-A... 目的构建激活蛋白2(AP-2)家族真核表达载体,探究AP-2α、AP-2β、AP-2γ对人肝癌细胞系HepG2增殖及迁移的影响。方法模板为人卵巢文库,通过PCR扩增AP-2α、AP-2β以及AP-2γ,并与载体pCDNA3.0-FLAG连接得到真核表达载体pCDNA3.0-FLAG-AP-2α/β/γ;通过CCK8法、克隆形成实验和划痕实验分别验证AP-2α、AP-2β以及AP-2γ对肝癌HepG2细胞增殖和迁移的影响。结果成功构建了AP-2基因家族主要成员AP-2α、AP-2β、AP-2γ的真核表达载体,经酶切及基因测序鉴定重组质粒AP-2家族转录因子构建成功,并且能够成功表达;同时经过功能鉴定,显示AP-2家族蛋白可以显著抑制HepG2细胞的增殖以及迁移(P<0.05)。结论构建的AP-2家族基因真核表达载体转染至HepG2细胞后,明显抑制HepG2细胞增殖和迁移。 展开更多
关键词 人ap-2基因家族 肝癌 真核表达 HEPG2细胞系
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