hrIFN-γ和hrIL-4对人早孕滋养层细胞形态改变的研究 被引量：1

1

作者 陈晓 陈莉 王越 《解剖科学进展》 CAS 2002年第4期306-308,共3页

目的　研究人重组γ 干扰素 (hrIFN γ)和白细胞介素 4(hrIL 4)对人早孕滋养层细胞形态的作用。方法　采用人工流产方法取得绒毛膜组织 ,加入hrIFN γ和hrIL 42 4h短期组织培养 ,通过光镜和透射电镜观察滋养层细胞形态学变化。结果　hrI... 目的　研究人重组γ 干扰素 (hrIFN γ)和白细胞介素 4(hrIL 4)对人早孕滋养层细胞形态的作用。方法　采用人工流产方法取得绒毛膜组织 ,加入hrIFN γ和hrIL 42 4h短期组织培养 ,通过光镜和透射电镜观察滋养层细胞形态学变化。结果　hrIFN γ组滋养层细胞核由圆形变为扁圆形 ,细胞界限不清 ,滋养层细胞数目明显减少 ;hrIL 4组滋养层细胞核多呈圆形或椭圆形 ,滋养层细胞数目明显增多至数层。结论　外源性Th1。 展开更多

关键词 人重组γ-干扰素 人重组白细胞介素4 滋养层细胞

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HrIFN-γ和hrIL-4对体外培养人早孕滋养层细胞PCNA和bcl-2表达的影响

2

作者 陈晓 陈莉 金迅 《武警医学院学报》 CAS 2008年第4期287-289,293,F0003,共5页

【目的】研究人重组γ-干扰素(hrIFN-γ)和白细胞介素4(hrIL-4)对人早孕滋养层细胞PCNA和bcl-2表达的影响。【方法】采用人工流产方法提取绒毛膜组织,在体外培养条件下加入hrIFN-γ和hrIL-4,继续培养24 h,用倒置光显微镜和透射电镜观察... 【目的】研究人重组γ-干扰素(hrIFN-γ)和白细胞介素4(hrIL-4)对人早孕滋养层细胞PCNA和bcl-2表达的影响。【方法】采用人工流产方法提取绒毛膜组织,在体外培养条件下加入hrIFN-γ和hrIL-4,继续培养24 h,用倒置光显微镜和透射电镜观察绒毛膜组织形态学变化,应用免疫组织化学法检测绒毛膜组织滋养层细胞PCNA和bcl-2蛋白表达。【结果】hrIFN-γ处理的滋养层细胞PCNA和bcl-2表达均较对照组弱;hrIL-4处理的滋养层细胞PCNA和bcl-2表达较对照组增强。【结论】hrIFN-γ抑制滋养层细胞的增殖,hrIL-4促进滋养层细胞的增殖。 展开更多

关键词 人重组γ-干扰素 人重组白细胞介素4 滋养层细胞 PCNA BEL-2

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重组人白介素11对豚鼠血小板减少的治疗作用 被引量：11

3

作者 赖伏英 方芳 +3 位作者 孙黎 何群 陈朝晖 方云祥 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第1期19-20,共2页

应用抗血小板血清造成豚鼠血小板减少症动物模型 ,观察人重组白细胞介素 11(rHuIL 11)对豚鼠血小板减少症的治疗作用 ,结果显示rHuIL 112 0 0 ,10 0 ,5 0 μg·kg-1均可明显升高豚鼠的血小板计数 ,增加骨髓巨核细胞集落生成单位 (CF... 应用抗血小板血清造成豚鼠血小板减少症动物模型 ,观察人重组白细胞介素 11(rHuIL 11)对豚鼠血小板减少症的治疗作用 ,结果显示rHuIL 112 0 0 ,10 0 ,5 0 μg·kg-1均可明显升高豚鼠的血小板计数 ,增加骨髓巨核细胞集落生成单位 (CFU Meg)细胞集落数 ,与生理盐水对照组比较有明显差异。说明rHuIL 展开更多

关键词 血小板减少症 人重组白细胞介素11 巨核细胞集落生成单位 骨髓 动物疾病模型 豚鼠

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hrIL-2治疗单疱病毒性角膜炎临床研究 被引量：6

4

作者 肖爱云 李建远 +2 位作者 李俊英 张秀华 沈肖方 《眼科研究》 CSCD 1998年第1期46-47,共2页

目的研究人重组白细胞介素Ⅱ（ｈｒＩＬ－２）与无环鸟苷联合治疗单纯疱疹病毒性角膜炎（ｈｅｒｐｅｓｓｉｍｐｌｅｘｋｅｒ－ａｔｉｔｉｓ，ＨＳＫ）疗效与预防复发。方法应用ｈｒＩＬ－２与０．１％无环鸟苷联合治疗ＨＳＫ５０例，对... 目的研究人重组白细胞介素Ⅱ（ｈｒＩＬ－２）与无环鸟苷联合治疗单纯疱疹病毒性角膜炎（ｈｅｒｐｅｓｓｉｍｐｌｅｘｋｅｒ－ａｔｉｔｉｓ，ＨＳＫ）疗效与预防复发。方法应用ｈｒＩＬ－２与０．１％无环鸟苷联合治疗ＨＳＫ５０例，对照组３０例单用０．１％无环鸟苷治疗。结果联合用药治疗组疗效明显高于对照组。随访１ａ观察复发率明显低于对照组。结论应用ｈｒＩＬ－２与０．１％无环鸟苷联合治疗ＨＳＫ疗效明显，复发率低，临床观察眼部无不良反应。 展开更多

关键词 单疱病毒性角膜炎 人重组白细胞介素2 治疗 HSK

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IL-1β对大鼠胆碱能神经元的影响 被引量：4

5

作者 刘恒颖 康劲松 +2 位作者 徐琪 郭中钰 祝世功 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期87-88,共2页

目的　探讨 IL- 1β对大鼠胆碱能神经元的损伤作用及机制。方法　将 IL- 1β缓慢释放颗粒 (IL- 1βpellet)植入大鼠右侧 Meynert核 (nb M,基底核 ) ,复制胆碱能系统受损的动物模型 ;将不同剂量的人重组白细胞介素 - 1β(rh IL- 1β)加... 目的　探讨 IL- 1β对大鼠胆碱能神经元的损伤作用及机制。方法　将 IL- 1β缓慢释放颗粒 (IL- 1βpellet)植入大鼠右侧 Meynert核 (nb M,基底核 ) ,复制胆碱能系统受损的动物模型 ;将不同剂量的人重组白细胞介素 - 1β(rh IL- 1β)加入培养大鼠前脑基底神经元中 ,复制 rh IL- 1β诱导神经元损伤模型 ,检测 (乙酰胆碱酯酶 ) Ach E活性和脂质过氧化物 (L PO)含量的变化。结果　 IL- 1β损伤侧皮质 Ach E活性较未损伤侧、正常组及假手术组均显著降低 (P <0 .0 1)。 5 0 - 5 0 0 U/ ml rh IL- 1β可引起培养的神经元 Ach E活性明显下降 (P <0 .0 5 ) ;10 0 - 5 0 0 U/ ml rh IL-1β可引起神经元 L PO含量明显升高 (P <0 .0 1)。结论　 IL- 1β慢性作用可以造成大鼠中枢胆碱能系统的损害 。 展开更多

关键词 IL-1Β 缓慢释放颗粒 人重组白细胞介素-1β 乙酰碱酯酶 脂质过氧化物 MEYNERT基底核 AD 阿尔茨海默病

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rhIL 1β、rhIL 2和rhIL 6诱导体外培养大鼠海马神经元Fos表达——免疫组织化学研究

6

作者 丁爱石 王福庄 +2 位作者 付群武 周长满 范明 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 1999年第3期246-250,361,共6页

采用免疫组织化学方法， 观察了人重组白细胞介素１ （ｒｈＩＬ１β）、人重组白细胞介素２ （ｒｈＩＬ２）和人重组白细胞介素６ （ｒｈＩＬ６） 诱导体外培养大鼠海马神经元Ｆｏｓ表达。结果显示， 培养１２ ｄ 的海马神... 采用免疫组织化学方法， 观察了人重组白细胞介素１ （ｒｈＩＬ１β）、人重组白细胞介素２ （ｒｈＩＬ２）和人重组白细胞介素６ （ｒｈＩＬ６） 诱导体外培养大鼠海马神经元Ｆｏｓ表达。结果显示， 培养１２ ｄ 的海马神经元分别与ｒｈＩＬ１β、ｒｈＩＬ２ 和ｒｈＩＬ６ 培养２ｈ 后， Ｆｏｓ免疫反应（ＦｏｓＩＲ） 阳性细胞百分率增多。随着所给剂量增加，ＦｏｓＩＲ阳性细胞百分率明显增多。图像分析的结果显示，ＦｏｓＩＲ阳性细胞的平均光密度亦随所给剂量的增大而增加。以上结果表明， ｒｈＩＬ１β、ｒｈＩＬ２ 和ｒｈＩＬ６ 均能诱导体外培养大鼠海马神经元Ｆｏｓ表达。提示ｒｈＩＬ１β、ｒｈＩＬ２ 和ｒｈＩＬ６ 对体外培养的大鼠海马神经元具有生物学作用。推测Ｆｏｓ表达可能是ｒｈＩＬ１β、ｒｈＩＬ２ 和ｒｈＩＬ６ 等细胞因子发挥生物效应的重要中间途径。 展开更多

关键词 Fos人重组白细胞介素1β 人重组白细胞介素2 人重组白细胞介素6 神经元 海马 细胞培养 免疫组织化学

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重组人白细胞介素-10融合表达载体的构建及其在BL21(DE3)pLysE细菌细胞中的表达

7

作者 方爱平 杨国成 +3 位作者 YEShui-qing 夏腊菊 孙凌聪 刘少平 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2004年第2期75-77,共3页

目的　构建重组人白细胞介素 10 (recombinanthumaninterleukin 10 ,rhIL 10 )融合蛋白的表达载体 ,并在大肠杆菌中表达。方法　应用RT PCR方法扩增IL 10基因 ,克隆PCR产物 ,构建PCRR○T7/NT TOPOR○ IL 10重组质粒 ,以AppiedBiosystems... 目的　构建重组人白细胞介素 10 (recombinanthumaninterleukin 10 ,rhIL 10 )融合蛋白的表达载体 ,并在大肠杆菌中表达。方法　应用RT PCR方法扩增IL 10基因 ,克隆PCR产物 ,构建PCRR○T7/NT TOPOR○ IL 10重组质粒 ,以AppiedBiosystems 370 0DNA分析仪进行分析。构建成功的重组质粒转化大肠杆菌BL2 1(DE3)pLysE细胞 ,经 12 %SDS PAGE鉴定融合表达蛋白。结果　PCRR○T7/NT TOPOR○ 质粒已载入rhIL 10基因 ,其序列与理论设计完全一致 ,表达质粒在BL2 1(DE3)pLysE中得到高效表达 ,产物主要以包涵体形式存在。结论　已成功构建重组PCRR○T7/NT TOPOR○ IL 10质粒载体 ,并在大肠杆菌BL2 1(DE3) 展开更多

关键词 RHIL-10 人重组白细胞介素-10 融合表达 包涵体 大肠杆菌

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人重组白介素6对人结肠癌HT-29细胞黏蛋白表达的调控 被引量：1

8

作者 黄华明 陈爱军 《中华胃肠外科杂志》 CAS 北大核心 2011年第11期899-902,共4页

目的研究人重组白介素6（rIL-6）对人结肠癌HT-29细胞中黏蛋白表达的调控，以期对结肠癌的发生发展进一步了解。方法采用流式细胞技术和RT-PCR分别检测1、2、5、10和20μg/L的rIL-6作用于HT-29细胞后黏蛋白1和黏蛋白2表达变化，采用Tran... 目的研究人重组白介素6（rIL-6）对人结肠癌HT-29细胞中黏蛋白表达的调控，以期对结肠癌的发生发展进一步了解。方法采用流式细胞技术和RT-PCR分别检测1、2、5、10和20μg/L的rIL-6作用于HT-29细胞后黏蛋白1和黏蛋白2表达变化，采用Transwell细胞侵袭实验研究rIL-6对HT．29细胞侵袭力的影响。结果2μg／L以上的rIL-6能够促进结肠癌HT-29细胞中黏蛋白1的表达，分别为（12．5±1．6）％、（26．6±2．7）％、（33．9±2．8）％和（58．9±2．5）％，均高于阴性对照组（8．0±0．8）％（P〈0．01）。反之，2μg／L以上的rIL-6可抑制黏蛋白2的表达，分别为（30．5±2．6）％、（17．0±2．7）％、（11．0±2．0）％和（5．3±1．8）％，均低于阴性对照组（41．6±3．6）％（P〈0．01）。随着rIL-6浓度的增加，HT-29细胞的透膜细胞数增加（P〈0．01）。结论rIL-6能促进结肠癌HT-29细胞中黏蛋白1的表达．抑制黏蛋白2的表达，对结肠癌细胞的浸润有促进作用。 展开更多

关键词 人重组白细胞介素6 结肠肿瘤 黏蛋白

原文传递

人重组白细胞介素-6对培养的大鼠海马神经元缺氧复氧后Jun表达的影响

9

作者 丁爱石 王福庄 +4 位作者 于顺 吴丽颖 赵彤 邹民吉 范明 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 2001年第1期59-61,共3页

关键词 人重组白细胞介素-6 大鼠 海马神经元 缺氧-复氧后 Jun表达

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人重组白细胞介素-6对成牙骨质细胞的生长及分泌骨钙素能力的影响 被引量：1

10

作者 侯建霞 由江峰 +1 位作者 曹采方 孟焕新 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期133-136,共4页

目的 :了解rhIL 6对成牙骨质细胞 (cementoblasts,CBs)增殖活性及分泌骨钙素 (osteocalcin ,OC)能力的影响。方法 :试验所用的CBs为用组织块法联合酶消化法培养所得的新生牛CBs。实验组培养液为 10 % (体积分数 )FCS +RPMI16 40加不同 ... 目的 :了解rhIL 6对成牙骨质细胞 (cementoblasts,CBs)增殖活性及分泌骨钙素 (osteocalcin ,OC)能力的影响。方法 :试验所用的CBs为用组织块法联合酶消化法培养所得的新生牛CBs。实验组培养液为 10 % (体积分数 )FCS +RPMI16 40加不同 (质量 )浓度的rhIL 6 ,对照组不加rhIL 6。采用四甲基偶氮唑盐 (MTT)法观察CBs生长及存活状态 ;放射免疫分析法测定CBs培养上清液中OC的含量。结果 :rhIL 6对CBs的生长有抑制作用 ,并呈剂量依赖趋势 ,但无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ;同一 (质量 )浓度rhIL 6在不同的培养时间段对CBs分泌OC的影响不同 ,除 0 .1μg·L- 1 IL 6组外 ,1、10、10 0 μg·L- 1 组上清液中的OC浓度在最初的 5d内有明显增高 ,以 10 0 μg·L- 1 组最显著 ,呈浓度依赖性 ,但在第 7天时 ,10 0 μg·L- 1 组的OC浓度明显下降至仅略高于第 3天的水平。 0 .1、1和 10μg·L- 1 组在第 3天和第 7天时 ,OC浓度均低于空白对照组。结论 :IL 6可能通过调节CBs的生长和OC的分泌而在CBs的代谢及牙骨质的形成、修复中发挥一定的作用。 展开更多

关键词 人重组白细胞介素-6 成牙骨质细胞 生长 分泌 骨钙素 影响

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重组人白细胞介素11对小鼠巨核细胞生成的促进作用

11

作者 马峰 Kenichi KOIKE +1 位作者 Atsushi KOMIYAMA Tatsutoshi NAKAHATA 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1995年第1期33-38,共6页

应用干细胞培养及集落形成法观察到白细胞介素11(IL-11)虽不能单独使小鼠骨髓细胞形成集落,但和白细胞介素3(IL-3)合用时,对正常及5-FU处理后小鼠骨髓细胞的集落形成有明显的促进作用,其中含巨核细胞的集落(CFI-GMM+CFU-M)数较IL-3单独... 应用干细胞培养及集落形成法观察到白细胞介素11(IL-11)虽不能单独使小鼠骨髓细胞形成集落,但和白细胞介素3(IL-3)合用时,对正常及5-FU处理后小鼠骨髓细胞的集落形成有明显的促进作用,其中含巨核细胞的集落(CFI-GMM+CFU-M)数较IL-3单独组分别增加约2.5和7倍。巨核细胞的体积测量法显示IL-11可增大成熟巨核细胞的体积。复种实验表明巨核细胞的早期集落形成受IL-3的刺激,而进一步分化和增殖需要IL-11的参与。在干细胞因子(SCF)的协同下,IL-11可使5-FU处理后小鼠骨髓细胞形成多量的未分化集落(CFU-Blast),提示IL-11在造血干细胞早期的自我更新中可能起着重要的作用。 展开更多

关键词 人重组白细胞介素11 干细胞培养 巨核细胞生成

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羟基喜树碱联合IL-2治疗MDS 15例临床分析

12

作者 王波涛 《基层医学论坛》 2009年第14期438-439,共2页

目的运用羟基喜树碱联合生物制剂人重组白细胞介素-2(IL-2)为主治疗骨髓增生异常综合征(MDS-RA、RAS/R EB、RAEB-t)15例以寻求一种提高疗效的方法。方法15例患者均采用羟基喜树碱联合IL-2为主治疗,配合输血、对症、支持治疗。结果11例患... 目的运用羟基喜树碱联合生物制剂人重组白细胞介素-2(IL-2)为主治疗骨髓增生异常综合征(MDS-RA、RAS/R EB、RAEB-t)15例以寻求一种提高疗效的方法。方法15例患者均采用羟基喜树碱联合IL-2为主治疗,配合输血、对症、支持治疗。结果11例患者(MDS-RA、RAS/RAEB-t)获得基本缓解,存活2年余,2例(MDS-RAEB)后期死于肺部感染。1例因经济困难放弃继续治疗。结论羟基喜树碱联合IL-2为主综合治疗有可能提高治疗MDS的疗效。 展开更多

关键词 羟基喜树碱 人重组白细胞介素-2 骨髓增生异常综合征

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急性髓系白血病细胞诱导分化生成树突状细胞的研究 被引量：8

13

作者 童向民 金洁 +1 位作者 薛永权 王云贵 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期45-48,共4页

目的　将急性髓系白血病 (AML)原代细胞诱导成树突状细胞 (DC) ,并探索白血病免疫治疗的新途径。方法　分离初诊AML患者 12例和正常人 6例的骨髓单个核细胞 ,用重组人粒单核细胞集落刺激因子 (rhGM CSF) 10 0 0U /ml、重组人白细胞介素 ... 目的　将急性髓系白血病 (AML)原代细胞诱导成树突状细胞 (DC) ,并探索白血病免疫治疗的新途径。方法　分离初诊AML患者 12例和正常人 6例的骨髓单个核细胞 ,用重组人粒单核细胞集落刺激因子 (rhGM CSF) 10 0 0U /ml、重组人白细胞介素 4(rhIL 4) 50 0U/ml和肿瘤坏死因子α(TNF α) 50U/ml联合培养 10d ;经形态学 (Wright染色、倒置显微镜、透射电镜 ) ,免疫学 (CD80 、CD86 、CD83 、CD1a、HLA DR)鉴定 ,荧光原位杂交 (FISH)进行细胞遗传学分析 ,混合淋巴细胞反应检测功能。结果　细胞因子联合诱导后 ,呈现DC的典型形态 ,CD80 、CD86 、CD83 、CD1a的表达与对照组比较明显上调 (P <0 0 5) ,具有刺激T淋巴细胞增殖的能力。经FISH证实来源于白血病细胞的这类DC与正常DC在形态和免疫学表达方面相似 (P >0 0 5) ,但功能较弱。结论　在体外可成功的将AML原代细胞诱导分化成DC 。 展开更多

关键词 急性髓系白血病 细胞诱导分化 树突状细胞 重组人粒单核细胞集落刺激因子 重组人白细胞介素4

原文传递

慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞表型及抗原提呈能力与HBV载量的关系 被引量：7

14

作者 钱峰 贺永文 +3 位作者 朱传武 王海燕 吴妹英 李明 《肝脏》 2005年第1期8-10,共3页

目的　探讨慢性乙型肝炎 (CHB)患者外周血树突状细胞 (DCs)表型及抗原提呈能力与HBV载量的关系。方法　采集 2 3例CHB患者和 8例健康人的抗凝外周静脉血 ,分离外周血单个核细胞 (PBMCs) ,在重组人白细胞介素 4和重组人粒细胞 巨噬细胞... 目的　探讨慢性乙型肝炎 (CHB)患者外周血树突状细胞 (DCs)表型及抗原提呈能力与HBV载量的关系。方法　采集 2 3例CHB患者和 8例健康人的抗凝外周静脉血 ,分离外周血单个核细胞 (PBMCs) ,在重组人白细胞介素 4和重组人粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子的作用下培养使DCs增殖、成熟 ,以间接免疫荧光流式细胞技术分别检测DCs表面CD80、CD86、HLA DR及ICAM 1的表达 ;将培养成熟的DCs与HBsAg共同孵育 ,用丝裂霉素C处理后再与自体PBMCs共同培养 ,在培养结束前 12h加入3H TDR ,收集细胞 ,以 β液闪计数仪测定cpm值 ;同期用定量聚合酶链反应技术测定CHB患者外周血HBV载量。结果　患者DCs表面CD86、HLA DR和ICAM 1的表达水平及DCs的抗原提呈能力均显著低于健康对照组 ;CD80、CD86、HLA DR及ICAM 1的表达与HBV载量呈显著负相关 (分别为P <0 .0 1,P <0 .0 1,P <0 .0 0 1和P <0 .0 0 1) ;DCs的抗原提呈能力也与HBV载量呈显著负相关 (为P <0 .0 0 1)。结论　CHB患者外周血DCs的成熟和功能存在障碍 ,DCs的抗原提呈能力与血液中HBV的载量密切相关 。 展开更多

关键词 抗原提呈能力 慢性乙型肝炎患者 HBV 树突状细胞表型 重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 载量 重组人白细胞介素4 ICAM-1 HLA-DR 外周血树突状细胞 外周血单个核细胞 聚合酶链反应技术 ^3H-TDR 流式细胞技术 间接免疫荧光

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人外周血树突状细胞的体外诱导和鉴定 被引量：5

15

作者 王媛 杨爱珍 +2 位作者 陈惠英 乐美兆 秦叔逵 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2004年第6期597-600,共4页

目的 :建立从人外周血体外诱导扩增树突状细胞 (DC)的方法。方法 :从正常人外周血白细胞分离单个核细胞 ,经三种细胞因子———重组人粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 (rhGM CSF)、重组人白细胞介素 4 (rhIL 4 )和重组人肿瘤坏死因子 (rhTN... 目的 :建立从人外周血体外诱导扩增树突状细胞 (DC)的方法。方法 :从正常人外周血白细胞分离单个核细胞 ,经三种细胞因子———重组人粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 (rhGM CSF)、重组人白细胞介素 4 (rhIL 4 )和重组人肿瘤坏死因子 (rhTNFα)联合诱导培养 ,10天后收获细胞 ,利用光学显微镜、透射电镜观察其外部形态和细胞超微结构 ,流式细胞仪检测其细胞表面抗原 ,自体混合淋巴细胞反应检测其刺激T细胞的增殖活性。结果 :培养收获了高纯度的DC ,这些细胞表面有大量的不规则突起 ,核也呈不规则状 ,核仁小 ,核膜异染色质聚集 ,含有丰富的细胞器 ,如核糖体、内质网、溶酶体等 ;细胞表面高水平表达HLA DR、CD1α、CD80、CD83和CD86 ;自体混合淋巴细胞反应表明诱导所得的DC具有很强的激发同种T细胞增殖的能力。结论 展开更多

关键词 人外周血 体外诱导 树突状细胞 混合淋巴细胞反应 细胞表面 DC 自体 CD83 CD86 重组人白细胞介素4

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脐血及外周血树突状细胞的体外诱导及比较研究 被引量：1

16

作者 孙晓雷 陶潜 刘晓娟 《南通医学院学报》 2002年第2期123-124,127,共3页

目的 :体外诱导扩增具典型形态、表型及功能的树突状细胞 (DC) ,以进行相关基础研究及临床应用。方法 :取正常人外周血及脐血 ,以 Ficoll分离取白细胞 ,去除悬浮细胞后 ,分别在以加入 GM- CSF,TNF-α(脐血 )及GM- CSF,IL- 4 (外周血 )... 目的 :体外诱导扩增具典型形态、表型及功能的树突状细胞 (DC) ,以进行相关基础研究及临床应用。方法 :取正常人外周血及脐血 ,以 Ficoll分离取白细胞 ,去除悬浮细胞后 ,分别在以加入 GM- CSF,TNF-α(脐血 )及GM- CSF,IL- 4 (外周血 )的完全培养基中培养 ,在第 3,7,9天表型 (CD1a,CD80 ,CD83,HL A- DR)分析及形态观察 ,1周左右分别做同种异体混合淋巴细胞培养 ,比较激发细胞增殖的能力。结果 :脐血诱导的 DC细胞数大于外周血来源的 DC细胞数 ,两者有显著差异。两种来源的 DC在形态及细胞表型 (第 9天 CD1a脐血 6 7.2± 3.6 % ,外周血 6 9.3± 6 .8% ;CD83脐血 73.7± 5 .5 % ,外周血 75 .6± 4 .9% )无显著差异 ,两者的刺激同种异体淋巴细胞增殖能力无显著差异。结论 :脐血可成功诱导功能性 DC,脐血诱导比外周血诱导效率高 ,且与外周血所诱导的 展开更多

关键词 树突状细胞 单核细胞 重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 重组人白细胞介素4 肿瘤坏死因子Α

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膀胱癌患者外周血树突状细胞的体外培养扩增和鉴定 被引量：2

17

作者 蔡丹 王志华 +3 位作者 胡志全 张旭 周四维 叶章群 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期472-474,共3页

目的研究膀胱癌患者外周血树突状细胞(DC)的体外培养扩增和鉴定。方法应用Ficoll-Hypaque离心获得界面细胞,贴壁培养2h,获得单个核细胞,体外以重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF,50ng/ml)+重组人白细胞介素4(rhlL-4,10ng/ml)... 目的研究膀胱癌患者外周血树突状细胞(DC)的体外培养扩增和鉴定。方法应用Ficoll-Hypaque离心获得界面细胞,贴壁培养2h,获得单个核细胞,体外以重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF,50ng/ml)+重组人白细胞介素4(rhlL-4,10ng/ml)+人肿瘤坏死因子-α(hTNF-α,50ng/ml)诱导培养。倒置相差显微镜及扫描电镜下观察DC生长情况；流式细胞仪检测DC表型；MTT法检测DC活化的T细胞对肿瘤细胞BIU87的杀伤率。结果第6天体外培养的DC由贴壁状态变为悬浮毛刺状细胞,第8天为形态不规则的毛刺状,为典型DC形态。流式细胞仪检测表明,成熟DC高水平表达CD_(1a)、CD_(83)、CD_(86)及HLA-DR等。被DC激活的T细胞对膀胱癌细胞株BIU87的杀伤率为(48.8±3.7)%,未经DC激活的T细胞的杀伤率为(25.7±1.5)%,2组比较差异有统计学意义(P＜0.01)。结论膀胱癌患者外周血经rhGM-CSF+rhIL-4+hTNF-α体外诱导培养能诱导出DC。 展开更多

关键词 树突状细胞 重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 重组人白细胞介素4 膀胱肿瘤

原文传递

人白细胞介素4的原核表达、复性、纯化及生物学活性鉴定 被引量：1

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作者 李炯 崔凯军 +8 位作者 文静 赵志伟 陈平 田聆 阚兵 文艳君 邓洪新 范琳玉 魏于全 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第4期866-869,共4页

用PCR方法从pORF-hIL4质粒中扩增重组人白细胞介素4(hIL-4)的基因,构建PQE60原核表达载体并诱导其目的蛋白的表达。对表达的目的蛋白的可溶性进行鉴定,发现hIL-4基因表达产物在大肠杆菌中主要以不溶性包涵体形式存在,经过超声波破细菌... 用PCR方法从pORF-hIL4质粒中扩增重组人白细胞介素4(hIL-4)的基因,构建PQE60原核表达载体并诱导其目的蛋白的表达。对表达的目的蛋白的可溶性进行鉴定,发现hIL-4基因表达产物在大肠杆菌中主要以不溶性包涵体形式存在,经过超声波破细菌、包涵体提取、洗涤处理后,用5mol/L盐酸胍变性溶解包涵体沉淀,上清稀释复性后透析,再经镍亲和层析进行纯化。纯化后的hIL-4进行TF-1细胞体外增生实验检测其生物学活性后,可用于人外周血树突状细胞的体外诱导培养。 展开更多

关键词 重组人白细胞介素4 包涵体 复性 纯化 生物学活性 树突状细胞

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小鼠IL-4重组质粒的构建及目的蛋白的表达和纯化 被引量：2

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作者 罗晓蕾 任潇潇 +4 位作者 黄浓郁 邱吉 李倩 周西坤 李炯 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期579-583,共5页

目的构建重组小鼠白细胞介素-4(rmIL-4)原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,纯化目的蛋白并鉴定。方法将优化后的小鼠IL-4cDNA片段克隆到原核表达载体pET-32a(+)上,获得重组质粒pET32/rmIL-4,转入BL21(DE3)中经IPTG诱导表达得... 目的构建重组小鼠白细胞介素-4(rmIL-4)原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,纯化目的蛋白并鉴定。方法将优化后的小鼠IL-4cDNA片段克隆到原核表达载体pET-32a(+)上,获得重组质粒pET32/rmIL-4,转入BL21(DE3)中经IPTG诱导表达得到包涵体。经复性处理后,依次用阴离子交换柱和分子筛纯化蛋白。对纯化得到的蛋白用Western blot检验免疫学特异性,用mIL-4生长依赖性细胞株CTLL-2增殖实验和动物实验测定其生物学活性。结果经酶切和测序证实重组质粒pET32/rmIL-4构建成功。诱导得到的包涵体用3mol/L盐酸胍溶液洗涤后溶于加有β-巯基乙醇的7mol/L盐酸胍溶液中变性,在pH9.5的条件下梯度透析复性。纯化出的蛋白经Western blot鉴定,能与抗小鼠IL-4抗体特异性结合;经细胞和动物实验鉴定,rmIL-4蛋白具有生物学活性,能刺激mIL-4生长依赖性细胞株CTLL-2增殖,使小鼠体内细胞因子发生从TH1到TH2的漂移。结论成功制备了高纯度、具有生物学活性的小鼠IL-4,为进一步研究其生物学功能提供了条件。 展开更多

关键词 重组小鼠白细胞介素-4蛋白纯化生物学活性

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大肠杆菌表达的重组hIL-4的分离纯化 被引量：1

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作者 周艳荣 熊凌霜 +1 位作者 唱韶红 阎明凡 《生物技术通讯》 CAS 1999年第2期130-133,共4页

对大肠杆菌表达的重组人白细胞介素 4进行了分离纯化。人 IL- 4基因表达产物在大肠杆菌中以不溶性包含体形式存在 ,经过超声破菌、包含体抽提、洗涤处理 ,可使包含体纯度达 70 %以上 ,用 6mol/L盐酸胍变性溶解包含体沉淀后上清直接稀释... 对大肠杆菌表达的重组人白细胞介素 4进行了分离纯化。人 IL- 4基因表达产物在大肠杆菌中以不溶性包含体形式存在 ,经过超声破菌、包含体抽提、洗涤处理 ,可使包含体纯度达 70 %以上 ,用 6mol/L盐酸胍变性溶解包含体沉淀后上清直接稀释复性 ,再经浓缩、透析、离子交换色谱一系列纯化步骤终产物纯度达 95 %以上 ,回收率 1 0 %以上 ,比活性达 2 .5× 1 0 展开更多

关键词 重组人白细胞介素4 包含体 复性 纯化

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