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人角膜基质间充质干细胞的分离培养及表型鉴定
被引量:
2
1
作者
刘先宁
汪耀
+7 位作者
朱秀萍
程燕
潘士印
肖湘华
银勇
安娜
王亚妮
刘睿
《现代检验医学杂志》
CAS
2019年第4期28-30,34,共4页
目的建立人角膜基质间充质干细胞(HCS-MSC)体外分离培养、传代和鉴定等方法。方法无菌条件下,取眼科临床角膜移植术后剩余的供体角膜缘组织,去除上皮和内皮组织,将基质组织切成1mm×2mm的组织块,采用无动物源性血清的间充质干细胞...
目的建立人角膜基质间充质干细胞(HCS-MSC)体外分离培养、传代和鉴定等方法。方法无菌条件下,取眼科临床角膜移植术后剩余的供体角膜缘组织,去除上皮和内皮组织,将基质组织切成1mm×2mm的组织块,采用无动物源性血清的间充质干细胞培养液进行组织块贴壁法培养,倒置显微镜下动态观察细胞的生长形态及贴壁状态,将传代培养后的第三代细胞采用流式细胞分析法进行表型鉴定,液氮冷冻保存。结果采用人角膜缘基质组织块贴壁法培养,于培养后第7天开始向周围呈放射状长出细胞,14天左右长满培养皿,细胞形态呈均一梭形;传代培养后生长快速,于2~4天达90%融合;连续传代3次,其生长特性和形态不变,CD90,CD29和CD105阳性率>95%,CD34和CD-HLA-dr阳性率<3%。结论采用人角膜缘基质组织可分离培养出间充质干细胞,为角膜组织修复、重建及对抗免疫排斥反应等奠定基础。
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关键词
人
角膜基质
间
充
质
干细胞
体外分离培养
表型鉴定
下载PDF
职称材料
人角膜基质间充质干细胞外泌体的分离制备及鉴定
2
作者
刘先宁
汪耀
+6 位作者
潘士印
肖湘华
银勇
王亚妮
刘睿
朱秀萍
赵明
《现代检验医学杂志》
CAS
2021年第5期114-116,共3页
目的制备人角膜基质间充质干细胞(human corneal stromal mesenchymal stem cells,HC-MSCs)外泌体并进行生物学鉴定。方法采用组织块培养技术获得HC-MSCs,利用超速离心法从HC-MSCs培养上清中分离制备外泌体,通过蛋白免疫印迹、透射电镜...
目的制备人角膜基质间充质干细胞(human corneal stromal mesenchymal stem cells,HC-MSCs)外泌体并进行生物学鉴定。方法采用组织块培养技术获得HC-MSCs,利用超速离心法从HC-MSCs培养上清中分离制备外泌体,通过蛋白免疫印迹、透射电镜、纳米颗粒跟踪分析法进行鉴定。结果分离的纳米囊泡表达外泌体特异性标志蛋白CD63,CD81和TSG101,在透射电子显微镜下可见其呈圆形、卵圆形和杯盘状囊泡,直经113.3 nm。结论从HCMSCs培养上清中可分离出具有典型结构及特征的外泌体,为HC-MSCs外泌体的作用机制及其在眼科的转化应用研究奠定坚实的基础。
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关键词
人
角膜基质
间
充
质
干细胞
外泌体
制备及鉴定
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职称材料
题名
人角膜基质间充质干细胞的分离培养及表型鉴定
被引量:
2
1
作者
刘先宁
汪耀
朱秀萍
程燕
潘士印
肖湘华
银勇
安娜
王亚妮
刘睿
机构
西安市第一医院陕西省眼科研究所陕西省眼科学重点实验室陕西省眼科疾病临床医学研究中心西北大学附属第一医院
出处
《现代检验医学杂志》
CAS
2019年第4期28-30,34,共4页
基金
陕西省重点研发计划项目(2018ZDXM-SF-056)
陕西省自然科学基金面上项目(2017JM8040)
文摘
目的建立人角膜基质间充质干细胞(HCS-MSC)体外分离培养、传代和鉴定等方法。方法无菌条件下,取眼科临床角膜移植术后剩余的供体角膜缘组织,去除上皮和内皮组织,将基质组织切成1mm×2mm的组织块,采用无动物源性血清的间充质干细胞培养液进行组织块贴壁法培养,倒置显微镜下动态观察细胞的生长形态及贴壁状态,将传代培养后的第三代细胞采用流式细胞分析法进行表型鉴定,液氮冷冻保存。结果采用人角膜缘基质组织块贴壁法培养,于培养后第7天开始向周围呈放射状长出细胞,14天左右长满培养皿,细胞形态呈均一梭形;传代培养后生长快速,于2~4天达90%融合;连续传代3次,其生长特性和形态不变,CD90,CD29和CD105阳性率>95%,CD34和CD-HLA-dr阳性率<3%。结论采用人角膜缘基质组织可分离培养出间充质干细胞,为角膜组织修复、重建及对抗免疫排斥反应等奠定基础。
关键词
人
角膜基质
间
充
质
干细胞
体外分离培养
表型鉴定
Keywords
human corneal stromal mesenchymal stem cells(HCS-MSC)
in vitro isolation and culture
phenotypic characterization
分类号
R446.8 [医药卫生—诊断学]
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职称材料
题名
人角膜基质间充质干细胞外泌体的分离制备及鉴定
2
作者
刘先宁
汪耀
潘士印
肖湘华
银勇
王亚妮
刘睿
朱秀萍
赵明
机构
西安市第一医院
出处
《现代检验医学杂志》
CAS
2021年第5期114-116,共3页
基金
陕西省重点研发计划项目(2018ZDXM-SF-056和2019SF-196)
陕西省自然科学基础研究计划一般项目(面上)(No.2021JM-593)。
文摘
目的制备人角膜基质间充质干细胞(human corneal stromal mesenchymal stem cells,HC-MSCs)外泌体并进行生物学鉴定。方法采用组织块培养技术获得HC-MSCs,利用超速离心法从HC-MSCs培养上清中分离制备外泌体,通过蛋白免疫印迹、透射电镜、纳米颗粒跟踪分析法进行鉴定。结果分离的纳米囊泡表达外泌体特异性标志蛋白CD63,CD81和TSG101,在透射电子显微镜下可见其呈圆形、卵圆形和杯盘状囊泡,直经113.3 nm。结论从HCMSCs培养上清中可分离出具有典型结构及特征的外泌体,为HC-MSCs外泌体的作用机制及其在眼科的转化应用研究奠定坚实的基础。
关键词
人
角膜基质
间
充
质
干细胞
外泌体
制备及鉴定
Keywords
human corneal stromal mesenchymal stem cells(HCS-MSCs)
exosome
preparation and identification
分类号
R772.2 [医药卫生—眼科]
R446 [医药卫生—临床医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人角膜基质间充质干细胞的分离培养及表型鉴定
刘先宁
汪耀
朱秀萍
程燕
潘士印
肖湘华
银勇
安娜
王亚妮
刘睿
《现代检验医学杂志》
CAS
2019
2
下载PDF
职称材料
2
人角膜基质间充质干细胞外泌体的分离制备及鉴定
刘先宁
汪耀
潘士印
肖湘华
银勇
王亚妮
刘睿
朱秀萍
赵明
《现代检验医学杂志》
CAS
2021
0
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职称材料
已选择
0
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