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人视网膜激光光凝后荧光血管造影和超微结构研究 被引量:12
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作者 李涛 罗清礼 吴海英 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期234-237,共4页
目的 探讨激光对人视网膜损伤后荧光血管造影和超微结构改变及修复过程 ,为激光治疗视网膜病变提供理论基础。方法 因眼眶恶性肿瘤需作眶内容物剜出的 7例病人 ,征得合作和签署同意书后 ,术前 1、3和 7d用 、 、 级光斑光凝视网膜 ,... 目的 探讨激光对人视网膜损伤后荧光血管造影和超微结构改变及修复过程 ,为激光治疗视网膜病变提供理论基础。方法 因眼眶恶性肿瘤需作眶内容物剜出的 7例病人 ,征得合作和签署同意书后 ,术前 1、3和 7d用 、 、 级光斑光凝视网膜 ,分别于 1、3和 7d行眼底血管荧光造影照像。摘除眼球用 2 0 g/ L 多聚甲醛固定 ,作成超薄切片 ,透射电镜观察照像。结果 荧光血管造影 :光凝后第 1d可见荧光明显渗漏 ,光斑越大 ,渗漏越显著。光凝后第 3d渗漏减轻 ,中心出现小的遮蔽荧光。光凝后第 7d渗漏消失 ,中心区遮蔽荧光增强。超微结构 :光凝后第 1d, 级光斑 ,部分色素上皮细胞肿胀、坏死 ,部分感光细胞排列紊乱或溶解消失 ,外核层细胞数减少。 级光斑 ,色素上皮和感光细胞大量溶解破坏 ,外核层部分细胞坏死核凋亡 ,外网状层结构紊乱。 级光斑 ,视网膜全层受损。光凝后第 3d,细胞水肿减轻 ,碎屑减少 ,吞噬细胞出现 ,色素上皮细胞和 Müller细胞开始增生。光凝后第 7d,增生的色素上皮细胞和 Müller细胞修复视网膜破坏区。 至 级光斑视网膜结构紊乱逐渐加重。结论 光疑引起视网膜荧光渗漏、视网膜色素上皮细胞、神经元细胞的坏死和凋亡 ,全层超微结构的破坏 。 展开更多
关键词 视网膜 激光光凝 荧光血管造影 超微结构
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密蒙花提取物对高糖下人视网膜血管内皮细胞增生及VEGF表达的影响 被引量:3
2
作者 夏世刚 彭辉灿 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期798-799,共2页
糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病严重的微血管并发症之一,其病理特征为视网膜新生血管形成,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)能特异性地作用于视网膜血管内皮细胞,是最直接的眼... 糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病严重的微血管并发症之一,其病理特征为视网膜新生血管形成,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)能特异性地作用于视网膜血管内皮细胞,是最直接的眼内新生血管形成因子之一。密蒙花是用于治疗眼部疾病的一种中药,具有维生素P样作用,能降低皮肤和小肠血管的通透性及脆性。 展开更多
关键词 血管内皮细胞增生 VEGF表达 视网膜 花提取物 视网膜新生血管形成 糖尿病视网膜病变 视网膜血管内皮细胞 血管内皮生长因子
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人胎视网膜神经元凋亡的研究—TUNEL法
3
作者 李爱冬 羊惠君 韦纯义 《解剖科学进展》 1997年第3期36-37,共2页
人胎视网膜神经元凋亡的研究—TUNEL法李爱冬羊惠君韦纯义*(华西医科大学解剖教研室*附一院眼科)为研究人胎视网膜神经元的凋亡与增殖、分化的关系,调节凋亡和增殖的因素,验证TUNEL法的敏感性和可靠性,本文收集了8—... 人胎视网膜神经元凋亡的研究—TUNEL法李爱冬羊惠君韦纯义*(华西医科大学解剖教研室*附一院眼科)为研究人胎视网膜神经元的凋亡与增殖、分化的关系,调节凋亡和增殖的因素,验证TUNEL法的敏感性和可靠性,本文收集了8—38周胎儿视网膜27例、成人视网膜... 展开更多
关键词 神经元凋亡 视网膜 细胞凋亡 TUNEL 国家自然科学基金 星形胶质细胞 视网膜细胞 神经上皮细胞 凋亡细胞 视网膜
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The Effect of siRNA-VEGF on the Growth of REC in Retina Pigment Epithelial Cell and Retinal Endothelial Cell Co-culture System 被引量:1
4
作者 Jin Ma Zhaomeng Shen Qianru Zhang Tiepei Zhu Ke Yao 《Eye Science》 CAS 2011年第2期75-79,共5页
Purpose:To investigate the effect of small interfering RNA (siRNA)targeting VEGF of retinal pigment epithelium (RPE) cells on the growth activity of human retinal vascular endothelial cells (RECs) under a co-culture s... Purpose:To investigate the effect of small interfering RNA (siRNA)targeting VEGF of retinal pigment epithelium (RPE) cells on the growth activity of human retinal vascular endothelial cells (RECs) under a co-culture system.Methods:By applying the vector.(pGPU6)-based siRNA plasmid gene silence system,we specifically silenced VEGF expression of RPE cells (ARPE-19) through plasmid (pG-PU6-VEGFA-siRNA)transfection.Reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR) was applied for selecting the most efficient siRNA segment among three pGPU6-VEGF-siRNA groups (siRNA-1,siRNA-2 and siRNA-3).Treated RPE cells were co-cultured with RECs in a co-culture system made up of a 24-well culture plate and transwell inserts assembled inside During 7-day culture period,the growth ca-pacity of RECs were observed and tested in the form of cell counting assay.Three groups were established in this study:RPE cells transfected with pGPU6-VEGF-siRNA and co-cultured with RECs (group A),RPE cells transfected with siR-NA null vector and co-cultured with RECs (group B),and RECs cultured alone (group C).Results:After transfection,VEGF expression levels of RPE cells in three pGPU6-VEGF-siRNA groups (siRNA-1,siR-NA-2 and siRNA-3)evaluated by RT-PCR were 2.56 ±0.45,1.17 ±0.38 and 4.39 ±0.51,respectively (n =10).siRNA-2 was selected as the foremost segment for transfection (P < 0.05,SNK-q test).During the 7-day co-culture period,the influence upon the growth of RECs was observed.Growth curve of RECs under co-culture showed a lower growth rate in group A than in group B (P <0.05,dunnett's test),but no significant difference between group A and group C was noted (P>0.05,dunnett's test).RECs in group A proliferated muchfaster during the first four days post-transfection.Conclusion:Delivery of siRNA targeting VEGF plays an efficient role in down-regulating VEGF expression in RPE cells,therefore modulating the growth activity of RECs under a co-culture system in vitro.The application of this technique may provide novel evidence for the preventi 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 血管内皮细胞 SIRNA 共培养体系 视网膜 上皮细胞 色素 经济共同体
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大麻素对人和小鼠视网膜神经节细胞GABA电流的调控差异 被引量:1
5
作者 罗雪 刘诗亮 +3 位作者 江梦南 沈雨濛 胡单萍 沈吟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1188-1192,共5页
目的比较人和小鼠视网膜内源性大麻素类受体1(cannabinoid receptor,CB1)的表达差异,观察大麻素受体激动剂WIN55212-2对不同种属视网膜神经节细胞GABA电流的调控作用。方法采用冰冻切片免疫荧光染色,观察CB1受体在视网膜中的表达。制备... 目的比较人和小鼠视网膜内源性大麻素类受体1(cannabinoid receptor,CB1)的表达差异,观察大麻素受体激动剂WIN55212-2对不同种属视网膜神经节细胞GABA电流的调控作用。方法采用冰冻切片免疫荧光染色,观察CB1受体在视网膜中的表达。制备视网膜薄片,行全细胞膜片钳记录。在神经节细胞上给予100μmol/L GABA快速加药诱导出电流IGABA,而后观察孵育大麻素受体激动剂WIN55212-2时GABA诱导的IGABA及同时孵育WIN 55212-2和大麻素受体拮抗剂SR141716A的电流IGABA。结果人和小鼠视网膜CB1受体的分布有所不同,人的内核层、外核层、神经节细胞层有显著的CB1表达,但小鼠CB1受体主要表达在内网状层、外网状层上;膜片钳结果显示不管是在人还是在小鼠的视网膜上,孵育WIN55212-2后的GABA诱导电流幅度均有显著减小。不同的是,在人视网膜神经节细胞上,WIN55212-2明显减慢了GABA电流的反应速度,表现在电流达峰时间明显延长,恢复时间缩短(P<0.05)。WIN55212-2对小鼠视网膜神经节细胞GABA的反应速度无明显差别(P>0.05)。结论CB1受体在人和小鼠视网膜中有差异性分布,对神经节细胞的GABA电流影响也不同。孵育WIN55212-2可抑制人和小鼠神经节细胞GABA电流幅度,但仅对人的神经节细胞的GABA电流的动力学速度有影响。 展开更多
关键词 视网膜 大麻素受体 神经节细胞 全细胞膜片钳技术
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喷墨打印技术首次成功地用于打印从眼睛采集细胞
6
《中国印刷》 2014年第2期9-10,共2页
喷墨打印技术已经首次成功地用于打印从眼睛采集的细胞。英国研究人员取得的该项突破使由人视网膜中发现的细胞制成组织移植物成为可能,有利于治愈失明的探索。这是第一次将该技术成功地用于打印成熟的中枢神经系统细胞。结果表明,该... 喷墨打印技术已经首次成功地用于打印从眼睛采集的细胞。英国研究人员取得的该项突破使由人视网膜中发现的细胞制成组织移植物成为可能,有利于治愈失明的探索。这是第一次将该技术成功地用于打印成熟的中枢神经系统细胞。结果表明,该印刷细胞能够保持自身健康,并具有在培养物中生存和生长的能力。 展开更多
关键词 喷墨打印技术 细胞 采集 眼睛 中枢神经系统 视网膜 研究 培养物
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An ultra-low power CMOS oscillating pixel array for retina implantation
7
作者 孙康明 袁祥辉 +1 位作者 孟丽娅 饶程 《Optoelectronics Letters》 EI 2010年第4期275-277,共3页
A light-controlled oscillating array for retina prosthesis is presented.The unique advantage of the circuit is that it has a lower voltage and ultra-low power consumption.And it has some other features as below:it is ... A light-controlled oscillating array for retina prosthesis is presented.The unique advantage of the circuit is that it has a lower voltage and ultra-low power consumption.And it has some other features as below:it is applicable to the natural light illumination and each pixel is an independent oscillator whose frequency is proportional to the intensity of the incident light.The fundamental characteristics of the circuit are analyzed.It is fabricated with a standard 0.6 μm CMOS technology.The experimental results indicate that the proposed circuit can be used for retina implantation,taking the place of the suffered photoreceptor in the retina of the blind and partially recovering the blind,s eyesight. 展开更多
关键词 视网膜 像素阵列 CMOS 超低功耗 振荡器 植入 自然光照明 感光细胞
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缺氧和高浓度葡萄糖对体外培养人视网膜色素上皮衍生因子表达的影响 被引量:31
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作者 姚毅 关明 +1 位作者 赵秀琴 黄一飞 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第22期1989-1992,共4页
目的 探讨缺氧和高糖对体外培养的人视网膜色素上皮 (RPE)细胞血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子 (PEDF)的影响。方法 我们通过实验性研究在氧正常或缺氧 (1%O2 )加或不加高浓度葡萄糖的条件下 ,培养的人RPE细胞 ,通过反转录... 目的 探讨缺氧和高糖对体外培养的人视网膜色素上皮 (RPE)细胞血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子 (PEDF)的影响。方法 我们通过实验性研究在氧正常或缺氧 (1%O2 )加或不加高浓度葡萄糖的条件下 ,培养的人RPE细胞 ,通过反转录PCR和实时定量分析检测PEDF和VEGF的表达 ,使用Western印迹分析检测PEDF和VEGF蛋白水平。结果 缺氧情况下 ,VEGF表达和蛋白水平增加 (P =0 .0 0 1) ;缺氧加 2 5mmol/L葡萄糖后增加更加明显 (P <0 .0 0 1)。缺氧情况下PEDF表达水平与正常氧环境比较无统计学意义 (P =0 .2 5 1) ;但加葡萄糖后PEDFmRNA表达水平低于正常对照。结论 体外培养的人RPE细胞在缺氧条件下PEDF表达降低不明显 ,这提示缺氧间接影响体外RPE细胞的PEDF下调 ,高葡萄糖直接下调PEDF的表达 ,同时增加VEGF的表达 ,这可能支持体内高血糖是糖尿病最危险的“糖毒性”观点。 展开更多
关键词 缺氧 葡萄糖 体外培养 视网膜色素 上皮衍生因子 表达 增殖性糖尿病视网膜病变
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可见光照对培养的人视网膜色素上皮细胞凋亡的影响 被引量:14
9
作者 周咏东 严密 张军军 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 2002年第3期227-230,共4页
目的 研究可见光照对培养的人视网膜色素上皮 (retinal pigment epithelium,RPE)细胞凋亡的影响。 方法 以白色荧光灯为光源 ,用 5 0 0 lx、(2 0 0 0± 5 0 0 ) lx及 (340 0± 2 0 0 ) lx不同光照强度 ,按不同的光照时间 (... 目的 研究可见光照对培养的人视网膜色素上皮 (retinal pigment epithelium,RPE)细胞凋亡的影响。 方法 以白色荧光灯为光源 ,用 5 0 0 lx、(2 0 0 0± 5 0 0 ) lx及 (340 0± 2 0 0 ) lx不同光照强度 ,按不同的光照时间 (无光照、6、12、2 4 h)照射培养的人 RPE细胞。利用终末脱氧核糖核苷酸转移酶介导的原位缺口末端标记 (terminal deoxynucleotidyl transferase mediated d UTP nick end labelling,TUNEL)、荧光素标记的连接素 V/碘化丙锭 (Annexin V- fluorescein isothiocyanate/ Propidium iodium,AnnexinV- FITC/ PI)双染色流式细胞测定、相差倒置显微镜等手段观察 RPE细胞凋亡 (分为光照后 6、12、2 4、36 h组 )。 结果 可观察到 RPE细胞出现两种死亡形式 ,凋亡与坏死。 (1)低于一定阈值 (5 0 0 lx)的光照对细胞损伤较轻 ,细胞凋亡及坏死随光照强度的增加而增加。 (2 )在较短的光照时间 (6 h和 12 h)内 ,细胞死亡的增加以凋亡为主 ;随着光照时间的延长 ,细胞坏死逐渐明显。 (3)随着光照后培养时间的延长 ,细胞凋亡明显增加 (P<0 .0 5 )。光照后 6、12、2 4 h的损伤改变以凋亡为主 ,但随时间的延长 ,凋亡继发性坏死的增加显著。光照后 36 h,细胞的坏死数显著增高 (P<0 .0 1)。 结论 可见? 展开更多
关键词 可见光照 培养 视网膜色素上皮 细胞凋亡
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体外原代培养人视网膜色素上皮细胞(英文) 被引量:17
10
作者 徐国兴 杨娟 +3 位作者 孙堂胜 胡建章 谢茂松 郭健 《国际眼科杂志》 CAS 2004年第1期12-15,共4页
目的:探讨建立体外原代培养人类视网膜色素上皮细胞(RPE)技术。为研究溶血磷脂酸(lysophos-phatidic acid, LPA)对培养的人类视网膜色素上皮细胞DNA合成与增殖的作用。方法:取自愿者贡献的意外事故成年眼球,用2.5g/L胰酶消化获取人RPE... 目的:探讨建立体外原代培养人类视网膜色素上皮细胞(RPE)技术。为研究溶血磷脂酸(lysophos-phatidic acid, LPA)对培养的人类视网膜色素上皮细胞DNA合成与增殖的作用。方法:取自愿者贡献的意外事故成年眼球,用2.5g/L胰酶消化获取人RPE细胞、150mL/L胎牛血清的DMEM培养液培养,细胞接近融合状态时进行传代培养。取自愿者贡献的眼球并游离其视网膜色素上皮细胞,用DMEM加100mL/L血清及MEM氨基酸和庆大霉素,进行细胞传代培养。用溶血磷脂酸、转移因子β2(TGF-β2)及LPA+TGF-β2进行视网膜色素上皮细胞增殖试验,用细胞染色法进行细胞计数,提取视网膜色素上皮细胞DNA,用Spectrophotometer进行DNA定量测定。结果:RPE原代细胞镜下为圆形,大小不一,内含较多的色素颗粒,胞核无法辨认。原代细胞培养贴壁后3d增殖速度明显加快,至4~5d即可基本融合,细胞浆内色素颗粒则随传代次数增多而逐渐减少。第3代培养的视网膜色素上皮细胞膜表面可见微绒毛,细胞质内细胞器丰富,线粒体量多,体积较小,内外膜分界清晰,嵴较短。色素颗粒散在分布于胞浆内,多数细胞质内数量较少呈高电子密度包含物。LPA对原代培养的视网膜色素上皮细胞增殖有促进作用。含有和/或缺乏10mL/L小牛血清的两种LPA(10μmol/L雪均明显刺激视网膜色素上皮细胞? 展开更多
关键词 体外原代培养 视网膜色素上皮细胞 LPA 溶血磷脂酸 原代培养 细胞增殖
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过表达低氧诱导因子-1α(HIF-1α)对体外培养人视网膜血管内皮细胞增殖、炎症反应及血管生成的影响 被引量:16
11
作者 蔡晖 石华宗 杨豫湘 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2019年第1期32-35,共4页
目的检测过表达低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor 1 alpha,HIF-1α)对体外培养人视网膜血管内皮细胞(human retinal capillary endothelial cell,HREC)增殖、炎症反应及血管生成的影响。方法将体外培养HREC转染人工合成的pEGF... 目的检测过表达低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor 1 alpha,HIF-1α)对体外培养人视网膜血管内皮细胞(human retinal capillary endothelial cell,HREC)增殖、炎症反应及血管生成的影响。方法将体外培养HREC转染人工合成的pEGFP-HIF-1α重组载体,并采用荧光定量PCR检测转染前后HREC中HIF-1α的表达变化。采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)、酶联免疫吸附实验(ELISA)和Western blot分别检测过表达HIF-1α对HREC增殖、炎症反应及血管生成的影响。结果体外转染pEGFP-HIF-1α可显著增加HREC中HIF-1αmRNA和蛋白表达。过表达HIF-1α可显著促进HREC增殖,HREC转染p EGFP-HIF-1α后24 h、48 h及72 h A值分别为:0. 34±0. 04、0. 57±0. 04、0. 83±0. 05,而HREC转染pEGFP-C1后24 h、48 h及72 h A值分别为:0. 26±0. 03、0. 44±0. 04、0. 61±0. 04,两者相比差异均有统计学意义(均为P <0. 05)。过表达HIF-1α可显著增加HREC中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、白细胞介素(interleukin,IL)-1β及IL-6的蛋白表达水平,TNF-α、IL-1β及IL-6蛋白表达分别为(2. 63±0. 57) ng·L^(-1)、(1. 94±0. 41) ng·L^(-1)、(5. 32±0. 83) ng·L^(-1),而转染p EGFP-C1后HREC中TNF-α、IL-1β及IL-6蛋白表达分别为(1. 20±0. 34) ng·L^(-1)、(0. 66±0. 27) ng·L^(-1)、(1. 89±0. 60) ng·L^(-1),两者相比差异均有统计学意义(均为P <0. 05)。过表达HIF-1α可显著增加HREC中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白表达,转染p EGFP-HIF-1α后细胞VEGF蛋白的表达为6. 72±0. 96,而转染p EGFP-C1后细胞VEGF蛋白的表达为2. 31±0. 47,两者相比差异有统计学意义(P <0. 05)。结论过表达HIF-1α可促进体外培养HREC增殖、炎症反应及血管的生成。 展开更多
关键词 低氧诱导因子-1Α 过表达 视网膜血管内皮细胞 增殖 炎症反应 血管内皮生长因子
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黄芪甲苷对甲基乙二醛诱导的人视网膜色素上皮细胞损伤的保护作用研究 被引量:14
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作者 周云丰 李琳 +7 位作者 葛争艳 周立东 郭宇洁 金龙 任烨 李彦林 孙兰 许扬 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期915-921,共7页
目的研究黄芪甲苷(AS-Ⅳ)对甲基乙二醛(MGO)诱导的人视网膜色素上皮细胞损伤的保护作用及分子机制。方法利用MGO诱导ARPE-19细胞损伤,CCK-8法检测细胞活力,Hoechst 33342染色法观察细胞核形态,流式细胞仪检测细胞凋亡,试剂盒测定细胞内... 目的研究黄芪甲苷(AS-Ⅳ)对甲基乙二醛(MGO)诱导的人视网膜色素上皮细胞损伤的保护作用及分子机制。方法利用MGO诱导ARPE-19细胞损伤,CCK-8法检测细胞活力,Hoechst 33342染色法观察细胞核形态,流式细胞仪检测细胞凋亡,试剂盒测定细胞内活性氧(ROS)水平、超氧化物歧化酶(SOD)水平和脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量,JC-1染色法观察线粒体膜电位的变化,Western blot法检测Bcl-2、Bax和PARP蛋白的表达量,荧光酶标法检测caspase家族蛋白caspase-9和caspase-3的活化水平。结果MGO能剂量依赖性地降低ARPE-19的细胞活力,AS-Ⅳ预处理能够明显逆转MGO引起的细胞活力下降(P<0.05),改善细胞核形态,减少细胞凋亡,减少ROS和MDA的产生(P<0.05),增加SOD活力(P<0.05),抑制线粒体膜电位的下降,提高Bcl-2/Bax蛋白表达率(P<0.05)和PARP的表达水平,降低caspase-9和caspase-3的活化水平(P<0.05)。结论 AS-Ⅳ对MGO损伤的ARPE-19细胞有明显的保护作用,其作用机制是提高细胞抗氧化能力,调节线粒体通路蛋白的表达,从而抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 黄芪甲苷 甲基乙二醛 视网膜色素上皮细胞 抗氧化 细胞凋亡
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笃斯越橘花色苷提取物对光损伤人视网膜色素上皮细胞的保护作用 被引量:12
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作者 宋雪 韩勇 +2 位作者 籍保平 刘翼翔 吕业春 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第21期324-328,共5页
目的:通过建立人视网膜色素上皮细胞(hRPE)光损伤模型评价笃斯越橘花色苷对眼睛的保护作用及机理。方法:光损伤设置光强、光照时间、后续培养时间3个影响因素,以细胞存活率和乳酸脱氢酶活性评价模型建立情况;根据越橘花色苷提取物的干... 目的:通过建立人视网膜色素上皮细胞(hRPE)光损伤模型评价笃斯越橘花色苷对眼睛的保护作用及机理。方法:光损伤设置光强、光照时间、后续培养时间3个影响因素,以细胞存活率和乳酸脱氢酶活性评价模型建立情况;根据越橘花色苷提取物的干预方式分为预防组、应激组和修复组,每组设高、中、低3个浓度,检测细胞存活率和血管内皮生长因子(VEGF)水平评价保护效果。结果:选择光照度2500lx,光照24h后培养24h作为最佳造模条件,细胞损伤率达20%;预防组和应激组能有效保护细胞活力(P<0.01),修复组没有效果,各组都能抑制由光损伤诱导hRPE细胞VEGF的过表达,但是不同浓度之间抑制能力有差异。结论:hRPE细胞光损伤程度呈光照强度和光照时间依赖性;越橘花色苷能通过保护hRPE的细胞活力和VEGF的过表达,实现保护眼科健康、预防眼科疾病的作用。 展开更多
关键词 视网膜色素上皮细胞 笃斯越橘花色苷提取物 光损伤 血管内皮生长因子
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高浓度葡萄糖对培养的人视网膜色素上皮细胞细胞表面黏附分子-1的影响 被引量:11
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作者 韩小霞 惠延年 +3 位作者 宋虎平 王海涛 张晓光 刘百军 《国际眼科杂志》 CAS 2006年第2期317-320,共4页
目的:研究高浓度葡萄糖对体外培养人视网膜色素上皮(RPE)细胞细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法:用免疫荧光法检测5.6mmol/L和30.0mmol/L葡萄糖作用1,2,3d后hRPE细胞表面ICAM-1表达量,MTT方法检测两种浓度葡萄糖作用下48hhRPE... 目的:研究高浓度葡萄糖对体外培养人视网膜色素上皮(RPE)细胞细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法:用免疫荧光法检测5.6mmol/L和30.0mmol/L葡萄糖作用1,2,3d后hRPE细胞表面ICAM-1表达量,MTT方法检测两种浓度葡萄糖作用下48hhRPE表面黏附白细胞的数量。结果:30.0mmol/L葡萄糖作用1,2,3d后hRPE细胞表面荧光着色密度分别为5.6mmol/L葡萄糖作用下荧光着色的2.4,3.8,4.0倍。30.0mmol/L葡萄糖作用48h后hRPE细胞表面黏附的白细胞数量是5.6mmol/L葡萄糖组的2.34倍,有统计学显著性差异(P<0.05)。结论:高糖可以促进体外培养hRPE细胞的ICAM-1表达,提示RPE细胞在高糖作用下可能参与了糖尿病视网膜病变的早期病理反应。 展开更多
关键词 视网膜色素上皮细胞 高糖 细胞间黏 附分子-1
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人视网膜色素上皮细胞对吲哚青绿的吸收与代谢 被引量:13
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作者 王文莹 张皙 +1 位作者 王方 富名水 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 2004年第3期179-181,共3页
目的 研究人视网膜色素上皮 (RPE)细胞对吲哚青绿 (ICG)的摄取和代谢规律以及 ICG在细胞内的亚细胞定位。 方法 将 RPE细胞与 0 .2 5 mg/ ml ICG在 37℃暗箱中共同孵育 1、4、2 4 h后 ,应用透射电子显微镜观察细胞浆内 ICG颗粒和细... 目的 研究人视网膜色素上皮 (RPE)细胞对吲哚青绿 (ICG)的摄取和代谢规律以及 ICG在细胞内的亚细胞定位。 方法 将 RPE细胞与 0 .2 5 mg/ ml ICG在 37℃暗箱中共同孵育 1、4、2 4 h后 ,应用透射电子显微镜观察细胞浆内 ICG颗粒和细胞超微结构改变。荧光显微镜下观察 RPE细胞与 ICG共同孵育 1、2、4、8、12、2 4、4 8h后细胞浆内 ICG的自发荧光。应用紫外 /可见光分光光度计测定梯度稀释的ICG溶液 80 5 nm吸光度 [A,旧称光密度 (OD) ]值 ,绘制 ICG溶液浓度的标准曲线 ,计算 ICG浓度与 A值的相关公式。RPE细胞与 ICG共同孵育 1、2、4、8、12、2 4、4 8、72 h后检测上清液 80 5 nm A值 ,代入公式 ,计算细胞对 ICG的吸收情况。RPE细胞与 ICG共同孵育 2 4 h后 ,1周内每次取 1个样本进行透射电子显微镜和荧光显微镜检查 ,记录 RPE细胞对 ICG的代谢周期。 结果 ICG进入细胞后 ,在细胞浆内均匀分布。 0 .2 5 mg/ ml ICG作用 RPE细胞 2 4 h后 ,对细胞超微结构无显著影响。RPE对 ICG的吸收随孵育时间延长逐渐增加。共同孵育 2 4 h后 ,RPE细胞对 ICG的摄取达高峰 ,以后由于细胞对其缓慢代谢而逐渐下降。 1周后 RPE细胞内仍有微量 ICG残留。 结论  RPE细胞通过主动转运摄取 ICG。ICG在 展开更多
关键词 视网膜色素上皮细胞 吲哚青绿 药物吸收 药物代谢 药代动力学 细胞超微结构
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柚皮素对ARPE-19和HUVEC细胞的抗氧化作用(英文) 被引量:12
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作者 林宝琴 邱春亿 《国际眼科杂志》 CAS 2008年第10期1963-1967,共5页
目的:研究柚皮素对人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的抗氧化作用。方法:采用MTT的方法检测ARPE-19和HUVEC细胞的生存率及增殖率。结果:3,10mg/L柚皮素能显著增加ARPE-19细胞的增殖率达10.8%和11.4%。10mg/L柚... 目的:研究柚皮素对人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的抗氧化作用。方法:采用MTT的方法检测ARPE-19和HUVEC细胞的生存率及增殖率。结果:3,10mg/L柚皮素能显著增加ARPE-19细胞的增殖率达10.8%和11.4%。10mg/L柚皮素能提高ARPE-19细胞在缺氧,0.3mmol/LNaN3及200μmol/LH2O2条件下的生存率分别为55.2%,69.2%及50.3%。1mg/L柚皮素能提高ARPE-19细胞在50μmol/Lt-BHP和30mg/LNaIO3条件下的生存率达20.2%和30.4%。30mg/L柚皮素能够促进ARPE-19细胞在50μmol/Lt-BHP条件下的增殖率达32.2%,而1mg/L柚皮素可以提高30,100,300mg/LNaIO3处理的ARPE-19细胞的增殖率达30.3%,10.3%及18.5%。3,10及30mg/L柚皮素抑制HUVEC的增殖率分别为23.9%,70.4%及77.9%。1,3mg/L柚皮素能提高HUVEC细胞在缺氧条件下的生存率达10.7%和13.1%,以及提高在300mg/LNaIO3条件下的生存率达41.2%和37.7%。3mg/L柚皮素能提高HUVEC细胞在200,400μmol/LH2O2条件下的生存率达20.1%和21.5%。结论:柚皮素能够促进ARPE-19细胞的增殖率,抑制HU-VEC生长,同时对这两种细胞均有抗氧化作用。因此,柚皮素是治疗老年黄斑变性的很有前景的候选药物。 展开更多
关键词 柚皮素 视网膜色素上皮细胞 脐静脉内皮细胞 老年黄斑变性
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黄芪皂苷通过调控蛋白激酶R样内质网激酶途径抑制高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞自噬的研究 被引量:10
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作者 余静 赵海岚 +2 位作者 程凯尧 沈平宇 金黄林 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2019年第4期361-368,共8页
目的:探讨黄芪皂苷通过调控蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)途径影响高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19细胞)自噬水平。方法:体外培养人视网膜色素上皮细胞,实验分为正常对照组(5.5 mmol/L葡萄糖),高糖组(30 mmol/L葡萄糖),黄芪皂苷... 目的:探讨黄芪皂苷通过调控蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)途径影响高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19细胞)自噬水平。方法:体外培养人视网膜色素上皮细胞,实验分为正常对照组(5.5 mmol/L葡萄糖),高糖组(30 mmol/L葡萄糖),黄芪皂苷组(30 mmol/L葡萄糖+2.5、5、10μg/mL黄芪皂苷)。噻唑蓝比色(MTT)法检测ARPE-19细胞活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测自噬相关蛋白及PERK途径关键因子表达水平。添加PERK特异性抑制剂GSK2606414,Western blot检测对细胞自噬水平的影响。结果:与正常对照组比较,高糖组ARPE-19细胞活性降低,凋亡率升高,自噬相关蛋白LC3表达水平明显升高,另一自噬相关蛋白p62蛋白表达水平明显降低。PERK途径关键因子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、Perk和增强子结合蛋白的同源蛋白(CHOP)表达水平明显上调,差异具有统计学意义(P<0.05)。与高糖组比较,黄芪皂苷组ARPE-19细胞活性升高,凋亡率降低,LC3蛋白表达水平明显下调,p62蛋白表达水平明显上调,GRP78、Perk和CHOP蛋白水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。PERK特异性抑制剂GSK2606414能够进一步抑制黄芪皂苷组ARPE-19细胞LC3蛋白表达水平,上调p62蛋白表达水平,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:黄芪皂苷能够抑制高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞自噬水平,其作用机制可能与抑制蛋白激酶R样内质网激酶途径有关。 展开更多
关键词 黄芪皂苷 蛋白激酶R样内质网激酶途径 视网膜色素上皮细胞 细胞自噬 糖尿病视网膜病变
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机械牵拉对培养人视网膜色素上皮细胞内钙离子的影响 被引量:10
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作者 侯旭 惠延年 +3 位作者 韩泉洪 张晓光 王建州 郭长梅 《国际眼科杂志》 CAS 2005年第1期50-54,共5页
目的:观察培养人视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial cells,RPEs)在受机械牵拉力时细胞内Ca^2+的变化。方法:将胶原包被的磁珠悬液加入培养人RPE细胞后孵育,附着磁珠的细胞放置在恒定磁场中,使用钙荧光指示剂fluo-3/AM和激... 目的:观察培养人视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial cells,RPEs)在受机械牵拉力时细胞内Ca^2+的变化。方法:将胶原包被的磁珠悬液加入培养人RPE细胞后孵育,附着磁珠的细胞放置在恒定磁场中,使用钙荧光指示剂fluo-3/AM和激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察在机械牵拉作用的前后细胞内钙离子的变化情况。结果:RPE细胞荧光着色很强,遍布整个细胞,其中细胞核比细胞质更强。机械牵拉后荧光强度显著增强,加入氯化锰后迅速降低。EGTA预处理的细胞在受力后荧光强度增加不显著,加入氯化钙后明显增强。细胞松弛素D预处理的细胞在受力后荧光强度比正常组增高2倍以上。结论:机械牵拉能显著增加钙离子内流,并且增加细胞内的钙库释放。钙离子内流可能是RPE细胞损伤前的信号。 展开更多
关键词 机械牵拉 RPE 视网膜色素上皮细胞 胞内钙离子 钙离子内流 观察 氯化锰 培养 结论 LSCM
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银杏叶提取物在高糖环境下对人视网膜微血管内皮细胞的作用及可能机制 被引量:10
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作者 王俞方 彭辉灿 +1 位作者 燕建军 陈磊 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2013年第9期822-825,共4页
目的研究不同浓度的银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract,GBE)在高糖环境下对人视网膜微血管内皮细胞(human retinal capillary endothelial cells,HRCEC)的作用及对基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP2)和核转录因子κB(n... 目的研究不同浓度的银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract,GBE)在高糖环境下对人视网膜微血管内皮细胞(human retinal capillary endothelial cells,HRCEC)的作用及对基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP2)和核转录因子κB(nuclear transcription factor kappaB,NF-κB)p65表达的影响,为糖尿病视网膜病变的药物防治提供新的思路和理论依据。方法体外原代培养HRCEC,并通过免疫细胞化学方法鉴定;用GBE作用于原代培养的HRCEC,实验分为空白对照组、低糖对照组、高糖对照组、高糖+不同浓度GBE(12.5 mg·L-1、25.0 mg·L-1、50.0 mg·L-1、100.0 mg·L-1)组,分别使用MTT比色法观察其对细胞增殖的影响,使用免疫细胞化学及Western blotting检测药物作用前后HRCEC中MMP2及NF-κB p65的表达。结果 TT比色法结果显示,用不同浓度的GBE处理高糖(25.0 mmol·L-1)环境下HRCEC,作用24 h、48 h和72 h,高糖+不同浓度GBE对HRCEC增殖有促进作用,并存在时间和浓度的依赖性。高糖+不同浓度(12.5 mg·L-1、25.0 mg·L-1、50.0 mg·L-1、100.0 mg·L-1)GBE组作用24 h细胞增殖率分别为(16.4±0.7)%、(30.6±0.8)%、(41.3±1.5)%、(52.6±1.8)%,作用48 h细胞增殖率分别为(21.8±1.2)%、(36.2±1.3)%、(48.0±1.4)%、(62.7±1.6)%,作用72 h细胞增殖率分别为(29.9±0.5)%、(46.2±0.8)%、(61.2±0.8)%、(73.4±1.6)%。随着药物浓度的逐渐提高和作用时间的增加,细胞存活率逐渐提高,而细胞抑制率逐渐下降。用不同浓度的GBE处理HRCEC,作用72 h,行免疫细胞化学检测MMP2的表达,运用Western blotting检测NF-κB p65的表达,发现随着GBE药物浓度的增高,高糖环境下HRCEC中的MMP2、NF-κB p65表达量逐渐减少(P<0.05)。结论 GBE可以保护高糖环境下HRCEC并下调MMP2、NF-κB p65的表达,可用于糖尿病视网膜病变的防治。 展开更多
关键词 银杏叶提取物 视网膜血管内皮细胞 基质金属蛋白酶 核转录因子ΚB
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枸杞多糖对LPS诱导的人视网膜色素上皮细胞炎性反应的影响及机制 被引量:10
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作者 闫梅 马倩 +2 位作者 马雅玲 刘媛 马立萍 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2021年第3期411-416,共6页
目的:探索枸杞多糖(LBP)对细菌脂多糖(LPS)诱导的人视网膜色素上皮(ARPE-19)细胞的炎性反应的影响及其可能介导的信号通路。方法:通过LPS刺激体外培养的ARPE-19细胞构建炎性反应模型。将细胞随机分为5组,空白组使用完全培养基培养,LPS... 目的:探索枸杞多糖(LBP)对细菌脂多糖(LPS)诱导的人视网膜色素上皮(ARPE-19)细胞的炎性反应的影响及其可能介导的信号通路。方法:通过LPS刺激体外培养的ARPE-19细胞构建炎性反应模型。将细胞随机分为5组,空白组使用完全培养基培养,LPS组给予含10μg/mL LPS的完全培养基刺激24h,低、中、高浓度LBP组分别给予0.1、0.5、1mg/mL LBP完全培养基孵育24h后给予含10μg/mL LPS的完全培养基刺激24h。应用CCK-8观察细胞存活率、实时荧光定量PCR检测相关炎性因子的mRNA表达量及Western-blot检测NF-κB/MAPK信号通路相关磷酸化蛋白表达量的变化。结果:与正常细胞相比,LPS刺激后,ARPE-19的存活率下降。同时,随着外源性LBP浓度增加,ARPE-19的细胞存活率升高,且细胞内炎性因子IL-1β、IL-6和MCP-1的表达量降低,并伴随NF-κB/MAPK通路的相关磷酸化蛋白(p-p65、p-IκBα、p-JNK、p-ERK及p-p38)的表达下降。结论:枸杞多糖通过抑制胞内炎性因子及NF-κB/MAPK通路相关因子的磷酸化,从而阻止LPS诱导人视网膜色素上皮细胞产生的炎性反应。 展开更多
关键词 枸杞多糖 细菌脂多糖 视网膜色素上皮细胞 炎性反应 NF-κB MAPK
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