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银杏叶提取物调控PI3K/AKT信号通路对人脑血管外膜成纤维细胞增殖和凋亡的影响
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作者 毕晓晨 孔晓彬 +1 位作者 赵娜 顾晶晶 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1556-1559,共4页
目的研究银杏叶提取物(GBE)调控磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路对人脑血管外膜成纤维细胞(HBVAFs)增殖和凋亡的影响。方法将HBVAFs分为空白组(正常培养,未做处理)和低、中、高剂量实验组(25、50和100 mg·L^(-1)的... 目的研究银杏叶提取物(GBE)调控磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路对人脑血管外膜成纤维细胞(HBVAFs)增殖和凋亡的影响。方法将HBVAFs分为空白组(正常培养,未做处理)和低、中、高剂量实验组(25、50和100 mg·L^(-1)的GBE处理24 h)及联合组(100 mg·L^(-1)GBE和2 nmol·L^(-1)胰岛素样生长因子-1处理24 h)。用噻唑蓝法检测细胞的增殖情况,用流式细胞仪检测细胞的凋亡情况,用蛋白质印迹法检测细胞磷酸化PI3K(p-PI3K)、PI3K、磷酸化AKT(p-AKT)及AKT蛋白的表达水平。结果低、中、高剂量实验组和联合组、空白组的细胞存活率分别为(66.78±8.21)%、(53.51±7.40)%、(42.33±6.01)%、(75.69±5.87)%和(96.77±12.80)%,细胞凋亡率分别为(24.83±2.47)%、(30.07±3.06)%、(37.02±4.66)%、(16.71±2.11)%和(8.99±0.19)%,p-PI3K/PI3K比值分别为0.75±0.07、0.62±0.06、0.43±0.04、0.72±0.05和0.90±0.09,p-AKT/AKT比值分别为0.70±0.07、0.60±0.06、0.38±0.03、0.69±0.06和0.90±0.09。低、中、高剂量实验组的上述指标与空白组比较,联合组的上述指标与高剂量实验组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论GBE可降低HBVAFs增殖,促进凋亡,其机制与抑制PI3K/AKT信号通路相关。 展开更多
关键词 银杏叶提取物 磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路 脑血管外膜纤维细胞 增殖 凋亡
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尼莫地平调控IRS-1对人脑血管外膜成纤维细胞活力和凋亡的影响 被引量:3
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作者 袁岗 肖宗宇(指导) +2 位作者 李文辉 曹立新 惠超杰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1171-1176,共6页
目的:探讨尼莫地平对人脑血管外膜成纤维细胞活力、凋亡的影响及其对胰岛素受体底物-1(IRS-1)的调控机制。方法:体外培养人脑血管外膜成纤维细胞,分为NC组、IFN-α组和共同处理组,其中共同处理组分别采用不同浓度(50、100、200μg/ml)... 目的:探讨尼莫地平对人脑血管外膜成纤维细胞活力、凋亡的影响及其对胰岛素受体底物-1(IRS-1)的调控机制。方法:体外培养人脑血管外膜成纤维细胞,分为NC组、IFN-α组和共同处理组,其中共同处理组分别采用不同浓度(50、100、200μg/ml)的尼莫地平与IFN-α共同处理人脑血管外膜成纤维细胞,分别记作IFN-α+Nimo 50μg/ml组、IFN-α+Nimo 100μg/ml组、IFN-α+Nimo 200μg/ml组;MTT检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡率;qRT-PCR与Western blot分别检测IRS-1表达;分别将pcDNA、pcDNA-IRS-1转染至细胞,分别将si-con、si-IRS-1转染至细胞随后采用尼莫地平处理细胞,采用上述方法检测细胞活力及凋亡率。结果:NC组、IFN-α组、IFN-α+Nimo 50μg/ml组、IFN-α+Nimo 100μg/ml组、IFN-α+Nimo 200μg/ml组72 h时细胞活力分别为1.16±0.09、0.71±0.07、0.88±0.06、0.96±0.08、1.03±0.11;细胞凋亡率分别为(3.51±0.32)%、(21.84±2.23)%、(14.39±1.15)%、(9.18±1.03)%、(8.37±0.94)%;IRS-1蛋白表达水平分别为0.67±0.06、0.19±0.03、0.33±0.04、0.47±0.05、0.59±0.06,NC组、IFN-α组、IFN-α+Nimo 50μg/ml组、IFN-α+Nimo 100μg/ml组、IFN-α+Nimo 200μg/ml组上述指标比较差异有统计学意义(P<0.05)。IFN-α+pcDNA组与IFN-α+pcDNA-IRS-1组72 h时细胞活力分别为0.76±0.06、1.04±0.07;细胞凋亡率分别为(20.75±2.07)%、(11.35±1.43)%,IFN-α+pcDNA组与IFN-α+pcDNA-IRS-1组上述指标比较差异有统计学意义(P<0.05)。IFN-α+Nimo+si-con组与IFN-α+Nimo+si-IRS-1组72 h时细胞活力分别为1.03±0.09、0.79±0.06;细胞凋亡率分别为(10.75±1.08)%、(15.36±1.25)%,IFN-α+Nimo+si-con组与IFN-α+Nimo+si-IRS-1组上述指标比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:尼莫地平可能通过上调IRS-1表达从而影响人脑血管外膜成纤维细胞增殖及凋亡。 展开更多
关键词 尼莫地平 IRS-1 脑血管外膜纤维细胞 细胞活力 凋亡
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益母草碱抑制人脑血管外膜成纤维细胞增殖并促进细胞凋亡的机制研究 被引量:1
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作者 伍兰萼 章青青 +1 位作者 郭倩 熊卫标 《河北医药》 CAS 2022年第6期856-859,共4页
目的探讨益母草碱对人脑血管外膜成纤维细胞(HBVAFs)增殖和凋亡的影响,并研究其作用机制。方法采用不同浓度的益母草碱干预体外培养的HBVAFs,通过噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活力,并筛选后续实验加药浓度,采用10μmol/L的益母草碱处理HBV... 目的探讨益母草碱对人脑血管外膜成纤维细胞(HBVAFs)增殖和凋亡的影响,并研究其作用机制。方法采用不同浓度的益母草碱干预体外培养的HBVAFs,通过噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活力,并筛选后续实验加药浓度,采用10μmol/L的益母草碱处理HBVAFs,实验分为Control组(正常对照)、Leonurine组(10μmol/L益母草碱)和Leo+PMA组(10μmol/L益母草碱和1μmol/L NF-κB信号通路激活剂佛波酯PMA)。克隆形成、流式细胞术和Annexin V-FITC/PI双染色实验分别检测各组细胞增殖、周期和凋亡情况,蛋白免疫印迹(Western blot)分析细胞中核转录因子-κB p65(NF-κB p65)、IκB激酶-α(IKK-α)和IκB激酶-β(IKK-β)表达水平。结果随着益母草碱浓度的升高,HBVAFs增殖率随之降低,呈明显的浓度依赖性,益母草碱对HBVAFs的IC50为12.55μmol/L,因此后续实验选择10μmol/L为加药浓度。与Control组比较,Leonurine组克隆形成率明显降低(P<0.05),与Leonurine组比较,Leo+PMA组克隆形成率明显升高(P<0.05)。与Control组比较,Leonurine组G2/M期细胞比例明显增多(P<0.05),G1期和S期细胞比例差异无统计学意义(P>0.05);与Leonurine组比较,Leo+PMA组G2/M期细胞比例明显减少(P<0.05),G1期和S期细胞比例差异无统计学意义(P>0.05)。与Control组比较,Leonurine组细胞凋亡率明显升高(P<0.05),与Leonurine组比较,Leo+PMA组细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。与Control组比较,Leonurine组细胞中NF-κB p65、IKK-α和IKK-β蛋白表达明显下调(P<0.05),与Leonurine组比较,Leo+PMA组细胞中NF-κB p65、IKK-α和IKK-β蛋白表达明显上调(P<0.05)。结论益母草碱可能通过抑制NF-κB信号通路的激活实现对HBVAFs增殖抑制和凋亡诱导的作用。 展开更多
关键词 益母草碱 脑血管外膜纤维细胞 NF-κB信号通路 增殖 凋亡
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IFN-α调控miR-214-5p/MFGE8通路对人脑血管外膜成纤维细胞增殖、凋亡的影响 被引量:2
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作者 郭延兵 姚庆和 王新军 《医学研究杂志》 2020年第5期170-176,共7页
目的探讨干扰素α(IFN-α)调控miR-214-5p/乳脂肪球表皮生长因子8(MFGE8)通路对人脑血管外膜成纤维细胞(HBVAFs)增殖、凋亡的影响。方法将HBVAFs细胞分为NC组、IFN-α组、IFN-α+anti-miR-con组、IFN-α+anti-miR-214-5p组、IFN-α+pcDN... 目的探讨干扰素α(IFN-α)调控miR-214-5p/乳脂肪球表皮生长因子8(MFGE8)通路对人脑血管外膜成纤维细胞(HBVAFs)增殖、凋亡的影响。方法将HBVAFs细胞分为NC组、IFN-α组、IFN-α+anti-miR-con组、IFN-α+anti-miR-214-5p组、IFN-α+pcDNA组、IFN-α+pcDNA-MFGE8组、IFN-α+anti-miR-214-5p+si-con组和IFN-α+anti-miR-214-5p+si-MFGE8组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-214-5p和MFGE8 mRNA的表达;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印记(Western blot)法检测MFGE8、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。双荧光素酶报告基因实验和Western blot法验证miR-214-5p和MFGE8的靶向调控关系。结果与NC组比较,IFN-α组HBVAFs细胞miR-214-5p的表达显著升高,MFGE8和Bcl-2的表达显著降低,Cleaved caspase-3和Bax的表达显著升高,细胞活力显著降低,细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。与IFN-α+anti-miR-con组比较,IFN-α+anti-miR-214-5p组HBVAFs细胞miR-214-5p、Cleaved caspase-3和Bax的表达显著降低,Bcl-2表达显著升高,细胞活力显著降低,细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。miR-214-5p靶向负性调控MFGE8表达。与IFN-α+pcDNA组比较,IFN-α+pcDNA-MFGE8组HBVAFs细胞Cleaved caspase-3和Bax的表达显著降低,MFGE8和Bcl-2表达显著升高,细胞活力显著降低,细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。与IFN-α+anti-miR-214-5p+si-con组比较,IFN-α+anti-miR-214-5p+si-MFGE8组HBVAFs细胞Cleaved caspase-3和Bax的表达显著升高,MFGE8和Bcl-2表达显著降低,细胞活力显著升高,细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。结论IFN-α通过调控miR-214-5p/MFGE8通路抑制人脑血管外膜成纤维细胞增殖并促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 miR-214-5p 乳脂肪球表皮生长因子8 干扰素Α 脑血管外膜纤维细胞 增殖 凋亡
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蒿本内酯通过lncRNA NKILA对干扰素α诱导的人脑血管外膜成纤维细胞增殖及凋亡的影响
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作者 卢金华 程熙 戴清月 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2022年第11期2081-2087,共7页
该文旨在探讨蒿本内酯对干扰素α(IFN-α)诱导的人脑血管外膜成纤维细胞(HBVAF)增殖及凋亡的影响及其可能作用机制。HBVAF细胞经IFN-α诱导后建立细胞损伤模型,将不同剂量的蒿本内酯作用于IFN-α诱导的HBVAF细胞后,采用MTT法、平板克隆... 该文旨在探讨蒿本内酯对干扰素α(IFN-α)诱导的人脑血管外膜成纤维细胞(HBVAF)增殖及凋亡的影响及其可能作用机制。HBVAF细胞经IFN-α诱导后建立细胞损伤模型,将不同剂量的蒿本内酯作用于IFN-α诱导的HBVAF细胞后,采用MTT法、平板克隆形成实验、流式细胞术分别检测细胞增殖、克隆形成及凋亡情况,qRT-PCR法检测lncRNA NKILA的表达量;为探究蒿本内酯与lncRNA NKILA对IFN-α诱导的HBVAF细胞增殖及凋亡的影响,将pcDNA、pcDNA-lncRNA NKILA分别转染至HBVAF细胞后加入IFN-α处理24 h,si-NC、si-lncRNA NKILA分别转染至HBVAF细胞后加入蒿本内酯与IFN-α共处理24 h,Western blot测定凋亡相关蛋白表达量。结果显示,蒿本内酯处理后细胞存活率和lncRNA NKILA的表达量升高(P<0.05),细胞克隆形成数增多(P<0.05),细胞凋亡率和Cleaved-caspase3、Cleaved-caspase9蛋白水平降低(P<0.05),且呈剂量依赖性;转染pcDNA-lncRNA NKILA后,细胞存活率升高(P<0.05),细胞克隆形成数增多(P<0.05),细胞凋亡率和Cleaved-caspase3、Cleaved-caspase9蛋白水平降低(P<0.05);转染si-lncRNANKILA可减弱蒿本内酯对IFN-α诱导的HBVAF细胞增殖、克隆形成及凋亡的作用。总之,蒿本内酯可通过上调lncRNA NKILA表达而促进IFN-α诱导的脑血管外膜成纤维细胞增殖、克隆形成及抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 脑血管外膜纤维细胞 干扰素Α 蒿本内酯 lncRNA NKILA 细胞增殖 凋亡
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