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题名长期培养人脐带间充质干细胞分化能力改变的研究
被引量:5
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作者
柳菁
宇丽
许超
罗二梅
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机构
暨南大学医学院生物化学教研室广州
暨南大学医学院中心实验室广州
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出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期8-16,共9页
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基金
广东省自然科学基金资助项目(9151008901000050)
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文摘
目的:分析体外传代培养至23代,人脐带间充质干细胞(human umbilical cord-MSCs,hUC-MSCs)多向分化能力的改变,以探索hUC-MSCs体外诱导分化的最佳时间窗。方法:采用胶原酶消化法提取hUC-MSCs,并用胰酶消化传代;收集不同代细胞,用流式细胞术检测细胞表面抗原及细胞周期;MTT法检测不同代细胞的增殖活性;取不同代细胞进行成骨、成软骨及成脂肪诱导鉴定;并利用实时定量PCR分别检测OCT-4、SOX-2、Nanog的mRNA表达水平。结果:用胶原酶消化法可获得形态均一,可稳定传代23代以上的hUC-MSCs;体外传代培养至23代,细胞表面标志物表达率无明显改变;细胞生长曲线形态相似;细胞周期亦无明显差异,(73.04±1.15)%的细胞处于G0/G1期;细胞均可被诱导成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞;不同代细胞OCT-4、SOX-2、Nanog的mRNA表达无显著差异。结论:体外培养至23代,随着传代次数的增加,hUC-MSCs的多向分化能力并未受影响。
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关键词
人脐带间充质干细胞长期培养
多向分化基因
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Keywords
Human umbilical cord-MSCs Long-term culture Multilineage differentiation Gene
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分类号
Q254
[生物学—细胞生物学]
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