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沃顿胶对小鼠脑损伤后炎症和情绪的影响 被引量:2
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作者 程田 刘雯雯 +2 位作者 马珊珊 孙同文 关方霞 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期779-784,共6页
目的 探究移植人脐带沃顿胶(Wharton's jelly, WJ)对脑外伤(traumatic brain injury,TBI)小鼠炎症反应和抑郁情绪的影响。方法 分离与培养脐带沃顿胶,流式细胞仪鉴定第三代脐带间充质干细胞的细胞表型。采用改良式自由落体脑外伤... 目的 探究移植人脐带沃顿胶(Wharton's jelly, WJ)对脑外伤(traumatic brain injury,TBI)小鼠炎症反应和抑郁情绪的影响。方法 分离与培养脐带沃顿胶,流式细胞仪鉴定第三代脐带间充质干细胞的细胞表型。采用改良式自由落体脑外伤模型,将实验小鼠随机(随机数字法) 分为两组:脑损伤+ 生理盐水处理组(Veh 组),脑损伤+WJ 移植组(WJ 组)。术后3 d,干湿称重法检测小鼠损伤侧脑含水量,Elisa 试剂盒检测炎症因子IL-1β 和TNF-α 的表达,HEt 染色检测损伤部位活性氧的积累,GFAP 免疫荧光染色检测星形胶质细胞的表达,Iba1 和CD68 免疫荧 光染色检测小胶质细胞的表达;术后28 d,神经功能缺损评分评价小鼠运动功能,糖水偏好实验、悬尾实验和强迫游泳实验评价小鼠的认知和情绪状况。所得数据使用SPSS 21.0 软件,以均数±标准差(x±s)表示,不同时间点的比较采用重复测量设计的两因素ANOVA 分析。结果 与Veh 组相比,WJ 移植组小鼠神经功能缺损评分降低[1 d:(14.8±1.169 和15.2±1.472),3 d:(11.0±1.414和13.5±1.225),7 d:(9.5±1.517 和12.0±1.549),14 d:(7.7±0.816和10.5±1.643),21 d:(6.5±0.547和9.0±1.265),28 d :(5.3±0.816 和7.8±1.169),P〈0.05],糖水偏嗜度升高[(64.56±2.279)%和(54.49±1.505)%,P=0.004],悬尾实验不动时间减少[(115.7±4.660)s 和(144.7±5.493)s,P〈0.01],强迫游泳实验悬浮时间降低[(215.8±5.003)s 和(260.3±4.558)s,P=0.002],脑含水量降低[(75.58±1.559)% 和(84.48±1.802)%,P=0.004],炎症因子IL-1β 和TNF-α 水平均明显降低[(44.429±3.422)ng/mL 和(658.712±43.175)ng/mL,(70.717±4.124)ng/mL 和(1043.118±56.813)ng/mL,P=0.000 6 和0.000 3)],损伤区域ROS 含量减少[(2 151±406.287) 和(3 687±380.466),P=0.020],活化的星形胶质细胞荧光强度明 展开更多
关键词 脐带沃顿 脑外伤 抑郁 炎症反应
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人脐带沃顿胶对脑外伤小鼠的神经修复作用
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作者 程田 刘雯雯 +1 位作者 刘宏建 关方霞 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期737-740,共4页
目的观察人脐带沃顿胶(WJ)对脑外伤小鼠的神经修复作用。 方法采用小鼠CCI脑外伤模型建立动物模型,将实验小鼠随机分为Veh和WJ移植组。术后3 d,干湿称重法检测小鼠损伤侧脑含水量,酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测炎性因子肿... 目的观察人脐带沃顿胶(WJ)对脑外伤小鼠的神经修复作用。 方法采用小鼠CCI脑外伤模型建立动物模型,将实验小鼠随机分为Veh和WJ移植组。术后3 d,干湿称重法检测小鼠损伤侧脑含水量,酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-10的表达,碘化丙锭(PI)染色检测损伤附近区域坏死细胞数量;术后28 d,神经功能缺损评分评价小鼠运动功能,新物体识别实验检测小鼠认知功能,糖水偏好实验评价小鼠抑郁状况,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测神经元特异性相关蛋白和神经营养因子表达。 结果(1)WJ移植组小鼠脑含水量[(84.61±1.61)%]与Veh组比较[(11.06±2.24)%]明显降低,差异有统计学意义(t=4.935,P=0.001)。(2)小鼠神经功能缺损评分结果显示WJ移植组术后第7、14、21、28天神经功能缺损评分[(11.80±1.30)、(10.60±1.14)、(9.40±1.14)和(8.20±1.30)分]与Veh组比较有统计学意义[(9.80±1.09)、(8.40±1.14)、(7.20±1.09)和(5.80±0.84)分,P=0.000]。(3)小鼠新物体识别实验结果显示WJ移植组小鼠新物体辨别率为(65.57±1.543)%,高于Veh组[(50.03±1.704)%],差异有统计学意义(t=6.760,P=0.000)。(4)糖水偏嗜实验表明WJ移植组和Veh组比较差异有统计学意义[(63.05±2.10)%和(48.62±1.80)%,t=4.935,P=0.001]。(4)WJ移植组抑炎因子IL-10表达量[(659.39±14.40) pg/ml]明显高于Veh组[(554.39±15.54) pg/ml,t=4.957,P=0.008],而促炎因子TNF-α(755.90±16.89) ng/ml明显低于Veh组[(1 081.22±14.81) ng/ml,t=14.480,P=0.000]。(5)WJ移植组神经元特异性相关蛋白微管相关蛋白-2(MAP-2)、双皮质蛋白(DCX)和神经营养因子脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)的表达(0.94±0.18、1.3 展开更多
关键词 脐带沃顿 脑外伤 神经修复
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人脐带沃顿胶干细胞对急性大鼠脊髓损伤的作用及脊髓组织中TNF-α和BDNF表达的影响 被引量:4
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作者 渠瑞娜 马珊珊 +7 位作者 田毅 姚宁 崔渊博 张文进 韩康 宋及时 杨波 关方霞 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2014年第6期765-769,共5页
目的:探讨人脐带沃顿胶干细胞(WJCs)移植对急性脊髓损伤大鼠的治疗作用及其可能机制。方法:81只大鼠分为假手术组、模型组和WJCs移植组,每组27只。每组取6只,采用BBB评分法评估脊髓损伤后1、3、7、14、21和28 d各组大鼠的运动功能,采用... 目的:探讨人脐带沃顿胶干细胞(WJCs)移植对急性脊髓损伤大鼠的治疗作用及其可能机制。方法:81只大鼠分为假手术组、模型组和WJCs移植组,每组27只。每组取6只,采用BBB评分法评估脊髓损伤后1、3、7、14、21和28 d各组大鼠的运动功能,采用透射电镜检测损伤局部超微结构并检测损伤后28 d脑源性神经营养因子(BDNF)的表达,其余大鼠采用实时荧光定量PCR和Western blot检测损伤后0、3、6、12、24、72、168 h损伤脊髓组织中肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达。结果:脊髓损伤后模型组与WJCs移植组大鼠的运动功能均有不同程度的恢复,其中WJCs移植组较模型组恢复更明显。与模型组相比,WJCs移植组损伤区脊髓组织结构相对完整。模型组和WJCs移植组损伤脊髓组织中TNF-αmRNA和蛋白以及BDNF蛋白的表达较假手术组增加(P<0.05);与模型组相比,WJCs移植组中TNF-α的表达降低,而BDNF的表达增加(P<0.05)。结论:WJCs移植可改变脊髓损伤区的微环境,抑制损伤脊髓组织中TNF-α的表达,同时增加BDNF的表达,促进大鼠神经功能恢复,减少脊髓继发性损伤。 展开更多
关键词 脐带沃顿干细胞 脊髓损伤 肿瘤坏死因子-α 脑源性神经营养因子 大鼠
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人脐带沃顿胶间充质干细胞移植对创伤性脑损伤大鼠脑损伤区微循环的影响 被引量:3
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作者 李静 杨波 +6 位作者 刘献志 翟广 田毅 张源 渠瑞那 Eileen Shen 张文进 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期880-884,共5页
目的探讨人脐带沃顿胶间充质干细胞(WJCs)对脑创伤区周围微循环的影响。方法72只健康SD大鼠采用随机数字表法分为4组:(1)假手术组;(2)移植对照组;(3)WJCs移植组;(4)正常组。每组18只。移植对照组和WJCs移植组采用Feeney... 目的探讨人脐带沃顿胶间充质干细胞(WJCs)对脑创伤区周围微循环的影响。方法72只健康SD大鼠采用随机数字表法分为4组:(1)假手术组;(2)移植对照组;(3)WJCs移植组;(4)正常组。每组18只。移植对照组和WJCs移植组采用Feeney自由落体硬脑膜外撞击法建立中度创伤性颅脑损伤模型,再分别注射0.3mL的生理盐水和WJCs混悬液;假手术组颅骨钻孔后不损伤脑组织不移植细胞;正常组不做任何处理。分别于移植后3d及7d进行大鼠行为学评分;取移植后1d、3d、7d和2周的脑组织切片行免疫组织化学检测,检测大鼠损伤灶周围血管内皮生长因子(VEGF)及CD34的表达;实时定量PCR(RT.PCR)检测的VEGFmRNA表达;测定微血管面密度(MVD);移植后2周和4周行免疫组化观察胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)蛋白表达水平。结果移植后7d,WJCs移植组大鼠mNSS评分明显高于移植对照组,差异有统计学意义(P〈0.05)。WJCs移植组移植后3d、7d和2周损伤灶周围皮层脑组织VEGF和CD34的表达均高于移植对照组,差异有统计学意义(P〈0.05)。移植后2周和4周WJCs移植组损伤区免疫组织化学染色均发现GFAP和NSE阳性细胞,其他3组均未发现.RT—PCR检测到WJCs组VEGFmRNA的表达量高于移植对照组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论WJCs移植后可增加损伤区脑组织VEGF及CD34阳性表达,参与调控损伤区微血管的变化,改善损伤区的微循环.促进大鼠神经功能的恢复。 展开更多
关键词 脐带沃顿间充质干细胞 细胞移植 创伤性脑损伤 微血管面密度
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