中药双龙丸对动脉粥样硬化细胞模型增殖动力学和病理形态学的影响 被引量：13

1

作者 王会玲 胡婉英 《中药药理与临床》 CAS CSCD 1999年第4期34-38,共5页

培养的家兔动脉血管平滑肌细胞（ASMC）用高脂血清（HLS）建立AS细胞模型，应用结晶紫色法、^3H-TdR掺入、透射电镜等方法观察了双龙丸药物血清对增殖动力学和病理形态学的影响，结果用10％的HLS能明显刺激ASMC增殖和DNA合成，使生长曲... 培养的家兔动脉血管平滑肌细胞（ASMC）用高脂血清（HLS）建立AS细胞模型，应用结晶紫色法、^3H-TdR掺入、透射电镜等方法观察了双龙丸药物血清对增殖动力学和病理形态学的影响，结果用10％的HLS能明显刺激ASMC增殖和DNA合成，使生长曲线升高，^3H-TdR掺入增加，引起细胞超微结构改变，促进肌原性泡沫细胞形成。双龙丸可显著抑制HLS作用下的ASMC增殖和DNA合成，同时使病理性细胞内超微结构改变明显减轻，提示双龙丸可通过干预ASMC增殖来阻止AS发生，抑制粥样斑块发展。 展开更多

关键词 动脉粥样硬化 动脉血管平滑肌细胞 双龙丸 细胞增殖 细胞动力学 病理形态学 AS

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动脉血管平滑肌细胞、血管内皮细胞原代培养方法的改良及应用 被引量：6

2

作者 王敏 崔连群 +3 位作者 王晓军 烟玉琴 韩秋霞 秦风菊 《山东医药》 CAS 北大核心 2004年第14期17-18,共2页

关键词 动脉血管平滑肌细胞 血管内皮细胞 体外培养 动脉粥样硬化 高血压

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白藜芦醇抑制血管平滑肌细胞成骨样转化的实验研究 被引量：6

3

作者 张明慧 王本泉 +7 位作者 蔡晓青 刘彪 王斯璐 吴存造 白永恒 陈必成 刘毅 邵蓉蓉 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1444-1449,共6页

目的研究白藜芦醇(resveratrol,Res)对血管钙化的抑制作用,观察不同浓度的Res对高钙高磷诱导的人脐动脉血管平滑肌细胞(hVSMC)成骨样转化的影响。方法体外培养hVSMC细胞,通过形态学和α-SMA标记进行鉴定。用高钙高磷(钙2.5 mmol/L、磷3.... 目的研究白藜芦醇(resveratrol,Res)对血管钙化的抑制作用,观察不同浓度的Res对高钙高磷诱导的人脐动脉血管平滑肌细胞(hVSMC)成骨样转化的影响。方法体外培养hVSMC细胞,通过形态学和α-SMA标记进行鉴定。用高钙高磷(钙2.5 mmol/L、磷3.0 mmol/L)培养基诱导hVSMC成骨样转化,通过茜红素染色法鉴定成骨样转化。以普通培养hVSMC作为对照组,加高钙高磷为阳性对照组,实验组为阳性对照加不同浓度的Res(5、10、20μmol/L)干预,培养12 d后,检测各组细胞含钙量,实时荧光定量PCR检测hVSMC成骨样转化相关基因骨特异性碱性磷酸酶(BAP)、骨形态蛋白(BMP-2)、骨桥蛋白(OPN)的表达水平;Western blotting和免疫荧光标记方法检测BAP、BMP-2、OPN蛋白的表达。结果与对照组比较,阳性对照组细胞内含钙量明显升高约5倍,α-SMA蛋白表达下降,而成骨样细胞特异性标记BAP、BMP-2、OPN mRNA和蛋白质表达均显著升高(P<0.01)。不同浓度Res干预后后,细胞内含钙量下降,BAP、BMP-2、OPN mRNA水平降低(P<0.05、0.01);BMP-2及OPN的蛋白表达显著降低(P<0.01),并与Res浓度呈负相关。结论 hVSMC在高钙高磷条件下发生成骨样转化,而Res抑制此过程的进展并与其浓度呈正相关。 展开更多

关键词 白藜芦醇 人脐动脉血管平滑肌细胞 成骨样转化 骨桥蛋白 骨形态蛋白

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小鼠血管平滑肌细胞原代培养方法的改良 被引量：4

4

作者 吴建芳 《青海医学院学报》 CAS 2008年第1期52-53,共2页

目的建立一种简单方便但高效的血管平滑肌细胞原代培养方法。方法改良酶消化法。结果用该法培养细胞传代生长快,细胞纯度达98%以上,足以满足各种细胞试验需求。结论与传统方法相比该法简单经济,试验成功率高,节省材料和时间,而且可获得... 目的建立一种简单方便但高效的血管平滑肌细胞原代培养方法。方法改良酶消化法。结果用该法培养细胞传代生长快,细胞纯度达98%以上,足以满足各种细胞试验需求。结论与传统方法相比该法简单经济,试验成功率高,节省材料和时间,而且可获得更多纯度较高的细胞。 展开更多

关键词 小鼠 动脉血管平滑肌细胞 原代培养

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高血压家族史与高盐对人脐动脉平滑肌细胞转化生长因子β1/Smads及钙离子调控相关基因表达的析因分析 被引量：4

5

作者 范静 商黔惠 +2 位作者 邹焰 刘婵 胡琼 《中华高血压杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1043-1050,共8页

目的研究高血压家族史与高盐对人脐动脉平滑肌细胞(hUASMC)转化生长因子β1(TGF-β1)/Smads及钙离子调控相关基因表达的效应分析。方法取高血压阴性家族史(FH-)和阳性家族史(FH+)胎儿脐带各7例,按照析因设计采用组织块贴壁法培养hUASMC... 目的研究高血压家族史与高盐对人脐动脉平滑肌细胞(hUASMC)转化生长因子β1(TGF-β1)/Smads及钙离子调控相关基因表达的效应分析。方法取高血压阴性家族史(FH-)和阳性家族史(FH+)胎儿脐带各7例,按照析因设计采用组织块贴壁法培养hUASMC:培养基Na+终浓度为139mmol/L(FH-正常盐组和FH+正常盐组)和164mmol/L(FH-高盐组和FH+高盐组),用平滑肌细胞特异性α肌动蛋白进行免疫细胞化学方法鉴定;实时逆转录聚合酶链反应检测4组hUASMC TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7、细胞膜钠泵-α1亚型(α1-subunit)、α2-subunit、α3-subunit、细胞膜钙泵亚型1(PMCA1)、PMCA4、瞬时受体电位通道C亚族(TRPC)TRPC1、TRPC3、TRPC6mRNA表达;采用析因分析高血压家族史与高盐在TGF-β1/Smads及钙离子调控相关基因表达中的效应。结果高血压家族史和高盐对TGF-β1/Smads、α3-subunit、PMCA4、TRPC1、TRPC6mRNA表达无交互效应(均P>0.05),主效应分析显示高血压家族史增加TGF-β1、α3-subunit、TRPC6的表达(均P<0.05),减少Smad7的表达(均P<0.05),而高盐增加Smad3、TRPC1的表达(均P<0.05),减少PMCA4、Smad7的表达(均P<0.05)。高血压家族史和高盐对α1-subunit、α2-subunit、PMCA1、TRPC3mRNA表达有交互效应(均P<0.05)。高血压家族史为阳性时,高盐组较正常盐组TRPC3表达增加(P<0.05),α1-subunit、α2-subunit、PMCA1表达减少(P<0.05);高血压家族史为阴性时,高盐组较正常盐组TRPC3表达增加(P<0.05),对α1-subunit、α2-subunit、PMCA1表达无影响(均P>0.05);此外,在高盐水平下,高血压家族史阳性组较阴性组α1-subunit、TRPC3表达增加(P<0.05),PMCA1表达减少(P<0.05),在正常盐水平下,高血压家族史阳性组较阴性组α1-subunit、α2-subunit、PMCA1表达增加(P<0.05),对TRPC3表达无影响(均P>0.05)。结论家族史影响α3-subunit、TRPC6基因表达,而高盐影响PMCA4、TRPC1基因表达,高盐和家族史共同参与调节TGF-β1/Smads、α1-subunit、α2-subun 展开更多

关键词 人脐动脉血管平滑肌细胞 高血压家族史 高盐 转化生长因子β1/Smads信号通路 离子泵 瞬时受体电位通道C亚族

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葛根素对大鼠肾动脉血管平滑肌细胞大电导钙激活钾通道电流的影响 被引量：2

6

作者 秦小江 侯晓敏 梁泰刚 《中国药物与临床》 CAS 2014年第9期1203-1204,共2页

葛根素是从豆科植物野葛或甘葛根的干燥根中提取的单体,其化学名为8-β-D-葡萄吡喃糖-4,7-二羟基异黄酮。据研究报道,葛根素具有多种药理学活性,包括降低血压[1]、舒张大鼠冠状动脉[2]、改善急性心肌缺血[3]、清除氧自由基[4]等,但关于... 葛根素是从豆科植物野葛或甘葛根的干燥根中提取的单体,其化学名为8-β-D-葡萄吡喃糖-4,7-二羟基异黄酮。据研究报道,葛根素具有多种药理学活性,包括降低血压[1]、舒张大鼠冠状动脉[2]、改善急性心肌缺血[3]、清除氧自由基[4]等,但关于葛根素对大鼠肾动脉的作用却未见报道。本实验主要研究葛根素对大鼠离体肾动脉的肌源性作用,葛根素对大鼠肾动脉血管平滑肌细胞大电导钙激活钾通道（BKCa）电流的作用及其与过氧化氢（H2O2）的关系。 展开更多

关键词 大电导钙激活钾通道 动脉血管平滑肌细胞 钾通道电流 葛根素 肾动脉 大鼠 豆科植物野葛 二羟基异黄酮

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祛痰泻浊方对机械损伤兔的血管平滑肌细胞增殖和凋亡机理研究 被引量：2

7

作者 张丝微 李艳石 杨关林 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2007年第3期364-365,共2页

观察祛痰泻浊方对实验性动脉粥样硬化(AS)家兔,机械损伤血管内皮后血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其机理。

关键词 祛痰泻浊方 动脉粥样硬化 动脉血管平滑肌细胞 血栓形成

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血管紧张素Ⅱ对有高血压家族史人脐动脉血管平滑肌细胞离子泵的影响 被引量：2

8

作者 方宇 商黔惠 +1 位作者 姜黔峰 刘金伟 《中华高血压杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期153-159,共7页

背景细胞膜离子泵活性和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)异常在高血压发病过程中起重要作用。有高血压家族史(FH+)的青少年红细胞膜钠泵和钙泵活性比无高血压家族史(FH-)的对照组低,而在有高血压家族史的人动脉平滑肌细胞,离子泵活性变化以及AngⅡ... 背景细胞膜离子泵活性和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)异常在高血压发病过程中起重要作用。有高血压家族史(FH+)的青少年红细胞膜钠泵和钙泵活性比无高血压家族史(FH-)的对照组低,而在有高血压家族史的人动脉平滑肌细胞,离子泵活性变化以及AngⅡ干预对其的影响尚不清楚。目的探讨有无高血压家族史人脐动脉血管平滑肌细胞(HUASMCs)钠泵、钙泵活性及其mRNA表达的异同以及AngⅡ干预对上述指标的影响。方法选取有无高血压家族史新生儿脐带各7根,用组织块贴壁法培养其脐动脉平滑肌细胞,设置AngⅡ空白对照组和高、低两个剂量组,采用生化酶学方法和逆转录聚合酶链反应技术分别测量其细胞膜钠泵(Na+,K+-ATP酶)、钙泵(Ca2+-ATP酶)活性和mRNA相对表达量。结果未用AngⅡ时,FH+组HUASMCs质膜钠泵、钙泵活性均高于FH-组(均P<0.05),但其质膜钠泵α1亚单位mRNA表达和质膜Ca2+-ATP酶(PMCA)亚型1(PMCA1)mRNA表达无差异。AngⅡ干预后,在FH-组,AngⅡ(1×10-7mol/L)能提高两种离子泵活性(均P<0.01)和上调钠泵α1亚单位mRNA表达水平(P<0.01),AngⅡ(1×10-6mol/L)能抑制两种离子泵活性和下调钠泵mRNA表达水平(均P<0.01);在FH+组,AngⅡ(1×10-7mol/L)能抑制两种离子泵活性(均P<0.01)和下调其mRNA表达(P<0.05),AngⅡ(1×10-6mol/L)对两种离子泵活性的抑制更为明显(均P<0.01),但对Na+,K+-ATP酶α1亚单位和PMCA1的mRNA的相对表达量无影响。结论FH+的HUASMCs质膜钠泵和钙泵活性增高;AngⅡ抑制FH+的HUASMCs离子泵活性。 展开更多

关键词 腺苷三磷酸酶 人脐动脉血管平滑肌细胞 血管紧张素Ⅱ 高血压 家族史

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miR-24-3p靶向HIF-1α体外调节AngiotensinⅡ诱导的小鼠血管平滑肌细胞增殖、凋亡、迁移 被引量：2

9

作者 张永安 徐建平 +4 位作者 陈旭 龚绍慧 余斌 熊成英 詹剑 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期31-35,共5页

目的:探讨miR-24-3p靶向HIF-1α对血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ)体外诱导的小鼠血管平滑肌细胞增殖、凋亡及迁移的影响。方法:分离C57BL/6小鼠原代动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)体外培养,分为对照组和诱导组,诱导组用10-8 mol/L Angiotensi... 目的:探讨miR-24-3p靶向HIF-1α对血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ)体外诱导的小鼠血管平滑肌细胞增殖、凋亡及迁移的影响。方法:分离C57BL/6小鼠原代动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)体外培养,分为对照组和诱导组,诱导组用10-8 mol/L AngiotensinⅡ诱导VSMCs,采用qRT-PCR法检测miR-24-3p和HIF-1α表达,运用生物信息学预测和荧光素酶实验验证miR-24-3p和HIF-1α的靶向关系;体外原代培养VSMCs分为对照组,诱导组,诱导组+mimic,诱导组+pc-HIF-1α,采用Western blot法检测各组的HIF-1α蛋白表达水平,Colony forming法检测细胞增殖,Hoechest法检测细胞凋亡,划痕实验和Transwell小室迁移实验检测细胞迁移侵袭。结果:诱导组miR-24-3p mRNA的表达极显著低于对照组,HIF-1α的表达极显著高于对照组(P<0.01);HIF-1α是miR-24-3p的预测靶点;与对照组相比,诱导组和诱导组+pc-HIF-1α组HIF-1α的表达极显著增加,诱导组+mimic组HIF-1α的表达极显著下降(P<0.01);与对照组相比,诱导组和诱导组+pc-HIF-1α组细胞的集落率和迁移率显著上调、凋亡率显著下调,诱导组+mimic组细胞的集落率和迁移率显著下调、凋亡率显著上调。结论:miR-24-3p通过抑制HIF-1α的表达,抑制AngiotensinⅡ诱导的小鼠血管平滑肌细胞增殖和迁移,促进其凋亡。 展开更多

关键词 HIF-1Α 动脉血管平滑肌细胞 细胞增殖 细胞凋亡 细胞迁移

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Ⅰ、ⅣfimA型牙龈卟啉单胞菌对内皮细胞与平滑肌细胞共培养体系产生内皮素-1及一氧化氮的影响 被引量：1

10

作者 李文军 贾惠杰 葛颂 《口腔医学》 CAS 2015年第7期525-531,共7页

目的研究不同fim A基因型牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)刺激人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)及人脐动脉血管平滑肌细胞(human umbilical artery smooth muscle cells,HU... 目的研究不同fim A基因型牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)刺激人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)及人脐动脉血管平滑肌细胞(human umbilical artery smooth muscle cells,HUASMCs)共培养体系产生内皮素-1(endothelin-1,ET-1)和一氧化氮(NO)的水平。方法用Ⅰfim A型P.gingivalis(ATCC33277)和Ⅳfim A型P.gingivalis(W83)分别刺激HUVECs-HUASMCs共培养体系,于2、8、24、48 h时收集细胞培养上清液,酶联免疫反应检测ET-1的含量,硝酸还原酶法测定NO的含量。各组均设阴性对照组(纯培养基)及阳性对照组(1μg/m L E.coli-LPS)。结果 HUVECs-HUASMCs共培养体系在Ⅰ、Ⅳfim A型P.gingivalis刺激作用下产生ET-1和NO的量以及ET-1/NO水平,与阴性及阳性对照组比较存在差异。Ⅰfim A型P.gingivalis刺激细胞共培养模型分泌ET-1和NO情况的总趋势与阴性对照组相似、而Ⅳfim A型P.gingivalis的刺激作用总趋势则与阳性对照组相似,Ⅳfim A型P.gingivalis较Ⅰfim A型P.gingivalis刺激共培养细胞可分泌更多的ET-1、而NO量减少,Ⅳfim A型P.gingivalis感染48 h的细胞共培养模型表现出明显的ET-1/NO的失衡。结论不同fim A型P.gingivalis刺激共培养模型后产生ET-1及NO的情况及ET-1/NO的水平有明显差异,可能与其本身毒力相关,Ⅳfim A型P.gingivalis比Ⅰfim A型P.gingivalis更易引起内皮功能紊乱。 展开更多

关键词 牙龈卟啉单胞菌 人脐静脉血管内皮细胞 人脐动脉血管平滑肌细胞 内皮素-1 一氧化氮

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神经肽Y及其亚型受体在动脉粥样硬化中的作用

11

作者 周永巧(综述) 杨剑 曾春雨(审校) 《中华高血压杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期636-638,共3页

动脉粥样硬化等心血管疾病的治疗仍然是临床难点之一。近年研究发现，神经肽Y（Neuropeptide Y，NPY）作为支配外周血管的交感神经递质，在促动脉粥样硬化发生中也发挥着重要的作用，它不仅促进动脉血管平滑肌细胞（vascular smooth mus... 动脉粥样硬化等心血管疾病的治疗仍然是临床难点之一。近年研究发现，神经肽Y（Neuropeptide Y，NPY）作为支配外周血管的交感神经递质，在促动脉粥样硬化发生中也发挥着重要的作用，它不仅促进动脉血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells，VSMC）异常增殖，还介导了巨噬细胞及血小板在粥样硬化病变过程的病理变化。本综述主要探讨NPY在动脉粥样硬化病变发生发展过程中的作用。 展开更多

关键词 动脉粥样硬化病变 神经肽Y 亚型受体 动脉血管平滑肌细胞 交感神经递质 心血管疾病 CELLS 外周血管

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核不均一核糖蛋白A1在血管平滑肌钙化中的作用机制

12

作者 李健 杨淑均 +1 位作者 陈宇 张伟丽 《中国分子心脏病学杂志》 CAS 2016年第6期1916-1919,共4页

目的研究核不均一核糖蛋白A1(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1,hnRNP A1)是否可以通过IκBα/NF-κB信号通路调控平滑肌细胞的钙化过程。方法分离培养原代人脐动脉血管平滑肌细胞(human umbilical artery smooth muscle cel... 目的研究核不均一核糖蛋白A1(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1,hnRNP A1)是否可以通过IκBα/NF-κB信号通路调控平滑肌细胞的钙化过程。方法分离培养原代人脐动脉血管平滑肌细胞(human umbilical artery smooth muscle cells,HUASMCs),构建pc DNA3.1-hnRNP A1真核表达质粒并转染HUASMCs,观察hnRNP A1对HUASMCs增殖和凋亡功能的影响。建立HUASMCs钙化模型,研究hnRNP A1在血管平滑肌钙化过程中的作用机制。结果 hnRNP A1表达水平在HUASMCs由收缩型转变为合成型的分化过程中显著上调,但hnRNP A1对HUASMCs细胞的增殖和凋亡功能无显著影响。无论是否给予H2O2刺激,hnRNP A1均可促进HUASMCs细胞形成钙化结节,其促进钙化的分子机制不是通过IκBα/NF-κB信号通路介导。结论本研究发现hnRNP A1在平滑肌细胞由收缩型向合成型转化的过程中表达上调,过表达hnRNP A1促进平滑肌细胞钙化。 展开更多

关键词 血管钙化 人脐动脉血管平滑肌细胞 HNRNP A1

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RNAi特异性抑制A20基因对H_2O_2诱导的HUASMC细胞表型的影响

13

作者 李蕾 宁淑娥 +1 位作者 陈海英 曲鹏 《现代生物医学进展》 CAS 2009年第11期2031-2034,共4页

目的:通过采用锌指蛋白A20基因干扰技术观察其对H2O2诱导的人脐动脉血管平滑肌细胞(HUASMC)超微结构影响,以初步研究锌指蛋白A20在氧化还原方面对细胞的保护作用。方法:将培养的人脐动脉血管平滑肌细胞随机分六组,空白组;A20siRNA组;scr... 目的:通过采用锌指蛋白A20基因干扰技术观察其对H2O2诱导的人脐动脉血管平滑肌细胞(HUASMC)超微结构影响,以初步研究锌指蛋白A20在氧化还原方面对细胞的保护作用。方法:将培养的人脐动脉血管平滑肌细胞随机分六组,空白组;A20siRNA组;scramble siRNA组;H2O2组;H2O2+A20siRNA组;H2O2+scramble siRNA,采用RT-PCR,Western-blotting方法观察A20基因表达变化,应用透射电镜观察细胞超微结构改变。结果:空白组A20mRNA与蛋白有微弱表达,A20siRNA组较空白组表达减少(P<0.05);H2O2组A20mRNA与蛋白表达明显高于空白组但显著低于H2O2+A20siRNA组(P<0.05)干扰效率大约55%。空白组平滑肌细胞(VSMC)电镜下呈典型的"收缩表型";H2O2组VSMC表型发生明显改变,呈"合成表型"H2O2+A20siRNA组成典型的合成表型且肌丝明显减少,细胞器及分泌物增多。结论:A20基因可以抑制H2O2损伤诱导的血管平滑肌细胞表型转化。 展开更多

关键词 H2O2 锌指蛋白A20 基因干扰 人脐动脉血管平滑肌细胞 超微结构

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组织块贴壁法培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞的特征 被引量：10

14

作者 张量 隋璐 +3 位作者 孙成林 王麟 牟艳玲 苏禄辉 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2005年第19期108-110,i003,共4页

目的:采用组织块贴壁法培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞,并应用光镜、电镜和免疫组织化学方法观察细胞各生长时期的形态变化。方法:实验于2004-02/08在中国医科大学基础医学院药理实验室完成。选择健康清洁级Wistar大鼠30只,体质量150～18... 目的:采用组织块贴壁法培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞,并应用光镜、电镜和免疫组织化学方法观察细胞各生长时期的形态变化。方法:实验于2004-02/08在中国医科大学基础医学院药理实验室完成。选择健康清洁级Wistar大鼠30只,体质量150～180g,无菌条件下取全段主动脉中膜组织修剪成1mm×1mm大小的组织块直接贴壁于一次性塑料培养皿中,组织块间距0.5cm,保证细胞从组织块游出后有足够的生长空间并保持局部细胞密度的均匀,发现漂起的组织块及时清理,于37℃孵箱内放置1.5h左右使组织块与壁贴附后,缓慢加入改良Eagle培养液培养3～5d,待有细胞从组织块周围游出后换液。当细胞长满培养皿时即可传代。采用倒置相差显微镜和透射电镜及抗α-平滑肌肌动蛋白免疫组织化学方法观察主动脉平滑肌细胞的形态。绘制主动脉平滑肌细胞生长曲线,观察各生长时期的变化,并评估其培养方法的优点。结果:30只大鼠全部进入结果分析。①技术方法优点:贴块方便,直接一次性贴壁使污染机会少,随组织块生长随时清理漂起的组织块,可减少对其他组织块的毒性作用,并增加已游离出的细胞生长空间。②原代培养血管平滑肌细胞:光镜观察形态多样,大小略有差异,胞体较小,胞质折光性强。③传代血管平滑肌细胞:光镜下观察呈现特征性“峰”、“谷”状生长。电镜下观察:细胞形态不规则,胞浆内有肌丝,纵向平行排列,有密区,具备平滑肌细胞特征。免疫组织化学染色后可见细胞浆中大量平行条状棕黄染色、胞核不着色,所有细胞均染色,呈阳性。④主动脉平滑肌细胞生长曲线:血管平滑肌细胞生长曲线近似“S”形,传代后第1天细胞数有所减少,经过2d潜伏适应期后进入对数生长期,持续两三天进入平台期。结论:组织块贴壁法培养技术具有操作简便,污染机会少,有足够细胞生长� 展开更多

关键词 主动脉血管平滑肌细胞 组织块贴壁法 免疫组织化学方法 免疫组织化学染色 α-平滑肌肌动蛋白 细胞生长曲线 Wistar大鼠 主动脉平滑肌细胞 对数生长期 中国医科大学 镜下观察 细胞特征 药理实验室 基础医学院 相差显微镜

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超声造影剂对血管平滑肌细胞增殖、迁移和凋亡的影响 被引量：7

15

作者 张萍 高云华 +2 位作者 刘平 谭开彬 刘政 《临床超声医学杂志》 2005年第5期289-292,共4页

目的探讨超声波联合超声造影剂对平滑肌细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法体外培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)。采用MTT法、Millicell小室、AnnexinV-FITC/PI双标染色和流式细胞仪,检测VSMC的增殖、迁移能力和凋亡,观察血小板衍... 目的探讨超声波联合超声造影剂对平滑肌细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法体外培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)。采用MTT法、Millicell小室、AnnexinV-FITC/PI双标染色和流式细胞仪,检测VSMC的增殖、迁移能力和凋亡,观察血小板衍生生长因子———BB(PDGF-BB)对VSMC增殖、迁移和凋亡的影响,频率1MHz、声强0·3W/cm2的连续波超声联合声学造影剂辐照VSMC后上述指标的变化。结果PDGF-BB对VSMC的凋亡无影响,但可促进VSMC增殖和迁移。超声联合造影剂辐照VSMC30s即可显著抑制PDGF-BB所致的VSMC增殖(P<0·05),同时细胞凋亡比例显著增高(P<0·01),辐照60s可显著抑制PDGF-BB所致的VSMC迁移(P<0·05),随着辐照时间延长,以上作用增强,辐照60s时对VSMC增殖的抑制程度最强。结论低强度超声波辐照联合超声造影剂可抑制VSMC增殖、迁移,并促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 超声造影剂 血管平滑肌细胞 增殖 迁移 凋亡 血管平滑肌细胞增殖 超声造影剂 迁移能力 细胞凋亡 VSMC增殖 PDGF-BB 主动脉血管平滑肌细胞 血小板衍生生长因子 超声波辐照

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糖尿病大鼠血管平滑肌细胞体外培养方法的探讨 被引量：9

16

作者 李艳平 李新荣 +2 位作者 邓湘蕾 李震 缪峰 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2005年第3期186-189,共4页

目的:对糖尿病大鼠血管平滑肌细胞体外培养方法进行探讨,建立糖尿病大鼠血管平滑肌细胞模型,为糖尿病慢性血管并发症研究奠定基础。方法:建立糖尿病大鼠模型,用组织贴壁法体外培养胸主动脉血管平滑肌细胞。结果:糖尿病大鼠造模成功。用... 目的:对糖尿病大鼠血管平滑肌细胞体外培养方法进行探讨,建立糖尿病大鼠血管平滑肌细胞模型,为糖尿病慢性血管并发症研究奠定基础。方法:建立糖尿病大鼠模型,用组织贴壁法体外培养胸主动脉血管平滑肌细胞。结果:糖尿病大鼠造模成功。用贴壁法培养糖尿病大鼠血管平滑肌细胞,3d后相差显微镜下可见细胞游出,培养7～10d左右细胞重叠生长达多层,高低起伏呈“峰—谷”状。平滑肌细胞actin免疫组织化学染色鉴定为平滑肌细胞。结论:糖尿病大鼠血管平滑肌细胞增殖速度快,培养条件要求严格,在形态学上与正常大鼠平滑肌细胞相同。 展开更多

关键词 糖尿病大鼠 体外培养方法 主动脉血管平滑肌细胞 慢性血管并发症 免疫组织化学 组织贴壁法 ACTIN 细胞模型 大鼠模型 显微镜下 染色鉴定 增殖速度 培养条件 正常大鼠 形态学

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丹酚酸B激活自噬改善高磷诱导血管平滑肌细胞钙化的机制研究 被引量：7

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作者 林评兰 吴明 +4 位作者 杨枫 徐琳 黄迪 裘福荣 叶朝阳 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2022年第12期1192-1196,共5页

目的:探讨丹酚酸B(Salvianolic acid B,SAB)改善高磷诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化的作用及机制。方法:采用大鼠血管平滑肌细胞(A7r5)钙化体外模型,用细胞增殖与活性检测试剂盒(cell counting kit-8,CC... 目的:探讨丹酚酸B(Salvianolic acid B,SAB)改善高磷诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化的作用及机制。方法:采用大鼠血管平滑肌细胞(A7r5)钙化体外模型,用细胞增殖与活性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测SAB对细胞活力的影响;2.6μmol·g^(-1)高磷诱导VSMCs钙化,加入丹参多酚酸类化合物丹酚酸B、丹酚酸C(Salvianolic acid C,SAC)、迷迭香酸(Rosmarinic acid,RA)及细胞自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA,5 nmol·g^(-1)),采用邻甲酚酞络合铜法及茜素红S染色检测细胞钙化程度;Western blot检测VSMCs钙化指标Runx2、OPN,自噬相关蛋白Beclin-1和LC3II/LC3I以及平滑肌收缩表型蛋白Calponin、SM22α的表达。结果:(1)钙离子浓度定量实验及茜素红染色实验显示SAB显著减轻高磷诱导的VSMCs钙化;(2)SAB浓度小于100 nmol·g^(-1)以下时对VSMCs生存活力无明显影响,选择3,10,30 nmol·g^(-1)剂量进行后续实验;Western blot显示SAB明显降低VSMCs成骨样分化的分子标志物Runx2、OPN蛋白表达(P<0.05),上调自噬标志物Beclin-1、LC3-I/II及VSMCs收缩表型标志物Calponin、SM22蛋白表达(P<0.05)。(3)SAB减轻高磷诱导VSMCs钙化的作用被自噬抑制剂3-MA阻断。结论:SAB可通过激活自噬抑制VSMCs钙化及向成骨样表型转化。 展开更多

关键词 胸主动脉血管平滑肌细胞 血管钙化 丹酚酸B 自噬

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Kv3．4通道参与15-羟二十碳四烯酸诱导的大鼠肺动脉收缩 被引量：5

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作者 李倩 毕海容 +1 位作者 张荣 朱大岭 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期77-82,共6页

通过组织浴槽血管环方法观察Kv3．4通道特异阻断剂BDS-Ⅰ对15-羟二十碳四烯酸(15-hydroxyeicosatetraenoic acid,15- HETE)收缩肺动脉血管的影响:通过酶法分离、培养Wistar大鼠肺动脉血管平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cel... 通过组织浴槽血管环方法观察Kv3．4通道特异阻断剂BDS-Ⅰ对15-羟二十碳四烯酸(15-hydroxyeicosatetraenoic acid,15- HETE)收缩肺动脉血管的影响:通过酶法分离、培养Wistar大鼠肺动脉血管平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells, PASMCs),RT-PCR和Western blot技术观察15-HETE对大鼠PASMCs上Kv3．4通道表达的影响,以探讨Kv3．4通道在15- HETE收缩肺动脉过程中的作用。结果如下:(1)15-HETE以浓度依赖方式使肺动脉环张力增加,对缺氧组大鼠肺动脉环张力作用更为明显,与正常对照组相比差异显著:(2)除去肺动脉内皮后,15-HETE引起血管收缩的强度较内皮完整时增强,呈剂量依赖性收缩反应;(3)阻断Kv3．4通道可抑制15-HETE收缩肺动脉;(4)15-HETE下调PASMCs膜上Kv3．4通道 mRNA及蛋白质表达。上述观察结果提示Kv3．4通道参与由15-HETE引起的缺氧肺动脉血管收缩(hypoxic pulmonary vasoconstriction,HPV)。 展开更多

关键词 15-羟二十碳四烯酸 电压门控性钾通道亚型 肺动脉血管平滑肌细胞 缺氧肺动脉血管收缩

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晚期糖基化终末产物通过AKT信号通路促进人主动脉血管平滑肌细胞钙化 被引量：3

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作者 侯青春 曾宏 +4 位作者 孙晓磊 何虎强 张雷 袁罡 刘勇 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第19期3169-3173,共5页

目的探讨蛋白激酶B在晚期糖基化终末产物(AGEs)引起的人主动脉血管平滑肌细胞(HASMCs)钙化中的作用。方法体外培养HASMCs,随机分为对照组、DMSO组、AGEs组和AGEs+LY294002组,冯库萨染色检测各组钙化情况;Western blot检测相关蛋白的表... 目的探讨蛋白激酶B在晚期糖基化终末产物(AGEs)引起的人主动脉血管平滑肌细胞(HASMCs)钙化中的作用。方法体外培养HASMCs,随机分为对照组、DMSO组、AGEs组和AGEs+LY294002组,冯库萨染色检测各组钙化情况;Western blot检测相关蛋白的表达。结果与对照组相比,AGEs组钙化相关蛋白骨形成蛋白-2(BMP-2)、骨保护素(OPG)表达量明显升高(P<0.05),且呈浓度依赖性;与对照组相比,AGEs组P-AKT表达量明显升高(P<0.05),且呈时间和浓度依赖性;与AGEs组相比,AGEs+LY294002组钙化相关蛋白BMP-2、OPG的表达量明显降低(P<0.01)。结论 AKT信号通路在AGEs引起的HAVSMCs钙化中可能起重要作用。 展开更多

关键词 人主动脉血管平滑肌细胞 晚期糖基化终末产物 血管平滑肌细胞 钙化 AKT

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利伐沙班对血管平滑肌细胞增殖迁移的影响 被引量：2

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作者 陈杰 杨晓霞 余汁 《医学研究杂志》 2021年第8期79-83,共5页

目的探究利伐沙班对血小板生长因子BB(platelet growth factor BB,PDGF-BB)诱导的人主动脉血管平滑肌细胞(human aortic vascular smooth muscle cells,HAVSMCs)增殖迁移的影响。方法选取处于对数生长期的HAVSMCs,给予20ng/ml PDGF-BB刺... 目的探究利伐沙班对血小板生长因子BB(platelet growth factor BB,PDGF-BB)诱导的人主动脉血管平滑肌细胞(human aortic vascular smooth muscle cells,HAVSMCs)增殖迁移的影响。方法选取处于对数生长期的HAVSMCs,给予20ng/ml PDGF-BB刺激24h,再用8μm利伐沙班共孵育24h。MTT法和Edu染色检测各组HAVSMCs的增殖活性,流式检测细胞周期,Transwell和划痕实验观测细胞迁移情况,Western blot法检测迁移相关蛋白E-cadherin和N-cadherin的表达量。结果与对照组比较,HAVSMC+PDGF-BB组的细胞活力、迁移能力、S期细胞数量和N-cadherin表达量都明显增加,E-cadherin表达量明显减少;相较于HAVSMC+PDGF-BB组,HAVSMC+PDGF-BB+利伐沙班组的细胞活力、迁移能力、S期细胞数量和N-cadherin蛋白表达量都显著减少,E-cadherin蛋白表达量明显增加。结论利伐沙班能有效抑制PDGF-BB诱导的血管平滑肌细胞增殖迁移,为利伐沙班治疗动脉闭塞硬化症提供一定的实验基础。 展开更多

关键词 利伐沙班 动脉硬化闭塞症 人主动脉血管平滑肌细胞 增殖 迁移

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