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土木香乙酸乙酯提取物对人胰腺癌Capan-2细胞增殖的抑制作用及机制研究 被引量:4
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作者 王霖玲 曾健梅 +2 位作者 阎优优 张博 林能明 《中国药房》 CAS 北大核心 2017年第31期4384-4388,共5页
目的:研究土木香乙酸乙酯提取物(IHE)对人胰腺癌Capan-2细胞增殖的抑制作用及机制。方法:采用MTT法测定0、0.5、1、2、4、8μg/mL的IHE作用48 h后细胞的增殖抑制率,克隆形成试验观察0、1、2μg/mL的IHE作用1周后对细胞克隆形成的影响,Ho... 目的:研究土木香乙酸乙酯提取物(IHE)对人胰腺癌Capan-2细胞增殖的抑制作用及机制。方法:采用MTT法测定0、0.5、1、2、4、8μg/mL的IHE作用48 h后细胞的增殖抑制率,克隆形成试验观察0、1、2μg/mL的IHE作用1周后对细胞克隆形成的影响,Hoechst 33342染色法观察0、2、4μg/mL的IHE作用48 h后细胞核形态的变化,流式细胞术检测0、4、8、16μg/mL的IHE作用48 h后细胞的凋亡率,JC-1染色法观察0、4、8、16μg/mL的IHE作用24 h后细胞线粒体膜电位变化,Western blot法检测0、4、8、16μg/mL的IHE作用48 h后细胞线粒体凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Mcl-1和p53上调凋亡因子(PUMA)、多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP)蛋白的表达。结果:2、4、8μg/mL的IHE对细胞的增殖有明显抑制作用,且呈浓度依赖性,半数抑制浓度为6.6μg/mL;1、2μg/mL的IHE可明显抑制细胞的克隆形成;4μg/mL的IHE可明显造成细胞核固缩;8、16μg/mL的IHE可明显促进细胞凋亡,16μg/mL的IHE作用48 h后细胞凋亡率达到45.53%;16μg/mL的IHE作用24 h后可引起82.47%的细胞线粒体膜电位下降;8μg/mL的IHE可明显下调细胞中Bcl-2、Mcl-1、PUMA、PARP蛋白表达,16μg/mL的IHE可明显下调细胞中Mcl-1、PUMA表达。结论:IHE可能通过引起细胞线粒体膜电位的下降,下调细胞中PUMA、Mcl-1蛋白的表达,引起细胞的凋亡,从而发挥其抑制人胰腺癌Capan-2细胞增殖的作用。 展开更多
关键词 土木香 乙酸乙酯提取物 胰腺癌capan-2细胞 线粒体 细胞凋亡
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新型小分子激酶抑制剂Ibr-7对人胰腺癌Capan-2细胞的抑制作用及机制研究
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作者 阎优优 张博 +2 位作者 张琪 周冬梅 林能明 《中国药房》 CAS 北大核心 2019年第4期499-506,共8页
目的:观察新型小分子激酶抑制剂Ibr-7[依鲁替尼(Ibr)衍生物]对人胰腺癌Capan-2细胞的抑制作用及其可能机制。方法:以Capan-2细胞为对象,采用CCK-8法检测1、2、4、8μmol/L Ibr、Ibr-7作用48 h后的细胞增殖情况,计算细胞存活率;同法检测1... 目的:观察新型小分子激酶抑制剂Ibr-7[依鲁替尼(Ibr)衍生物]对人胰腺癌Capan-2细胞的抑制作用及其可能机制。方法:以Capan-2细胞为对象,采用CCK-8法检测1、2、4、8μmol/L Ibr、Ibr-7作用48 h后的细胞增殖情况,计算细胞存活率;同法检测1μmol/L Ibr、Ibr-7对不同剂量吉西他滨/紫杉醇(均分别为0.062 5、0.125、0.25、0.5、1μmol/L)的增敏作用。采用克隆形成试验检测1、2、4μmol/L Ibr、Ibr-7作用48 h后的细胞克隆形成情况,并记录细胞集落形成数量。采用流式细胞术或JC-1法检测2、4、8μmol/L Ibr-7作用24或16 h后细胞凋亡情况和线粒体膜电位变化情况,并计算总凋亡率及细胞线粒体膜电位下降比例。采用Westernblotting法检测细胞中相关凋亡蛋白[多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP)、Noxa、Bcl-2、Bax、髓样细胞白血病1(Mcl-1)、B淋巴细胞瘤x L(Bcl-xL)]的表达情况。结果:1、2、4、8μmol/L Ibr、Ibr-7作用48 h后,细胞的存活率均显著下降,各剂量Ibr-7组均显著低于同剂量Ibr组,且Ibr-7的半数抑制浓度显著低于Ibr(P<0.05或P<0.01)。联用Ibr、Ibr-7后,细胞的存活率均显著低于同剂量吉西他滨/紫杉醇单用组,且Ibr-7联用组显著低于同剂量Ibr联用组(P<0.05或P<0.01)。经2、4μmol/L Ibr以及1、2、4μmol/L Ibr-7作用48 h后,细胞集落形成数量均显著减少,且各剂量Ibr-7组均显著低于同剂量Ibr组(P<0.01)。经不同剂量Ibr-7作用24或16h后,Capan-2细胞的总凋亡率(2、4、8μmol/L组)、细胞线粒体膜电位下降比例(8μmol/L组)以及Noxa(2、4、8μmol/L组)、Bax(8μmol/L组)蛋白的相对表达量均显著上升,PARP(8μmol/L组)、Bcl-2(4μmol/L组)、Mcl-1(2、4、8μmol/L组)蛋白的相对表达量均显著下降,且8μmol/L Ibr-7组上述指标(PARP、Bcl-2相对表达量除外)均显著优于同剂量Ibr组(P<0.05或P<0.01)。而各组细胞Bcl-xL蛋白的相对表达量差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:与Ibr相比,Ibr-7对人胰� 展开更多
关键词 依鲁替尼 依鲁替尼衍生物 胰腺癌capan-2细胞 增殖 凋亡 线粒体膜电位 凋亡相关蛋白
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