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海藻多糖对H2O2诱导人胚肺成纤维细胞MRC-5氧化损伤的影响及其机制 被引量：2
1
作者 刘骅漫 刘学 +2 位作者 贾新华 张心月 张伟 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第32期17-20,共4页
目的探讨海藻多糖对H_2O_2诱导人胚肺成纤维细胞MRC-5氧化损伤的影响及机制。方法将体外培养的人胚肺成纤维细胞MRC-5随机分为空白组、H_2O_2组、海藻多糖组、海藻多糖+H_2O_2组、H_2O_2+海藻多糖组。空白组正常培养,H_2O_2组给予H_2O_... 目的探讨海藻多糖对H_2O_2诱导人胚肺成纤维细胞MRC-5氧化损伤的影响及机制。方法将体外培养的人胚肺成纤维细胞MRC-5随机分为空白组、H_2O_2组、海藻多糖组、海藻多糖+H_2O_2组、H_2O_2+海藻多糖组。空白组正常培养,H_2O_2组给予H_2O_2处理,海藻多糖组给予海藻多糖处理,海藻多糖+H_2O_2组先给予海藻多糖干预1 h、再给予H_2O_2处理,H_2O_2+海藻多糖组先给予H_2O_2干预1 h、再给予海藻多糖处理。各组H_2O_2浓度均为600μmol/L,海藻多糖浓度均为0.312 5 mg/m L。各组均于干预0、24、48、72 h时采用MTT法检测细胞增殖抑制率;处理24 h时检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)表达,采用免疫荧光法检测核转录因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达,采用RT-PCR法检测Nrf2、Kelch样ECH联合蛋白1(Keap1)、NADP(H)醌氧化还原酶1(NQO1)、血红素氧合酶1(HO-1)、CGLC mRNA表达。结果培养24、48、72 h时,H_2O_2组、海藻多糖+H_2O_2组、H_2O_2+海藻多糖组细胞增殖抑制率均高于空白组及海藻多糖组,海藻多糖+H_2O_2组、H_2O_2+海藻多糖组均低于H_2O_2组,组间比较P均<0.05。与空白组及海藻多糖组比较,H_2O_2组、海藻多糖+H_2O_2组、H_2O_2+海藻多糖组MDA、ROS表达增加,SOD表达降低;与H_2O_2组比较,海藻多糖+H_2O_2组、H_2O_2+海藻多糖组MDA、ROS表达降低,SOD表达增加,组间比较P均<0.05。与空白组及海藻多糖组比较,H_2O_2组、海藻多糖+H_2O_2组、H_2O_2+海藻多糖组Nrf2 mRNA和蛋白相对表达量均降低,海藻多糖+H_2O_2组、H_2O_2+海藻多糖组均较H_2O_2组升高,组间比较P均<0.05。与空白组及海藻多糖组比较,H_2O_2组、海藻多糖+H_2O_2组、H_2O_2+海藻多糖组Keap1 mRNA相对表达量均升高,NQO1、CGLC、HO-1 mRNA相对表达量均降低;与H_2O_2组比较,海藻多糖+H_2O_2组、H_2O_2+海藻多糖组Keap1 mRNA相对表达量均降低,NQO1、CGLC、HO-1 mRNA相对表达量均升高;组间比较P均<0.05。� 展开更多
关键词 肺纤维化 人胚肺成纤维细胞mrc-5 海藻多糖 过氧化氢 氧化损伤 核转录因子E2相关因子2
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致急性呼吸道感染人腺病毒的体外感染特性初步比较 被引量：13
2
作者 陈诗颖 樊晔 +2 位作者 张玲 田新贵 周荣 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期741-747,共7页
致急性呼吸道感染人腺病毒(Human adenoviruses,HAdV)的型别特异性体外感染可能与细胞因子诱导的差异有关,并推测型别特异性体外感染可能与肺细胞中型别特异性细胞因子的诱导有关。为了比较致急性呼吸道感染人腺病毒3型、5型、7型和55... 致急性呼吸道感染人腺病毒(Human adenoviruses,HAdV)的型别特异性体外感染可能与细胞因子诱导的差异有关,并推测型别特异性体外感染可能与肺细胞中型别特异性细胞因子的诱导有关。为了比较致急性呼吸道感染人腺病毒3型、5型、7型和55型的体外感染特性,临床分离多株人腺病毒3型、7型和55型接种人肺腺癌细胞(A549细胞)或人胚肺成纤维细胞(MRC-5细胞),比较其感染滴度;将人腺病毒3型、5型、7型和55型毒株接种MRC-5细胞和A549细胞进行空斑试验,比较其空斑形成以及大小、形态;接种感染MRC-5细胞,分别于感染后10h和26h收集细胞培养上清,用人炎症细胞因子抗体芯片同步检测10个主要炎症相关细胞因子包括IL-1α、IL-1β、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-13、MCP-1、IFN-γ以及TNF-α的表达水平并进行分析。结果显示,与MRC-5细胞相比,A549细胞对这几种人腺病毒更加敏感;人腺病毒55型毒株与其它型别相比产毒量较高。人腺病毒在MRC-5细胞上难以形成空斑,而用A549细胞进行的空斑试验显示人腺病毒5型和55型毒株有较高的空斑形成单位,并且形成的空斑为规则的圆形且边缘清晰,空斑直径较大;而人腺病毒7型和3型毒株感染滴度较低,人腺病毒7型形成的空斑大小不均匀,形状不规则,人腺病毒3型形成的空斑直径很小,呈点状。炎症细胞因子检测结果显示,与正常对照组相比,野生型人腺病毒55型表达差异的炎症细胞因子是IL-1α、IL-1β和TNF-α;改造的人腺病毒3型感染MRC-5细胞后,两个时间点的各炎症细胞因子基本低表达。与正常对照组相比,人腺病毒感染MRC-5细胞后表达有差异的炎症细胞因子主要为IL-6和IL-8。 展开更多
关键词 人腺病毒(HAdV) 病毒培养 人胚肺成纤维细胞(mrc-5细胞) 抗体芯片 炎症细胞因子
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土槿皮乙酸通过DNA损伤反应诱导细胞自噬来抑制凋亡 被引量：4
3
作者 王越 刘春禹 +4 位作者 王增艳 宋凤梅 孟祥玲 于静华 张辉 《吉林中医药》 2017年第4期381-384,共4页
目的本课题在人肺成纤维细胞MRC5中研究土槿皮乙酸(PAB)诱导的DNA损伤反应、自噬及其与凋亡的关系。方法以4 mmol/L PAB分别处理12、24、36、48 h后,Western blot分析DNA损伤反应标志蛋白g-H2AX表达;通过酰尸胺染色法、Western blot法确... 目的本课题在人肺成纤维细胞MRC5中研究土槿皮乙酸(PAB)诱导的DNA损伤反应、自噬及其与凋亡的关系。方法以4 mmol/L PAB分别处理12、24、36、48 h后,Western blot分析DNA损伤反应标志蛋白g-H2AX表达;通过酰尸胺染色法、Western blot法确定PAB是否诱导细胞自噬;通过抑制DNA损伤反应的发生确定DNA损伤反应对自噬和凋亡的影响。结果 PAB诱导DNA损伤反应;PAB诱导细胞自噬;抑制DNA损伤反应抑制细胞自噬并促进细胞凋亡。结论 PAB通过诱导DNA损伤反应诱导细胞自噬,抑制自噬促进细胞凋亡并增加PAB的抑制率。 展开更多
关键词 土槿皮乙酸 人肺成纤维细胞mrc5 DNA损伤反应 细胞自噬 凋亡
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P物质对人胚肺成纤维细胞作用及机制 被引量：2
4
作者 曾令军 王文军 +5 位作者 李雪森 杨茂 潘英 毕煜玲 肖贵宝 周蓉 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期849-852,共4页
目的探讨P物质(SP)对人胚肺成纤维细胞(MRC-5)增殖与活化的作用及其调控机制。方法体外培养MRC-5细胞,以P物质或与NK-1R抑制剂(L732138)及TGFβR1抑制剂(SB431542)联合培养细胞后,利用CCK8法检测细胞增殖活性,天狼猩红染色检测胶原纤维... 目的探讨P物质(SP)对人胚肺成纤维细胞(MRC-5)增殖与活化的作用及其调控机制。方法体外培养MRC-5细胞,以P物质或与NK-1R抑制剂(L732138)及TGFβR1抑制剂(SB431542)联合培养细胞后,利用CCK8法检测细胞增殖活性,天狼猩红染色检测胶原纤维含量,Western blot检测α-SMA、TGFβ1、Smad3及p-Smad3蛋白的表达。结果MRC-5细胞经P物质(1、10、100、1000、10000 nmol/L)处理后,24 h细胞增殖率无明显变化;在处理48及72 h后,100 nmol/L P物质可促进细胞增殖。与对照组比较,100 nmol/L P物质处理72 h后的细胞胶原蛋白含量(54.04±1.25)、α-SMA蛋白表达水平(2.48±0.07)明显升高(P<0.001)。与100 nmol/L P物质+L732138组比较,100 nmol/L P物质组细胞胶原纤维含量、α-SMA、TGFβ1、p-Smad3蛋白相对表达量[分别为(56.14±1.25)、(0.89±0.04)、(0.87±0.05)、(1.06±0.03)]明显升高(P<0.001);与100 nmol/L P物质组比较,100 nmol/L P物质+SB431542组细胞A450值、胶原纤维含量明显降低(P<0.001)。结论P物质可以通过TGFβ1/Smad3信号通路促进人胚肺成纤维细胞(MRC-5)增殖及活化。 展开更多
关键词 P物质 人胚肺成纤维细胞(mrc-5) 转化生长因子β1(TGFβ1) SMAD3 肺纤维化
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白藜芦醇对人肺细胞株放射损伤的保护作用及其机制研究 被引量：2
5
作者 伏晓月 薛建新 +4 位作者 周麟 王永生 黄媚娟 李潞 卢铀 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期319-324,共6页
目的探讨白藜芦醇对X射线照射后人支气管上皮细胞HBE和人胚肺成纤维细胞MRC5损伤的保护作用及可能机制。方法培养HBE和MRC5细胞,分为4个组:对照组(Vehicle)、白藜芦醇组(resveratrol,Res)、X射线照射组(RT+Vehicle)、白藜芦醇和X射线联... 目的探讨白藜芦醇对X射线照射后人支气管上皮细胞HBE和人胚肺成纤维细胞MRC5损伤的保护作用及可能机制。方法培养HBE和MRC5细胞,分为4个组:对照组(Vehicle)、白藜芦醇组(resveratrol,Res)、X射线照射组(RT+Vehicle)、白藜芦醇和X射线联合组(RT+Res)。Res(终浓度5μmol/L)为X射线前2h给药,X射线(20Gy,8.33Gy/min,照射144s)照射后,分别对各组细胞的形态、超微结构、生长活力、DNA损伤、凋亡情况进行观察;同时检测胞内的活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量、总超氧化物歧化酶(SOD)活性、总谷胱甘肽(GSH)含量。结果 X射线能对HBE和MRC5细胞造成明显的损伤。白藜芦醇能有效地减轻X射线对细胞形态和超微结构的破坏,缓解X射线对细胞活力的影响和DNA的损伤,降低X射线照射后细胞的凋亡、降低细胞ROS的水平和MDA的含量,增加细胞总GSH的含量和总SOD的活性。结论白藜芦醇对HBE和MRC5细胞的放射损伤具有保护作用,其机制与减轻氧化应激损伤有关。 展开更多
关键词 人支气管上皮细胞(HBE) 人胚肺成纤维细胞(mrc5) 放射损伤 白藜芦醇 氧化应激损伤
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