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华蟾素对肾癌细胞增殖的影响
被引量:
2
1
作者
兰勇
程帆
《实用临床医药杂志》
CAS
2015年第7期83-86,共4页
目的探讨华蟾素对人肾癌786-0细胞的影响及机制。方法用不同浓度的华蟾素(浓度分别为1、10、100、1 000μg/m L)作用于人肾癌786-0细胞株,采用CCK-8法检测华蟾素对肾癌786-0细胞增殖效应的影响,采用流式细胞术(FCM)检测华蟾素对肾癌786-...
目的探讨华蟾素对人肾癌786-0细胞的影响及机制。方法用不同浓度的华蟾素(浓度分别为1、10、100、1 000μg/m L)作用于人肾癌786-0细胞株,采用CCK-8法检测华蟾素对肾癌786-0细胞增殖效应的影响,采用流式细胞术(FCM)检测华蟾素对肾癌786-0细胞周期的影响,采用蛋白印迹法检测华蟾素对Survivin蛋白表达水平的影响。结果CCK-8法结果提示,不同浓度的华蟾素均可显著抑制肾癌786-0细胞的增殖,且抑制率呈时间、剂量依赖关系。FCM检测发现华蟾素可使肾癌786-0细胞周期中的G0/G1期比例增加,S期缩短。蛋白印迹法显示,华蟾素可使肾癌786-0细胞中Survivin蛋白表达水平降低。结论华蟾素能够抑制人肾癌786-0细胞的增殖,并阻滞细胞周期在G0/G1期,其机制可能与影响蛋白Survivin的表达相关。
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关键词
华蟾素
人
肾癌
786
-0
细胞
细胞
增殖
SURVIVIN
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职称材料
RNA干扰ezrin基因真核生物表达载体的构建及鉴定
2
作者
杨旭凯
王养民
+6 位作者
张斌
周逢海
董永超
景德善
常德辉
李卫平
郑少斌
《中国医药》
2012年第4期467-470,共4页
目的构建用于RNA干扰(RNAi)的小发夹RNAshRNA表达载体并检测其对ezrin基因的沉默效果。方法以ezrin为靶基因,以pGenesil-1质粒为载体,设计和构建重组体,根据GeneBank数据库提供的ezrin核苷酸序列,按照Tuschl设计原则,设计2条小...
目的构建用于RNA干扰(RNAi)的小发夹RNAshRNA表达载体并检测其对ezrin基因的沉默效果。方法以ezrin为靶基因,以pGenesil-1质粒为载体,设计和构建重组体,根据GeneBank数据库提供的ezrin核苷酸序列,按照Tuschl设计原则,设计2条小发夹结构的DNA序列,经退火形成互补双链,克隆到空载体pGenesil-1中,转化DH5a菌株,提取质粒,予以酶切和测序鉴定;重组质粒转染786-0肾癌细胞株,运用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法进行筛选鉴定。结果酶切及测序鉴定表明成功地构建重组质粒shRNA—ezrin1、shRNA—ezrin2;荧光实时定量PCR和蛋白质印迹法检测结果显示,肾癌细胞中shRNA—ezrin1、shRNA—ezrin2mRNA相对表达量分别为(0.3376±0.0166)及(0.4661±0.0266),shRNA—ezrin1与shRNA-ezrin2相对表达量差异有统计学意义(P〈0.01),根据基相对表达量算出shRNA—ezrin1,shRNA—ezrin2ezrin—mRNA的表达量抑制率分别为66.33%及53.29%。转染重组质粒后显著抑制786-0细胞中ezrinmRNA和蛋白表达,其中shRNA—ezrin1的抑制效率最高。结论成功构建ezrin基因的shRNA表达载体,并筛选出抑制率较高的重组质粒载体shRNA-ezrin1,为进一步研究ezrin基因沉默对肾癌786-0细胞株生物学行为的影响奠定基础。
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关键词
RNA干扰
重组质粒
人
肾癌
786
-0
细胞
株
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职称材料
题名
华蟾素对肾癌细胞增殖的影响
被引量:
2
1
作者
兰勇
程帆
机构
武汉大学人民医院泌尿外科
出处
《实用临床医药杂志》
CAS
2015年第7期83-86,共4页
文摘
目的探讨华蟾素对人肾癌786-0细胞的影响及机制。方法用不同浓度的华蟾素(浓度分别为1、10、100、1 000μg/m L)作用于人肾癌786-0细胞株,采用CCK-8法检测华蟾素对肾癌786-0细胞增殖效应的影响,采用流式细胞术(FCM)检测华蟾素对肾癌786-0细胞周期的影响,采用蛋白印迹法检测华蟾素对Survivin蛋白表达水平的影响。结果CCK-8法结果提示,不同浓度的华蟾素均可显著抑制肾癌786-0细胞的增殖,且抑制率呈时间、剂量依赖关系。FCM检测发现华蟾素可使肾癌786-0细胞周期中的G0/G1期比例增加,S期缩短。蛋白印迹法显示,华蟾素可使肾癌786-0细胞中Survivin蛋白表达水平降低。结论华蟾素能够抑制人肾癌786-0细胞的增殖,并阻滞细胞周期在G0/G1期,其机制可能与影响蛋白Survivin的表达相关。
关键词
华蟾素
人
肾癌
786
-0
细胞
细胞
增殖
SURVIVIN
Keywords
cinobufotalin
renal cancer cell lines
786
-0
cell proliferation
Survivin
分类号
R692 [医药卫生—泌尿科学]
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职称材料
题名
RNA干扰ezrin基因真核生物表达载体的构建及鉴定
2
作者
杨旭凯
王养民
张斌
周逢海
董永超
景德善
常德辉
李卫平
郑少斌
机构
兰州军区总医院泌尿外科
南方医院泌尿外科
出处
《中国医药》
2012年第4期467-470,共4页
文摘
目的构建用于RNA干扰(RNAi)的小发夹RNAshRNA表达载体并检测其对ezrin基因的沉默效果。方法以ezrin为靶基因,以pGenesil-1质粒为载体,设计和构建重组体,根据GeneBank数据库提供的ezrin核苷酸序列,按照Tuschl设计原则,设计2条小发夹结构的DNA序列,经退火形成互补双链,克隆到空载体pGenesil-1中,转化DH5a菌株,提取质粒,予以酶切和测序鉴定;重组质粒转染786-0肾癌细胞株,运用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法进行筛选鉴定。结果酶切及测序鉴定表明成功地构建重组质粒shRNA—ezrin1、shRNA—ezrin2;荧光实时定量PCR和蛋白质印迹法检测结果显示,肾癌细胞中shRNA—ezrin1、shRNA—ezrin2mRNA相对表达量分别为(0.3376±0.0166)及(0.4661±0.0266),shRNA—ezrin1与shRNA-ezrin2相对表达量差异有统计学意义(P〈0.01),根据基相对表达量算出shRNA—ezrin1,shRNA—ezrin2ezrin—mRNA的表达量抑制率分别为66.33%及53.29%。转染重组质粒后显著抑制786-0细胞中ezrinmRNA和蛋白表达,其中shRNA—ezrin1的抑制效率最高。结论成功构建ezrin基因的shRNA表达载体,并筛选出抑制率较高的重组质粒载体shRNA-ezrin1,为进一步研究ezrin基因沉默对肾癌786-0细胞株生物学行为的影响奠定基础。
关键词
RNA干扰
重组质粒
人
肾癌
786
-0
细胞
株
Keywords
RNA interference
Recombinant plasmid
Human cancer of kidney
786
-0 cell line
分类号
R394 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
华蟾素对肾癌细胞增殖的影响
兰勇
程帆
《实用临床医药杂志》
CAS
2015
2
下载PDF
职称材料
2
RNA干扰ezrin基因真核生物表达载体的构建及鉴定
杨旭凯
王养民
张斌
周逢海
董永超
景德善
常德辉
李卫平
郑少斌
《中国医药》
2012
0
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职称材料
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