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H2S调节miR-21表达抑制内质网应激介导肺成纤维化细胞凋亡 被引量:6
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作者 赵红 姚平波 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1612-1616,共5页
目的:探讨H_2S是否可调节mi R-21表达抑制内质网应激介导肺成纤维细胞凋亡。方法:体外培养小鼠成纤维细胞(NIH3T3),随机分为对照组、TGF-β1组和Na HS干预组。采用CCK-8分别检测细胞增殖,流式细胞仪检测NIH3T3凋亡率; q RT-PCR法和Weste... 目的:探讨H_2S是否可调节mi R-21表达抑制内质网应激介导肺成纤维细胞凋亡。方法:体外培养小鼠成纤维细胞(NIH3T3),随机分为对照组、TGF-β1组和Na HS干预组。采用CCK-8分别检测细胞增殖,流式细胞仪检测NIH3T3凋亡率; q RT-PCR法和Western blot分别分析葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和caspase-12的表达;检测mi R-21是否参与H_2S抑制ERS介导的肺成纤维化细胞凋亡,将其随机分为3组:对照组、mi R-21激动剂(mi R-21 agomir)组和mi R-21拮抗剂(mi R-21 antagomir)组。mi R-21激动剂组和mi R-21拮抗剂组分别给予40μmol/L的Na HS预处理,再进行TGF-β1处理,检测GRP78、CHOP及caspase-12的表达。结果:与对照组比较,Na HS干预组小鼠肺成纤维化细胞的增殖率、细胞凋亡率、mi R-21蛋白及m RNA的表达均明显降低;与TGF-β1组比较,Na HS可明显降低内质网应激相关因子GRP78、CHOP及caspase-12蛋白和m RNA表达;与阴性对照组比较,mi R-21 agomir组GRP78、CHOP及caspase-12的蛋白及m RNA表达均显著升高。而与mi R-21 agomir组比较,mi R-21 antagomir组结果则与之相反。结论:H_2S可通过调节mi R-21的表达,调控TGF-β1诱导小鼠肺成纤维化细胞的ERS稳态减少细胞凋亡,发挥其内源性的保护作用。 展开更多
关键词 纤维化细胞 MICRORNA-21 内质网应激 凋亡
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蛋白激酶C和JNK在溶血磷脂酸诱导人肺成纤维细胞MCP-1表达中的作用 被引量:3
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作者 尹齐 许铭炎 +1 位作者 傅玉才 邓小玲 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2017年第1期31-36,共6页
目的:研究蛋白激酶C(PKC)和c-Jun氨基末端激酶(JNK)在溶血磷脂酸(LPA)诱导人肺成纤维细胞(HLF-1)单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达中的作用。方法:培养HLF-1细胞,以不同浓度(0、1、3和10μmol/L)的LPA处理细胞不同时间(0.5、6、12和24h)后... 目的:研究蛋白激酶C(PKC)和c-Jun氨基末端激酶(JNK)在溶血磷脂酸(LPA)诱导人肺成纤维细胞(HLF-1)单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达中的作用。方法:培养HLF-1细胞,以不同浓度(0、1、3和10μmol/L)的LPA处理细胞不同时间(0.5、6、12和24h)后,ELISA检测细胞培养基上清液中MCP-1的蛋白表达,荧光定量PCR检测MCP-1 mRNA的表达水平。用不同浓度的PKC抑制剂Bisindolylmaleimide I(0、0.1、1和10μmol/L)或JNK抑制剂SP600125(0、0.1、1和10μmol/L)预孵育细胞30 min后,用LPA(10μmol/L)刺激2或6 h后,ELISA方法检测细胞培养基上清液中MCP-1的蛋白表达,荧光定量PCR检测MCP-1 mRNA的表达水平。用PKC抑制剂Bisindolylmaleimide I(1μmol/L)预孵育30 min,以浓度为10μmol/L的LPA处理细胞不同时间(0、5、30和60 min)后,Western blot检测c-Jun蛋白磷酸化水平。结果:LPA可诱导HLF-1细胞MCP-1蛋白释放,并呈剂量效应和时间效应关系。LPA的浓度为10μmol/L时,HLF-1细胞释放MCP-1蛋白的量是对照组的2.4倍(P<0.05);细胞在LPA处理24 h后,MCP-1蛋白的释放量较对照组增加约1倍(P<0.05)。LPA可诱导HLF-1细胞MCP-1 mRNA的表达并呈时间效应,LPA处理2 h后,MCP-1 mRNA表达水平是对照组的5.3倍(P<0.05)。PKC抑制剂Bisindolylmaleimide I和JNK抑制剂SP600125均可显著抑制LPA诱导的HLF-1细胞MCP-1 mRNA表达及MCP-1蛋白释放。Bisindolylmaleimide I的浓度为1μmol/L时可阻断LPA诱导的HLF-1细胞MCP-1蛋白释放量的60%(P<0.05),浓度为3μmol/L时对MCP-1 mRNA表达有明显抑制效果,抑制率达40%(P<0.05);而SP600125的浓度为1μmol/L时可阻断LPA诱导的HLF-1细胞MCP-1蛋白释放量的78%(P<0.05),对MCP-1 mRNA表达有明显抑制效果,抑制率达87%(P<0.05)。10μmol/L的LPA可显著诱导HLF-1细胞c-Jun磷酸化,同时PKC抑制剂Bisindolylmaleimide I(1μmol/L)可显著抑制LPA(10μmol/L)诱导的HLF-1细胞c-Jun磷酸化。结论:PKC与JNK通路均参与LPA诱导HLF-1细胞MCP-1的表达。 展开更多
关键词 溶血磷脂酸 蛋白激酶C C-JUN氨基端激酶 单核细胞因子-1 纤维化细胞
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TGF-β_1介导的Smads信号通路调控细胞“成纤维化”的作用机制浅析 被引量:8
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作者 庞立健 吕晓东 +7 位作者 赵仲雪 刘创 袁佺 滑振 郑炜东 臧凝子 杨丽 任延毅 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期750-753,共4页
成纤维细胞灶是肺纤维化、肾纤维化等器官纤维化的病理特征,其主要组成部分肌成纤维细胞是纤维化的效应细胞。TGF-β_1/Smads信号通路为"开关"参与纤维化疾病的发生,笔者梳理近几年相关文献报道,阐述"成纤维化"细... 成纤维细胞灶是肺纤维化、肾纤维化等器官纤维化的病理特征,其主要组成部分肌成纤维细胞是纤维化的效应细胞。TGF-β_1/Smads信号通路为"开关"参与纤维化疾病的发生,笔者梳理近几年相关文献报道,阐述"成纤维化"细胞的来源,并剖析TGF-β_1介导的Smads信号通路调控不同种类的细胞"成纤维化"的作用机制,为开展相关实验研究与新药研发提供理论依据。 展开更多
关键词 TGF-β1/Smads信号通路 纤维化细胞
原文传递
贝复济联合封闭式负压引流治疗外科难愈性伤口的效果观察 被引量:7
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作者 王凤霞 李燕润 张维 《西部医学》 2015年第7期1019-1021,共3页
目的探讨贝复济(碱性成纤维化细胞生长因子,BFGF)联合封闭式负压引流对于普外科难愈性伤口的临床疗效。方法随机将100例普外科手术后难愈性伤口患者平均分为两组,即封闭式负压引流治疗组(对照组)和贝复济联合封闭式负压引流治疗组(观察... 目的探讨贝复济(碱性成纤维化细胞生长因子,BFGF)联合封闭式负压引流对于普外科难愈性伤口的临床疗效。方法随机将100例普外科手术后难愈性伤口患者平均分为两组,即封闭式负压引流治疗组(对照组)和贝复济联合封闭式负压引流治疗组(观察组),每组50例。对治疗有效率、换药次数、伤口愈合时间及患者住院时间进行分析。结果观察组治疗的临床有效率、换药次数、伤口愈合时间及患者住院时间均显著优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论在封闭式负压引流(VSD)的基础上使用碱性成纤维化细胞生长因子对于普外科手术导致的难愈性伤口有较好的临床疗效,可在临床推广应用。 展开更多
关键词 碱性纤维化细胞生长因子 封闭式负压引流 难愈性伤口
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抗纤颗粒对肺间质纤维化血清细胞外基质的影响研究 被引量:1
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作者 李素云 胡秀芳 马利军 《中医药学刊》 2003年第4期514-515,共2页
目的 :观察特发性肺间质纤维化患者血清细胞外基质成分的改变及中药抗纤颗粒对其影响。方法 :选择符合观察标准的病例 33例 ,治疗组口服抗纤颗粒加小剂量强的松 ,健康对照组为来自我院的健康体检者。用放射免疫法测定患者的细胞外基质... 目的 :观察特发性肺间质纤维化患者血清细胞外基质成分的改变及中药抗纤颗粒对其影响。方法 :选择符合观察标准的病例 33例 ,治疗组口服抗纤颗粒加小剂量强的松 ,健康对照组为来自我院的健康体检者。用放射免疫法测定患者的细胞外基质成分Ⅲ型胶原、Ⅳ型胶原 (Ⅳ -C)、透明质酸 (HA)、层粘连蛋白 (LN)。结果 :治疗组治疗前血清Ⅳ -C、Ⅲ -C、LN、HA含量明显高于对照组和治疗后 (P <0 .0 0 1,P <0 .0 1,P <0 .0 5 )。结论 :特发性肺间质纤维化患者血清Ⅳ -C、Ⅲ -C、LN、HA含量明显增高。抗纤颗粒能够降低患者的细胞外基质。 展开更多
关键词 抗纤颗粒 间质纤维化血清细胞 研究
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中性粒细胞胞外陷阱对类风湿关节炎成纤维化样滑膜细胞mRNA表达谱的影响 被引量:1
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作者 孙玥 黄赛赛 +2 位作者 耿林玉 丁从珠 王红 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2022年第9期909-913,共5页
目的中性粒细胞胞外陷阱(NETs)与RA疾病的发生发展密切相关。文章旨在研究NETs对RA成纤维化样滑膜细胞(FLS)基因表达谱的影响。方法收集RA患者8例以及8例健康志愿者外周血5 mL分别作为RA组和对照组。分离RA患者与健康对照者的外周血中... 目的中性粒细胞胞外陷阱(NETs)与RA疾病的发生发展密切相关。文章旨在研究NETs对RA成纤维化样滑膜细胞(FLS)基因表达谱的影响。方法收集RA患者8例以及8例健康志愿者外周血5 mL分别作为RA组和对照组。分离RA患者与健康对照者的外周血中性粒细胞,免疫荧光法检测NETs的生成。同时ELISA检测RA组与对照组血清中游离核小体的水平。体外分离健康供者的中性粒细胞,以PMA诱导NETs生成。将FLS以1×10~6的数量接种在6孔板中,以含10%FBS的DMEM培养基培养,加或不加所分离的NETs刺激,分为未刺激的FLS组和NETs刺激后的FLS组。全基因组分析NETs对RA FLS基因表达谱的影响。结果与对照组外周血中NETs形成数量(6.67±1.45)相比,RA组(18.67±2.33)显著增多(P<0.05);与对照组(0.11±0.02)相比,RA组血清中NETs组分游离核小体的水平(0.20±0.02)也显著升高(P<0.05)。基因芯片结果进一步提示与未刺激的FLS对比,NETs刺激培养后的FLS共有差异表达mRNA469个,其中mRNA上调257个,下调212个。全基因组学分析显示NETs可以作用于RA FLS,上调炎性反应、细胞增殖、细胞迁移、蛋白酶等相关基因的表达,下调细胞程序性死亡、细胞生长阻滞、DNA损伤相关基因的表达。结论NETs诱导RA FLS的侵袭表型和炎症反应,NETs可通过影响FLS的生物学功能参与RA滑膜炎。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 中性粒细胞胞外陷阱 纤维化样滑膜细胞
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