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SRPX2对肝癌细胞侵袭与迁移能力的影响及作用机制 被引量：1
1
作者 王云检 尤国华 +1 位作者 张珉 张璐阳 《肝脏》 2019年第2期184-187,共4页
目的探讨sushi重复蛋白X连锁2(SRPX2)对人肝癌细胞MHCC97H侵袭与迁移能力的影响及作用机制。方法体外培养人肝癌细胞MHCC97H,用Lipofectamine法将阴性对照和SRPX2特异性siRNA转染到人肝细胞癌MHCC97H,继续培养48 h收获细胞,用Transwell... 目的探讨sushi重复蛋白X连锁2(SRPX2)对人肝癌细胞MHCC97H侵袭与迁移能力的影响及作用机制。方法体外培养人肝癌细胞MHCC97H,用Lipofectamine法将阴性对照和SRPX2特异性siRNA转染到人肝细胞癌MHCC97H,继续培养48 h收获细胞,用Transwell检测细胞体外侵袭和迁移能力;实时荧光RT-PCR法检测人肝癌细胞MHCC97H内SRPX2和基质金属蛋白酶(MMP2)mRNA表达的影响;Western Blot法检测人肝癌细胞MHCC97H内SRPX2和MMP2蛋白水平的影响。结果与阴性对照组比较,干扰SRPX2组人肝癌细胞MHCC97H侵袭、迁移能力、SRPX2 mRNA、MMP-2 mRNA、SRPX2蛋白和MMP-2蛋白降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SRPX2可能通过调节MMP2而影响人肝癌细胞MHCC97H侵袭和迁移。 展开更多
关键词 sushi重复蛋白X连锁2 人肝癌细胞mhcc97h 基质金属蛋白酶 细胞侵袭 细胞迁移
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DAPT对人肝癌细胞MHCC97H裸鼠皮下移植瘤生长的影响
2
作者 司云飞 吴德全 +2 位作者 胡彦华 裘铠杰 李大川 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2015年第9期1050-1052,共3页
目的探讨DAPT对人肝癌细胞MHCC97H裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法人肝癌细胞株MHCC97H接种于3~4周鼠龄的雄性裸鼠BALB/C-nu背部1周,建立裸鼠皮下移植瘤模型,记录裸鼠体质量。24只成瘤裸鼠随机分为4组,高剂量DAPT组（10 mg/kg,0.03 ml/... 目的探讨DAPT对人肝癌细胞MHCC97H裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法人肝癌细胞株MHCC97H接种于3~4周鼠龄的雄性裸鼠BALB/C-nu背部1周,建立裸鼠皮下移植瘤模型,记录裸鼠体质量。24只成瘤裸鼠随机分为4组,高剂量DAPT组（10 mg/kg,0.03 ml/只）、低剂量DAPT组（5 mg/kg,0.03 ml/只）、DAPT溶剂二甲基亚砜（DMSO）对照组（0.05%,0.03 ml/只）、空白对照组（生理盐水,0.03 ml/只）,腹腔注射给药。间隔2 d给药1次,共6次。观察裸鼠肿瘤生长情况及生存状态。于末次给药48 h后采用颈椎脱臼法处死全部裸鼠,称量裸鼠体质量,解剖瘤体,测量肿瘤体积,计算抑瘤率。结果药物干预前,4组移植瘤模型的裸鼠体质量差异无统计学意义（P〉0.05）;药物干预后,高剂量DAPT组与低剂量DAPT组较其他两组生存状态佳,高剂量DAPT组裸鼠体质量明显高于其他3组,差异有统计学意义（P〈0.05）;相比于其他3组,高剂量DAPT组移植瘤体积最小,差异有统计学意义（P〈0.05）;高剂量DAPT组及低剂量DAPT组的抑瘤率分别与DMSO对照组及空白对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 DAPT抑制人肝癌细胞MHCC97H裸鼠皮下移植瘤生长,改善人肝癌细胞MHCC97H荷瘤裸鼠的生存状态。 展开更多
关键词 DAPT 移植瘤 人肝癌细胞mhcc97h Notch细胞信号
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益气化瘀解毒方对人肝癌细胞MHCC97-H迁移能力及趋化因子CXCL12、CXCR4、CXCR7表达的影响 被引量：9
3
作者 郜文辉 曾普华 +5 位作者 黄惠勇 叶书林 潘敏求 周芳 李为 刘丹 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2018年第7期41-43,共3页
目的观察益气化瘀解毒方对人肝癌细胞MHCC97-H迁移能力及趋化因子CXCL12、CXCR4、CXCR7表达的影响,探讨其相关作用机制。方法以索拉非尼为阳性对照,CCK-8法测定益气化瘀解毒方及索拉非尼对MHCC97-H细胞增殖的作用及最佳作用浓度,划痕实... 目的观察益气化瘀解毒方对人肝癌细胞MHCC97-H迁移能力及趋化因子CXCL12、CXCR4、CXCR7表达的影响,探讨其相关作用机制。方法以索拉非尼为阳性对照,CCK-8法测定益气化瘀解毒方及索拉非尼对MHCC97-H细胞增殖的作用及最佳作用浓度,划痕实验观察MHCC97-H细胞迁移能力;Western blot检测药物干预24 h后CXCL12、CXCR4、CXCR7的蛋白表达。结果益气化瘀解毒方及索拉非尼均能抑制MHCC97-H细胞生长,24 h半数抑制浓度分别为0.095 g/m L、10μmol/m L;益气化瘀解毒方及索拉非尼均有抑制MHCC97-H迁移的能力;经益气化瘀解毒方干预后,MHCC9-H细胞CXCL12、CXCR4、CXCR7蛋白表达量均下降。结论益气化瘀解毒方能抑制MHCC97-H细胞增殖及迁移,其机制可能是通过下调CXCL12/CXCR4/CXCR7趋化因子轴发挥作用。 展开更多
关键词 益气化瘀解毒方 索拉非尼 人肝癌细胞mhcc97-h 趋化因子
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臭牡丹含药血清抑制人肝癌MHCC97-H细胞侵袭与迁移的作用及其机制研究 被引量：6
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作者 胡琦 朱定耀 +3 位作者 谭小宁 李勇敏 蒋佳红 朱克俭 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第21期2691-2694,共4页
目的探讨臭牡丹含药血清对人肝癌细胞(MHCC97-H细胞)迁移与侵袭能力的影响及其机制。方法按照体重将SD大鼠随机分成4组:模型组和低、中、高3个剂量实验组,每组5只。低、中、高3个剂量实验组给予臭牡丹提取物0.55,1.09,2.18 g·kg^-1... 目的探讨臭牡丹含药血清对人肝癌细胞(MHCC97-H细胞)迁移与侵袭能力的影响及其机制。方法按照体重将SD大鼠随机分成4组:模型组和低、中、高3个剂量实验组,每组5只。低、中、高3个剂量实验组给予臭牡丹提取物0.55,1.09,2.18 g·kg^-1;模型组给予0.9%Na Cl,每日灌胃2次,连续3 d。腹主动脉取血后分离血清,制备各组含药血清,体外培养MHCC97-H细胞。Transwell实验检测细胞的迁移能力;免疫印迹法检测磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路中的磷酸Akt(p-Akt)和PI3K相关蛋白表达的影响。结果模型组和低、中、高3个剂量实验组的迁移细胞数分别为(256.0±28.6),(181.0±15.7),(118.0±14.7)和(66.0±12.4)个,3个实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)。模型组和低、中、高3个剂量实验组的PI3K蛋白相对表达量(灰度值)分别为0.68±0.03,0.65±0.02,0.48±0.01和0.15±0.01;上述这4组的p-Akt蛋白相对表达量(灰度值)分别为0.37±0.04,0.33±0.02,0.25±0.01和0.09±0.01,中、高2个剂量实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论臭牡丹含药血清具有抑制肝癌MHCC97-H细胞迁移和侵袭的作用,其作用机制可能与PI3K/Akt信号通路相关。 展开更多
关键词 臭牡丹 人肝癌细胞mhcc97-h 侵袭 迁移 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路
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反义皮层肌动蛋白基因对肝癌细胞功能影响的研究 被引量：3
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作者 许朱定 窦科峰 +2 位作者 宋振顺 李韧 张福琴 《现代肿瘤医学》 CAS 2006年第6期651-654,共4页
目的:将反义的皮层肌动蛋白(cortactin)基因转染入人肝癌细胞中,观察其表达效果及其对细胞本身的影响以及该基因在肝癌细胞转移中的作用。方法:Trizol试剂法提取体外培养的人肝癌高转移细胞株MHCC97总RNA,经逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR... 目的:将反义的皮层肌动蛋白(cortactin)基因转染入人肝癌细胞中,观察其表达效果及其对细胞本身的影响以及该基因在肝癌细胞转移中的作用。方法:Trizol试剂法提取体外培养的人肝癌高转移细胞株MHCC97总RNA,经逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增目的片段,PCR产物及真核表达载体分别双酶切后进行连接,并转化入大肠杆菌Ecoli.Dh5α扩增以获得重组质粒。重组质粒、空质粒分别转染入人高转移肝癌细胞株,进行扩增培养,分别绘制MHCC97/vect-cortactin(+)、MHCC97/vect和MHCC97细胞生长曲线;并进行Western-blot实验及通过小室培养模型进行细胞侵袭力实验。结果:RT-PCR获得预期大小的特异性DNA片段,经PCR、双酶切鉴定及测序证实人皮层肌动蛋白基因cDNA片段已正确的反向插入真核表达载体中。细胞生长曲线提示转染与未转染该基因的肝癌细胞生长曲线相同;Western-blot结果显示转染反义基因的肝癌细胞皮层肌动蛋白cortactin呈低表达或不表达;细胞侵袭力实验表明转染有反义基因的肝癌细胞穿膜细胞数较未转染的有非常显著差异(P<0.01)。结论:从蛋白水平和细胞水平均证实该反义基因能抑制肝癌细胞的皮层肌动蛋白的表达和游走而不影响细胞的生长特性。 展开更多
关键词 高转移肝癌细胞mhcc97 人皮层肌动蛋白cortactin 转膜腔培养 转移
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反义cortactin基因真核重组质粒的构建及鉴定
6
作者 许朱定 宋振顺 +3 位作者 安家泽 李韧 张福琴 窦科峰 《第四军医大学学报》 北大核心 2006年第8期720-722,共3页
目的:构建一个包含人皮层肌动蛋白(cortactin)反义基因的全部功能区的重组真核表达载体pcDNA3.0/cortac-tin,为进一步研究人皮层肌动蛋白对人肝癌细胞的转移影响的研究奠定基础.方法:Trizol试剂法提取体外培养的人肝癌高转移细胞株MHCC9... 目的:构建一个包含人皮层肌动蛋白(cortactin)反义基因的全部功能区的重组真核表达载体pcDNA3.0/cortac-tin,为进一步研究人皮层肌动蛋白对人肝癌细胞的转移影响的研究奠定基础.方法:Trizol试剂法提取体外培养的人肝癌高转移细胞株MHCC97总RNA,经逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增目的片段,PCR产物及真核表达载体分别双酶切后进行连接,并转化入大肠杆菌Ecoli.Dh5α扩增以获得重组载体.结果:RT-PCR获得预期大小的特异性DNA片段,经PCR、双酶切鉴定及测序证实已将人皮层肌动蛋白基因cDNA片段正确的反向插入真核表达载体中.结论:成功获得反义pcDNA3.0/cortactin重组质粒. 展开更多
关键词 基因表达 高转移肝癌细胞mhcc97 逆转录聚合酶链反应 人皮层肌动蛋白cortactin
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