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牛膝多糖刺激的DC联合CIK细胞对SW480的杀伤作用研究 被引量:10
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作者 周智东 夏大静 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1056-1060,共5页
从中药材牛膝中提取牛膝多糖(ABPS),用ABPS和/或SW480肿瘤抗原刺激的树突状细胞(DC)联合细胞因子诱导的杀伤性细胞(CIK)对结肠癌细胞株SW480进行杀伤试验,研究ABPS刺激的DC联合CIK细胞的抗肿瘤效果。分离人外周血单个核细胞培养成DC和CI... 从中药材牛膝中提取牛膝多糖(ABPS),用ABPS和/或SW480肿瘤抗原刺激的树突状细胞(DC)联合细胞因子诱导的杀伤性细胞(CIK)对结肠癌细胞株SW480进行杀伤试验,研究ABPS刺激的DC联合CIK细胞的抗肿瘤效果。分离人外周血单个核细胞培养成DC和CIK细胞。①把DC分成4个组合:单纯DC组作为对照组,ABPS刺激DC实验组(ABPS刺激的质量浓度为50mg·L-1),SW480肿瘤抗原刺激DC实验组,ABPS(50mg·L-1)和SW480肿瘤抗原联合刺激DC实验组,流式检测比较各组DC细胞表面分子CD80,CD86,CD11c,CD40,HLA-DR的阳性率的差异(每组均为6例样本)。②以上述4个组合的DC与CIK细胞以1:5比例混合共同作为效应细胞;以SW480肿瘤细胞株为靶细胞,设置效靶比分别为30:1,20:1及10:1,进行细胞杀伤活性试验,用CCK-8试剂盒检测、比较各组细胞杀伤活性的差异。③ELISA检测并比较上述细胞杀伤活性试验中效靶比为30:1的实验组各反应孔(3个复孔)上清液中细胞因子IL-2,IL-12p70,IL-17及TNF-α的分泌水平的差异。结果显示:①ABPS和SW480肿瘤抗原联合刺激的DC表面CD80,CD11c,HLA-DR的阳性率显著高于其他实验组的DC(P<0.05);CD86,CD40的阳性率显著高于单纯DC实验组(P<0.05),与其他实验组无显著差异。②在效靶比分别为30:1,20:1及10:1细胞杀伤活性试验中,ABPS刺激的DC+CIK细胞组、SW480肿瘤抗原刺激的DC+CIK细胞组对SW480肿瘤细胞株的杀伤活性显著高于DC+CIK细胞组(P<0.05);ABPS+SW480肿瘤抗原+DC+CIK实验组对SW480肿瘤细胞株的杀伤活性均显著高于其他实验组(P<0.05)。③效靶比为30:1的细胞杀伤活性试验中,ABPS+SW480抗原+DC+CIK细胞组上清液中IL-12p70,TNF-α的分泌水平高于其他实验组,差异具有统计学意义(P<0.05);IL-2,IL-17的分泌水平各组之间无显著差异。说明ABPS刺激的DC+CIK细胞对SW480肿瘤细胞株的杀伤活性显著提高,ABPS和SW480肿瘤抗原共同刺激DC能协同CIK提高对SW480肿瘤细胞株的杀� 展开更多
关键词 牛膝多糖 细胞因子诱导的杀伤细胞 树突状细胞 结肠癌细胞株(sw480) 细胞因子 细胞毒作用
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天马颗粒剂抑制人结肠癌细胞株SW480增殖机制研究 被引量:2
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作者 周晓丽 高宗跃 《中医学报》 CAS 2018年第4期511-516,共6页
目的:探讨天马颗粒剂抑制人结肠癌细胞株SW480增殖的作用,并对其增殖抑制作用机制进行初步探讨。方法:采用不同质量浓度的天马颗粒剂(10^(-1)g·mL^(-1)、10^(-2)g·mL^(-1)、10^(-3)g·mL^(-1)及10^(-4)g·mL^(-1))处... 目的:探讨天马颗粒剂抑制人结肠癌细胞株SW480增殖的作用,并对其增殖抑制作用机制进行初步探讨。方法:采用不同质量浓度的天马颗粒剂(10^(-1)g·mL^(-1)、10^(-2)g·mL^(-1)、10^(-3)g·mL^(-1)及10^(-4)g·mL^(-1))处理人结肠癌细胞株SW480,同时设立空白对照组(RPMI 1640培养液处理)及阳性对照组(以5-氟尿嘧啶处理)。观察SW480细胞的形态学动态变化,以MTT法检测各组SW480细胞的增殖情况,另以速率法检测各组SW480细胞中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)比活性的变化情况。建立人结肠癌细胞株SW480免疫抑制小鼠肾包膜下移植瘤模型,同时设立天马颗粒剂组(天马颗粒剂灌胃),空白对照组(生理盐水灌胃)及阳性对照组(5-氟尿嘧啶腹腔注射),8 d后采集肿瘤组织,以免疫组织化学法及图像分析技术定量检测各组移植瘤SW480细胞中Ki-67及PCNA基因的表达情况。结果:随着天马颗粒剂质量浓度的增加,SW480细胞逐渐稀疏,散在生长,细胞变大,透明度差,颗粒增多;当天马颗粒剂质量浓度为10^(-4)g·mL^(-1)时,SW480细胞颜色加深,且部分细胞从瓶壁脱落,甚至部分细胞可见坏死崩解的碎片;实验组10^(-1)g·mL^(-1)、10^(-2)g·mL^(-1)、10^(-3)g·mL^(-1)及10^(-4)g·mL^(-1)的天马颗粒剂均可显著抑制SW480细胞增殖,且随天马颗粒剂作用时间延长及质量浓度增大,SW480活细胞计数逐渐降低(P<0.05);随着质量浓度的增加OD值逐渐降低,增殖抑制率逐渐升高(P<0.05);10^(-1)g·mL^(-1)、10^(-2)g·mL^(-1)、10^(-3)g·mL^(-1)及10^(-4)g·mL^(-1)的天马颗粒剂均会使SW480细胞的AKP比活性升高,且以10^(-2)g·mL^(-1)时的AKP比活性最高,且显著高于其他各组(P<0.05或P<0.01)。阳性对照组AKP比活性与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);Ki-67及PCNA基因主要表达于SW480细胞的细胞核,天马颗粒剂组及阳性对照组Ki-67及PCNA基因阳性着色较空白对照组明显减少,其表达的面积均� 展开更多
关键词 结肠癌细胞株sw480 天马颗粒剂 5-氟尿嘧啶 细胞增殖 KI-67基因 PCNA基因 碱性磷酸酶比活性
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瘤果黑种草子总黄酮成分对结肠癌细胞株SW480增殖、迁移能力的影响及机制 被引量:1
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作者 热娜古丽.热依木 盛磊 +3 位作者 方磊 安加提.艾尼瓦尔 伊力亚尔.尼加提 艾尼娃尔.艾克木 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第9期2596-2601,共6页
目的探讨瘤果黑种草子总黄酮成分对人结肠癌细胞株SW480增殖、迁移能力的影响及可能的作用机制。方法用不同浓度的瘤果黑种草子总黄酮成分药物干预的结肠癌细胞株SW480,MTT法检测SW480细胞株的增殖能力,倒置显微镜观察对结肠癌细胞株SW... 目的探讨瘤果黑种草子总黄酮成分对人结肠癌细胞株SW480增殖、迁移能力的影响及可能的作用机制。方法用不同浓度的瘤果黑种草子总黄酮成分药物干预的结肠癌细胞株SW480,MTT法检测SW480细胞株的增殖能力,倒置显微镜观察对结肠癌细胞株SW480细胞形态的影响,划痕实验检测对细胞的迁移能力的影响,实时荧光定量PCR检测瘤果黑种草子总黄酮成分对细胞中BECN1、MAPILC3B基因表达的影响。结果瘤果黑种草子总黄酮对人结肠癌细胞株SW480体外增殖的抑制作用明显,并呈浓度依赖性抑制人结肠癌细胞株SW480的增殖,在25μg/mL时达到最大的抑制率,抑制率为81.28%。倒置显微镜观察,用瘤果黑种草子总黄酮成分药物干预后,人结肠癌细胞株SW480形态学发生明显变化,瘤果黑种草子总黄酮成分可抑制人结肠癌细胞株SW480迁移能力,同时,可上调自噬相关基因BECN1、MAPILC3B的表达量。结论瘤果黑种草子总黄酮成分可抑制人结肠癌细胞株SW480的增殖、迁移能力,机制可能与能影响细胞中BECN1、MAPILC3B基因表达量有关。 展开更多
关键词 瘤果黑种草子 总黄酮 结肠癌细胞株sw480 细胞增值 细胞迁移 自噬相关分子
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