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人结肠癌组织环加氧酶-2 mRNA剪接异构体片段分离与克隆 被引量：2
1
作者 万敬员 叶笃筠 +7 位作者 吴萍 黄云峰 孙伟 应红刚 盘茜 袁萍 张代娟 张力 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期467-470,共4页
目的　探讨人结肠癌组织中是否存在环加氧酶 2 (COX 2 )选择性剪接异构体的表达及其可能意义。方法针对人COX 2DNA第 7、 8外显子序列 ,设计一对全新引物 ,并采用RT PCR技术 ,从结肠癌组织中分离COX 2mRNA ,然后对电泳条带进行克隆、测... 目的　探讨人结肠癌组织中是否存在环加氧酶 2 (COX 2 )选择性剪接异构体的表达及其可能意义。方法针对人COX 2DNA第 7、 8外显子序列 ,设计一对全新引物 ,并采用RT PCR技术 ,从结肠癌组织中分离COX 2mRNA ,然后对电泳条带进行克隆、测序和分析。结果　正常结肠组织和结肠癌组织均发现COX 2目的条带 ( 2 5 2bp) ,但结肠癌组织则出现了一条新的电泳带 ( 5 34bp) ,经克隆和测序证实 ,该条带除目的条带的COX 2DNA的第7、 8外显子序列外 ,还包含第 7、 8外显子间的内含子序列 ,即保留的内含子 ( 2 82bp)。根据阅读框推测 ,在保留的内含子第 4 8～ 5 0碱基出现终止密码。结论　首次发现结肠癌组织中存在COX 2基因的选择性剪接异构体 (Genbankaccessionnumber:BU4 936 0 2 ,AY15 12 980 ) ,其所编码蛋白可能较已报道的COX 2酶蛋白小 ,且蛋白质的C末端缺少阿斯匹林作用位点。 展开更多
关键词 人结肠癌组织 环加氧酶-2 mRNA剪接异构体 分离 克隆
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miR-34与survivin基因在人结肠癌组织中的表达及意义
2
作者 王红芳 余细球 +1 位作者 叶静 范昭 《中国现代药物应用》 2021年第11期53-55,共3页
目的探讨微小核糖核酸-34(miR-34)与其靶基因生存素(survivin)在人结肠癌中的表达及意义。方法收集32例手术患者切除的新鲜组织,其中32份结肠癌组织标本(均为腺癌)作为癌症组,32份癌旁组织标本(据切缘>2 cm)作为癌旁组。采用荧光定... 目的探讨微小核糖核酸-34(miR-34)与其靶基因生存素(survivin)在人结肠癌中的表达及意义。方法收集32例手术患者切除的新鲜组织,其中32份结肠癌组织标本(均为腺癌)作为癌症组,32份癌旁组织标本(据切缘>2 cm)作为癌旁组。采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)技术检测miR-34和survivin基因在癌症组和癌旁组中的转录表达水平,并进行比较。结果miR-34a和miR-34b/c基因表达在癌症组组织中均低于癌旁组,差异有统计学意义(P<0.05);在癌症组组织中miR-34b/c表达较miR-34a水平降低更显著,survivin表达增加较癌旁组增高,差异有统计学意义(P<0.05);miR-34a和miR-34b/c与survivin在结肠癌癌组织中表达水平呈显著负相关(r=-0.43、-0.51,P<0.05)。结论miR-34家族在结肠腺癌中作为抑癌基因发挥作用,可以负性调节survivin的表达,为结肠癌的临床诊治提供新的靶点和思路。 展开更多
关键词 人结肠癌组织 微小核糖核酸-34基因 生存素基因
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ULBP3胞外段基因的克隆与表达
3
作者 王玲 王宏 +2 位作者 徐莘香 王丽颖 于永利 《中国骨肿瘤骨病》 CAS 2004年第6期355-357,365,共4页
目的　为了研究ULBP3刺激NK细胞增殖分化的功能 ,首先需构建、表达ULBP3胞外段重组蛋白。方法　用RT -PCR方法从人结肠癌组织中钓取ULBP3胞外段基因 ,构建pET3 2a原核表达载体 ,转化大肠杆菌BL2 1 ,以IPTG诱导表达 ,Westernblot鉴定。... 目的　为了研究ULBP3刺激NK细胞增殖分化的功能 ,首先需构建、表达ULBP3胞外段重组蛋白。方法　用RT -PCR方法从人结肠癌组织中钓取ULBP3胞外段基因 ,构建pET3 2a原核表达载体 ,转化大肠杆菌BL2 1 ,以IPTG诱导表达 ,Westernblot鉴定。结果　经测序证实 ,所获得的cDNA克隆为ULBP3胞外段基因 ,其序列与genebank中已经发表的序列完全一致 ,pET3 2a原核表达载体转化大肠杆菌BL2 1后 ,经筛选获得的阳性重组菌稳定表达ULBP3胞外段重组蛋白。结论　成功表达了ULBP3胞外段重组蛋白 ,可用于进一步研究ULBP3刺激NK细胞增殖分化的功能。 展开更多
关键词 胞外段 基因 RT-PCR方法 细胞增殖分化 原核表达载体 Western 重组蛋白 人结肠癌组织 cDNA克隆 BL21 大肠杆菌 诱导表达 BLOT 稳定表达 重组菌 步研究 NK 转化 序列
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