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毛细管电泳用于测定人绒促性素的解离亚基及其质量控制 被引量：3
1
作者 邓钦培 安然 +4 位作者 徐通泽 何丽秀 孙梦梅 杨嘉明 彭育才 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期430-435,共6页
人绒促性素(hCG)是用于治疗不孕症等的常用药物。其由α亚基和β亚基组成,研究发现hCG在生产及储存过程中均可能产生亚基的解离,从而影响其活性。本文旨在建立hCG解离亚基的测定方法,通过考察样品制备缓冲体系、样品制备温度、分离电压... 人绒促性素(hCG)是用于治疗不孕症等的常用药物。其由α亚基和β亚基组成,研究发现hCG在生产及储存过程中均可能产生亚基的解离,从而影响其活性。本文旨在建立hCG解离亚基的测定方法,通过考察样品制备缓冲体系、样品制备温度、分离电压、毛细管温度等,建立了毛细管电泳(CE-SDS)定量测定hCG解离亚基的方法。方法验证结果表明,α亚基和β亚基含量具有良好的灵敏度、线性、准确度和精密度,优于传统的凝胶电泳SDS-PAGE。本文所开发的方法适用于不同来源的hCG,并可应用于指导工艺开发及稳定性研究。因此,该方法应作为hCG生物制品的重要质控方法。 展开更多
关键词 人绒促性素 毛细管电泳 凝胶电泳 解离亚基 质量控制
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人绒促性素单克隆抗体的制备与分离纯化 被引量：2
2
作者 沈泓 易喻 +3 位作者 梅建凤 朱克寅 李敏 应国清 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期22-25,共4页
目的制备人绒促性素(hCG)单克隆抗体。方法hCG抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0按5∶1融合,间接ELISA法筛选阳性孔,有限稀释法进行克隆化培养;制备腹水抗体;间接ELISA法测定抗体效价;采用HiTrap rProtein A FF亲和... 目的制备人绒促性素(hCG)单克隆抗体。方法hCG抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0按5∶1融合,间接ELISA法筛选阳性孔,有限稀释法进行克隆化培养;制备腹水抗体;间接ELISA法测定抗体效价;采用HiTrap rProtein A FF亲和色谱柱纯化抗体。结果得到2株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,细胞培养上清中抗体效价达10-3以上,腹水抗体效价达10-7以上,纯化后的单抗纯度达98%以上,回收率达75%。结论成功获得两株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞,可用于早孕、肿瘤等诊断的研究。 展开更多
关键词 人绒促性素 单克隆抗体 杂交瘤细胞
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人绒促性素粗品制备新工艺
3
作者 魏经建 王天元 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2002年第5期241-242,共2页
目的寻求人绒促性素 (HCG)的高效吸附剂。方法用色谱硅胶吸附孕妇尿中的HCG ,用酶联免疫HCG定量法分别检测原尿、硅胶吸附后上清液和洗脱液中HCG的总效价 ,计算硅胶对HCG的吸附率及洗脱率。结果硅胶对孕妇尿中HCG的平均吸附率为 (99.6&#... 目的寻求人绒促性素 (HCG)的高效吸附剂。方法用色谱硅胶吸附孕妇尿中的HCG ,用酶联免疫HCG定量法分别检测原尿、硅胶吸附后上清液和洗脱液中HCG的总效价 ,计算硅胶对HCG的吸附率及洗脱率。结果硅胶对孕妇尿中HCG的平均吸附率为 (99.6± 1.2 ) % ,HCG从硅胶上的洗脱平均回收率为 (79.2± 13.3) % ,原尿HCG的总活性平均回收率为 (6 1.3± 11.9) %。结论硅胶是一种理想的孕妇尿中HCG高效吸附剂 。 展开更多
关键词 人绒促性素 硅胶 吸附剂 制备工艺
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重组人绒促性素注射后不同取卵时间的IVF结局
4
作者 贾晓丽 陈艳 《国际医药卫生导报》 2012年第13期1887-1889,共3页
目的探讨注射重组人绒促性素（rHCG）后不同时间的取卵对IVF（体外受精-胚胎移植）结局的影响。方法收集2010年3月至2011年7月在韶关市妇幼保健院生殖中心行体外受精-胚胎移植（IVF—ET）及卵胞浆内单精子注射（ICSI）的不孕患者204个... 目的探讨注射重组人绒促性素（rHCG）后不同时间的取卵对IVF（体外受精-胚胎移植）结局的影响。方法收集2010年3月至2011年7月在韶关市妇幼保健院生殖中心行体外受精-胚胎移植（IVF—ET）及卵胞浆内单精子注射（ICSI）的不孕患者204个周期，根据注射rHCG后的取卵时间不同分为34～36h优胚数、临床妊娠率进行回顾性分析。结果获卵率：34-36h组为（73．8±20．5）％，36。37h组为（78．9±22．8）％，差异有显著性（P〈0．05）；M11卵子比例：34～36h组为（69．1±21．3）％，36～37h组（73．7±21．5）％，差异有显著性（P〈0．05）；受精率：34～36h组为（73．3±19．5）％，36。37h组为（78．9±22．1）％，差异有显著性（P〈0．05）；卵裂率：34～36h组为（88．3±9．5）％低于36。37h组为（90．1±9．8）％，差异无显著性（P〉0．05），但有增高趋势；优胚数：34—36h组为（3．9±1．5）个低于36～37h组为（4．2±1．8）个，差异无显著性（P〉0．05），但有增高趋势；临床妊娠率：34—36h组为40．8％，低于36～37h组的42．9％，两组差异无显著性，但有增高趋势。结论r—HCG注射后36～37h取卵，获卵率、M11卵子比例、受精率均较34—36h取卵高，卵裂率、优胚数、临床妊娠率有增加趋势。 展开更多
关键词 辅助生殖 重组人绒促性素 IVF结局
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第1批重组人绒促性素(生物测定用)国家标准品的制备与协作标定
5
作者 李湛军 梁誉龄 +12 位作者 李懿 胡馨月 胡宇驰 曹春然 魏霞 祝清芬 张娟 冯润东 王莉芳 何丽秀 李晶 张慧 梁成罡 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期68-77,共10页
目的:制备并标定第1批重组人绒促性素(recombinant human chorionic gonadotrophin,rHCG)国家标准品(生物测定用)。方法:以WHO第5批绒促性素国际标准品07/364效价为162 IU·瓶^(-1)作为标准,采用2020年版《中华人民共和国药典》四部... 目的:制备并标定第1批重组人绒促性素(recombinant human chorionic gonadotrophin,rHCG)国家标准品(生物测定用)。方法:以WHO第5批绒促性素国际标准品07/364效价为162 IU·瓶^(-1)作为标准,采用2020年版《中华人民共和国药典》四部1209绒促性素生物测定法,联合5个实验室对第1批rHCG待标品进行生物活性协作标定。对待标品原液进行了等电点、肽图、相对分子质量测定等结构确认。对待标品进行了紫外分光光度法蛋白含量测定、SEC-HPLC法纯度和聚体分析、RP-HPLC法氧化亚基分析等关键理化性质分析,并进行了稳定性考察。结果:,rHCG素待标品经协作标定,最终定值其生物效价为6400 IU·瓶^(-1);,rHCG素含量约为290μg·瓶^(-1),SEC-HPLC纯度约为100%。结构确认结果符合要求;聚体、解离亚基、氧化亚基等各项理化指标符合规定;稳定性考察结果满足要求。结论:本批待标品可作为第1批rHCG国家标准品,以供rHCG及相关制剂的生物效价测定用,定值为6400 IU·瓶^(-1)。 展开更多
关键词 重组人绒促性素(rHCG) 国家标准品 体内生物测定 生物效价 协作标定 理化测定 结构确认
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