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人线粒体DNA聚合酶基因的克隆及序列分析 被引量：2
1
作者 金洪涛 赵晶华 盛彦敏 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2015年第9期926-928,933,共4页
目的克隆人线粒体DNA聚合酶(polymerase gama,Polγ)的全长编码基因POLG,并进行序列分析。方法参考Gen Bank中登录的POLG c DNA序列设计2对特异性引物,采用RT-PCR法分别从He La细胞中进行分段扩增,再克隆至载体p MD18-T中,经双酶切及测... 目的克隆人线粒体DNA聚合酶(polymerase gama,Polγ)的全长编码基因POLG,并进行序列分析。方法参考Gen Bank中登录的POLG c DNA序列设计2对特异性引物,采用RT-PCR法分别从He La细胞中进行分段扩增,再克隆至载体p MD18-T中,经双酶切及测序鉴定后拼接POLG全长基因,应用Phylip软件绘制系统进化树,分析Polγ与其他物种间的系统进化关系。结果双酶切及测序鉴定证明,重组质粒构建正确;人POLG基因位于西部低地大猩猩所形成的基础分支中,与其亲缘关系较近的物种包括黑猩猩和倭黑猩猩等高等灵长类哺乳动物。结论成功克隆了人Polγ基因,其变异较大,物种间差异显著,本实验为Polγ酶活性和酶作用机制的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 人线粒体dna聚合酶基因 克隆 序列分析
原文传递
等位基因特异性PCR检测人线粒体DNA11778突变位点及其临床意义 被引量：3
2
作者 林经安 童绎 +2 位作者 陈君敏 陈贻凯 林玲 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期276-276,共1页
关键词 人线粒体dna 第11778位点 视神经萎缩 LHON 基因突变 等位基因特异性PCR
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