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禽流感病毒非结构蛋白1单克隆抗体的制备及其特异性分析 被引量:4
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作者 丁细霞 Hoi-wah Tsoi +5 位作者 陈伟俊 丘立文 王压娣 廖志勇 袁国勇 车小燕 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期493-498,共6页
为研制禽流感病毒(H5N1)非结构蛋白1(NS1)的特异性单克隆抗体(mAb),并鉴定其特异性,本研究在分别表达了具有良好抗原性的A/Vietnam/1194/04(H5N1)-NS1和A/HongKong/486/97(H5N1)-NS1重组蛋白基础上,用A/Viet-nam/1194/04(H5N1)-NS1蛋白... 为研制禽流感病毒(H5N1)非结构蛋白1(NS1)的特异性单克隆抗体(mAb),并鉴定其特异性,本研究在分别表达了具有良好抗原性的A/Vietnam/1194/04(H5N1)-NS1和A/HongKong/486/97(H5N1)-NS1重组蛋白基础上,用A/Viet-nam/1194/04(H5N1)-NS1蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合,间接ELISA筛选阳性的杂交瘤细胞,并结合免疫荧光和免疫印迹对抗体的特异性进行鉴定,通过竞争抑制实验对单抗识别的抗原位点进行分析。结果共获得19株能识别4个H5N1-NS1蛋白不同抗原位点的mAb,亚类测定显示,5株为IgG2a、1株为IgG2b,另外13株为IgG1。这些mAb均与A/Vietnam/1194/04(H5N1)-NS1和A/HongKong/486/97(H5N1)-NS1重组蛋白特异性结合,免疫荧光检测均与A型流感病毒(H1N1和H3N2)有交叉反应,而与B型流感病毒无交叉现象。表明成功获得特异性针对H5N1-NS1蛋白的mAb,为进一步研究禽流感病毒NS1蛋白的结构与功能奠定基础。 展开更多
关键词 禽流感病毒(h5n1) 非结构蛋白 单克隆抗体
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禽流感病毒感染小鼠模型病理损伤及抗原定位研究 被引量:1
2
作者 孙世惠 赵光宇 +5 位作者 于虹 郭彦 吴小红 范薇 曾林 周育森 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1033-1036,共4页
目的通过建立高致病性禽流感H5N1病毒感染小鼠模型,研究病毒感染致小鼠组织病理损伤、病毒抗原在体内分布及复制特点,为禽流感病毒传播途径及致病机理研究提供实验依据。方法采用A/vietnam/1194/2004(H5N1)病毒株,滴鼻感染BALB/c小鼠,5 ... 目的通过建立高致病性禽流感H5N1病毒感染小鼠模型,研究病毒感染致小鼠组织病理损伤、病毒抗原在体内分布及复制特点,为禽流感病毒传播途径及致病机理研究提供实验依据。方法采用A/vietnam/1194/2004(H5N1)病毒株,滴鼻感染BALB/c小鼠,5 d后取小鼠肺、脑、脾、肠、心、肝、肾等组织,制备石蜡切片并进行组织病理损伤和抗原定位研究。结果小鼠肺组织表现为弥漫性肺损伤,脑组织出现轻度炎症反应,脾组织结构完整但脾小体可见凋亡细胞,其它脏器组织结构未查见组织病理损伤;利用M2、NS1单抗,采用免疫组织化学方法检测发现小鼠肺、脑、肠等均有M2、NS1抗原分布。结论高致病性H5N1病毒感染可在小鼠肺、脑、肠等多种组织中复制,引起严重的肺组织病理损伤及轻度的脑组织及脾组织病理损伤。 展开更多
关键词 禽流感病毒(h5n1) 病理损伤 病毒复制
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浙江省人禽流感病毒Zhejiang/16/2006株的基因特性分析
3
作者 卢亦愚 严菊英 +6 位作者 徐昌平 茅海燕 冯燕 陈寅 李榛 李敏红 史雯 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期351-355,共5页
目的分析浙江省首例报道的人禽流感H5N1病毒株A/Zhejiang/16/2006的基因特性与系统进化关系。方法对A/zhejiang/16/2006病毒株的全序列8个基因片段作序列测定,并与国内外相关病毒株进行同源性与系统进化比较。结果A/Zhejiang/16... 目的分析浙江省首例报道的人禽流感H5N1病毒株A/Zhejiang/16/2006的基因特性与系统进化关系。方法对A/zhejiang/16/2006病毒株的全序列8个基因片段作序列测定,并与国内外相关病毒株进行同源性与系统进化比较。结果A/Zhejiang/16/2006的HA序列,与周边国家和地区的H5N1病毒株之间存在11个氨基酸的差异,但这些差异并未影响到相关糖基化位点的稳定;在NA区,1997年以后的毒株均缺少第49~68位的20个氨基酸。总体上中国大陆近年H5N1毒株的8个基因片段与周边国家和地区毒株相比形成另一个分支,并与1996—1997年香港及广东的H5N1毒株之间存在较大差异,但有个别毒株的基因片段在系统进化树上远离当前的毒株而更接近1997年的病毒株。结论A/Zhejiang/16/2006与中国大陆近年的病毒株自成一个体系,与周边国家和地区的H5N1病毒株之间存在一定差异。 展开更多
关键词 禽流感病毒(h5n1) 基因特性 A/浙江/16/2006
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国外家禽快讯
4
《养禽与禽病防治》 北大核心 2005年第7期44-45,共2页
关键词 肉质 生肉 熟肉 微量元素 维生素B 番鸭 禽流感病毒h5n7 肠炎沙门氏杆菌Ⅰ型菌毛 紫花苜蓿 蛋鸡 饲料
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禽流感病毒血凝素H5特异性单克隆抗体的制备及ELISA捕获法的建立 被引量:9
5
作者 廖志勇 王压娣 +4 位作者 温坤 丘立文 狄飚 袁国勇 车小燕 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期339-343,共5页
目的制备和鉴定禽流感病毒(H5N1)血凝素(H5)特异性单克隆抗体(mAb),建立H5抗原的双抗体夹心ELISA捕获法。方法以H5血凝素和携带H5全长基因的质粒免疫Balb/c小鼠制备mAb,利用血凝抑制(HI)实验筛选和鉴定,通过竞争抑制试验分析抗... 目的制备和鉴定禽流感病毒(H5N1)血凝素(H5)特异性单克隆抗体(mAb),建立H5抗原的双抗体夹心ELISA捕获法。方法以H5血凝素和携带H5全长基因的质粒免疫Balb/c小鼠制备mAb,利用血凝抑制(HI)实验筛选和鉴定,通过竞争抑制试验分析抗体识别表位,并采用抗体配对试验筛选捕获抗体和检测抗体,建立测定H5抗原的双抗体夹心ELISA捕获法。结果获得16株特异性针对H5的单克隆抗体,与A型流感病毒H1、H3、H7、H9和B型流感病毒的血凝素无HI交叉反应,对H5血凝素的血凝抑制效价为1∶100-1∶51200;通过配对实验,建立以单克隆抗体H5M9为捕获抗体,辣根过氧化物酶标记单克隆抗体H5M11为检测抗体的双抗体夹心ELISA;检测多株H5N1病毒和H5血凝素的最低检出值为1/32血凝单位,检测A型流感病毒H1N1、H3N2、B型流感病毒以及H7、H9血凝素均为阴性。结论建立了一种灵敏度高、特异性强的测定H5抗原的ELISA捕获法,可应用于禽流感病毒H5N1感染的实验室早期诊断。 展开更多
关键词 禽流感病毒h5n1 h5血凝素 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验
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湖北省首例人感染高致病性禽流感病例的流行病学调查 被引量:9
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作者 官旭华 张险峰 +7 位作者 张瑜 刘公平 袁方玉 霍细香 邢学森 彭延 向妮娟 余宏杰 《中国热带医学》 CAS 2007年第10期1783-1785,1885,共4页
目的通过对1例人感染高致病性禽流感病毒(H5N1)的调查分析,为科学防控提供依据。方法采用病例流行病学调查方法,调查病例发病经过、可能的感染来源、传播途径及暴露因素等,医学观察患者的密切接触者,同时对患者进行临床诊治、实验室检... 目的通过对1例人感染高致病性禽流感病毒(H5N1)的调查分析,为科学防控提供依据。方法采用病例流行病学调查方法,调查病例发病经过、可能的感染来源、传播途径及暴露因素等,医学观察患者的密切接触者,同时对患者进行临床诊治、实验室检测。结果确诊1例人感染高致病性禽流感病毒(H5N1),经救治无效死亡。患者无明确病死禽接触史,有健康禽接触史。实验室检测鼻分泌物和下呼吸道灌洗物均分离出禽流感病毒H5N1,下呼吸道灌洗物禽流感病毒H5N1核酸阳性。患者的密切接触者中均未发现异常临床表现。结论存在感染来源不明的人禽流感病例,需加强不明原因肺炎监测和进一步研究人禽流感有关危险因素。 展开更多
关键词 感染高致病性禽流感病毒(h5n1) 流行病学 防控
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一例人感染高致病性禽流感病毒(H5N1)的流行病学调查 被引量:9
7
作者 王勇 何益新 +6 位作者 李群 吴家兵 韩从明 李贤相 赵武 熊传龙 王平 《疾病监测》 CAS 2006年第3期117-119,122,共4页
目的通过对1例人感染高致病性禽流感病毒(H5N1)的调查分析,为制定人禽流感预防控制措施提供科学依据。方法采用流行病学调查、临床检查、血清学检查和 RT-PCR、 Real-time PCR 法进行分析和诊断。结果发现1例人感染高致病性禽流感病毒(H... 目的通过对1例人感染高致病性禽流感病毒(H5N1)的调查分析,为制定人禽流感预防控制措施提供科学依据。方法采用流行病学调查、临床检查、血清学检查和 RT-PCR、 Real-time PCR 法进行分析和诊断。结果发现1例人感染高致病性禽流感病毒(H5N1),经救治无效因呼吸衰竭死亡。患者有明确的病、死禽接触史。采用隔离治疗、个人防护、医学观察、消毒等措施,疫情得到控制,未出现二代病例。结论需加强禽流感疫情监测,采取综合防控措施,预防疫情再次发生。 展开更多
关键词 感染高致病性禽流感病毒(h5n1) 流行病学调查 综合防控措施
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155例甲型流感疑似患者血常规结果不典型变化分析 被引量:6
8
作者 寇翰林 陈耐新 +1 位作者 南京柱 张贺平 《中国实验诊断学》 2018年第10期1783-1786,共4页
甲型流感病毒根据H和N抗原不同,又分为许多亚型,其中H1N1、H3N2主要感染人类,而高致病性禽流感病毒H5N1、H7N9和H9N2等病毒亚型对人类已具有较大的潜在威胁[1,2]。在2009年至2016年我国流感流行主要以甲型H1N1亚型为主,共发生四次高峰,... 甲型流感病毒根据H和N抗原不同,又分为许多亚型,其中H1N1、H3N2主要感染人类,而高致病性禽流感病毒H5N1、H7N9和H9N2等病毒亚型对人类已具有较大的潜在威胁[1,2]。在2009年至2016年我国流感流行主要以甲型H1N1亚型为主,共发生四次高峰,主要在冬春季[3]。本研究拟通过回顾性分析155例疑似甲型流感病毒抗原阳性患者的外周血血常规结果及C-反应蛋白(CRP)结果, 展开更多
关键词 甲型流感病毒 疑似患者 血常规 禽流感病毒h5n1 病毒亚型 感染 2009年 h3n2
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基于HCR放大的无标记型荧光传感器的构建及H5N1 DNA检测
9
作者 龚亮 单秀芝 +2 位作者 朱琳 徐琳 汤力 《包装学报》 2024年第3期52-60,共9页
对于高致病性H5N1禽流感病毒,构建检测该病毒的高灵敏生物传感器,并与智能包装相结合用于实时监测,这对禽流感的防控具有重要意义。基于杂交链式反应(HCR)信号放大策略,以AgNCs作为荧光信号基团,构建了一种无标记“turn on”型荧光生物... 对于高致病性H5N1禽流感病毒,构建检测该病毒的高灵敏生物传感器,并与智能包装相结合用于实时监测,这对禽流感的防控具有重要意义。基于杂交链式反应(HCR)信号放大策略,以AgNCs作为荧光信号基团,构建了一种无标记“turn on”型荧光生物传感器用于检测代表H5N1病毒的H5N1基因序列。该传感器以H5N1 DNA作为触发剂引发HCR过程,使AgNCs产生强的荧光信号变化。研究表明,当H5N1 DNA浓度在0.2~800.0 nmol/L内,该传感器具有良好的响应信号,且在0.2~200.0 nmol/L之间的荧光强度与H5N1 DNA浓度呈线性相关,线性方程为y=10.982C+567.435(R^(2)=0.99273),检测限为176 pmol/L。核酸传感体系具有通用性,通过简单调整目标序列,可实现对不同目标物的特异性灵敏检测。该研究有望为高灵敏分析禽流感病毒标志物的通用传感平台设计提供思路。 展开更多
关键词 杂交链式反应 银纳米簇 荧光生物传感器 禽流感病毒标志物h5n1 DnA
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抗流行性感冒病毒药物研究进展 被引量:5
10
作者 陶小军 曹永孝 《中国医院药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期388-390,共3页
目的:介绍抗流行性感冒病毒(包括H5N1病毒)药物的研究进展、临床应用及耐药性。方法:采用近期国内外相关文献进行综述。结果:疫苗能有效预防流感的发生,抗病毒药物对流感的预防和治疗都有积极的效果,但其耐药性的发展不容忽视。结论:开... 目的:介绍抗流行性感冒病毒(包括H5N1病毒)药物的研究进展、临床应用及耐药性。方法:采用近期国内外相关文献进行综述。结果:疫苗能有效预防流感的发生,抗病毒药物对流感的预防和治疗都有积极的效果,但其耐药性的发展不容忽视。结论:开发应用新疫苗及特异性抗流感病毒药物M2蛋白抑制剂和神经氨酸酶抑制剂等仍是防治流感的基本手段。 展开更多
关键词 流行性感冒 疫苗 M2蛋白抑制剂 神经氨酸酶抑制剂 禽流感病毒h5n1
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H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的克隆及原核表达 被引量:4
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作者 朱春玉 孙婷婷 +5 位作者 郑方亮 艾海新 朱俊峰 王宁 商玲玲 刘宏生 《辽宁大学学报(自然科学版)》 CAS 2011年第2期143-148,共6页
克隆、表达和纯化禽流感病毒H5N1 NS1基因序列,为筛选与NS1相互作用的宿主蛋白以及深入研究NS1蛋白的功能打下基础.根据GenBank中收录的H5N1亚型禽流感病毒NS1基因序列,设计并合成一对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增AIV NS1基因,将酶切... 克隆、表达和纯化禽流感病毒H5N1 NS1基因序列,为筛选与NS1相互作用的宿主蛋白以及深入研究NS1蛋白的功能打下基础.根据GenBank中收录的H5N1亚型禽流感病毒NS1基因序列,设计并合成一对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增AIV NS1基因,将酶切处理后的基因片段定向克隆到原核表达载体pET-28a载体上,经酶切分析及序列测定正确后,鉴定出NS1基因的阳性重组子.阳性质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,用1 mmol/L IPTG诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE检测,获得预期蛋白的表达,通过Ni-NTA树脂蛋白纯化系统对NS1蛋白进行纯化.结果成功克隆H5N1亚型AIV的NSl基因,其核苷酸序列长度为678 bp,重组蛋白在大肠杆菌中可以高效表达,SDS-PAGE显示其相对分子质量与预计大小一致,表达产物在上清及包涵体中均有表达.经纯化,目的蛋白纯度高达90%,成功表达纯化出28KD的NS1融合蛋白并鉴定其免疫学活性.成功克隆和表达了禽流感病毒H5N1 NS1基因序列,为进一步研究NS1蛋白的生物学功能奠定了坚实基础. 展开更多
关键词 禽流感病毒h5n1 nS1蛋白 克隆 原核表达 纯化
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甲型流感病毒跨种传播机制研究进展 被引量:3
12
作者 朱云 周剑芳 +1 位作者 朱闻斐 舒跃龙 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期76-78,共3页
甲型流感病毒可感染多种宿主,包括禽以及雪貂、猪、马等哺乳类动物和人类,水禽是甲型流感病毒的天然宿主,大部分亚型病毒都已经从水禽中分离。一般来说,流感病毒感染具有较严格的宿主限制性,目前只有H1、H2、H3三种亚型流感病毒在... 甲型流感病毒可感染多种宿主,包括禽以及雪貂、猪、马等哺乳类动物和人类,水禽是甲型流感病毒的天然宿主,大部分亚型病毒都已经从水禽中分离。一般来说,流感病毒感染具有较严格的宿主限制性,目前只有H1、H2、H3三种亚型流感病毒在人群中流行,禽流感病毒H5N1、H9N2、H7N2、 展开更多
关键词 甲型流感病毒 传播机制 禽流感病毒h5n1 流感病毒感染 哺乳类动物 h9n2 宿主
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H5N1亚型禽流感病毒NS1基因截短体的克隆与原核表达 被引量:3
13
作者 郑方亮 朱春玉 +7 位作者 商玲玲 马杰良 孙婷婷 艾海新 朱俊峰 段艳婷 朱应 刘宏生 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第3期1-6,共6页
禽流感病毒H5N1 NS1蛋白是一种非结构蛋白,在病毒感染过程中发挥着重要的作用。构建基因截短的重组蛋白,可为进一步研究NS1不同结构域与宿主蛋白间的相互作用奠定基础。在成功克隆禽流感病毒H5N1全长NS1基因并测序的基础上,将部分截短... 禽流感病毒H5N1 NS1蛋白是一种非结构蛋白,在病毒感染过程中发挥着重要的作用。构建基因截短的重组蛋白,可为进一步研究NS1不同结构域与宿主蛋白间的相互作用奠定基础。在成功克隆禽流感病毒H5N1全长NS1基因并测序的基础上,将部分截短基因序列克隆到表达载体pET28a(+)上,构建基因截短的重组表达质粒pET28a-NS1-RBD和pET28a-NS1-ED,转化大肠埃希菌BL21(DE3),阳性重组质粒经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE检测,获得预期蛋白的表达,然后利用Ni-NTA树脂蛋白纯化系统对重组蛋白进行纯化,并通过Western Blotting进一步确认NS1及截短体蛋白的表达。结果表明,实验成功构建禽流感病毒H5N1亚型的NS1蛋白截短体,并在大肠埃希菌中高效表达,这为进一步研究NS1蛋白不同结构域与宿主蛋白的相互作用提供了实验材料,为深入研究NS1蛋白的生物学功能奠定了坚实基础。 展开更多
关键词 禽流感病毒h5n1 nS1 截短体 原核表达 纯化
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不同免疫状态的小鼠对禽流感病毒H5N1感染的敏感性及其机制探讨 被引量:2
14
作者 占玲俊 李枫棣 +6 位作者 吕琦 朵建英 鲍琳琳 邓巍 马春梅 许黎黎 秦川 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2012年第2期78-82,I0007,共6页
目的比较不同免疫状态的小鼠对禽流感病毒的易感性,并探讨可能的原因。方法四种免疫状态的小鼠,无菌BALB/c小鼠,SPF级BALB/c小鼠,SCID小鼠和nude小鼠,以10 TCID50的禽流感病毒50μL感染小鼠,观察小鼠的体重变化,存活率,各组织脏器的病... 目的比较不同免疫状态的小鼠对禽流感病毒的易感性,并探讨可能的原因。方法四种免疫状态的小鼠,无菌BALB/c小鼠,SPF级BALB/c小鼠,SCID小鼠和nude小鼠,以10 TCID50的禽流感病毒50μL感染小鼠,观察小鼠的体重变化,存活率,各组织脏器的病毒分布,肺组织的细胞因子变化和肺组织病理病变。结果四种小鼠均能感染禽流感病毒,其中,无菌小鼠对禽流感病毒H5N1的易感性最低,存活率最高。并且病毒在无菌鼠体内病毒的复制水平最低,细胞因子TNF-α,IL-12,MIP2,GATA3,IFN-a/β在感染后表达水平最低,其中第7天最低。结论无菌小鼠能感染禽流感病毒,但是相比较SPF级BALB/c小鼠,SCID小鼠和nude小鼠,其易感性最低,可能与病毒在组织内的低复制和细胞因子的低表达均有关。 展开更多
关键词 禽流感病毒h5n1 易感性 病毒复制 细胞因子 小鼠品系
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含H5N1禽流感病毒核酸序列的病毒样颗粒的制备及应用 被引量:2
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作者 戚宇华 崔仑标 +5 位作者 史智扬 葛以跃 李显 张文帅 单军 汪华 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期29-32,35,共5页
目的构建耐RNase酶的内含禽流感病毒H5N1亚型部分核酸序列的病毒样颗粒。方法构建中间载体pET32a-MS2,将禽流感病毒H5N1亚型的HA、NA和M基因片断连接到中间载体上,构建原核表达载体pET32a-MS2-HA,pET32a-MS2-NA和pET32a-MS2-M,分别转化... 目的构建耐RNase酶的内含禽流感病毒H5N1亚型部分核酸序列的病毒样颗粒。方法构建中间载体pET32a-MS2,将禽流感病毒H5N1亚型的HA、NA和M基因片断连接到中间载体上,构建原核表达载体pET32a-MS2-HA,pET32a-MS2-NA和pET32a-MS2-M,分别转化宿主菌,诱导表达制备病毒样颗粒。结果表达载体经PCR、酶切鉴定和测序分析后证实构建成功。电镜观察到了病毒样颗粒,荧光定量RT-PCR试验表明颗粒稳定性良好。结论成功构建了含禽流感病毒H5N1部分核酸序列的病毒样颗粒且稳定性良好,可作为禽流感H5N1亚型RNA检测的标准品和质控品。 展开更多
关键词 MS2噬菌体 禽流感病毒h5n1 病毒样颗粒 原核表达
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应对高致病性禽流感病毒H5N1抗原漂移的通用疫苗策略 被引量:2
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作者 马勇 徐晓龙 +1 位作者 王秀荣 陈化兰 《动物医学进展》 北大核心 2015年第5期111-115,共5页
高致病性禽流感病毒(HPAIV)H5N1不仅能造成严重的病理损伤,而且能够跨越种间隔离从禽类直接传播给人类,对人类健康造成巨大的威胁。疫苗免疫是应对HPAIV H5N1最常用的防控手段。但由于流感病毒具有抗原漂移和抗原转变的能力,只针对特定... 高致病性禽流感病毒(HPAIV)H5N1不仅能造成严重的病理损伤,而且能够跨越种间隔离从禽类直接传播给人类,对人类健康造成巨大的威胁。疫苗免疫是应对HPAIV H5N1最常用的防控手段。但由于流感病毒具有抗原漂移和抗原转变的能力,只针对特定流行株的常规疫苗不能够有效的应对毒株的不断变异。研制能够激发广泛保护作用的通用疫苗是应对HPAIV H5N1抗原漂移的一种有力措施,该类疫苗以流感病毒中高度保守的蛋白结构域,如M2蛋白胞外域(M2e)、HA蛋白的茎部结构域以及其他的保守抗原表位为免疫原,激发机体产生广泛的保护以应对不断变异的流感病毒。论文主要对现阶段通用疫苗的研究思路及进展做一梳理,以期能够为禽流感疫苗的研制提供有益的帮助。 展开更多
关键词 高致病性禽流感病毒h5n1 抗原漂移 通用疫苗
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H5N1亚型禽流感病毒性肺炎二例 被引量:1
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作者 廖昂 王荣品 +2 位作者 李亚英 邓奇平 刘昌杰 《中华放射学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期167-168,共2页
例1男,29岁.2009年1月16日因畏寒、发热2d入院.发病前1周有家禽接触史.体检:体温39.5℃,呼吸25次/min.急性病容,神清合作.咽红,扁桃体Ⅰ度肿大.双肺呼吸音粗,闻及少量细湿啰音.心率105次/min,律齐,未闻及杂音.腹平软,肝脾肋下未扪及.... 例1男,29岁.2009年1月16日因畏寒、发热2d入院.发病前1周有家禽接触史.体检:体温39.5℃,呼吸25次/min.急性病容,神清合作.咽红,扁桃体Ⅰ度肿大.双肺呼吸音粗,闻及少量细湿啰音.心率105次/min,律齐,未闻及杂音.腹平软,肝脾肋下未扪及.血常规:白细胞7.2×10^9/L,中性粒白细胞0.81,淋巴细胞0.09,血小板125×10^9/L.尿、便常规正常.生化检查:丙氨酸转氨酶59 U/L,谷氨酰转酞酶231 U/L,乳酸脱氢酶610 U/L.22日病原学检测:呼吸道分泌物检测禽流感病毒H5N1核酸阳性. 展开更多
关键词 流感病毒性肺炎 h5n1亚型 禽流感病毒h5n1 丙氨酸转氨酶 病原学检测 呼吸道分泌物 肺呼吸音
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禽流感病毒H5N1的重组酶介导检测方法学研究 被引量:1
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作者 陈淑丹 廖静 +5 位作者 王玲 罗鹏 郭利川 郑伟 吴忠华 应清界 《中国口岸科学技术》 2021年第3期4-9,共6页
采用逆转录-重组酶介导核酸扩增技术(Reverse Transcription Recombinase-aided amplification,RT-RAA)建立检测禽流感病毒H5N1的快速方法。根据禽流感病毒H5N1保守序列设计引物及探针,将H5N1 RNA逆转录为cDNA,然后以cDNA作模板,扩增检... 采用逆转录-重组酶介导核酸扩增技术(Reverse Transcription Recombinase-aided amplification,RT-RAA)建立检测禽流感病毒H5N1的快速方法。根据禽流感病毒H5N1保守序列设计引物及探针,将H5N1 RNA逆转录为cDNA,然后以cDNA作模板,扩增检测病毒核酸序列。本研究构建了带有H5N1核酸序列的质粒,以此为模板检测不同浓度的质粒,分析该方法的灵敏度,对已知样本进行检测来验证方法的特异性。设计的H5N1特异性引物和探针,能在39℃恒温下,10~30 min可有效扩增出相应病毒的核酸,与其他流感病毒无交叉反应;对质粒的检测灵敏度可达10拷贝。建立的RT-RAA检测禽流感病毒H5N1方法灵敏度和特异性均较高,且该方法操作简单,适用于禽流感病毒H5N1的快速检测。 展开更多
关键词 禽流感病毒h5n1 逆转录-重组酶介导核酸扩增技术(RT-RAA) 分子检测
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禽流感病毒分离鉴定及其NA基因克隆分析 被引量:1
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作者 金洪涛 夏志平 +2 位作者 王泽 连海 孙艳永 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第4期16-19,共4页
将疑似禽流感病死鸡病料组织研磨液接种SPF鸡胚分离病毒,尿囊分离毒经电镜观察后,应用特异性RT-PCR方法和血凝及血凝抑制试验进行分型检测,同时对核蛋白全长基因进行扩增测序分析。通过血凝及血凝抑制试验初步证实分离的禽流感病毒为H5... 将疑似禽流感病死鸡病料组织研磨液接种SPF鸡胚分离病毒,尿囊分离毒经电镜观察后,应用特异性RT-PCR方法和血凝及血凝抑制试验进行分型检测,同时对核蛋白全长基因进行扩增测序分析。通过血凝及血凝抑制试验初步证实分离的禽流感病毒为H5亚型,然后对分离株HA基因和NA基因进行RT-PCR分析,确定该分离株禽流感病毒为H5N1亚型。通过NA全基因扩增测序、Blast分析显示该分离株NA基因序列与已发表的毒株基因序列(EU429747)同源性为97%,但基因3′端发生明显变异。 展开更多
关键词 禽流感病毒h5n1 分离 鉴定 nA基因 hA基因
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中国南方地区3株H5N1亚型人禽流感病毒血凝素基因特性 被引量:1
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作者 房师松 何建凡 +3 位作者 程小雯 吕星 逯建华 张顺祥 《中国热带医学》 CAS 2007年第10期1747-1748,1752,共3页
目的研究中国南方地区H5N1亚型人禽流感病毒血凝素基因分子特征。方法从Genebank中下载中国南方地区3株H5N1亚型人禽流感病毒和其他国家或地区的16株代表性H5N1亚型人禽流感病毒血凝素基因序列,利用生物信息学软件DNASTAR 5.0进行核酸... 目的研究中国南方地区H5N1亚型人禽流感病毒血凝素基因分子特征。方法从Genebank中下载中国南方地区3株H5N1亚型人禽流感病毒和其他国家或地区的16株代表性H5N1亚型人禽流感病毒血凝素基因序列,利用生物信息学软件DNASTAR 5.0进行核酸同源性分析,用MEGA 3.1进行核酸和氨基酸序列比对和进化树分析。结果中国南方3株H5N1亚型人禽流感病毒HA蛋白的重链区和轻链区连接肽的序列为LRERRR-KR,与动物分离的高致病性H5N1亚型禽流感病毒和东南亚地区人禽流感病毒的连接肽相比,减少1个碱性氨基酸;共有8个潜在的糖基化位点,抗原决定簇位点有其独特的特征。基因进化树表明中国南方3株H5N1亚型人禽流感病毒HA基因位于单一的进化簇,与动物来源的高致病性禽流感病毒HA基因同源性高。结论中国南方3株H5N1亚型人禽流感病毒HA基因分子特征一致,有其显著的独有特点。提示候鸟或其他扩散因素在高致病性H5N1亚型流感病毒HA基因的重配方面扮演了重要的作用。 展开更多
关键词 禽流感病毒h5n1 基因序列 中国南方
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