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重组人神经肽Y受体Y5融合蛋白的表达、纯化及其生物信息学分析研究 被引量：1
1
作者 丁克祥 董萍 +6 位作者 郑永晨 杨永鹏 朱晓亮 韩晋云 单志新 丁宇 丁振华 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第20期2609-2613,共5页
目的在大肠杆菌中表达人神经肽YY5受体,并对之进行纯化、鉴定及生物信息学分析。方法取已构建好且经测序确认无误的重组质粒pET28a-Y5转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达融合蛋白,并经SDS-PAGE检测和Western印迹鉴定,表达产物包涵体经N... 目的在大肠杆菌中表达人神经肽YY5受体,并对之进行纯化、鉴定及生物信息学分析。方法取已构建好且经测序确认无误的重组质粒pET28a-Y5转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达融合蛋白,并经SDS-PAGE检测和Western印迹鉴定,表达产物包涵体经Ni2+-NTA亲和层析纯化。然后利用相关在线软件进行生物信息学分析Y5受体蛋白。结果经IPTG诱导含有pET28a-Y5重组质粒的DE3菌,表达出重组人Y5融合蛋白。重组蛋白经Ni2+-NTA亲和层析进行纯化后,得到了较高纯度的融合蛋白。经相关在线软件分析后获得了Y5受体的相关生物学特性。结论重组质粒pET28a-Y5在大肠杆菌DE3中成功表达,亲和层析纯化后获得较高纯度融合蛋白,并对Y5受体蛋白的生物学特征进行了预测,为进一步研究其生物学功能及其抗体的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 人神经肽yy5受体 融合蛋白 包涵体 纯化 生物信息学
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多巴胺D_1类受体对神经肽Y受体介导的促血管平滑肌细胞增殖的影响 被引量：3
2
作者 周永巧 王震 +7 位作者 刘莉 王微 韩愈 陈彩宇 任红梅 何多芬 杨剑 曾春雨 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期581-584,共4页
目的探讨多巴胺D1类受体对神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)受体介导的Sprague-Dawley(SD)大鼠原代血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的影响。方法以NPY(10-8～10-11mol/L)刺激SD大鼠胸主动脉培养的VSMCs,观察在D1类... 目的探讨多巴胺D1类受体对神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)受体介导的Sprague-Dawley(SD)大鼠原代血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的影响。方法以NPY(10-8～10-11mol/L)刺激SD大鼠胸主动脉培养的VSMCs,观察在D1类多巴胺受体激动剂Fenoldopam(10-8mol/L)存在的情况下,神经肽Y促VSMCs增殖作用的变化。细胞增殖的检测采用[3H]胸腺嘧啶核苷([3H]-TdR)掺入率的变化表示及MTT方法。结果 NPY呈浓度依赖性促进SD大鼠VSMCs的异常增殖,最高增殖幅度达(77±9)%(P<0.05),该增殖作用由NPY Y1受体亚型介导。多巴胺D1类受体激动剂Fenoldopam对VSMCs无增殖影响,但Fenoldopam可抑制NPY Y1亚型受体介导VSMCs的增殖作用,该作用通过PKA途径发挥作用。结论多巴胺D1类受体激活抑制NPY受体介导的促VSMCs增殖作用,可能参与心血管疾病的发生、发展过程。 展开更多
关键词 多巴胺受体 神经肽yy1受体 细胞增殖 血管平滑肌细胞
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神经肽Y Y_1受体在发情周期大鼠子宫中的分布 被引量：1
3
作者 郝建军 张涌 +2 位作者 徐永平 逄国梁 王红梅 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期293-297,共5页
选择健康、未产、体重220～250g的成年雌性SD大鼠,采用阴道涂片方法鉴定其发情周期,并采用免疫组织化学SP法研究了神经肽YY1受体在大鼠发情周期子宫内分布的变化规律。结果显示,各期子宫内膜的神经肽YY1受体免疫阳性产物主要位于基质细... 选择健康、未产、体重220～250g的成年雌性SD大鼠,采用阴道涂片方法鉴定其发情周期,并采用免疫组织化学SP法研究了神经肽YY1受体在大鼠发情周期子宫内分布的变化规律。结果显示,各期子宫内膜的神经肽YY1受体免疫阳性产物主要位于基质细胞核膜、子宫内膜上皮细胞质以及子宫腺细胞质和核膜中,并且着色深浅有一定差别,发情间期着色最深,发情后期、发情前期、发情期依次减弱;在肌层和外膜中,发情各期的神经肽YY1受体免疫阳性产物主要位于肌细胞核中,还有一小部分位于结缔组织细胞中,并且在发情间期着色最深,发情前期中等强度着色,发情期和发情后期着色最浅。表明,神经肽Y可能通过神经肽YY1受体参与子宫生理功能的调节。 展开更多
关键词 神经肽yy1受体 免疫组织化学SP法 发情周期 子宫 大鼠
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重组人神经肽Y受体Y2融合蛋白的表达、纯化及其生物信息学分析研究 被引量：1
4
作者 丁克祥 董萍 +6 位作者 郑永晨 杨永鹏 朱晓亮 韩晋云 单志新 丁宇 丁振华 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第19期2423-2426,共4页
目的在大肠杆菌中表达人神经肽YY2受体,并对之进行纯化、鉴定及生物信息学分析。方法取已构建好且经测序确认无误的重组质粒pET28a-Y2转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达融合蛋白,并经SDS-PAGE检测和Western印迹鉴定,表达产物包涵体经N... 目的在大肠杆菌中表达人神经肽YY2受体,并对之进行纯化、鉴定及生物信息学分析。方法取已构建好且经测序确认无误的重组质粒pET28a-Y2转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达融合蛋白,并经SDS-PAGE检测和Western印迹鉴定,表达产物包涵体经Ni2+-NTA亲和层析纯化。然后利用相关在线软件进行生物信息学分析Y2受体蛋白。结果经IPTG诱导含有pET28a-Y2重组质粒的DE3菌,表达出重组人Y2融合蛋白。重组蛋白经Ni2+-NTA亲和层析进行纯化后,得到了较高纯度的融合蛋白。经相关在线软件分析后获得了Y2受体的相关生物学特性。结论重组质粒pET28a-Y2在大肠杆菌DE3中成功表达,亲和层析纯化后获得较高纯度融合蛋白,并对Y2受体蛋白的生物学特征进行了预测,为进一步研究其生物学功能及其抗体的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 人神经肽yy2受体 融合蛋白 包涵体 纯化 生物信息学
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泽泻汤对代谢综合征大鼠神经肽及其Y1受体的影响 被引量：3
5
作者 吴智春 王浩 +1 位作者 王志宏 于华芸 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第24期3682-3684,共3页
目的观察泽泻汤对代谢综合征(MS)大鼠血浆神经肽(NPY),下丘脑NPY及其Y1R表达的影响,探讨其可能机制。方法用高糖高脂饲料喂饲建立MS大鼠。将23只MS大鼠分为3组,分别给盐水、泽泻汤、盐酸西布曲明。4 w后,测体重、血糖、三酰甘油(TG),放... 目的观察泽泻汤对代谢综合征(MS)大鼠血浆神经肽(NPY),下丘脑NPY及其Y1R表达的影响,探讨其可能机制。方法用高糖高脂饲料喂饲建立MS大鼠。将23只MS大鼠分为3组,分别给盐水、泽泻汤、盐酸西布曲明。4 w后,测体重、血糖、三酰甘油(TG),放免法检测血浆NPY;免疫组化法检测下丘脑NPY及其Y1R表达。结果与盐水组相比,泽泻汤组大鼠体重、血糖、TG、血浆NPY水平、下丘脑NPY及其Y1R表达的平均光密度均显著降低(P<0.05)。结论泽泻汤对MS大鼠有良好的治疗作用,其机制可能与抑制下丘脑NPY及其Y1R表达有关。 展开更多
关键词 泽泻汤 代谢综合征 神经肽Y 神经肽yy1型受体(NPyy1R)
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