叶酸和维生素B12对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞的保护作用 被引量：5

1

作者 张景燕 陈娟 +2 位作者 王蓉 赵静姝 吴燕川 《首都医科大学学报》 CAS 2012年第6期776-778,共3页

目的通过观察叶酸和维生素B12对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞生长的影响,探讨叶酸和维生素B12对神经细胞的保护作用。方法体外培养SH-SY5Y细胞,分为对照组、叶酸组(1.875 mg/L)、维生素B12组(800μg/L)、叶酸(1.875 mg/L)+维生素B12(800... 目的通过观察叶酸和维生素B12对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞生长的影响,探讨叶酸和维生素B12对神经细胞的保护作用。方法体外培养SH-SY5Y细胞,分为对照组、叶酸组(1.875 mg/L)、维生素B12组(800μg/L)、叶酸(1.875 mg/L)+维生素B12(800μg/L)组,进行细胞形态观察、细胞计数分析以及测定各组细胞的噻唑蓝(thiazolyl blue,MTT)代谢率、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)漏出率。结果与对照组相比,叶酸组、维生素B12组、叶酸+维生素B12组的细胞计数和MTT代谢率升高(P<0.05),LDH漏出率降低(P<0.05),在细胞形态上,叶酸组、维生素B12组、叶酸+维生素B12组明显好于对照组,表现为细胞胞体饱满、存活细胞数目增多、贴壁良好、突起延长。结论叶酸、维生素B12能促进神经细胞生长,降低神经细胞死亡率,从而达到保护神经元的作用。 展开更多

关键词 叶酸 维生素B12 人神经母细胞瘤株sh-sy5y

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胰岛素增敏剂罗格列酮对链脲佐菌素损伤SH-SY5Y细胞的保护作用 被引量：1

2

作者 张景燕 王蓉 +3 位作者 盛树力 姬志娟 孟祥宏 赵志炜 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2010年第1期69-71,共3页

目的观察胰岛素增敏剂罗格列酮对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)所致胰岛素信号转导通路损伤的SH-SY5Y细胞的影响。方法将人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞分为对照组、STZ制备神经元损伤模型组(STZ 0.8 mmol/L)、罗格列酮干预组(STZ 0.8 m... 目的观察胰岛素增敏剂罗格列酮对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)所致胰岛素信号转导通路损伤的SH-SY5Y细胞的影响。方法将人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞分为对照组、STZ制备神经元损伤模型组(STZ 0.8 mmol/L)、罗格列酮干预组(STZ 0.8 mmol/L+罗格列酮20μmol/L),测定每组的细胞计数、噻唑蓝(MTT)代谢率、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,观察罗格列酮对SH-SY5Y细胞的作用。结果与对照组相比,STZ模型组的细胞计数和MTT代谢率降低(P<0.01),LDH漏出率升高(P<0.01);经罗格列酮保护后,上述细胞生存指标明显改善,细胞计数和MTT代谢率均高于STZ损伤组(P<0.01),LDH漏出率降低(P<0.01)。结论罗格列酮可以减轻STZ引起的神经细胞毒性,提高细胞生存率,其作用机制尚需进一步探讨。 展开更多

关键词 人神经母细胞瘤株sh—sy5y 链脲佐菌素 罗格列酮

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EX527对热量限制保护SH-SY5Y细胞的影响 被引量：1

3

作者 张静爽 马丽娜 +4 位作者 王蓉 张景燕 吴燕川 赵志炜 王玉兰 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第5期705-708,共4页

目的观察SIRT1抑制剂EX527对热量限制处理的人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞的影响。方法体外培养SHSY5Y细胞,分为正常对照组(NC组)、热量限制组(CR组)和热量限制加SIRT1抑制剂组(CR+EX527组),光镜下观察细胞形态学改变,测定各组细胞噻唑蓝... 目的观察SIRT1抑制剂EX527对热量限制处理的人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞的影响。方法体外培养SHSY5Y细胞,分为正常对照组(NC组)、热量限制组(CR组)和热量限制加SIRT1抑制剂组(CR+EX527组),光镜下观察细胞形态学改变,测定各组细胞噻唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)代谢率及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)漏出率,应用蛋白免疫印迹(Western blotting)法测定SIRT1表达量。结果与NC组相比,CR组细胞形态好,表现为细胞胞体饱满、突起伸展、贴壁牢固,MTT代谢率升高(P<0.05),LDH漏出率有降低趋势,CR组和CR+EX527组SIRT1表达均增加(P<0.05);与CR组相比,CR+EX527组细胞形态较差,突起回缩,贴壁性不好,MTT代谢率降低(P<0.05),LDH漏出率有升高趋势,SIRT1表达略减少。结论热量限制对神经细胞具有保护作用,而SIRT1抑制剂EX527能够减弱热量限制的神经保护作用,提示热量限制对SH-SY5Y细胞的保护作用可能是由SIRT1介导的。 展开更多

关键词 热量限制 SIRT1抑制剂 人神经母细胞瘤株sh-sy5y

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救脑益智方剂水提液对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞的保护作用

4

作者 张景燕 张静爽 +5 位作者 曹子青 赵志炜 张旭 吴燕川 王玉兰 王蓉 《中国比较医学杂志》 北大核心 2015年第4期58-60,I0005,共4页

目的通过观察复方中药救脑益智方剂水提液对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞生长以及胰岛素信号通路的影响,探讨其对神经细胞保护作用的机制。方法体外培养SH-SY5Y细胞,分为对照组(C组)、救脑益智1号方组和3号方组,每组药物剂量分别为0.062... 目的通过观察复方中药救脑益智方剂水提液对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞生长以及胰岛素信号通路的影响,探讨其对神经细胞保护作用的机制。方法体外培养SH-SY5Y细胞,分为对照组(C组)、救脑益智1号方组和3号方组,每组药物剂量分别为0.0625 mg/m L、0.125 mg/m L、0.25 mg/m L、0.5 mg/m L和1 mg/m L,测定各组细胞的噻唑蓝(MTT)代谢率,选定0.125 mg/m L进行细胞免疫荧光染色,观察细胞形态和胰岛素受体底物-1(IRS-1)、c AMP反应元件结合蛋白(CREB)表达的变化。结果与对照组相比,救脑益智组MTT代谢率升高(P<0.05),细胞形态好,表现为细胞胞体饱满、贴壁良好、突起延长,IRS-1和CREB表达增加。结论复方中药救脑益智水提液能促进神经细胞生长,提高神经元胰岛素信号通路相关因子IRS-1和CREB表达,推测其神经保护作用机制与胰岛素信号通路有关。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 复方中药 救脑益智方剂 人神经母细胞瘤株sh-sy5y

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Nrf 2信号通路在铅致SH-SY5Y细胞氧化应激中作用 被引量：5

5

作者 李平 李芬 +2 位作者 叶昉 吕玲 陈军 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期933-935,共3页

目的研究神经细胞内核因子E 2相关因子2(Nrf 2)信号通路是否对铅暴露所致的氧化应激产生应答及其可能机制。方法用低、中、高剂量(5、25、125μmol/L)的醋酸铅溶液对人神经母细胞瘤SH-SY 5 Y细胞染毒,用2',7'-二氯荧光黄双乙酸... 目的研究神经细胞内核因子E 2相关因子2(Nrf 2)信号通路是否对铅暴露所致的氧化应激产生应答及其可能机制。方法用低、中、高剂量(5、25、125μmol/L)的醋酸铅溶液对人神经母细胞瘤SH-SY 5 Y细胞染毒,用2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)探针检测染毒2 h后细胞活性氧(ROS)水平,染毒24 h后用二硫基双硝基苯甲酸(DTNB)比色法检测还原性谷胱甘肽(GSH)水平,western blot法检测蛋白激酶C-δ(PKC-δ)、酪氨酸激酶2(CKⅡ)以及胞浆和胞核中Nrf 2蛋白的表达水平。结果随着染毒剂量增加,低、中、高剂量组ROS含量依次为(559.17±54.56)、(585.50±36.41)、(621.00±29.96),与对照组(533.50±46.47)比较,中、高剂量组含量明显升高(P<0.05);GSH含量依次为(165.39±17.37)、(140.92±14.77)、(84.03±10.31),与对照组(222.10±14.91)比较,低、中、高剂量组含量均明显降低(P<0.01);与对照组比较,低、中、高剂量组胞浆Nrf 2相对灰度值为(0.38±0.09)、(0.27±0.09)、(0.25±0.11),胞浆Nrf 2表达均明显降低(P<0.05);低、中、高剂量组胞核Nrf 2相对灰度值为(1.38±0.50)、(1.55±0.49)、(2.79±1.56),仅高剂量组胞核Nrf 2蛋白表达明显增高(P<0.05)。低、中、高剂量组PKC-δ相对灰度值为(1.84±0.46)、(2.55±0.36)、(2.38±0.77),与对照组比较均明显升高(P<0.05);低、中、高剂量组CKⅡ相对灰度值为(1.28±0.32)、(1.34±0.21)、(1.52±0.42),与对照组比较仅高剂量组表达明显升高(P<0.05)。结论铅致神经细胞氧化损伤的同时激活胞浆中Nrf 2转移入核内,进而发挥氧化应答,PKC-δ、CKⅡ在铅致Nrf 2激活过程中具有一定作用。 展开更多

关键词 铅 人神经母细胞瘤(sh-sy5y)细胞 活性氧(ROS) 还原性谷胱甘肽(Gsh) 核因子E 2相关因子2(Nrf 2) 蛋白激酶C-δ(PKC-δ) 酪氨酸激酶2(CKⅡ)

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芝麻素对高糖损伤SH-SY5Y细胞的保护效果及机制 被引量：2

6

作者 张慧 宋宇 +1 位作者 栗志勇 张婷 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1678-1683,共6页

目的研究芝麻素(sesamin)对高糖所致人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞损伤的保护作用及其机制。方法SH-SY5Y细胞接种于含100 mmol/L葡萄糖的培养基并与10、20、40μmol/L芝麻素共同孵育36 h,MTT法测定细胞存活率,比色法测定细胞培养液乳酸... 目的研究芝麻素(sesamin)对高糖所致人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞损伤的保护作用及其机制。方法SH-SY5Y细胞接种于含100 mmol/L葡萄糖的培养基并与10、20、40μmol/L芝麻素共同孵育36 h,MTT法测定细胞存活率,比色法测定细胞培养液乳酸脱氢酶(LDH)水平,ELISA检测DNA片段及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性。2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)探针法检测细胞中活性氧(ROS)的水平,试剂盒检测细胞内丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和还原型谷胱甘肽(GSH)活性。光度法检测细胞烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶活性,实时荧光定量检测NADPH氧化酶亚基p47phox mRNA表达。Western blot法检测p47phox蛋白表达。结果芝麻素可增加高糖作用下SH-SY5Y细胞的存活率,抑制细胞LDH释放,阻止高糖诱导的DNA断裂,降低Caspase-3活性。同时芝麻素能够增加高糖作用下SH-SY5Y细胞内SOD、CAT和GSH的活性,清除细胞内的ROS,抑制NADPH氧化酶活性及p47phox mRNA和蛋白的表达。结论芝麻素对高糖诱导SY5Y细胞损伤具有保护作用,其机制可能与抗氧化和抑制NADPH氧化酶活性有关。 展开更多

关键词 芝麻素(sesamin) 高糖 人神经母细胞瘤(sh-sy5y)细胞 抗氧化 活性氧 NADPH氧化酶

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人参二醇对APP-SH-SY5Y细胞中Tau蛋白磷酸化及Fyn/GluN2B信号通路的影响 被引量：2

7

作者 梁喜才 蔺莹 +2 位作者 肖洪贺 孔亮 杨静娴 《中国药房》 CAS 北大核心 2021年第12期1485-1491,共7页

目的:研究人参二醇(PD)对转染APP基因的人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y(APP-SH-SY5Y)中Tau蛋白磷酸化的影响及其作用机制。方法:采用分子对接技术验证PD与非受体酪氨酸激酶Fyn的靶向性。在体外培养SH-SY5Y细胞,构建APP-SH-SY5Y细胞模型和绿... 目的:研究人参二醇(PD)对转染APP基因的人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y(APP-SH-SY5Y)中Tau蛋白磷酸化的影响及其作用机制。方法:采用分子对接技术验证PD与非受体酪氨酸激酶Fyn的靶向性。在体外培养SH-SY5Y细胞,构建APP-SH-SY5Y细胞模型和绿色荧光蛋白(GFP)-SH-SY5Y细胞模型(对照细胞),通过检测细胞中β淀粉样蛋白(Aβ1-42)的表达来验证APP-SH-SY5Y细胞模型是否构建成功。以GFP-SH-SY5Y细胞为对照,采用CCK-8法检测5、10、20、30、40μmol/L的PD和125、250、500、1000、2000 nmol/L的PP2(Fyn抑制剂,阳性对照)作用24 h对APP-SH-SY5Y细胞存活率的影响,以确定最佳给药浓度。以APP-SH-SY5Y细胞为对象,分别检测最佳浓度PD、PP2作用24后细胞中Ca2+浓度及磷酸化Tau蛋白(p-Tau)/Tau、磷酸化非受体酪氨酸激酶Src(p-Src)/Fyn、磷酸化谷氨酸受体2B(p-GluN2B)/GluN2B比值。结果:分子模拟对接结果显示,PD可靶向结合Fyn蛋白。与GFP-SH-SY5Y细胞比较,APP-SH-SY5Y细胞中Aβ1-42蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。PD和PP2的最佳作用浓度分别为20μmol/L和500 nmol/L。20μmol/L PD、500 nmol/L PP2均可显著升高细胞的存活率,显著降低细胞中Ca2+浓度以及p-Tau/Tau、p-Src/Fyn、p-GluN2B/GluN2B比值。结论:PD可通过抑制Fyn/GluN2B信号通路来降低APP-SH-SY5Y细胞中Ca2+浓度及Tau蛋白的磷酸化水平。 展开更多

关键词 人参二醇 转染APP基因的人神经母细胞瘤细胞sh-sy5y TAU蛋白 磷酸化 非受体酪氨酸激酶Fyn/谷氨酸受体2B信号通路

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TAZ诱导性过表达慢病毒载体的构建、鉴定及诱导过表达TAZ神经母细胞瘤细胞株的建立 被引量：1

8

作者 阮红峰 应忠明 罗环 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1035-1036,共2页

神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)是儿童最常见且致死性极高的实体肿瘤之一[1]。由NB所致死亡人数占所有儿童肿瘤死亡总数的15%[2]。分子靶向治疗是近年肿瘤领域研究的热点[3]。TAZ是一个包含WW-domain结构域的转录共激活子,参与多种肿... 神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)是儿童最常见且致死性极高的实体肿瘤之一[1]。由NB所致死亡人数占所有儿童肿瘤死亡总数的15%[2]。分子靶向治疗是近年肿瘤领域研究的热点[3]。TAZ是一个包含WW-domain结构域的转录共激活子,参与多种肿瘤细胞的增殖、调控肿瘤转移,并能预测部分肿瘤患者的预后情况[4]。针对Oncomine肿瘤数据库NB肿瘤组织的生物信息学分析发现,TAZ基因在NB肿瘤组织中呈高表达,且随着NB的恶化,表达逐渐升高。而TAZ是否参与NB的形成及恶化尚未完全明确。 展开更多

关键词 TAZ基因 神经母细胞瘤细胞sh-sy5y 诱导过表达慢病毒载体

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苦参碱对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的作用机制 被引量：13

9

作者 罗娟 许伟 +2 位作者 薛天阳 高吉照 闫晓方 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期190-191,214,共3页

目的探讨苦参碱对人神经母细胞瘤(NB)SH-SY5Y细胞的作用机制。方法取对数生长期的细胞,分为对照组(含细胞、无苦参碱)及药物处理组(苦参碱质量浓度为2.0 g.L-1,对细胞的作用时间分别为16 h、24 h、32 h)共4组,每组5个复孔。应用四甲基... 目的探讨苦参碱对人神经母细胞瘤(NB)SH-SY5Y细胞的作用机制。方法取对数生长期的细胞,分为对照组(含细胞、无苦参碱)及药物处理组(苦参碱质量浓度为2.0 g.L-1,对细胞的作用时间分别为16 h、24 h、32 h)共4组,每组5个复孔。应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测NB SH-SY5Y细胞增殖抑制率;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率;比色法检测Caspase-8的相对活性。采用SPSS 16.0统计软件进行单因素方差分析。结果 MTT检测对照组及各时间点药物处理组增殖抑制率分别为(4.98±1.20)%、(11.01±0.85)%、(15.22±0.71)%和(22.31±1.45)%;FCM法检测对照组及各时间点药物处理组细胞的凋亡率分别为(5.23±1.19)%、(10.74±1.65)%、(14.00±0.98)%和(17.81±1.06)%;比色法测定各组Caspase-8的相对活性分别为(4.25±1.00)%、(10.69±1.10)%、(14.80±1.44)%和(19.80±0.97)%;以上检测各组间比较差异均有统计学意义(Pa<0.05)。结论苦参碱可抑制人NB SH-SY5Y细胞增殖,并可通过上调Caspase-8的活性诱导NB SH-SY5Y细胞凋亡,其作用随时间的延长逐渐增强。 展开更多

关键词 苦参碱 人神经母细胞瘤sh—sy5y细胞 增殖 凋亡 CASPASE-8

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京尼平苷对帕金森病细胞模型的线粒体保护作用 被引量：5

10

作者 符晶 孟开顺 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第18期2132-2134,共3页

目的研究京尼平苷对帕金森病(PD)细胞模型的线粒体保护作用。方法人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞经0. 16 nmol·L-11-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)作用48 h建立PD模型细胞,很低、低、中、高剂量实验组分别加入0. 01,0. 05,0. 10,... 目的研究京尼平苷对帕金森病(PD)细胞模型的线粒体保护作用。方法人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞经0. 16 nmol·L-11-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)作用48 h建立PD模型细胞,很低、低、中、高剂量实验组分别加入0. 01,0. 05,0. 10,0. 50 mmol·L-1京尼平苷,模型组细胞加等量生理盐水,另设正常SH-SY5Y细胞为空白组。以噻唑蓝(MTT)法检测各组PD模型细胞增殖情况,检测各组PD模型细胞线粒体膜流动性、膜电位及腺苷三磷酸(ATP)水平。结果与空白组相比,模型组和实验组细胞存活率降低(P <0. 01);与模型组相比,实验组细胞存活率升高,且随京尼平苷作用浓度的升高呈逐渐升高趋势(P <0. 01)。与空白组比较,模型组细胞线粒体膜荧光偏振度和微黏度升高,膜电位降低(P <0. 01);实验组随京尼平苷干预浓度的增大线粒体膜荧光偏振度和微黏度逐渐降低,膜电位逐渐升高,且与模型组差异均有统计学意义(P <0. 05或P <0. 01)。空白组、模型组和很低、低、中、高剂量实验组细胞ATP水平分别为(4. 33±0. 25),(3. 89±0. 11),(4. 21±0. 14),(4. 37±0. 17),(4. 48±0. 20),(4. 53±0. 17) nmol·mg-1,模型组细胞ATP水平明显低于空白组(P <0. 05),实验组高于模型组(P <0. 05或P <0. 01),但不同剂量京尼平苷组间差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论京尼平苷可促进PD模型细胞增殖,同时可改善细胞线粒体结构与功能,起到抗细胞凋亡的保护作用。 展开更多

关键词 帕金森病 京尼平苷 人神经母细胞瘤sh-sy5y细胞 线粒体 神经保护

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黄芪多糖对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的增殖作用研究 被引量：5

11

作者 高晓红 焦海胜 张雪琛 《中国药房》 CAS 北大核心 2015年第22期3079-3082,共4页

目的:研究黄芪多糖(APS)对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖的抑制作用。方法:以0(空白对照)、25、50、100 mg/ml APS培养细胞6、12、24 h后,MTT法测定细胞活力并计算抑制率。0(空白对照)、25、50、100 mg/ml APS培养细胞24 h后,Hoechst33... 目的:研究黄芪多糖(APS)对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖的抑制作用。方法:以0(空白对照)、25、50、100 mg/ml APS培养细胞6、12、24 h后,MTT法测定细胞活力并计算抑制率。0(空白对照)、25、50、100 mg/ml APS培养细胞24 h后,Hoechst33258荧光染色,荧光显微镜下观察细胞核形态;流式细胞仪检测细胞周期分布与凋亡情况;Western blot法检测细胞磷酸化丝裂原活化蛋白激酶(ERK)1/2蛋白表达;酶联免疫吸附(ELISA)法测定细胞白细胞介素2(IL-2)、IL-6、IL-12含量。结果:与空白对照比较,100 mg/ml APS培养细胞6 h,50、100 mg/ml APS培养细胞12 h与25、50、100 mg/ml APS培养细胞24 h后细胞抑制率升高。50、100 mg/ml APS培养细胞24 h后,G0/G1期比例升高,G2/M、S期比例降低;IL-2、IL-6含量增加。25、50、100 mg/ml APS培养细胞24 h后细胞凋亡率升高;细胞核出现碎块状致密浓染,并有凋亡小体出现;细胞ERK1/2蛋白磷酸化水平降低,IL-12含量增加。以上差异均具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:APS能抑制SH-SY5Y细胞增殖,阻滞细胞周期进程,诱导细胞凋亡,其机制可能与降低ERK蛋白磷酸化水平和升高细胞因子水平有关。 展开更多

关键词 黄芪多糖 人神经母细胞瘤sh-sy5y细胞 细胞周期 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2 细胞因子

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远志寡糖酯对β淀粉样蛋白25~35诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤及AKT / CREB / BDNF 信号通路的影响 被引量：3

12

作者 牛芬溪 桑旭星 +3 位作者 杨依 唐晓丽 刘雅楠 方芳 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期414-420,共7页

目的 观察远志寡糖酯对β淀粉样蛋白25~35(Aβ;)诱导的人成神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞损伤及蛋白激酶B/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白/脑源性神经营养因子(AKT/CREB/BDNF)信号通路关键凋亡蛋白的影响。方法 将培养的SH-SY5Y细胞分为对照组、... 目的 观察远志寡糖酯对β淀粉样蛋白25~35(Aβ;)诱导的人成神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞损伤及蛋白激酶B/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白/脑源性神经营养因子(AKT/CREB/BDNF)信号通路关键凋亡蛋白的影响。方法 将培养的SH-SY5Y细胞分为对照组、Aβ;损伤模型组、远志寡糖酯(50、100、200、400 mg/L)组和Aβ;损伤+远志寡糖酯(50、100、200、400 mg/L)组。对照组和远志寡糖酯组分别给予等体积完全培养液和不同浓度的远志寡糖酯溶液后与细胞共孵育24 h;Aβ;损伤模型组和Aβ;损伤+远志寡糖酯组分别给予等体积完全培养液和不同浓度的远志寡糖酯溶液2 h后,加入25μmol/L Aβ;的溶液与细胞共孵育24 h。采用MTT法检测SH-SY5Y细胞存活率;Hoechst 33258染色观察细胞凋亡;Western Blot检测SH-SY5Y细胞内pAKT/AKT、pCREB/CREB和BDNF蛋白表达。结果 与对照组比较,不同浓度远志寡糖酯(100、200、400 mg/L)能明显增加细胞存活率;Aβ;可降低SH-SY5Y细胞存活率,增强SH-SY5Y细胞内的Hoechst 33258染色荧光强度,降低pAKT/AKT、pCREB/CREB和BDNF的蛋白表达(P<0.01)。与Aβ;损伤模型组比较,不同浓度的远志寡糖酯(100、200、400 mg/L)均可明显提高细胞存活率,降低细胞内Hoechst 33258染色的荧光强度,减少细胞凋亡,增加细胞内BDNF、 pAKT/AKT、pCREB/CREB的表达(P<0.05,P<0.01)。结论 远志寡糖酯抗Aβ;诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤可能与激活AKT/CREB磷酸化,促进BDNF表达有关。 展开更多

关键词 远志寡糖酯 β淀粉样蛋白25~35 人成神经母细胞瘤sh-sy5y细胞 脑源性神经营养因子

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氟西汀对皮质酮诱导Nesfatin-1含量升高的影响 被引量：3

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作者 徐亚运 陈征 +1 位作者 葛金芳 陈飞虎 《安徽医药》 CAS 2017年第8期1380-1383,共4页

目的观察氟西汀对皮质酮诱导的SH-SY5Y细胞株中下丘脑摄食调节因子Nesfatin-1含量升高的影响。方法采用体外培养细胞的方法,建立SH-SY5Y细胞皮质酮损伤模型,设氟西汀给药组(10^(-9)~10^(-5)mol·L^(-1))、皮质酮组和阴性对照组,采... 目的观察氟西汀对皮质酮诱导的SH-SY5Y细胞株中下丘脑摄食调节因子Nesfatin-1含量升高的影响。方法采用体外培养细胞的方法,建立SH-SY5Y细胞皮质酮损伤模型,设氟西汀给药组(10^(-9)~10^(-5)mol·L^(-1))、皮质酮组和阴性对照组,采用实时荧光定量PCR、Western blot和免疫组化的方法观察细胞中Nesfatin-1 mRNA及蛋白表达的变化。结果与对照组相比,皮质酮组细胞Nesfatin-1 mRNA和蛋白含量均显著升高;氟西汀(10^(-9)~10^(-5)mol·L^(-1))处理后Nesfatin-1 mRNA和蛋白含量均显著降低。结论氟西汀体外用药能够逆转皮质酮诱导的SH-SY5Y细胞Nesfatin-1表达上调。 展开更多

关键词 皮质酮 氟西汀 NESFATIN-1 神经母细胞瘤sh-sy5y

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丁香脂素对谷氨酸钠诱导的SH-SY5Y细胞兴奋性损伤的保护作用 被引量：3

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作者 严秋霞 李艳梅 +8 位作者 范艳华 张明生 杨礼寿 姚尧 杨珏 陈娟 龙群 邱剑飞 杨小生 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第18期76-82,共7页

目的:基于谷氨酸钠诱导人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)细胞损伤构建的模型,观察从枫香槲寄生中提取得到丁香脂素的保护,并探讨其作用机制。方法:采用谷氨酸钠构建SH-SY5Y细胞损伤模型,实验分为正常组,损伤模型组(谷氨酸钠50 mmol·L-1... 目的:基于谷氨酸钠诱导人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)细胞损伤构建的模型,观察从枫香槲寄生中提取得到丁香脂素的保护,并探讨其作用机制。方法:采用谷氨酸钠构建SH-SY5Y细胞损伤模型,实验分为正常组,损伤模型组(谷氨酸钠50 mmol·L-1,谷氨酸钠50 mmol·L-1+DMSO),丁香脂素组(6. 25,12. 5,25μmol·L-1),通过细胞计数法,细胞形态学观察,Annexin V-FITC/碘化丙啶(PI)细胞凋亡检测、活性氧(ROS)检测、线粒体膜电位以及蛋白免疫印迹法(Western blot)等方法,评价丁香脂素对谷氨酸钠诱导的神经兴奋性损伤的神经保护活性。结果:与正常组比较,模型组的细胞存活率明显降低(P <0. 01),ROS显著升高(P <0. 01),线粒体膜电位显著降低(P <0. 01),聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(PARP),PARP1蛋白表达显著降低(P <0. 01),细胞的凋亡率显著增大(P <0. 01);与模型组比较,丁香脂素组(6. 25,12. 5,25μmol·L-1)呈浓度依赖性增加细胞的存活率(P <0. 01),减少ROS的积累(P <0. 01),显著恢复线粒体膜电位的变化(P <0. 01),显著上调PARP,PARP1蛋白(P <0. 01),显著降低细胞凋亡率(P <0. 01)。结论:提示丁香脂素对谷氨酸钠诱导的SH-SY5Y神经细胞的兴奋性损伤具有显著的保护活性,其作用机制可能是通过抗氧化应激,修复线粒体功能及DNA损伤等通路来显著降低谷氨酸钠诱导的神经细胞凋亡。 展开更多

关键词 丁香脂素 谷氨酸钠 神经兴奋性损伤 人神经母细胞瘤细胞(sh-sy5y) 神经保护作用

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白藜芦醇对氟致人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞线粒体生物发生障碍的影响 被引量：3

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作者 田致远 陈静雯 +5 位作者 周郭育 李佩 赵倩 罗晨 张舜 王爱国 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期721-727,共7页

目的探讨线粒体生物发生在氟神经毒性中的作用,以及白藜芦醇干预氟神经毒性的作用机制。方法不同浓度氟化钠(NaF)处理对数生长期人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞24h,并用20μmol/L白藜芦醇对60mg/L NaF组进行干预。NaF剂量染毒实验分组:对照... 目的探讨线粒体生物发生在氟神经毒性中的作用,以及白藜芦醇干预氟神经毒性的作用机制。方法不同浓度氟化钠(NaF)处理对数生长期人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞24h,并用20μmol/L白藜芦醇对60mg/L NaF组进行干预。NaF剂量染毒实验分组:对照组,20、40、60mg/L NaF组;白藜芦醇干预NaF染毒实验分组:对照组,60mg/LNaF组,20μmol/L白藜芦醇+60mg/LNaF组,20μmol/L白藜芦醇组。采用蛋白质免疫印迹(Western blotting)法检测线粒体生物发生关键调控因子过氧化物酶体增殖物激活受体辅激活因子1α(PGC-1α)、核呼吸因子1(NRF1)及线粒体转录因子A(TFAM)的蛋白表达水平;采用实时荧光定量PCR技术检测线粒体生物发生关键调控因子及其下游呼吸链复合物亚基细胞色素C氧化酶亚基1(CO1)和ATP合成酶亚基(ATP8)的mRNA表达水平与线粒体DNA(mtDNA)相对含量;采用流式细胞术检测线粒体膜电位。结果与对照组比较,60mg/L NaF组SH-SY5Y细胞线粒体生物发生关键调控因子PGC-1α、NRF1、TFAM mRNA与蛋白表达水平、线粒体呼吸链复合物亚基CO1和ATP8 mRNA表达水平以及mtDNA相对含量均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);60mg/L NaF组线粒体膜电位与对照组比较也明显降低(P<0.05)。经白藜芦醇干预后,与60mg/L NaF组比较,20μmol/L白藜芦醇+60mg/LNaF组SH-SY5Y细胞的线粒体生物发生关键调控因子PGC-1α、NRF1、TFAM蛋白与mRNA表达水平均明显增加,线粒体呼吸链复合物亚基CO1和ATP8的mRNA表达水平、mtDNA相对含量和线粒体膜电位均明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论白藜芦醇干预可缓解氟导致的SH-SY5Y细胞线粒体生物发生障碍。 展开更多

关键词 氟 白藜芦醇 人神经母细胞瘤sh-sy5y细胞 线粒体生物发生 神经毒性

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复方脑康胶囊对β-淀粉样肽诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用研究 被引量：3

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作者 胡文军 邓朝晖 李国锋 《中国药房》 CAS CSCD 2012年第7期594-596,共3页

目的:研究复方脑康胶囊对β-淀粉样肽(Aβ)25-35(Aβ25-35)诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用。方法:将SH-SY5Y细胞接种后分为对照、Aβ25-35(25μmol.L-1)和复方脑康胶囊(0.725g.mL-1)+Aβ25-35(25μmol.L-1)组。通过测定... 目的:研究复方脑康胶囊对β-淀粉样肽(Aβ)25-35(Aβ25-35)诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用。方法:将SH-SY5Y细胞接种后分为对照、Aβ25-35(25μmol.L-1)和复方脑康胶囊(0.725g.mL-1)+Aβ25-35(25μmol.L-1)组。通过测定细胞存活率(MTT法)、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、细胞轴突长度、胞体面积,观察复方脑康胶囊对Aβ导致神经毒性的保护作用。结果:与对照组比较,Aβ25-35组SY5Y细胞的轴突长度和胞体面积均较小,MTT代谢率降低,LDH漏出率升高,而加入复方脑康胶囊水提液后,可使上述指标恢复或接近正常。结论:复方脑康胶囊具有神经保护作用,可减轻Aβ导致的神经毒性。 展开更多

关键词 复方脑康胶囊 β-淀粉样肽25-35 人神经母细胞瘤sh-sy5y细胞

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吗啡对SH-SY5Y细胞中HSP70蛋白的调控作用 被引量：3

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作者 杨海玉 《南昌大学学报（医学版）》 CAS 2014年第11期15-18,共4页

目的观察吗啡对人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞中热休克蛋白70(HSP70)的调控作用。方法将维甲酸诱导分化的SH-SY5Y细胞随机分为4组:正常对照组(Con组),给予PBS作用48h;吗啡组(Mor组),给予吗啡10μmol作用48h;吗啡+纳络酮组(Mor+Nal组),给... 目的观察吗啡对人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞中热休克蛋白70(HSP70)的调控作用。方法将维甲酸诱导分化的SH-SY5Y细胞随机分为4组:正常对照组(Con组),给予PBS作用48h;吗啡组(Mor组),给予吗啡10μmol作用48h;吗啡+纳络酮组(Mor+Nal组),给予纳洛酮100μmol作用30min,之后给予吗啡10μmol作用48h;纳络酮组(Nal组),给予纳洛酮100μmol作用48h。采用免疫印迹方法检测各组HSP70蛋白表达水平。结果与Con组比较,Mor组SH-SY5Y细胞中HSP70蛋白表达水平显著升高(P<0.001);与Mor组比较,Mor+Nal组、Nal组SH-SY5Y细胞中HSP70蛋白表达水平均明显抑制(P<0.01或P<0.001)。结论吗啡对HSP70蛋白表达具有促进作用。 展开更多

关键词 吗啡 热休克蛋白70 人神经母细胞瘤sh-sy5y细胞株 调控作用

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Ndfip1对铁诱导神经细胞凋亡的保护作用 被引量：2

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作者 毛建雯 田娟 《解剖科学进展》 2020年第3期332-335,共4页

目的观察Ndfip1对铁诱导神经细胞凋亡的保护作用及机制。方法神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞分为对照组、空质粒转染组、Ndfip1过表达(Ndfip1质粒转染)组和Ndfip1基因敲除(Ndfip1siRNA转染)组。应用蛋白印迹法检测Ndfip1在各组细胞的蛋白表达... 目的观察Ndfip1对铁诱导神经细胞凋亡的保护作用及机制。方法神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞分为对照组、空质粒转染组、Ndfip1过表达(Ndfip1质粒转染)组和Ndfip1基因敲除(Ndfip1siRNA转染)组。应用蛋白印迹法检测Ndfip1在各组细胞的蛋白表达量,验证细胞模型构建成功。应用MTT法筛选二价金属铁离子作用SH-SY5Y细胞的最佳浓度和最佳时间,检测铁离子作用下各组细胞的存活率。应用蛋白印迹法检测各组细胞凋亡通路相关蛋白Caspase-3表达量。结果Ndfip1过表达组细胞Ndfip1蛋白表达量明显高于对照组,而Ndfip1基因敲除组细胞Ndfip1蛋白表达量低于对照组,细胞模型构建成功。MTT法筛选铁离子处理细胞的最佳作用时间为24h,最佳作用条件为200μmol/L。在铁离子作用下,Ndfip1过表达组细胞存活率上升,Caspase-3蛋白表达下调;而Ndfip1基因敲除组细胞存活率下降,Caspase-3蛋白表达上调。结论Ndfip1对铁诱导的神经细胞凋亡的保护作用与抑制凋亡通路相关蛋白Caspase-3的表达相关。 展开更多

关键词 Ndfip1 神经母细胞瘤sh-sy5y细胞 铁离子 凋亡

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他米巴罗汀对神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖及酪氨酸激酶受体A、N-myc表达的影响 被引量：2

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作者 刘建英 李爱敏 +3 位作者 王建勇 王晓莉 王莉 司莹莹 《中华实用儿科临床杂志》 CSCD 北大核心 2019年第7期546-548,共3页

目的研究他米巴罗汀(Tamibarotene,Am80)对神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖抑制能力及酪氨酸激酶受体A(TrkA)、N-myc (即MYCN) mRNA和蛋白表达的影响,为治疗神经母细胞瘤提供实验依据。方法采用不同浓度(0、10、20、40、80、160 μmol/L)A... 目的研究他米巴罗汀(Tamibarotene,Am80)对神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖抑制能力及酪氨酸激酶受体A(TrkA)、N-myc (即MYCN) mRNA和蛋白表达的影响,为治疗神经母细胞瘤提供实验依据。方法采用不同浓度(0、10、20、40、80、160 μmol/L)Am80作用SH-SY5Y细胞48 h。采用细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测细胞增殖情况。采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western-blot法检测48 h时SH-SY5Y细胞中TrkA、MYCN mRNA和蛋白的表达情况。结果当Am80浓度为10 μmol/L时,Am80对SH-SY5Y细胞无显著抑制作用[(3.51±1.68)%,抑制率<5%];当Am80浓度为20 μmol/L时,显示弱抑制作用[(9.60±1.97)%,抑制率<10%];Am80浓度为80 μmol/L时,对SH-SY5Y细胞增殖的抑制率显著增强[(57.43±4.95)%];TrkA随着Am80浓度增加,表达量增加;Am80能显著降低SH-SY5Y细胞MYCN的表达(10 μmol/L:0.65±0.05比20 μmol/L:0.36±0.06),差异有统计学意义(P<0.05)。结论Am80可抑制SH-SY5Y细胞的增殖,随着Am80浓度的增加,对细胞的抑制作用逐渐增强,Am80浓度越高对肿瘤细胞的抑制作用越显著。其机制可能与通过下调MYCN来提升TrkA的表达有关。 展开更多

关键词 他米巴罗汀 神经母细胞瘤sh-sy5y细胞 增殖 酪氨酸激酶受体A N-myc基因

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氟对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞自噬水平的影响 被引量：2

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作者 唐莎 张舜 +5 位作者 陈威 全超 段鹏 黄文婷 王爱国 杨克敌 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期472-475,480,共5页

目的探讨氟对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞自噬水平的影响。方法用不同浓度(20、40、60 mg/L)的氟化钠(Na F)染毒SH-SY5Y细胞24 h,采用透射电子显微镜观察细胞内自噬体超微结构;吖啶橙染色观察细胞内自噬囊泡的生成;Western blotting技术... 目的探讨氟对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞自噬水平的影响。方法用不同浓度(20、40、60 mg/L)的氟化钠(Na F)染毒SH-SY5Y细胞24 h,采用透射电子显微镜观察细胞内自噬体超微结构;吖啶橙染色观察细胞内自噬囊泡的生成;Western blotting技术检测自噬延伸相关蛋白Atg5和LC3-II与自噬降解相关蛋白P62的表达水平。结果透射电子显微镜下可观察到细胞内自噬体结构,且随NaF剂量的增加自噬体数量明显减少;吖啶橙染色可见,与对照组相比,40和60 mg/L NaF染毒组自噬囊泡数量逐渐减少,尤以60 mg/L NaF染毒组减少最为明显;Western blotting检测发现,与对照组相比,Atg5和LC3-II的表达水平呈剂量依赖性降低,而P62的表达水平呈剂量依赖性升高,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论氟可抑制SH-SY5Y细胞的自噬水平。 展开更多

关键词 氟 人神经母细胞瘤sh-sy5y细胞 自噬

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