人白细胞介素24mRNA在瘢痕疙瘩中的表达及意义 被引量：6

1

作者 李建赤 梁杰 +3 位作者 罗少军 张培华 彭智 李平 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第32期6432-6435,共4页

目的:从基因水平测量瘢痕疙瘩组织中白细胞介素24的表达水平,探讨白细胞介素24在瘢痕疙瘩发生、发展过程中的作用和意义。方法:实验于2005-10/2006-09在广东医学院整形外科研究所完成。①选取2004-06/2005-10广东医学院附属医院整形外... 目的:从基因水平测量瘢痕疙瘩组织中白细胞介素24的表达水平,探讨白细胞介素24在瘢痕疙瘩发生、发展过程中的作用和意义。方法:实验于2005-10/2006-09在广东医学院整形外科研究所完成。①选取2004-06/2005-10广东医学院附属医院整形外科收治的患者,瘢痕疙瘩标本12例,正常瘢痕标本10例,行巨乳缩小、除皱术、植皮等患者正常皮肤标本12例,患者均知情同意且自愿捐献标本,实验经医学伦理委员会批准。标本取材部位为颜面、前胸、四肢等,切取后液氮保存。②低温条件下切取秤量组织,采用Trizol法提取总RNA。电泳鉴定总RNA完整性,并统一调整总RNA含量为10g/L,-70℃储存。RT-PCR二步法合成cDNA。③以正常皮肤、正常瘢痕为对照,以GAPDH作为扩增内参照基因,将正常皮肤、正常瘢痕和瘢痕疙瘩各类标本总RNA反转录的cDNA模板浓度调整相对一致进行扩增反应。以白细胞介素24mRNA与GAPDHmRNA的光密度积分值之比作为各类组织标本中白细胞介素24的相对含量,比较白细胞介素24mRNA在正常皮肤、正常瘢痕及瘢痕疙瘩组织中的表达情况。结果:①各类组织标本中总RNA抽提结果:正常皮肤、正常瘢痕和瘢痕疙瘩组织中抽提总RNA经甲醛变性凝胶电泳后显示较清晰的18s和28s条带,经紫外分光光度计测定A260/A280≈2.0。②各类组织标本中白细胞介素24mRNA的表达:白细胞介素24和GAPDH基因表达产物通过RT-PCR方法得到的特异性DNA片段长度分别为173bp和577bp。瘢痕疙瘩的白细胞介素24mRNA与GAPDHmRNA的吸光度比值明显低于正常皮肤、正常瘢痕(0.577±0.113,1.070±0.185,1.139±0.195;t=7.436×10-8～4.745×10-8,P均<0.01),正常皮肤与正常瘢痕白细胞介素24mRNA的相对表达量基本一致(t=0.405,P>0.05)。结论:瘢痕疙瘩的形成可能与白细胞介素24在组织中的表达降低有关。提示采用基因疗法提高早期瘢痕疙瘩中白细胞介素24的含量� 展开更多

关键词 瘢痕 瘢痕疙瘩 人白细胞介素24 基因表达

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人白介素24基因诱导人宫颈癌Ca Ski细胞凋亡的实验研究 被引量：2

2

作者 石华 成海恩 +4 位作者 张溢 郭风劲 易发平 马永平 宋方洲 《第四军医大学学报》 北大核心 2007年第6期512-514,共3页

目的:研究人白介素24(hIL-24)在体外诱导宫颈癌CaSki细胞凋亡及其作用机制.方法:①以脂质体包裹重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-hIL-24转染Ca Ski细胞;②利用RT-PCR技术检测处理后Ca Ski细胞中HPV E6癌基因的mRNA水平变化;③Western Blot... 目的:研究人白介素24(hIL-24)在体外诱导宫颈癌CaSki细胞凋亡及其作用机制.方法:①以脂质体包裹重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-hIL-24转染Ca Ski细胞;②利用RT-PCR技术检测处理后Ca Ski细胞中HPV E6癌基因的mRNA水平变化;③Western Blot分析处理后Ca Ski细胞中抑癌蛋白P53水平的变化;④流式细胞仪分析处理后的Ca Ski细胞凋亡情况.结果:处理后Ca Ski细胞中HPV E6癌基因的mRNA水平下降,抑癌蛋白P53水平增加,细胞凋亡率升高.结论:真核表达载体介导的hIL-24基因体外转染宫颈癌Ca Ski细胞后,能抑制Ca Ski细胞中HPV E6癌基因的表达,使抑癌蛋白P53恢复活性,促使宫颈癌Ca Ski细胞凋亡. 展开更多

关键词 人白细胞介素24 CA Ski细胞 乳头状瘤病毒 人 E6基因 蛋白质P53 细胞凋亡

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rhIL-24对黑色素瘤B16细胞的体内外抑瘤作用 被引量：3

3

作者 赵小瑜 严苏 +2 位作者 韩梅 盛伟华 杨吉成 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1125-1127,I0002,共4页

目的研究重组人白细胞介素24(rhIL-24)及真核表达基因重组质粒pcDNA3·0-hIL-24对黑色素瘤B16细胞(B16细胞)及其荷瘤小鼠体内外抑肿瘤作用。方法用rhIL-24蛋白作用于小鼠B16细胞,检测其对B16细胞的生长抑制作用及诱导凋亡作用,并用r... 目的研究重组人白细胞介素24(rhIL-24)及真核表达基因重组质粒pcDNA3·0-hIL-24对黑色素瘤B16细胞(B16细胞)及其荷瘤小鼠体内外抑肿瘤作用。方法用rhIL-24蛋白作用于小鼠B16细胞,检测其对B16细胞的生长抑制作用及诱导凋亡作用,并用rhIL-24蛋白及pcD-NA3·0-hIL-24治疗荷瘤小鼠。结果rhIL-24蛋白对体外培养的B16细胞具有显著的抑制生长和诱导凋亡作用,rhIL-24蛋白及pcDNA3·0-hIL-24对C57/BL6小鼠体内形成的恶性黑色素瘤具有明显的抑瘤作用。结论rhIL-24蛋白具有生物活性,他及真核表达重组质粒对B16细胞及其小鼠种植瘤生长有抑制作用,并能诱导肿瘤细胞凋亡及促进其分化。 展开更多

关键词 人白细胞介素24 黑色素瘤B16细胞 C57/BL6小鼠

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Mda7/IL-24基因的克隆及其融合蛋白在E.coli中的表达 被引量：2

4

作者 马群风 江红 +2 位作者 刘锟 朱捷 郑晓飞 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2004年第3期221-224,共4页

目的 :克隆人黑素瘤分化相关基因 (melanomadifferentiationassociatedgene ,mda 7/IL 2 4 ) ,并在大肠杆菌中表达。方法 :从PHA刺激培养的人外周血淋巴细胞提取总RNA ,根据mda 7/IL 2 4基因序列设计引物 ,用PCR法扩增mda 7/IL 2 4基因... 目的 :克隆人黑素瘤分化相关基因 (melanomadifferentiationassociatedgene ,mda 7/IL 2 4 ) ,并在大肠杆菌中表达。方法 :从PHA刺激培养的人外周血淋巴细胞提取总RNA ,根据mda 7/IL 2 4基因序列设计引物 ,用PCR法扩增mda 7/IL 2 4基因。将mda 7/IL 2 4基因插入表达载体pET 2 8a(+)中 ,构建表达载体pET 2 8a mda 7/IL 2 4 ,用IPTG诱导目的蛋白在E .coli中表达。通过Western印迹分析对表达产物进行鉴定。结果 :经RT PCR从人外周血分离的淋巴细胞中扩增到mda 7/IL 2 4cDNA ,序列分析与文献报道一致 ;SDS PAGE分析表明 ,经 0 .5mmol/LIPTG 37℃诱导 4h后在E .coli中有大量mda 7/IL 2 4融合蛋白表达 ,相对分子质量约为 2 8× 10 3 ,融合蛋白约占诱导菌总蛋白的30 % ;Western印迹分析提示 ,诱导表达产物能与His单抗发生特异性反应。结论 :从人外周血淋巴细胞中获得了mda 7/IL 2 4的全长cDNA ,融合蛋白在E .coli中获得高效表达。 展开更多

关键词 人白细胞介素24 基因克隆 基因表达

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rhIL-24刺激PBMC产生IFN-γ、IL-6的初步研究 被引量：2

5

作者 叶建新 陈雄艳 +4 位作者 盛伟华 丁云芳 谢宇峰 缪竞诚 杨吉成 《苏州大学学报（医学版）》 CAS 2004年第6期813-814,共2页

目的 研究重组人白细胞介素24(rhlL-24)对外周血单个核细胞产生γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素6(IL-6)的刺激效应。方法 正常人的外周血单个核细胞(PBMC)经含有rhlL-24的CHO细胞表达上清刺激48 h、72 h,取其刺激PBMC培养上清液用酶联免... 目的 研究重组人白细胞介素24(rhlL-24)对外周血单个核细胞产生γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素6(IL-6)的刺激效应。方法 正常人的外周血单个核细胞(PBMC)经含有rhlL-24的CHO细胞表达上清刺激48 h、72 h,取其刺激PBMC培养上清液用酶联免疫吸附试验((ELISA)法测定IFN-γ和IL-6含量。结果 加含rhlL-24的CHO细胞表达上清的实验组上清中IFN-γ和IL-6含量明显高于对照组(P<0.01)。结论 rhlL-24对外周血单个核细胞分泌IFN-γ和IL-6具有刺激效应,说明rhlL-24具有明显的免疫调节功能。导师。 展开更多

关键词 重组人白细胞介素24 外周血单个核细胞 Γ干扰素 白细胞介素6

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腺病毒重组人白细胞介素24对肾癌细胞株786-O细胞生长和凋亡的影响 被引量：1

6

作者 范毛川 杨晓亮 +3 位作者 朱峰 余沁楠 郭康 郭会敏 《河南医学研究》 CAS 2019年第4期582-585,共4页

目的探讨腺病毒重组人白细胞介素24(IL-24)对肾癌细胞株786-O细胞的生长和凋亡的影响。方法将培养的肾癌细胞株786-O细胞随机分为空白对照组、阴性对照组(转染腺病毒重组人IL-24对照组)及实验组(转染腺病毒重组人IL-24组)。取对数生长... 目的探讨腺病毒重组人白细胞介素24(IL-24)对肾癌细胞株786-O细胞的生长和凋亡的影响。方法将培养的肾癌细胞株786-O细胞随机分为空白对照组、阴性对照组(转染腺病毒重组人IL-24对照组)及实验组(转染腺病毒重组人IL-24组)。取对数生长期肾癌细胞株786-O,构建腺病毒重组人IL-24及对照并转染至肾癌细胞株786-O实验组细胞及阴性对照组细胞。使用四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测肾癌细胞株786-O生长能力;采用流式细胞术检测肾癌细胞株786-O凋亡情况;应用Western Blot检测肾癌细胞株786-O中MMP-9蛋白的表达水平。结果实验组肾癌细胞株786-O细胞增殖能力低于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组肾癌细胞株786-O细胞表面磷脂酰丝氨酸表达水平高于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组肾癌细胞株786-O细胞中MMP-9蛋白表达水平低于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。空白对照组与阴性对照组肾癌细胞株786-O细胞增殖能力、细胞膜表面磷脂酰丝氨酸表达水平、MMP-9蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论转染腺病毒重组人IL-24可抑制肾癌细胞株786-O细胞的生长并诱导细胞凋亡,腺病毒重组人IL-24可能通过下调MMP-9诱导肾癌细胞株786-O细胞的凋亡。 展开更多

关键词 肾癌细胞株786-O细胞 腺病毒重组人白细胞介素24 金属基质蛋白酶 细胞凋亡

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重组人白细胞介素24抑制淋巴瘤raji细胞生长及其分子机制

7

作者 谭洁 程骁赪 +1 位作者 陆向东 李汉冲 《现代肿瘤医学》 CAS 2009年第10期1961-1963,共3页

目的:研究重组人白细胞介素24体外对淋巴瘤raji细胞的生长抑制作用及其分子机制。方法:用rhIL-24蛋白作用于淋巴瘤raji细胞,MTT法检测rhIL-24蛋白对raji细胞的生长抑制作用,激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察rhIL-24蛋白诱导raji细胞凋亡... 目的:研究重组人白细胞介素24体外对淋巴瘤raji细胞的生长抑制作用及其分子机制。方法:用rhIL-24蛋白作用于淋巴瘤raji细胞,MTT法检测rhIL-24蛋白对raji细胞的生长抑制作用,激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察rhIL-24蛋白诱导raji细胞凋亡的形态学改变,流式细胞仪(FACS)检测rhIL-24蛋白诱导raji细胞的凋亡率及细胞周期改变,免疫细胞化学分析凋亡相关因子Bcl-2和Bax的改变。结果:rhIL-24蛋白作用于淋巴瘤raji细胞后,可以显著抑制raji细胞的生长,诱导G2/M期阻滞和凋亡,rhIL-24蛋白能使raji细胞中bcl-2的表达下调和bax的表达上调。结论:rhIL-24蛋白对淋巴瘤raji细胞具有显著的生长抑制及凋亡诱导作用,其作用机制可能与下调bcl-2和上调bax的表达有关。 展开更多

关键词 重组人白细胞介素24 淋巴瘤细胞 凋亡

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人IL-24基因在CHO细胞中的表达及其抗肿瘤效应 被引量：11

8

作者 缪竞诚 陈雄艳 +2 位作者 盛伟华 谢宇锋 杨吉成 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期567-570,共4页

目的构建人IL-24基因真核表达载体,在CHO细胞中进行稳定表达,并检测重组表达蛋白rhIL-24的抗肿瘤活性。方法将测序验证的人IL-24基因亚克隆至真核表达载体pcDNA3,构建重组真核表达载体pcDNA3-hIL-24,转染CHO细胞进行稳定表达,经RT-PCR... 目的构建人IL-24基因真核表达载体,在CHO细胞中进行稳定表达,并检测重组表达蛋白rhIL-24的抗肿瘤活性。方法将测序验证的人IL-24基因亚克隆至真核表达载体pcDNA3,构建重组真核表达载体pcDNA3-hIL-24,转染CHO细胞进行稳定表达,经RT-PCR鉴定后用MTT法、Ho-echst染色和流式细胞术检测CHO细胞表达的rhIL-24诱导A549人肺腺癌细胞凋亡的抗肿瘤效应,用ELISA检测其刺激免疫细胞分泌IL-6和IFN-γ的功能。结果经双酶切和PCR鉴定,重组真核表达载体构建正确,人IL-24在CHO细胞中获得稳定表达,且所表达的人IL-24具有较强的诱导A549人肺腺癌细胞凋亡及上调免疫细胞表达IL-6和IFN-γ的免疫刺激活性。结论人IL-24基因的稳定表达和抗肿瘤效应的实验研究,为进一步研究人IL-24抗肿瘤的分子机制及潜在的应用奠定了基础。 展开更多

关键词 人白细胞介素-24 稳定转染 CHO细胞 凋亡

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人白细胞介素-24基因的克隆及序列测定 被引量：8

9

作者 陈雄艳 李丽娥 +3 位作者 盛伟华 龚爱华 缪竞诚 杨吉成 《苏州大学学报（医学版）》 CAS 2003年第3期279-281,共3页

目的　克隆人白细胞介素 - 2 4 (hIL - 2 4 )基因 ,以供重组表达。方法　利用自行设计合成的一对引物 ,采用RT -PCR技术从LPS活化的人外周血单个核细胞的总RNA中分离hIL - 2 4cDNA并重组到 pUC19载体上 ,进行酶切鉴定和DNA序列测定。结... 目的　克隆人白细胞介素 - 2 4 (hIL - 2 4 )基因 ,以供重组表达。方法　利用自行设计合成的一对引物 ,采用RT -PCR技术从LPS活化的人外周血单个核细胞的总RNA中分离hIL - 2 4cDNA并重组到 pUC19载体上 ,进行酶切鉴定和DNA序列测定。结果　PCR及酶切产物电泳结果均证明所克隆的基因为 6 2 1bp。经序列测定证实所克隆的hIL - 2 4与GenBank报道的结果完全一致。结论　该基因系国内首次获得并经序列测定证实的hIL - 2 4cDNA基因。这为进一步在真核或大肠杆菌中高效表达有活性的重组hIL - 2 4 ,更深入地研究其作用机制以及临床应用奠定了坚实的基础。 展开更多

关键词 人白细胞介素-24 基因克隆 序列测定 RT-PCR

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重组人白细胞介素-24对裸鼠人胃癌移植瘤生长的抑制作用 被引量：4

10

作者 严苏 杨吉成 +3 位作者 韩梅 赵小瑜 盛伟华 陈卫昌 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期555-556,共2页

白细胞介素（IL）-24对多种人肿瘤细胞的生长均有抑制作用，可诱导肿瘤凋亡、抑制肿瘤细胞生长和血管生成，对正常细胞没有影响，还具有抑制裸鼠人移植瘤生长的作用。苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室成功构建了真核表达载体pcDNA3... 白细胞介素（IL）-24对多种人肿瘤细胞的生长均有抑制作用，可诱导肿瘤凋亡、抑制肿瘤细胞生长和血管生成，对正常细胞没有影响，还具有抑制裸鼠人移植瘤生长的作用。苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室成功构建了真核表达载体pcDNA3．0-IL-24和原核表达载体PET21a（＋）IL-24，并分别在中国仓鼠卵巢（CHO）细胞和大肠杆菌BL-21中稳定表达。我们在此研究基础上，将两种质粒的表达产物重组人白细胞介素（rhIL）-24蛋白直接注入裸鼠人胃癌皮下移植瘤瘤体内，观察对裸鼠胃癌移植瘤生长的影响，并初步探讨其可能的作用机制。 展开更多

关键词 人白细胞介素-24 重组人白细胞介素 移植瘤生长 抑制作用 人胃癌 裸鼠 抑制肿瘤细胞生长 原核表达载体

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腺病毒载体介导IL-24基因对肺癌细胞的化疗增敏效应 被引量：4

11

作者 李畅 赵军 +3 位作者 李印 梁光辉 盛伟华 杨吉成 《苏州大学学报（医学版）》 CAS 2012年第3期322-325,共4页

目的研究携带人IL-24基因腺病毒载体(Ad-IL-24)联用顺铂(DDP)对人非小细胞肺癌NCI-H460细胞生长和凋亡的影响。方法取对数生长期的NCI-H460细胞,MTT比色法检测Ad-IL-24联合DDP对细胞生长的影响,流式细胞仪分析细胞周期及检测细胞凋亡率... 目的研究携带人IL-24基因腺病毒载体(Ad-IL-24)联用顺铂(DDP)对人非小细胞肺癌NCI-H460细胞生长和凋亡的影响。方法取对数生长期的NCI-H460细胞,MTT比色法检测Ad-IL-24联合DDP对细胞生长的影响,流式细胞仪分析细胞周期及检测细胞凋亡率。结果 Ad-IL-24联合DDP对NCI-H460细胞的生长抑制作用和诱导凋亡效应均明显优于单用Ad-IL-24和单用化疗药物DDP,且G2/M期细胞比例显著增加(P<0.05或<0.01)。结论 Ad-IL-24能提高NCI-H460肺癌细胞对化疗药物DDP的敏感性。 展开更多

关键词 腺病毒 人白细胞介素-24 肺癌 基因治疗 顺铂

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人IL-24重组蛋白免疫刺激及血管形成抑制作用 被引量：4

12

作者 危少华 吴浩荣 +3 位作者 朱晔涵 叶震敏 盛伟华 杨吉成 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期273-275,F0003,共4页

目的探讨人重组白细胞介素-24(rhIL-24)蛋白体外免疫刺激功能和血管形成抑制作用。方法将原核稳定表达得到的rhIL-24蛋白刺激外周血单个核细胞(PBMC),ELISA检测其刺激免疫细胞分泌白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及γ-干扰... 目的探讨人重组白细胞介素-24(rhIL-24)蛋白体外免疫刺激功能和血管形成抑制作用。方法将原核稳定表达得到的rhIL-24蛋白刺激外周血单个核细胞(PBMC),ELISA检测其刺激免疫细胞分泌白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及γ-干扰素(IFN-γ)的活性;利用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型观察rhIL-24蛋白抑制血管形成的效应。结果rhIL-24蛋白孵育的PMBC在不同时段分泌的IL-6、TNF-α及IFN-γ浓度与阴性对照组相比存在显著差异;rhIL-24蛋白能明显抑制CAM二级和三级血管形成,与阴性组比较,差异极显著。结论rhIL-24蛋白具有明显的免疫刺激功能和血管形成抑制作用。 展开更多

关键词 人白细胞介素-24 免疫刺激 血管形成 抑制作用 鸡胚绒毛尿囊膜

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人白细胞介素-24基因的克隆、表达和纯化 被引量：2

13

作者 肖斌 杨珺 +3 位作者 田文标 朱永红 毛旭虎 邹全明 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2006年第2期134-138,共5页

目的对人白细胞介素-24(hIL-24)进行克隆、表达和纯化。方法分离人外周血单个核细胞,ConA刺激培养,提取细胞总RNA,应用RT-PCR技术从外周血单个核细胞中扩增hIL-24成熟肽编码区,定向克隆至融合表达载体pGEX-4T-1,重组载体pGEX-4T-1/hIL-2... 目的对人白细胞介素-24(hIL-24)进行克隆、表达和纯化。方法分离人外周血单个核细胞,ConA刺激培养,提取细胞总RNA,应用RT-PCR技术从外周血单个核细胞中扩增hIL-24成熟肽编码区,定向克隆至融合表达载体pGEX-4T-1,重组载体pGEX-4T-1/hIL-24经DNA测序鉴定后,转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达,阴离子交换层析纯化融合蛋白,SDS-PAGE和Westernblot鉴定。结果所得hIL-24基因经序列分析,与GenBank公布一致。所构建融合表达载体pGEX-4T-1/hIL-24测序正确,转化BL21(DE3)后,37℃诱导表达相对分子质量约为44000的融合蛋白,主要以包涵体形式存在,占菌体总蛋白的30.63%。经纯化后,纯度达85%以上。Westernblot检测能与兔抗人IL-24的多克隆抗血清发生结合反应。结论已成功构建了hIL-24的融合表达载体pGEX-4T-1/hIL-24,并在大肠杆菌中高效表达,纯化后获得了高纯度的融合蛋白,为hIL-24的功能及活性研究奠定基础。 展开更多

关键词 人IL-24 克隆 融合表达 离子交换层析 人白细胞介素-24

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慢病毒介导hIL-24基因对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、迁移及侵袭性的影响 被引量：2

14

作者 吴志远 史玉仓 +4 位作者 粱杰 卫裴 徐孝兴 吴志贤 黎然 《中华整形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期359-364,共6页

目的 研究人白细胞介素-24（human interleukin-24,hlL-24）基因对体外培养的人瘢痕疙瘩成纤维细胞（keloid fibroblasts,KF）增殖、迁移、侵袭性的影响.方法 将携带hIL-24及绿色荧光蛋白的慢病毒载体（LV-hlL-24-GFP,KF-hIL-24组）及... 目的 研究人白细胞介素-24（human interleukin-24,hlL-24）基因对体外培养的人瘢痕疙瘩成纤维细胞（keloid fibroblasts,KF）增殖、迁移、侵袭性的影响.方法 将携带hIL-24及绿色荧光蛋白的慢病毒载体（LV-hlL-24-GFP,KF-hIL-24组）及空载体（LV-GFP,KF-NC组）感染KF细胞,并设空白对照组（KF组）,应用实时定量PCR和Western blot分别检测hlL-24 mRNA及蛋白的表达;MTT法检测KF细胞增殖情况;流式细胞仪法测定KF细胞周期;划痕实验和Trans-well小室实验检测KF细胞的体外迁移和侵袭能力.结果 hIL-24慢病毒载体感染KF细胞96 h后,KF-hIL-24组hIL-24 mRNA和蛋白的表达量明显高于KF-NC组和KF组,差异有统计学意义（P ＜0.01）;MTT结果显示,KF-hIL-24组吸光度A值明显降低,与KF-NC组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;细胞周期结果显示, hIL-24基因阻滞KF细胞在G1期[（75.40±2.10）％]、S期[（4.96±1.60）％]和G2期[（0.01 ±0.01）％]细胞比例下降,与KF-NC组比较,差异有统计学意义（P＜0.01）;划痕实验和Trans-well实验结果显示,hIL-24慢病毒载体能够抑制KF细胞的体外迁移和侵袭能力.结论 hlL-24慢病毒载体能够抑制KF细胞增殖、细胞周期进程、迁移及侵袭能力. 展开更多

关键词 人白细胞介素-24 瘢痕疙瘩 成纤维细胞 增殖 迁移 侵袭

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过表达MDA-7/IL-24蛋白的亚细胞定位

15

作者 马群风 江红 +2 位作者 刘锟 朱捷 郑晓飞 《现代肿瘤医学》 CAS 2006年第2期135-137,共3页

目的了解标签蛋白GFP的位置对过表达的MDA-7/IL-24融合蛋白亚细胞定位的影响。方法分别构建在MDA-7/IL-24 cDNA的5'端和3'端带有GFP-tag的重组表达质粒pEGFP-C1-mda-7/IL-24和pEGFP-N3-mda-7/IL-24,瞬时转染猴胚肾Cos7细胞,48h... 目的了解标签蛋白GFP的位置对过表达的MDA-7/IL-24融合蛋白亚细胞定位的影响。方法分别构建在MDA-7/IL-24 cDNA的5'端和3'端带有GFP-tag的重组表达质粒pEGFP-C1-mda-7/IL-24和pEGFP-N3-mda-7/IL-24,瞬时转染猴胚肾Cos7细胞,48h后用Hoechst 33258染核,在荧光显微镜下观察GFP-MDA-7/IL-24融合蛋白在Cos7细胞的亚细胞分布。结果测序表明重组质粒pEGFP-C1-mda-7/IL-24和pEGFP-N3-mda-7/IL-24构建正确;分别转染Cos7细胞后,在氨基端带有GFP-tag的MDA-7/IL-24融合蛋白表达阳性细胞中,绿色荧光均匀分布于胞浆和胞核,但在羧基端带有GFP-tag的MDA-7/IL-24融合蛋白表达阳性细胞中,绿色荧光则分布于核膜外侧和胞浆。结论GFP-tag位置的不同对过表达融合蛋白MDA-7/IL-24的亚细胞定位有显著的影响。 展开更多

关键词 黑素瘤分化相天基因-7 人白细胞介素-24 绿色荧光蛋白

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IL-24 cDNA转染人喉癌细胞系的建立及其表达的研究

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作者 何跃平 张艳 +3 位作者 郑家法 申海荣 田梦秋 梁贵玲 《南华大学学报（医学版）》 2007年第3期389-391,400,共4页

目的建立转染人白细胞介素-24(hIL-24)基因的喉癌细胞株,并研究hIL-24的表达情况。方法将携带人白细胞介素-24的质粒pcDNA3.1(+)-hIL-24转导入人喉表皮样癌细胞Hep-2中,G418筛选阳性克隆,RT-PCR、Western blot和ELISA法对hIL-24的表达... 目的建立转染人白细胞介素-24(hIL-24)基因的喉癌细胞株,并研究hIL-24的表达情况。方法将携带人白细胞介素-24的质粒pcDNA3.1(+)-hIL-24转导入人喉表皮样癌细胞Hep-2中,G418筛选阳性克隆,RT-PCR、Western blot和ELISA法对hIL-24的表达进行检测。结果IL-24基因成功地转导入Hep-2细胞中并能高效表达。RT-PCR电泳结果显示hIL-24基因在mRNA水平有表达;ELISA法测得106个转染阳性细胞24 h内培养上清液中hIL-24的含量为162.8±15.4 pg/mL,空载体转染及未转染的细胞未检测到hIL-24。结论hIL-24基因成功转染人喉癌细胞系Hep-2细胞且能持续大量表达。 展开更多

关键词 人白细胞介素-24 转染 喉癌细胞 表达

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