免疫荧光和激光共聚焦显微镜对人横纹肌肉瘤细胞系的观察 被引量：2

1

作者 张红英 杨光华 +3 位作者 步宏 张杰 李胜富 郭立新 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期304-305,共2页

关键词 免疫荧光 激光共聚焦显微镜 人横纹肌肉瘤 细胞系

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注射用核糖核酸Ⅱ对人横纹肌肉瘤细胞增殖和凋亡的调控作用 被引量：2

2

作者 单宇 白雪莲 +5 位作者 杨淑贤 韩嘉媛 赵青舟 包晓威 李立勇 曹丽 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1505-1511,共7页

目的研究注射用核糖核酸Ⅱ调控人恶性胚胎横纹肌瘤RD细胞增殖和凋亡作用的分子机制。方法注射用核糖核酸Ⅱ与RD细胞作用24 h后,MTT法检测细胞存活率,确定给药浓度;Hoechst 33258、AO/EB染色法检测细胞凋亡;JC-1法检测线粒体膜电位;流式... 目的研究注射用核糖核酸Ⅱ调控人恶性胚胎横纹肌瘤RD细胞增殖和凋亡作用的分子机制。方法注射用核糖核酸Ⅱ与RD细胞作用24 h后,MTT法检测细胞存活率,确定给药浓度;Hoechst 33258、AO/EB染色法检测细胞凋亡;JC-1法检测线粒体膜电位;流式细胞术检测细胞周期分布;Western blot检测细胞增殖与凋亡相关蛋白表达。结果注射用核糖核酸Ⅱ可呈浓度依赖性降低RD细胞存活率,诱导细胞凋亡,并明显降低线粒体膜电位。流式细胞术结果表明,RD细胞复制被阻滞在S期。Western blot结果表明,给药后周期阻滞蛋白p21表达上调,CDK2、CDK4下调,p-Akt、p-JNK下调;凋亡相关因子Bcl-2表达下调,Bax上调,caspase-8、caspase-3含量降低。结论注射用核糖核酸Ⅱ通过激活p21,下调G_1/S期关键蛋白CDK2、CDK4,将RD细胞周期阻滞在S期,抑制Akt、JNK的磷酸化,从而抑制RD细胞增殖;通过下调Bcl-2,上调Bax,破坏线粒体完整性,激活caspase-8、caspase-3,诱导RD细胞凋亡。 展开更多

关键词 注射用核糖核酸Ⅱ 人横纹肌肉瘤 RD细胞 细胞周期 细胞凋亡 JNK

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三磷酸腺苷对人横纹肌肉瘤细胞系诱导分化作用的研究 被引量：2

3

作者 吕桂芝 林仲翔 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期408-411,T015,共5页

为了探讨三磷酸腺苷（ＡＴＰ）对人横纹肌肉瘤细胞增殖和分化的影响，用ＡＴＰ作用于人横纹肌肉瘤细胞亚系（ＲＤＬ６）细胞，观察到ＡＴＰ可抑制ＲＤＬ６细胞的增殖，使其生长速度明显减慢，作用第５ｄ时增殖抑制率为８１％，流式光度... 为了探讨三磷酸腺苷（ＡＴＰ）对人横纹肌肉瘤细胞增殖和分化的影响，用ＡＴＰ作用于人横纹肌肉瘤细胞亚系（ＲＤＬ６）细胞，观察到ＡＴＰ可抑制ＲＤＬ６细胞的增殖，使其生长速度明显减慢，作用第５ｄ时增殖抑制率为８１％，流式光度术检测；观察到ＡＴＰ作用的ＲＤＬ６细胞Ｓ期的细胞数明显增多，说明细胞停滞在Ｓ期，用罗氏黄荧光染料传输法证实，ＡＴＰ有恢复ＲＤＬ６细胞间隙连接通讯功能的作用。用免疫荧光细胞化学方法观察到经ＡＴＰ处理后的ＲＤＬ６细胞间隙连接蛋白基因的表达明显增强。用肌专一蛋白荧光染色法也证明了ＡＴＰ促进ＲＤＬ６细胞的肌专一蛋白表达；出现肌丝肌管的分化。这些结果表明ＡＴＰ不仅抑制人横纹肌肉瘤细胞的增殖，而且诱导其分化，是有效的促分化性抗癌药物。本文讨论了增殖分化偶联与间隙连接蛋白基因（ｃｏｎｎｅｘｉｎ４３。 展开更多

关键词 腺苷三磷酸 人横纹肌肉瘤 肌分化 蛋白基因

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人横纹肌肉瘤中微管蛋白的表达

4

作者 叶绿 张红英 +4 位作者 步宏 杨光华 张杰 郭立新 王守立 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期50-53,共4页

目的　研究人横纹肌肉瘤中细胞骨架成分微管的改变。方法　采用免疫组化 SP法 ,对 70例人横纹肌肉瘤石蜡组织切片中微管蛋白的表达进行研究 ;应用激光共聚焦显微镜对三种不同转移潜能的横纹肌肉瘤细胞系 (PL A- 80 2 ,A6 73,RD)中微管... 目的　研究人横纹肌肉瘤中细胞骨架成分微管的改变。方法　采用免疫组化 SP法 ,对 70例人横纹肌肉瘤石蜡组织切片中微管蛋白的表达进行研究 ;应用激光共聚焦显微镜对三种不同转移潜能的横纹肌肉瘤细胞系 (PL A- 80 2 ,A6 73,RD)中微管进行免疫荧光染色研究。结果　人横纹肌肉瘤石蜡组织切片中普遍存在微管蛋白的低表达。肿瘤组织学分级 级 microtubulin- β的低表达细胞为 5 2 .38% , 级为 85 .0 0 % (P<0 .0 5 )。有转移、复发的 32例中 ,microtubulin- β的低表达细胞为 87.5 0 % ;无转移、复发的 38例中 ,其低表达细胞为 5 5 .2 6 % (P<0 .0 5 )。在三种人横纹肌肉瘤细胞系中 ,PL A- 80 2细胞的微管发育最不完善 ;RD细胞中微管形态接近正常肌母细胞 ;A6 73细胞微管发育程度居中 (P<0 .0 5 )。结论　人横纹肌肉瘤中 ,普遍存在微管蛋白的低表达。微管蛋白的减少和微管的发育不完善与肿瘤细胞的转移潜能 ,肿瘤的组织学分级和转移复发有关。 展开更多

关键词 人横纹肌肉瘤 微管 微管蛋白

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大蒜素对人横纹肌肉瘤RD细胞的作用及其机制

5

作者 王媛 薛天阳 许伟 《临床合理用药杂志》 2015年第20期11-12,共2页

目的探讨大蒜素(allicin)对人横纹肌肉瘤RD细胞增殖和凋亡的作用及其相关机制。方法应用不同浓度大蒜素(5,10,20,30μg/ml)作用人横纹肌肉瘤RD细胞株24h,采用MTT比色法检测不同浓度大蒜素下RD细胞的增殖抑制率;流式细胞仪检测不同浓度... 目的探讨大蒜素(allicin)对人横纹肌肉瘤RD细胞增殖和凋亡的作用及其相关机制。方法应用不同浓度大蒜素(5,10,20,30μg/ml)作用人横纹肌肉瘤RD细胞株24h,采用MTT比色法检测不同浓度大蒜素下RD细胞的增殖抑制率;流式细胞仪检测不同浓度大蒜素作用后RD细胞的凋亡率。结果 MTT比色法检测各实验组增殖抑制率分别为(25.82±1.75)%、(31.04±1.61)%、(36.32±1.61)%、(42.58±3.88)%;流式细胞仪检测对照组及各实验组凋亡率分别为(5.23±0.80)%、(7.07±0.83)%、(10.60±2.51)%、(15.70±1.79)%、(19.33±0.72)%。以上检测各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论大蒜素能有效抑制RD细胞的增殖,诱导其凋亡。 展开更多

关键词 大蒜素 人横纹肌肉瘤 RD细胞 细胞增殖 细胞凋亡

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miR373和miR542-5p调控肠道病毒71型在人横纹肌肉瘤细胞中的复制 被引量：4

6

作者 杨倬 田波 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期943-953,共11页

研究发现microRNAs(miRNAs)可以参与调控病毒在宿主细胞内感染和复制的过程。为了揭示miRNAs是否参与肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)的感染与复制,研究了miRNAs对EV71病毒在宿主细胞内复制的影响。构建miRNAs靶基因筛选系统,在双荧... 研究发现microRNAs(miRNAs)可以参与调控病毒在宿主细胞内感染和复制的过程。为了揭示miRNAs是否参与肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)的感染与复制,研究了miRNAs对EV71病毒在宿主细胞内复制的影响。构建miRNAs靶基因筛选系统,在双荧光素酶报告体系的pMIR载体插入病毒基因,如果插入的基因序列能被细胞内的miRNAs靶向调控,报告基因的表达将发生变化。实验发现EV71病毒5′-UTR基因可能是miRNAs的作用靶标。随后利用miRNAs在线分析软件预测并验证可能作用于5′-UTR基因片段的miRNAs。为了研究miRNAs分子对5′-UTR基因的调控作用是否可以体现在EV71病毒的复制过程中,在人横纹肌肉瘤(Rhabdomyosarcoma,RD)细胞中转染miRNAs mimics,利用Western blotting和real-time PCR实验检验EV71病毒的复制和表达情况。实验结果表明,miR373和miR542-5p可以通过作用于EV71病毒5′-UTR基因从而抑制病毒在RD细胞中的复制和表达。细胞内miR373和miR542-5p可以调控EV71在宿主细胞中的复制过程。研究EV71病毒与宿主miRNAs的相互作用机制为进一步阐明EV71病毒感染与复制机理奠定了基础。 展开更多

关键词 MIRNAS 肠道病毒71型 人横纹肌肉瘤细胞 病毒复制

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五肽对肠道病毒71型在人横纹肌肉瘤细胞和小鼠体内复制的抑制作用 被引量：3

7

作者 杨倬 田波 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期457-462,共6页

肠道病毒71型(EV71)是手足口病(HFMD)主要的病原体之一。为研究小分子肽类化合物抑制EV71感染的作用,采用五肽分子作为干预分子,考察其对EV71在人横纹肌肉瘤(RD)细胞和乳鼠模型体内复制的影响。通过Western blotting、real-time PCR方法... 肠道病毒71型(EV71)是手足口病(HFMD)主要的病原体之一。为研究小分子肽类化合物抑制EV71感染的作用,采用五肽分子作为干预分子,考察其对EV71在人横纹肌肉瘤(RD)细胞和乳鼠模型体内复制的影响。通过Western blotting、real-time PCR方法,检测EV71病毒蛋白和mRNA的表达水平,使用显微镜观察细胞病变效应。通过乳鼠体重变化和肠组织中EV71病毒VP1蛋白表达水平的变化来评价五肽体内抗病毒活性。结果表明,五肽分子P010157能够显著抑制RD细胞中EV71 VP1蛋白的表达,其质量浓度为100μg·mL-1时,EV71 vp1 mRNA水平降低了(92.0±6.3)%,EC50约为2.2μg·mL-1,且能有效抵抗病毒感染产生的细胞病变效应。通过MTS比色法测定P010157对RD细胞的细胞毒活性,结果显示其对细胞无明显毒性。体内实验结果还表明,P010157对感染EV71的乳鼠有保护作用(乳鼠无明显消瘦现象),并能抑制EV71在乳鼠体内的复制。本研究证实,P010157能有效抑制体外及体内的EV71的复制,是一种新型的对抗手足口病病毒EV71的化合物。 展开更多

关键词 肠道病毒71型 五肽 人横纹肌肉瘤细胞 抗病毒

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苦参碱对人横纹肌肉瘤RD细胞增殖凋亡的影响及其作用机制 被引量：3

8

作者 李艳 薛天阳 +1 位作者 许伟 高吉照 《求医问药（下半月刊）》 2012年第7期295-296,共2页

目的:探讨苦参碱(Matrine,Ma)对人横纹肌肉瘤RD细胞增殖凋亡的影响及其作用机制。方法:将我组经体外培养的人横纹肌肉瘤RD细胞随机分为实验组和对照组。其中,实验组又分为3个小组且3个小组的细胞中分别加入浓度为0.5mg/ml、1.0mg/ml和1.... 目的:探讨苦参碱(Matrine,Ma)对人横纹肌肉瘤RD细胞增殖凋亡的影响及其作用机制。方法:将我组经体外培养的人横纹肌肉瘤RD细胞随机分为实验组和对照组。其中,实验组又分为3个小组且3个小组的细胞中分别加入浓度为0.5mg/ml、1.0mg/ml和1.5mg/ml的苦参碱,对照组细胞中不加入苦参碱。然后应用MTT比色法检测苦参碱对横纹肌肉瘤RD细胞增殖的影响;应用流式细胞仪(FCM)检测苦参碱对横纹肌肉瘤细胞凋亡的影响;应用RT-PCR检测不同浓度苦参碱作用后fas、caspase3等凋亡相关基因的mRNA表达水平。结果:①在抑制RD细胞增殖、诱导RD细胞凋亡方面,实验组和对照组间的差异具有统计学意义(P<0.05)。实验组可明显抑制RD细胞增殖、诱导RD细胞凋亡,且作用效果与剂量相关。②将浓度为2.0mg/ml的苦参碱作用于RD细胞24h后,细胞增殖的抑制率和凋亡率分别为(50.49±0.076)%和(39.43±0.487)%。③实验组caspase3和FasmRNA的表达较对照组明显增强(P<0.05)。结论:苦参碱能有效抑制人横纹肌肉瘤RD细胞增殖、诱导人横纹肌肉瘤RD细胞凋亡,且caspase3和FasmRNA等相关基因可能参与了苦参碱抑制RD细胞增殖和诱导RD细胞凋亡的过程。 展开更多

关键词 苦参碱 人横纹肌肉瘤RD细胞 细胞增殖 凋亡 CASPASE 3

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苦参碱对人横纹肌肉瘤RD细胞增殖及凋亡的影响 被引量：2

9

作者 阮梦然 薛天阳 +1 位作者 许伟 高吉照 《中国小儿血液与肿瘤杂志》 CAS 2012年第6期263-266,共4页

目的探讨苦参碱(Ma)对人横纹肌肉瘤(RMS)细胞RD增殖及凋亡的影响。方法取对数生长期的细胞,分为对照组(无Ma);Ma组:Ma终浓度分别为0.5、1.0、1.5、2.0 mg/mL;U0126(MAPK抑制剂)组:U0126为10μmol/L;Ma联合U0126共同作用组:U0126均为10μ... 目的探讨苦参碱(Ma)对人横纹肌肉瘤(RMS)细胞RD增殖及凋亡的影响。方法取对数生长期的细胞,分为对照组(无Ma);Ma组:Ma终浓度分别为0.5、1.0、1.5、2.0 mg/mL;U0126(MAPK抑制剂)组:U0126为10μmol/L;Ma联合U0126共同作用组:U0126均为10μmol/L,Ma浓度同Ma组;每组设5个复孔。给予相应药物作用后,采用倒置显微镜观察细胞形态学变化;四甲基氮唑蓝(MTT)比色法检测RD细胞的增殖抑制率;流式细胞仪(FCM)检测凋亡率。结果药物作用后显微镜下可见细胞数目减少,细胞变小、变圆,随着Ma作用浓度的增加,RD细胞凋亡细胞逐步增多;Ma与U0126联合作用后,凋亡细胞明显增多,MTT比色法检测其抑制率按分组顺序分别为(13.39±1.13)%、(23.49±0.39)%、(38.84±0.35)%、(48.05±0.82)%、(63.47±1.35)%、(13.91±0.63)%、(24.52±0.46)%、(39.82±0.58)%、(48.98±0.31)%和(65.09±0.85)%;流式细胞仪检测其凋亡率按分组顺序分别为(5.49±0.96)%、(14.23±0.70)%、(25.84±4.17)%、(36.08±3.68)%、(42.53±2.71)%、(6.72±1.52)%、(17.23±3.42)%、(27.83±1.29)%、(38.25±1.44)%和(47.79±1.35)%;除U0126组外,其余各组与对照组比较差异均有显著性(P<0.05)。结论苦参碱单独或与U0126共同作用RD细胞,可抑制该细胞的增殖,促进其凋亡,在本实验范围内浓度越高这种抑制增殖、诱导凋亡的作用越明显。 展开更多

关键词 苦参碱 人横纹肌肉瘤RD细胞 U0126 增殖率 凋亡率

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苦参碱对人横纹肌肉瘤RD细胞中X连锁凋亡抑制蛋白表达的影响 被引量：2

10

作者 李丽 薛天阳 许伟 《中华实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第15期1161-1163,共3页

目的探讨苦参碱对体外培养的人横纹肌肉瘤RD细胞中X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）表达的影响。方法体外培养人横纹肌肉瘤RD细胞并分为对照组及0．5g/L、1．0g／L、1．5g／L苦参碱干预组。采用四甲基偶氮唑蓝比色法及流式细胞术分别检测RD细... 目的探讨苦参碱对体外培养的人横纹肌肉瘤RD细胞中X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）表达的影响。方法体外培养人横纹肌肉瘤RD细胞并分为对照组及0．5g/L、1．0g／L、1．5g／L苦参碱干预组。采用四甲基偶氮唑蓝比色法及流式细胞术分别检测RD细胞在不同质量浓度苦参碱作用下的细胞增殖抑制率及凋亡率的变化，反转录PCR法检测RD细胞中XIAP mRNA的表达。结果不同质量浓度苦参碱干预组及对照组中RD细胞的增殖抑制率[0．5g／L苦参碱干预组：（15．84±2．58）％、1．0g／L苦参碱干预组：（23．13±4．19）％、1．5g／L苦参碱干预组：（30．32±3．02）％、对照组：（8．92±1．23）％]、凋亡率[0．5g／L苦参碱干预组：（12．33±1．15）％、1．0g／L苦参碱干预组：（16．67±0．99）％、1．5g/L苦参碱干预组：（25．33±1．91）％、对照组：（9．47±O．96）％]及XIAP mRNA表达（0．5g／L苦参碱干预组：0．633±0．046、1．0g／L苦参碱干预组：0．441±0．055、1．5g/L苦参碱干预组：0．326±0．065、对照组：0．794±0．029）均有差异，且差异有统计学意义（F=14．15、83．37、50．57，P均〈0．01）。随着苦参碱质量浓度的增加，RD细胞的增殖抑制率及凋亡率明显增加，而心尸mRNA的表达明显降低，且呈剂量依赖性。结论苦参碱对人横纹肌肉瘤RD细胞具有抑制增殖及诱导凋亡的作用，且该作用可能与下调凋亡抑制基因XIAP的表达有关。 展开更多

关键词 人横纹肌肉瘤RD细胞 苦参碱 X连锁凋亡抑制蛋白

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miR432*调控柯萨奇病毒A16型在人横纹肌肉瘤细胞中的复制 被引量：1

11

作者 杨倬 田波 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期679-687,共9页

【目的】研究发现microRNAs(miRNAs)可以参与调控病毒在宿主细胞内感染和复制的过程。作者研究了miRNAs对柯萨奇病毒A16型(Coxsackievirus A16,CA16)在宿主细胞内复制的影响。【方法】构建miRNAs靶基因筛选系统,在双荧光素酶报告体系的p... 【目的】研究发现microRNAs(miRNAs)可以参与调控病毒在宿主细胞内感染和复制的过程。作者研究了miRNAs对柯萨奇病毒A16型(Coxsackievirus A16,CA16)在宿主细胞内复制的影响。【方法】构建miRNAs靶基因筛选系统,在双荧光素酶报告体系的pMIR载体插入病毒基因,如果插入的基因序列能被细胞内的miRNAs靶向调控,报告基因的表达将发生变化。通过实验,发现CA16病毒5'-UTR基因可能是miRNAs的作用靶标。随后利用miRNAs在线分析软件,预测可能作用于5'-UTR基因片段的miRNAs,检测miRNAs对5'-UTR基因片段的作用。为了研究miRNAs分子对5'-UTR基因的调控作用是否可以体现在CA16病毒的复制过程中,在人横纹肌肉瘤(Rhabdomyosarcoma,RD)细胞中转染miRNAs mimics和inhibitors,利用Western blot和real-time PCR实验检验CA16病毒的复制和表达情况。【结果】实验结果表明,miR432*可以促进病毒在RD细胞中的复制和表达。反之,miR432*inhibitor有抑制病毒复制的作用。【结论】细胞内miR432*可以调控CA16在宿主细胞中的复制过程,本研究首次报导miR432*在CA16病毒复制过程中的调控作用。研究CA16病毒与宿主miRNAs的相互作用机制为进一步阐明CA16病毒感染与复制机理奠定了基础。 展开更多

关键词 MIRNAS 柯萨奇病毒A16型 人横纹肌肉瘤细胞 病毒复制

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柯萨奇病毒A组10型感染RD细胞的转录组学分析

12

作者 江俊涛 任盈盈 刘洪波 《生物资源》 CAS 2023年第2期185-192,共8页

探讨柯萨奇病毒A组10型(coxsackievirus A10,CV⁃A10)感染人横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,RD)细胞的基因表达谱变化,为深入理解CV⁃A10致病机制提供重要基础数据。本研究将CV⁃A10以感染复数(MOI)为0.1的剂量感染RD细胞12 h后提取总RNA,通... 探讨柯萨奇病毒A组10型(coxsackievirus A10,CV⁃A10)感染人横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,RD)细胞的基因表达谱变化,为深入理解CV⁃A10致病机制提供重要基础数据。本研究将CV⁃A10以感染复数(MOI)为0.1的剂量感染RD细胞12 h后提取总RNA,通过RNA⁃Seq技术获取RD细胞中的全部转录本信息,基于生物信息学的方法对差异表达基因进行GO(gene ontology,GO)和KEGG(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)分析。结果显示,共筛选到2610个差异表达基因,其中表达上调的基因有1582个,表达下调的基因有1028个。随机选取8个差异表达基因,经RT⁃qPCR验证后发现,其变化趋势与转录组数据一致。GO和KEGG富集分析结果显示,差异表达基因主要聚焦于细胞内信号转导、mRNA加工、抗病毒免疫反应等过程。结果表明,CV⁃A10感染可能会引起RD细胞发生自噬。 展开更多

关键词 柯萨奇病毒A组10型 人横纹肌肉瘤细胞 转录组学

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基于RNA-seq技术研究埃可病毒30型感染RD细胞前后的差异表达基因 被引量：1

13

作者 李冀琛 张国艳 +4 位作者 张珂艺 杨倩 刘志军 孙强 张勇 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期64-71,共8页

埃可病毒30型(Echovirus 30,E30)是一种全球传播的B组肠道病毒,常与无菌性脑膜炎等疾病暴发有关,分析E30在感染人横纹肌肉瘤(Human rhabdomyosarcoma,RD)细胞前后的差异表达基因有助于了解该病毒的复制周期以及宿主感染机制。本研究通... 埃可病毒30型(Echovirus 30,E30)是一种全球传播的B组肠道病毒,常与无菌性脑膜炎等疾病暴发有关,分析E30在感染人横纹肌肉瘤(Human rhabdomyosarcoma,RD)细胞前后的差异表达基因有助于了解该病毒的复制周期以及宿主感染机制。本研究通过转录组测序技术探究E30感染RD细胞前后的基因表达谱变化,共检测到的1281个差异表达基因,其中包括730个下调基因和551个上调基因。基因本体论(Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析表明,显著差异表达基因主要参与细胞受体信号通路的调节、炎症反应、免疫细胞活化、调控细胞生命周期等。利用荧光定量PCR(Realtime quantitative PCR,qPCR)对其中9个与炎症和免疫反应相关的差异表达基因进行验证,发现DEAD-box解旋酶3(DEAD-box RNA helicase 3,DDX3)表达上调,这与转录组学分析一致。利用RK-33(DDX3的小分子抑制剂)靶向抑制DDX3的表达,发现RK-33能够抑制E30的复制,并且qPCR结果显示在抑制DDX3的表达后,GTP酶激活蛋白结合蛋白1(GTPase-activating protein-binding protein1,G3BP1)和干扰素调节因子3(Interferon Regulatory Factor 3,IRF3)的表达也出现不同程度地降低。本研究的结果提示DDX3表达可能影响E30复制,这一发现为进一步探索E30在感染宿主过程中的分子机制奠定基础。 展开更多

关键词 埃可病毒30型 RNA-SEQ DEAD-box解旋酶3(DDX3) 差异表达基因 人横纹肌肉瘤(RD)细胞

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人用疫苗检定用MRC-5和人横纹肌肉瘤细胞的短串联重复序列图谱鉴定

14

作者 宋彩花 段男 +7 位作者 任芳芳 高有 杨欢 李娜 雷银瓶 蔡秋龙 乔燕 易力 《国际生物制品学杂志》 CAS 2021年第6期305-309,共5页

目的用短串联重复序列(short tandem repeat,STR)基因分型法对人用疫苗检定用MRC-5和人横纹肌肉瘤细胞进行鉴定,确认无污染。方法选取人源细胞的20个STR位点进行等位基因PCR扩增及荧光检测,将得到的STR图谱与美国典型培养物保藏中心和... 目的用短串联重复序列(short tandem repeat,STR)基因分型法对人用疫苗检定用MRC-5和人横纹肌肉瘤细胞进行鉴定,确认无污染。方法选取人源细胞的20个STR位点进行等位基因PCR扩增及荧光检测,将得到的STR图谱与美国典型培养物保藏中心和德国微生物菌种保藏中心数据库比对分析。结果两株细胞均得到清晰的STR特征性图谱,未出现3单位基因,在两个数据库中均找到与其细胞分型完全匹配的细胞株。结论人用疫苗检定用MRC-5和人横纹肌肉瘤细胞均为正确细胞株,不存在污染和交叉污染。 展开更多

关键词 鉴别 短串联重复序列 MRC-5细胞 人横纹肌肉瘤细胞

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miR-34b调控肠道病毒71型在人横纹肌肉瘤细胞中的复制及机制

15

作者 杨倬 田波 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期2731-2737,共7页

【背景】研究发现microRNAs(miRNAs)可以参与调控病毒在宿主细胞内感染和复制的过程。【目的】研究miR-34b对肠道病毒71型(Enterovirus71,EV71)在宿主细胞内的复制及其可能机制。【方法】在人横纹肌肉瘤(Rhabdomyosarcoma,RD)细胞中转染... 【背景】研究发现microRNAs(miRNAs)可以参与调控病毒在宿主细胞内感染和复制的过程。【目的】研究miR-34b对肠道病毒71型(Enterovirus71,EV71)在宿主细胞内的复制及其可能机制。【方法】在人横纹肌肉瘤(Rhabdomyosarcoma,RD)细胞中转染miR-34b mimics和Inhibitor,通过Western blot和Real-time PCR实验检验EV71病毒的复制和表达情况。随后利用双荧光素酶报告系统验证miR-34b与潜在靶点eIF4E的相互作用,并检测miR-34b对RD细胞中eIF4E mRNA表达水平的影响。【结果】miR-34b可以促进病毒在RD细胞中的复制和表达,而miR-34b抑制剂有抑制病毒复制的作用,细胞内miR-34b可以通过作用于靶基因eIF4E调控EV71在宿主细胞中的复制过程。【结论】揭示了miR-34b在EV71病毒复制过程中的调控作用及机制,研究EV71病毒与宿主miRNAs的相互作用机制为进一步阐明EV71病毒感染与复制机理奠定了基础。 展开更多

关键词 miR-34b 肠道病毒71型 人横纹肌肉瘤细胞 病毒复制

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肠道病毒71型激活人横纹肌肉瘤细胞中JNK1/2信号转导通路

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作者 许超 彭阳 史伟峰 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2017年第8期632-636,共5页

目的探讨c-Jun N端激酶(JNK)信号转导通路在肠道病毒71型(EV71)感染中的作用。方法台盼蓝染色法检测不同浓度抑制剂SP600125对人横纹肌肉瘤细胞(RD)活性的影响;实时荧光定量PCR及western blot检测EV71感染RD细胞后VP1 mRNA及蛋白质的表... 目的探讨c-Jun N端激酶(JNK)信号转导通路在肠道病毒71型(EV71)感染中的作用。方法台盼蓝染色法检测不同浓度抑制剂SP600125对人横纹肌肉瘤细胞(RD)活性的影响;实时荧光定量PCR及western blot检测EV71感染RD细胞后VP1 mRNA及蛋白质的表达水平;western blot检测JNK1/2、c-Fos、c-Jun蛋白及其磷酸化水平,并分析JNK1/2抑制剂SP600125对EV71复制及JNK1/2信号通路的影响。结果台盼蓝染色结果表明,与空白对照组比较,5和10μmol/L实验组存活率差异无统计学意义(P均>0.05),而20μmol/L抑制剂组细胞存活率明显降低(P<0.05);实时荧光定量PCR及western blot结果表明,与对照组相比,实验组在EV71感染RD细胞8 h后,其VP1 mRNA及蛋白质的表达水平均明显下降(P均<0.01)。此外,western blot检测结果证实EV71感染RD细胞后,其JNK1/2、c-Fos和c-Jun的蛋白质磷酸化水平均明显升高(P均<0.05)。而经抑制剂SP600125处理可明显下调其JNK1/2、c-Fos、c-Jun磷酸化水平(P均<0.05)。结论 JNK1/2信号通路可被EV71感染有效激活,并与EV71复制有关。 展开更多

关键词 JNK1/2信号通路 肠道病毒71型 人横纹肌肉瘤细胞

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白藜芦醇对人腺泡横纹肌肉瘤细胞株PLA-802增殖和凋亡的影响及其分子机制

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作者 党胜利 崔玉婷 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2017年第5期500-504,513,共6页

目的观察白藜芦醇(Resveratrol,Res)对人腺泡横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,RMS)细胞株PLA-802增殖及凋亡的影响,并探讨其可能的分子机制。方法体外培养PLA-802细胞,用不同浓度的Res(25、50、100、200μmol/L)作用不同时间(24、48、72 h)... 目的观察白藜芦醇(Resveratrol,Res)对人腺泡横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,RMS)细胞株PLA-802增殖及凋亡的影响,并探讨其可能的分子机制。方法体外培养PLA-802细胞,用不同浓度的Res(25、50、100、200μmol/L)作用不同时间(24、48、72 h)。MTT法检测Res对PLA-802细胞增殖活力的影响;流式细胞术检测Res对PLA-802细胞周期和凋亡的影响;采用Caspase-3活性检测试剂盒检测Caspase-3酶的活性;Western blot法检测PLA-802细胞中与凋亡密切相关的Bax、Bcl-2、Survivin和Caspase-3酶蛋白的表达水平。结果 Res可明显抑制PLA-802细胞的增殖(P<0.05)及提高Caspase-3酶活性(P<0.001),且呈剂量-时间依赖性;同时可明显提高处于G0/G1及G2/M期的细胞比例(P<0.01),减少S期细胞比例(P<0.001),促进PLA-802细胞的凋亡,且可显著增加促凋亡蛋白Bax和Caspase-3的表达水平(P<0.05),降低抗凋亡蛋白Bcl-2和Survivin的表达水平(P<0.05)。结论 Res可通过上调Bax、Caspase-3及下调Bcl-2和Survivin蛋白的表达水平及激活Caspase-3酶活性,诱导PLA-802细胞的凋亡并抑制其增殖,为治疗RMS提供了实验依据。 展开更多

关键词 白藜芦醇 人腺泡横纹肌肉瘤 PLA-802细胞 细胞增殖 细胞凋亡

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人横纹肌肉瘤的遗传学建模

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作者 姚杰 王志刚 《临床医药杂志》 2005年第2期36-36,共1页

横纹肌肉瘤是起源于人骨骼肌的恶性肿瘤，也是儿童时期最常见的软组织肉瘤。根据其截然不同的临床表现，肿瘤组织学分型及疾病相关风险分组。可推测横纹肌肉瘤是一类由于多种高度相关的肉瘤组成的集合体，而非成分单一的实体瘤。为了便... 横纹肌肉瘤是起源于人骨骼肌的恶性肿瘤，也是儿童时期最常见的软组织肉瘤。根据其截然不同的临床表现，肿瘤组织学分型及疾病相关风险分组。可推测横纹肌肉瘤是一类由于多种高度相关的肉瘤组成的集合体，而非成分单一的实体瘤。为了便于理解这种多组织学成分的恶性肿瘤，我们建立了一个具严格遗传学定义但又有一定可塑性的横纹肌肉瘤模型。将低分化的原始骨骼肌细胞(SkMC)及人成骨骼肌细胞(HSMM)经由旁路转化，形成恶性的横纹肌肉瘤。 展开更多

关键词 人横纹肌肉瘤 遗传学建模 软组织肉瘤 肿瘤组织学分型 骨骼肌细胞

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