NS基因克隆及人成骨肉瘤细胞和人胚胎肾细胞NS基因的表达 被引量：17

1

作者 刘思金 蔡子微 +2 位作者 胡国法 魏影允 劳为德 《牡丹江医学院学报》 2003年第2期5-7,共3页

目的 :研究nucleostemin(核干细胞因子 ,NS)基因在人成骨肉瘤细胞 (OS - 732 )和人胚胎肾细胞 (HEK -2 93)的表达情况 ,并克隆该基因的部分片段。方法 :以OS - 732细胞和HEK - 2 93细胞为实验材料 ,进行细胞总RNA的提取、反转录反应、PC... 目的 :研究nucleostemin(核干细胞因子 ,NS)基因在人成骨肉瘤细胞 (OS - 732 )和人胚胎肾细胞 (HEK -2 93)的表达情况 ,并克隆该基因的部分片段。方法 :以OS - 732细胞和HEK - 2 93细胞为实验材料 ,进行细胞总RNA的提取、反转录反应、PCR反应、NS基因片段的克隆及测序等。结果 :(1)提取的总RNA质量很高 ,基本上无降解 ;(2 )OS - 732细胞和HEK - 2 93细胞中均有NS基因的表达 ,并且在相同量底物的情况下 ,OS- 732细胞NS基因的表达量明显高于HEK - 2 93细胞 ;(3)将PCR产物成功地与pGEM -T克隆载体连接 ,构建为pGEM -T -NS质粒 ,测序结果表明NS基因片段序列与基因库中登陆的序列完全一致。结论 :本文成功地从OS - 732细胞和HEK - 2 93细胞克隆到NS基因片段 ,OS - 732细胞NS基因的表达量明显高于HEK- 2 展开更多

关键词 核干细胞因子 人成骨肉瘤细胞 NS 基因 克隆 胚胎 肾细胞 反转录反应 PCR反应

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丹参酮ⅡA对人成骨肉瘤MG-63细胞增殖的抑制作用 被引量：12

2

作者 郑燕彬 王国红 +2 位作者 洪琛 梁盈 李祺福 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第B05期1-5,共5页

应用细胞培养、台盼蓝拒染计数、光学显微镜观察、流式细胞仪检测及免疫细胞化学等技术研究中药有效成分丹参酮ⅡA对人成骨肉瘤MG-63细胞增殖抑制作用.实验结果显示,丹参酮ⅡA处理MG-63细胞后,细胞增殖活动受到抑制,抑制率为52.10%,细... 应用细胞培养、台盼蓝拒染计数、光学显微镜观察、流式细胞仪检测及免疫细胞化学等技术研究中药有效成分丹参酮ⅡA对人成骨肉瘤MG-63细胞增殖抑制作用.实验结果显示,丹参酮ⅡA处理MG-63细胞后,细胞增殖活动受到抑制,抑制率为52.10%,细胞倍增时间由对照组的48 h延长至65 h;细胞发生G0/G1期阻滞,G0/G1期细胞比例由对照组的47.5%上升到59.5%,S期细胞比例则由对照组的20.0%下降至9.0%;并出现细胞形态规则、大小趋于一致、细胞体积增大、核质比例减小等变化;MG-63细胞增殖分化调控相关的癌基因c-fos和c-myc表达活性降低.结果表明,丹参酮ⅡA对人成骨肉瘤MG-63细胞增殖有显著抑制作用,其作用可能与干预c-fos和c-myc等癌基因表达从而调控细胞周期有关. 展开更多

关键词 人成骨肉瘤细胞 抑制作用 丹参酮ⅡA

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姜黄素对人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡的诱导作用 被引量：8

3

作者 郑燕彬 杨海波 +3 位作者 陈兰英 李祺福 赵振利 刘用金 《细胞生物学杂志》 CSCD 2009年第1期84-88,共5页

应用细胞培养、细胞计数、流式细胞仪、琼脂糖凝胶电泳、Hoechst33258染色、苏木精-伊红(HE)染色、透射电镜观察等技术研究姜黄素对人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡的诱导作用。实验结果显示,姜黄素可明显诱导MG-63细胞的凋亡,经7.5mg/L姜黄素... 应用细胞培养、细胞计数、流式细胞仪、琼脂糖凝胶电泳、Hoechst33258染色、苏木精-伊红(HE)染色、透射电镜观察等技术研究姜黄素对人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡的诱导作用。实验结果显示,姜黄素可明显诱导MG-63细胞的凋亡,经7.5mg/L姜黄素诱导处理后,人成骨肉瘤MG-63细胞的增殖活动受到显著的抑制,细胞生长抑制率达63.14%;细胞周期检测出现亚二倍体(亚G1期)细胞峰值,细胞凋亡率达21.8%;琼脂糖凝胶电泳出现细胞凋亡典型的DNA"梯状"条带;细胞核经Hoechst33258染色出现浓染致密的固缩形态和颗粒状荧光;光镜和电镜观察结果显示,姜黄素处理组细胞体积缩小,细胞核固缩,染色质凝聚、线粒体肿胀、有凋亡小体形成等显著的凋亡特征。研究结果表明,姜黄素对人成骨肉瘤MG-63凋亡的诱导具有显著作用,从而为进一步研究细胞凋亡机制和多种骨骼疾病的研究提供重要基础和研究依据。 展开更多

关键词 姜黄素 人成骨肉瘤细胞 细胞凋亡 流式细胞术 琼脂糖凝胶电泳

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4种含RGD的短肽对细胞粘附作用的影响 被引量：3

4

作者 黄宜兵 吴胜男 +1 位作者 徐力 张学忠 《吉林大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期128-134,共7页

从两方面对比研究了4种含Arg-Gly-Asp(RGD)的细胞粘附肽RGD,RGDS,RGD-(NH2)2即RGE-NH2和RGDS-NH2对细胞粘附的影响.一方面研究了固定在聚乙交酯丙交酯共聚物(PLGA)膜上的4种细胞粘附肽通过其细胞定向作用对大肠癌细胞(HCT-8)和人成骨肉... 从两方面对比研究了4种含Arg-Gly-Asp(RGD)的细胞粘附肽RGD,RGDS,RGD-(NH2)2即RGE-NH2和RGDS-NH2对细胞粘附的影响.一方面研究了固定在聚乙交酯丙交酯共聚物(PLGA)膜上的4种细胞粘附肽通过其细胞定向作用对大肠癌细胞(HCT-8)和人成骨肉瘤细胞(OS732)细胞粘附性的促进作用;另一方面研究了外源性细胞粘附肽对HCT-8和OS732在纤维连接蛋白(FN)上粘附的竞争性抑制作用.结果发现,除了RGD-(NH2)2,其他3种肽都具有明显抑制细胞粘附的作用且具有一定的浓度依赖关系,其中以RGDS和RGDS-NH2的能力最强,RGD稍弱.对于HCT-8细胞,3种肽的最大抑制率分别为53.3%,56.3%,37.5%;而对OS732细胞,3种肽的最大抑制率分别为50.9%,49.8%,34%. 展开更多

关键词 细胞粘附肽 ARG-GLY-ASP 聚乙交酯丙交酯共聚物 大肠癌细胞 人成骨肉瘤细胞 纤维连接蛋白

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人甲状旁腺激素(1-34)在人成骨肉瘤细胞中对基质Gla蛋白及Wnt/β-catenin信号通路的调节作用 被引量：7

5

作者 胡亚莉 张洁 +1 位作者 符刘晨 杨雅 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期984-989,共6页

目的观察人甲状旁腺激素(PTH)的N端活性片段PTH(1-34)对人成骨肉瘤细胞MG63基质Gla蛋白(MGP)表达的影响,以及PTH通过Wnt/β-catenin信号通路介导MGP表达调控的作用,探讨PTH(1-34)在防治骨质疏松症作用中可能的分子机制。方法(1)用不同浓... 目的观察人甲状旁腺激素(PTH)的N端活性片段PTH(1-34)对人成骨肉瘤细胞MG63基质Gla蛋白(MGP)表达的影响,以及PTH通过Wnt/β-catenin信号通路介导MGP表达调控的作用,探讨PTH(1-34)在防治骨质疏松症作用中可能的分子机制。方法(1)用不同浓度PTH(1-34)(10-9、10-8、10-7mol/L),单独或联合Wnt/β-catenin信号通路抑制剂DKK-1(200 ng/m L)干预MG63细胞;(2)检测碱性磷酸酶(ALP)染色及活力测定用于判断细胞分化情况;(3)MGP及Wnt/β-catenin信号通路各组分的m RNA及蛋白的表达分别采用实时定量RT-PCR及Western blotting方法。结果 (1)PTH(1-34)上调MGP基因的表达,MGP m RNA的表达分别是对照组的2.56倍、4.14倍、7.81倍(P<0.05或P<0.01),且呈剂量依赖性增高;(2)PTH增强MG63细胞ALP活力,Dkk-1抑制ALP活性,Dkk-1与PTH联用部分阻断PTH上调ALP活力(P<0.05);(3)PTH上调MGP及Wnt/β-catenin信号通路中相关因子LRP5、β-catenin、Runx2 m RNA及蛋白水平,其m RNA分别是对照组的2.65、4.01、3.48倍(P<0.05或<0.01);DKK-1对PTH(1-34)促MGP表达没有影响,但大部分阻断了Wnt/β-catenin信号通路中相关因子的表达。结论PTH(1-34)能明显上调MGP及Wnt/β-catenin信号通路中相关因子的表达,Wnt/β-catenin信号通路和MGP在PTH调节骨代谢中起重要作用。 展开更多

关键词 人甲状旁腺激素(1-34) 基质GLA蛋白 人成骨肉瘤细胞 WNT/Β-CATENIN信号通路 碱性磷酸酶

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人成骨肉瘤顺铂耐药细胞系的建立 被引量：4

6

作者 张文韬 屠重棋 +1 位作者 刘洋 李胜富 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期262-265,共4页

目的建立顺铂诱导的人成骨肉瘤多药耐药细胞系(MG63/R)并观察其生物学特性。方法以顺铂为诱导剂,采用大剂量冲击与逐步增加剂量相结合的方法诱导人成骨肉瘤MG63细胞,建立多药耐药系MG63/R。MTT法检测药物敏感性;光镜、透射电镜观察MG63... 目的建立顺铂诱导的人成骨肉瘤多药耐药细胞系(MG63/R)并观察其生物学特性。方法以顺铂为诱导剂,采用大剂量冲击与逐步增加剂量相结合的方法诱导人成骨肉瘤MG63细胞,建立多药耐药系MG63/R。MTT法检测药物敏感性;光镜、透射电镜观察MG63、MG63/R细胞形态及超微结构变化;生长曲线、克隆形成试验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期、凋亡指数、P-pg、bcl-2、P53蛋白表达。结果经顺铂186d的诱导,建立了MG63/R,其对顺铂的耐药指数为83.557±4.841,对阿霉素、长春新碱、氨甲基蝶呤、环磷酰氨亦产生不同程度的交叉耐药;光镜观察可见MG63/R细胞排列不规则,形态呈三角形、多角形及多核现象;透射电镜显示MG63/R细胞表面突起增加,粗面内质网丰富;细胞周期分析显示细胞增殖能力明显增加而细胞凋亡明显降低;MG63/R细胞P-pg、bcl-2阳性表达较MG63细胞明显增加,P53表达则明显降低。结论本研究建立了稳定的人成骨肉瘤多药耐药细胞系MG63/R,为进一步研究顺铂的多药耐药机制和耐药治疗提供了一种新的实验模型。 展开更多

关键词 人成骨肉瘤细胞 顺铂 多药耐药

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Notch1信号抑制对成骨肉瘤细胞化疗药物敏感性的影响 被引量：3

7

作者 高天君 杨达宇 《局解手术学杂志》 2012年第3期285-287,共3页

目的研究抑制Notch1信号对成骨肉瘤细胞化疗药物敏感性的影响及部分机制。方法将人成骨肉瘤细胞系OS-732按γ-分泌酶抑制剂(GSI)作用与否分为GSI组和对照组;脂质体法转染真核细胞表达质粒;Realtime PCR检测NICD、Hes1mRNA表达;流式细胞... 目的研究抑制Notch1信号对成骨肉瘤细胞化疗药物敏感性的影响及部分机制。方法将人成骨肉瘤细胞系OS-732按γ-分泌酶抑制剂(GSI)作用与否分为GSI组和对照组;脂质体法转染真核细胞表达质粒;Realtime PCR检测NICD、Hes1mRNA表达;流式细胞仪(FACS)检测Annexin V-PE/7-AAD双标的细胞凋亡;MTT法检测化疗药物对细胞的抑制率。结果 GSI组NICD和Hes1 mRNA均较对照组明显降低(P<0.01)。GSI组化疗药物导致的瘤细胞抑制率和凋亡率均明显高于对照组。过表达Hes1可减弱GSI诱导的瘤细胞化疗药物敏感性增高。结论 GSI通过抑制Notch1受体激活和下游靶基因Hes1表达促进人成骨肉瘤细胞凋亡,从而增加人成骨肉瘤细胞对化疗药物的敏感性。 展开更多

关键词 人成骨肉瘤细胞 细胞凋亡 Γ-分泌酶抑制剂 NOTCH1 化疗敏感性

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姜黄素诱导人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡过程中核基质蛋白表达的变化 被引量：2

8

作者 李祺福 郑燕彬 +3 位作者 杨海波 石松林 赵振利 陈晋安 《分子细胞生物学报》 CSCD 北大核心 2008年第6期473-481,共9页

应用选择性抽提、整装透射电镜观察和双向聚丙烯酰胺凝胶电泳与质谱鉴定技术研究细胞凋亡诱导物姜黄素处理前后人成骨肉瘤MG-63细胞核基质-中间纤维系统的构型变化.及其核基质蛋白表达的差异。经姜黄素处理后.MG-63细胞的核基质和中间... 应用选择性抽提、整装透射电镜观察和双向聚丙烯酰胺凝胶电泳与质谱鉴定技术研究细胞凋亡诱导物姜黄素处理前后人成骨肉瘤MG-63细胞核基质-中间纤维系统的构型变化.及其核基质蛋白表达的差异。经姜黄素处理后.MG-63细胞的核基质和中间纤维比对照组明显稀疏,且分布更加不均匀,并分别与核纤层连系,形成趋于断裂但相对还较为完整的网状结构:双向凝胶电泳分析显示在姜黄素诱导MG-63细胞凋亡前后存在27个差异表达的核基质蛋白,经质谱鉴定了其中的21个蛋白.在凋亡的MG-63细胞中表达上调的蛋白鉴定为:DNA聚合酶zeta等7种蛋白:表达下调的蛋白质为:Prohibitin等14种蛋白。其中首次在核基质中发现的蛋白质有17个。因此,在MG-63细胞凋亡过程中不仅其核基质-中间纤维系统构型产生了典型的的凋亡特征性变化.而且伴有核基质蛋白表达的差异。由此证实了与肿瘤细胞凋亡诱导相关特异核基质蛋白的存在及其对肿瘤细胞凋亡诱导的调控作用.从而对揭示核基质构型及其蛋白组成与细胞凋亡的关系和阐明细胞凋亡过程中的基因表达调控机理.均具有重要意义。 展开更多

关键词 人成骨肉瘤细胞 细胞凋亡 姜黄素 核基质-中间纤维系统 核基质蛋白

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人成骨肉瘤MG-63细胞在HMBA诱导分化后核基质蛋白表达的变化 被引量：1

9

作者 赵春红 李祺福 +1 位作者 李智星 陈晋安 《分子细胞生物学报》 CSCD 北大核心 2006年第2期169-176,共8页

HMBA诱导处理人成骨肉瘤MG-63细胞分化后,选择性抽提核基质蛋白,经双向凝胶电泳技术分析．共有12个蛋白点表达发生变化,经肽指纹图谱分析鉴定了9个蛋白质,其中,MHCⅡ类抗原、IFN刺激的基因因子3α蛋白、DKFZp434M2221．1蛋白、8-羟基-... HMBA诱导处理人成骨肉瘤MG-63细胞分化后,选择性抽提核基质蛋白,经双向凝胶电泳技术分析．共有12个蛋白点表达发生变化,经肽指纹图谱分析鉴定了9个蛋白质,其中,MHCⅡ类抗原、IFN刺激的基因因子3α蛋白、DKFZp434M2221．1蛋白、8-羟基-鸟嘌呤糖基化酶同功酶oggl和波形蛋白表达上调,hnRNP A2/B1和肌动蛋白表达下调,60S核糖体蛋白L21和ST2蛋白仅在分化的MG-63细胞中表达。研究结果表明肿瘤细胞增殖分化过程中伴随核基质蛋白表达的变化,并为深入揭示核基质蛋白与细胞癌变和逆转的关系以及阐明细胞增殖分化的基因表达调控原理提供了依据。 展开更多

关键词 核基质蛋白 细胞分化 人成骨肉瘤细胞 HMBA

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维甲酸诱导人成骨肉瘤MG-63细胞分化过程中核基质构型及其蛋白质组成变化观察

10

作者 赵妍 唐剑 +2 位作者 赵春红 石松林 李祺福 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第B05期6-10,共5页

应用选择性抽提、整装透射电镜观察和双向聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分析维甲酸诱导处理前后人成骨肉瘤MG-63细胞核基质-中间纤维系统的构型变化,以及核基质蛋白表达变化.实验结果显示MG-63细胞核基质和中间纤维数量较少、分布不均匀,核... 应用选择性抽提、整装透射电镜观察和双向聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分析维甲酸诱导处理前后人成骨肉瘤MG-63细胞核基质-中间纤维系统的构型变化,以及核基质蛋白表达变化.实验结果显示MG-63细胞核基质和中间纤维数量较少、分布不均匀,核纤层为薄厚不一结构,与两类纤维联系不密切.经1μmol/L维甲酸处理后,细胞核基质纤维和中间纤维数量增多、结构层次丰富、单丝成分多,分布均匀并相互交织成规则网络,两类纤维通过薄层均一的核纤层发生密切联系,形成贯穿整个细胞核质区域的完整体系.此外,核基质蛋白表达也发生显著变化.表明经维甲酸诱导处理后MG-63的核基质-中间纤维系统产生了与正常细胞相似的恢复性改变,并且伴有核基质蛋白表达的差异.这些变化是癌细胞恶性表型逆转的重要特征和功能表现,对于揭示核基质构型及其蛋白组成与细胞癌变和逆转的关系和阐明细胞增殖分化的基因表达调控原理,均具有重要意义. 展开更多

关键词 核基质-中间纤维 核基质蛋白 人成骨肉瘤细胞 维甲酸

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二氢青蒿素对人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡的诱导作用 被引量：2

11

作者 马玉樊 卢婷利 +3 位作者 王韵晴 赵雯 梅其炳 陈涛 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2011年第12期1324-1330,共7页

采用CCK-8细胞增殖检测、流式细胞仪、Hoechst 33258染色、细胞周期检测、细胞凋亡检测等研究了二氢青蒿素对人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡的诱导作用。细胞增殖检测发现二氢青蒿素对MG-63细胞48h及72h时的50%抑制率分别为44.87μmol/L和19.1... 采用CCK-8细胞增殖检测、流式细胞仪、Hoechst 33258染色、细胞周期检测、细胞凋亡检测等研究了二氢青蒿素对人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡的诱导作用。细胞增殖检测发现二氢青蒿素对MG-63细胞48h及72h时的50%抑制率分别为44.87μmol/L和19.15μmol/L;细胞周期检测发现细胞生长被阻滞在G_0/G_1期;Hoechst33258染色凋亡检测发现细胞核出现致密的固缩形态及颗粒状荧光;Annexin V-FITC双染细胞凋亡检测发现二氢青蒿素对MG-63细胞的凋亡率为45.10%。表明:二氢青蒿素可明显诱导MG-63细胞的凋亡,并且MG-63细胞的凋亡与二氢青蒿素存在剂量与时间依赖关系,二氢青蒿素对人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡的诱导具有显著作用,这将为进一步研究细胞凋亡机制提供基础和实验依据。 展开更多

关键词 二氢青蒿素 人成骨肉瘤细胞 细胞凋亡 流式细胞术

原文传递

姜黄素对顺铂抑制人成骨肉瘤细胞MG63增殖的影响 被引量：2

12

作者 李飞 杜远立 +2 位作者 王华 邓桂 乐锦波 《医学综述》 2010年第20期3180-3182,共3页

目的研究姜黄素对顺铂抑制人成骨肉瘤细胞MG63增殖的影响。方法采用噻唑蓝比色法检测姜黄素和顺铂不同浓度组合时对MG63细胞增殖的影响,荧光倒置显微镜观察药物作用后细胞形态的改变,流式细胞术检测细胞凋亡率的改变。结果随着姜黄素和... 目的研究姜黄素对顺铂抑制人成骨肉瘤细胞MG63增殖的影响。方法采用噻唑蓝比色法检测姜黄素和顺铂不同浓度组合时对MG63细胞增殖的影响,荧光倒置显微镜观察药物作用后细胞形态的改变,流式细胞术检测细胞凋亡率的改变。结果随着姜黄素和顺铂的药物浓度逐渐升高,单药对MG63细胞的增殖抑制率呈上升趋势(P<0.05)。两药联合作用后细胞明显变形、发泡,细胞凋亡数进一步增加,细胞排列更加紊乱,大量细胞脱落悬浮于培养液中。结论不同浓度的姜黄素对顺铂抑制人成骨肉瘤细胞MG63增殖的影响不一样,可以是拮抗、相加或协同。 展开更多

关键词 姜黄素 顺铂 人成骨肉瘤细胞 细胞凋亡

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亚甲蓝衍生物光化学反应对人成骨肉瘤细胞细胞株灭活作用的实验研究 被引量：2

13

作者 周芳 吴文知 +3 位作者 张兰 黄毅 王艳萍 刘进 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期223-226,共4页

目的探讨光化学反应中不同浓度亚甲蓝衍生物（M007）对人成骨肉瘤细胞（MG-63）的灭活作用，提供将M007应用于肿瘤手术血液回收的前期研究基础。方法实验设空白（c）对照组、单纯光照（P）对照组、不作红光光照的M007对照组及实验组（M0... 目的探讨光化学反应中不同浓度亚甲蓝衍生物（M007）对人成骨肉瘤细胞（MG-63）的灭活作用，提供将M007应用于肿瘤手术血液回收的前期研究基础。方法实验设空白（c）对照组、单纯光照（P）对照组、不作红光光照的M007对照组及实验组（M007-PCT）。将10^6个／ml的MG-63单细胞悬液与不同浓度的M007混匀反应，经震荡暗反应及可见红外光照射（M007-PCT）后，采用台盼蓝染色检测肿瘤细胞死亡率。结果M007-PCT组，M007为（2～4）μmol／L时，MG-63细胞株死亡率随光敏剂浓度增加而增大（P〈0．05）；M007在（4～32）μmol／L内，MG-63细胞的死亡率达到较高水平（〉93％），且不再随M007浓度增加而增大（P〉0．05）。M007对照组的MG-63细胞株死亡率随M007浓度增加有增加的趋势，但明显低于相同光敏剂浓度M007-PCT组肿瘤细胞死亡率（P〈0．05）。结论新型光敏剂M007对MG-63细胞具有有效的灭活作用，是肿瘤手术术中血液回收方面极具应用前景的光敏剂。 展开更多

关键词 光化学治疗(PCT) 光敏剂 人成骨肉瘤细胞 台盼蓝 肿瘤手术 血液回收

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华蟾素联合甲氨蝶呤治疗骨肉瘤效果及作用机制研究

14

作者 王华 张明 +1 位作者 刘恒志 李飞 《中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生》 2022年第5期6-9,共4页

研究华蟾素对甲氨蝶呤(MTX)抑制人成骨肉瘤细胞MG63增殖的影响。方法:采用MTT比色法检测华蟾素组、华蟾素+甲氨蝶呤以及其他各组的细胞抑制作用,Hoechst33258染色法检测细胞凋亡情况,流式细胞术观察药物对细胞周期的抑制作用。结果:华... 研究华蟾素对甲氨蝶呤(MTX)抑制人成骨肉瘤细胞MG63增殖的影响。方法:采用MTT比色法检测华蟾素组、华蟾素+甲氨蝶呤以及其他各组的细胞抑制作用,Hoechst33258染色法检测细胞凋亡情况,流式细胞术观察药物对细胞周期的抑制作用。结果:华蟾素不同药物浓度在不同时间点对骨肉瘤MG-63细胞的生长表现出不同的抑制效果,并且华蟾素与MTX联合用药具有更好的肿瘤抑制。结论:华蟾素作为化疗增敏剂,可与MTX联合应用于骨肉瘤的化疗中。 展开更多

关键词 华蟾素 甲氨蝶呤 人成骨肉瘤细胞 细胞凋亡

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氟化钠对人成骨肉瘤Saos-2细胞PI3K/Akt信号表达及凋亡的影响 被引量：1

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作者 蒋香菊 张利 +5 位作者 贺怡 张荣 尚香玉 谢玉 贺梦雅 张亚楼 《中华地方病学杂志》 CAS 北大核心 2021年第3期190-194,共5页

目的观察氟化钠(NaF)对人成骨肉瘤Saos-2细胞磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号表达及凋亡的影响。方法采用成组设计,按NaF剂量将Saos-2细胞分为0(对照)、5、10、20、40 mg/L染氟组(n=3)。体外培养24、48 h后收集细胞,采用蛋... 目的观察氟化钠(NaF)对人成骨肉瘤Saos-2细胞磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号表达及凋亡的影响。方法采用成组设计,按NaF剂量将Saos-2细胞分为0(对照)、5、10、20、40 mg/L染氟组(n=3)。体外培养24、48 h后收集细胞,采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测PI3K、Akt和线粒体凋亡途径相关分子Forkhead转录因子(FoxO)1的蛋白表达,采用流式细胞仪检测Saos-2细胞的凋亡水平。结果体外培养24、48 h时,各组Saos-2细胞PI3K、Akt蛋白表达比较,差异均无统计学意义(P均>0.05)。24 h时,5、10、20、40 mg/L染氟组磷酸化PI3K(p-PI3K)蛋白表达(0.40±0.06、0.45±0.02、0.37±0.06、0.32±0.06)均高于对照组(0.28±0.04,P均<0.05);48 h时,5、10 mg/L染氟组p-PI3K蛋白表达(0.46±0.06、0.58±0.03)均高于对照组(0.29±0.04,P均<0.05),而40 mg/L染氟组(0.21±0.03)低于对照组(P<0.05)。24 h时,5、10、20 mg/L染氟组磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达(0.27±0.01、0.30±0.03、0.27±0.03)均高于对照组(0.20±0.02,P均<0.05);48 h时,5、10 mg/L染氟组p-Akt蛋白表达(0.42±0.04、0.60±0.02)均高于对照组(0.27±0.01,P均<0.05),而40 mg/L组(0.18±0.02)低于对照组(P<0.05)。24 h时,10、20、40 mg/L染氟组FoxO1蛋白表达(0.38±0.07、0.41±0.06、0.47±0.08)均高于对照组(0.34±0.04,P均<0.05);48 h时,5、10、20、40 mg/L染氟组FoxO1蛋白表达(0.36±0.08、0.37±0.10、0.54±0.04、0.73±0.04)均高于对照组(0.28±0.04,P均<0.05)。24、48 h时,对照组和5、10、20、40 mg/L染氟组细胞凋亡率分别为(2.867±0.583)%、(3.647±0.035)%、(3.773±0.095)%、(5.440±0.325)%、(7.203±0.476)%,(3.707±0.286)%、(4.023±0.241)%、(4.970±0.368)%、(12.473±0.949)%、(19.387±1.892)%。24 h时,40 mg/L染氟组凋亡水平高于对照组(P<0.05);48 h时,20、40 mg/L染氟组凋亡水平均高于对照组(P均<0.05)。结论氟可以直接激活成骨细胞内的PI3K/Akt信号通路,进而产生抗凋亡作用。 展开更多

关键词 氟化钠 人成骨肉瘤细胞 磷脂酰肌醇-3-激酶 蛋白激酶B 细胞凋亡

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组织非特异性碱性磷酸酶活力的细胞原位红外检测

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作者 任重远 Saida Mebarek +1 位作者 René Buchet 吴玉清 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2018年第S1期115-116,共2页

以富含组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)的人成骨肉瘤细胞株Saos-2为研究模型,利用β-甘油磷酸(β-GP)作为TNAP的生物底物,以红外(IR)光谱为监测工具,检测Saos-2细胞水解β-GP的反应过程,根据红外谱图特征吸收峰的变化,计算TNAP酶活力值。

关键词 人成骨肉瘤细胞 TNAP β-甘油磷酸 IR光谱 细胞原位

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原位检测组织非特异碱性磷酸酶活性的二维相关分析校正

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作者 任重远 Saida Mebarek +1 位作者 RenéBuchet 吴玉清 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2020年第S01期69-70,共2页

在以人成骨肉瘤细胞株(Saos-2)为模型,利用α-D-葡萄糖-1-磷酸(α-G-1-P)为生理底物,原位检测组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)活力时,红外(IR)光谱峰位选取不准确和谱带严重重叠无法分辨/分离等都将给酶活力的测试结果带来偏差。二维相关... 在以人成骨肉瘤细胞株(Saos-2)为模型,利用α-D-葡萄糖-1-磷酸(α-G-1-P)为生理底物,原位检测组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)活力时,红外(IR)光谱峰位选取不准确和谱带严重重叠无法分辨/分离等都将给酶活力的测试结果带来偏差。二维相关分析与IR光谱的结合使用将在一定程度上改进上述问题,将在文中具体阐述。 展开更多

关键词 人成骨肉瘤细胞 TNAP α-D-葡萄糖-1-磷酸 IR光谱 二维相关分析

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不同浓度葡萄糖对人成骨肉瘤细胞株MG63活性的影响 被引量：6

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作者 程萌 陈德才 卢春燕 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期239-242,共4页

目的观察不同浓度葡萄糖对体外培养的人成骨肉瘤细胞株MG63的影响,探讨糖尿病导致骨质疏松症可能的发病机制。方法采用4种不同浓度葡萄糖(5.5 mmol/L、10 mmol/L、20 mmol/L、40 mmol/L),培养基连续培养人成骨肉瘤细胞株MG63,观察葡萄... 目的观察不同浓度葡萄糖对体外培养的人成骨肉瘤细胞株MG63的影响,探讨糖尿病导致骨质疏松症可能的发病机制。方法采用4种不同浓度葡萄糖(5.5 mmol/L、10 mmol/L、20 mmol/L、40 mmol/L),培养基连续培养人成骨肉瘤细胞株MG63,观察葡萄糖对细胞增殖、分泌活性产物的能力、凋亡以及矿化能力等各个方面的影响。结果升高的葡萄糖浓度对细胞的增殖具有一定的促进作用,但增多的细胞数量并没有带来相应细胞活性的增加。相反,细胞分泌碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(BGP)的能力以及矿化能力不同程度的出现了下降,且在不考虑渗透压因素情况下,细胞凋亡比率增加。结论本实验证实了高糖环境对细胞活性,特别是矿化能力的抑制作用,为临床工作中严格控制血糖防止骨质疏松症的发生提供了理论依据。 展开更多

关键词 葡萄糖 糖尿病 骨质疏松症 人成骨肉瘤细胞株MG63

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Bak1腺病毒表达载体的构建及对人成骨肉瘤细胞的影响 被引量：1

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作者 柴爽 黄红 +3 位作者 万雷 王吉利 王伟 黄宏兴 《广东医学》 CAS 2018年第9期1332-1336,共5页

目的构建人Bcl2拮抗1(Bak1)基因重组表达腺病毒pAd-Bak1,并感染人成骨肉瘤细胞MG63建立过表达Bak1的细胞模型,检测其对细胞活性的影响。方法利用qPCR扩增Bak1全长cDNA,利用穿梭质粒pENTER构建载有Bak1基因的重组穿梭质粒pENTER-Bak1,通... 目的构建人Bcl2拮抗1(Bak1)基因重组表达腺病毒pAd-Bak1,并感染人成骨肉瘤细胞MG63建立过表达Bak1的细胞模型,检测其对细胞活性的影响。方法利用qPCR扩增Bak1全长cDNA,利用穿梭质粒pENTER构建载有Bak1基因的重组穿梭质粒pENTER-Bak1,通过基因测序鉴定载体序列。将重组载体PmeⅠ线性化、脱磷酸化后,转入含有腺病毒骨架质粒pAd-Amp的感受态BJ5183细胞中进行基因同源重组。将重组腺病毒质粒pAD-Bak1经PacⅠ酶切线性化后,用Lipofectamine 2000脂质体转染到HEK-293细胞中进行包装扩繁,荧光定量PCR法测定病毒滴度。感染MG63细胞,qPCR和Western blot检测Bak1的表达,MTT检测细胞活性。结果测序及酶切验证pENTER-Bak1构建成功。pAD-Bak1感染MG63细胞,qPCR检测到细胞中Bak1基因过表达(与NC对照组和空白对照组相比P<0.01、P<0.01),Western blot检测到细胞中Bak1蛋白过表达。MTT检测显示与NC对照组相比,细胞活性减弱(P<0.05)。结论成功构建了Bak1重组表达腺病毒,验证了其能够感染MG63细胞表达Bak1蛋白,证明了过表达Bak1可以减弱细胞的活性。为进一步研究Bak1的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 人Bcl2拮抗1(Bak1)蛋白 重组腺病毒载体 人成骨肉瘤细胞MG63

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Bcl2过表达重组腺病毒的构建及鉴定

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作者 黄红 王吉利 +2 位作者 柴爽 万雷 黄宏兴 《贵州医药》 CAS 2018年第8期909-912,共4页

目的构建人B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)过表达载体p ENTER-Bcl2,检测其在人成骨肉瘤细胞中的表达及对细胞活性的影响。方法利用q PCR扩增Bcl2全长c DNA,构建表达载体p ENTER-Bcl2,经测序证实后将其转染至人成骨肉瘤细胞(MG63)中,利用q PCR和We... 目的构建人B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)过表达载体p ENTER-Bcl2,检测其在人成骨肉瘤细胞中的表达及对细胞活性的影响。方法利用q PCR扩增Bcl2全长c DNA,构建表达载体p ENTER-Bcl2,经测序证实后将其转染至人成骨肉瘤细胞(MG63)中,利用q PCR和Western blot方法检测Bcl2的表达,利用MTT检测细胞活性。结果DNA测序结果显示构建的p ENTER-Bcl2载体表达与实验设计相符;Ad-Bcl2组Bcl2 mRNA表达较NC对照组和空白对照组高(P均<0.01);Ad-Bcl2组Bcl2蛋白表达较NC对照组和空白对照组高(P<0.05,P<0.01);与NC对照组比较,Ad-Bcl2感染细胞活性增强(P<0.05)。结论构建的p ENTER-Bcl2能在MG63细胞中过表达Bcl2;AdBcl2可以提高细胞的活性,这为研究Bcl-2在骨质疏松发生时的分子生物学机制奠定了基础。 展开更多

关键词 过表达人B细胞淋巴瘤-2载体 人成骨肉瘤细胞MG63 构建

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