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心脏安全药理学评价新策略——CiPA 被引量：6
1
作者 胡晓敏 张子腾 +4 位作者 宗英 马秀娟 袁伯俊 陆国才 王庆利 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第17期1939-1945,共7页
心脏安全药理学评价是药物开发的重要环节。现有的心脏安全药理学评价主要是依据人用药品注册技术国际协调会(ICH)制定了关于心脏安全性评估的框架性指南S7A/B文件进行,但随着对心律失常机制认识的深入,上述评价方法的弊端日益凸显。新... 心脏安全药理学评价是药物开发的重要环节。现有的心脏安全药理学评价主要是依据人用药品注册技术国际协调会(ICH)制定了关于心脏安全性评估的框架性指南S7A/B文件进行,但随着对心律失常机制认识的深入,上述评价方法的弊端日益凸显。新的评价心脏安全性策略——综合性离体致心律失常风险评估(CiPA)应运而生。这是一种基于人类自身机制的、研究药物对人类心脏多个离子通道影响、应用计算机模拟技术及人源化细胞系的全新评价策略。本文介绍和分析CiPA,以期为我国心脏安全药理学评价提供借鉴。 展开更多
关键词 心脏安全药理学评价 综合性离体致心律失常风险评估 计算机模拟 人干细胞 心肌细胞
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人干细胞实验动物嵌合体模型的研究进展 被引量：2
2
作者 周文君 张连峰 《中国比较医学杂志》 CAS 2007年第11期I0014-I0016,I0019,共4页
动物模型是疾病研究、发病机制、药物治疗的必要工具,目前一些困扰人类健康的重大疾病如艾滋病、乙型肝炎等因为还没有能反映人类疾病发病机理的理想动物模型。人干细胞是能在体外长期培养的、高度未分化的全能细胞系,亚全能细胞系和分... 动物模型是疾病研究、发病机制、药物治疗的必要工具,目前一些困扰人类健康的重大疾病如艾滋病、乙型肝炎等因为还没有能反映人类疾病发病机理的理想动物模型。人干细胞是能在体外长期培养的、高度未分化的全能细胞系,亚全能细胞系和分化的干细胞等。如果能将人的干细胞成功移植入实验动物体内形成人源化嵌合体动物,有希望为艾滋病、肝炎等的研究制备适当的模型。人类干细胞在动物中的移植研究中主要的实验动物是绵羊,小鼠等,本文介绍了人干细胞在动物体内移植的研究进展。 展开更多
关键词 人干细胞 实验动物 嵌合体 模型 动物
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人干细胞的采集分离和保存及临床应用 被引量：1
3
作者 梁翠铭 黄敏 《检验医学与临床》 CAS 2007年第12期1192-1193,共2页
关键词 人干细胞 分离 保存 干细胞移植
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体外人干细胞分化血小板研究进展
4
作者 黄韦华 王若儒 +1 位作者 顾海慧 钱宝华 《中国输血杂志》 CAS 2021年第12期1403-1408,共6页
血小板输注是临床治疗血小板减少症的主要方法。但是由于血小板采集难度大、使用成本高的特点,再加上献血者数量有限,使得其治疗开展受到很大限制。因此体外生成血小板的相关研究在世界范围内日益受到广泛关注。体外生成血小板具有非供... 血小板输注是临床治疗血小板减少症的主要方法。但是由于血小板采集难度大、使用成本高的特点,再加上献血者数量有限,使得其治疗开展受到很大限制。因此体外生成血小板的相关研究在世界范围内日益受到广泛关注。体外生成血小板具有非供体依赖性、无血小板抗原限制性、低同种异体免疫风险等优点。目前体外产生功能性血小板的效率较低,距离实现体外大量生成功能性血小板的最终目标还有很大距离。本文回顾了体外巨核细胞/血小板生成的研究进展,重点介绍了巨核细胞/血小板的体外生成潜能,总结了目前基于人多能干细胞、胚胎干细胞和脂肪干细胞的血小板体外培养体系,探讨了体外生成血小板所面临的矛盾与困难,为进一步的深入研究作了理论梳理。 展开更多
关键词 血小板生成 体外实验 巨核细胞 人干细胞 血小板减少症
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hSCGF-α穿膜肽的构建及其对hUCMSCs增殖作用的影响 被引量：1
5
作者 彭鑫磊 马岩岩 +3 位作者 荣靖 任哲 陈海佳 王一飞 《中国卫生检验杂志》 CAS 2011年第4期871-874,共4页
目的:构建hSCGF-α穿膜肽(TAT-SCGF),研究其对人脐带间充质干细胞的增殖作用。方法:采用基因工程技术将hSCGF-α基因重组插入pET-28a(+)质粒DNA,构建TAT-SCGF-28a重组DNA,并在大肠杆菌BL21(DE3)中成功高效表达,包涵体纯化后,通过实验比... 目的:构建hSCGF-α穿膜肽(TAT-SCGF),研究其对人脐带间充质干细胞的增殖作用。方法:采用基因工程技术将hSCGF-α基因重组插入pET-28a(+)质粒DNA,构建TAT-SCGF-28a重组DNA,并在大肠杆菌BL21(DE3)中成功高效表达,包涵体纯化后,通过实验比较hSCGF-α及hSCGF-α穿膜肽(TAT-SCGF)对人脐带间充质干细胞的增殖刺激作用。结果与结论:成功构建TAT-SCGF-28a重组DNA;纯化的蛋白纯度达90%以上;TAT-SCGF较不具有穿膜功能的SCGF对人脐带间充质干细胞有更强的增殖效果。 展开更多
关键词 人干细胞生长因子 人脐带间充质干细胞 穿膜肽 包涵体
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人干细胞自体移植治疗冠心病的临床研究现状 被引量：2
6
作者 陈绪军 肖明第 《中华外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期695-697,共3页
关键词 人干细胞自体移植 治疗 冠心病 临床研究
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重组人干细胞生长因子(rhSCF)生物活性测定方法研究 被引量：2
7
作者 韩蕾 王舸 +4 位作者 黎耘 关向前 刘玉应 吴洽庆 陈松森 《中国药学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第2期149-151,共3页
目的 建立rhSCF生物活性测定方法。方法 分别采用MTT比色法与琼脂集落培养法进行rhSCF生物活性测定。结果 两种方法对同批次rhSCF成品测定结果无显著性差异。结论由于MTT比色法操作简便、稳定性好,可以替代琼脂集落培养法,使rhSCF测定... 目的 建立rhSCF生物活性测定方法。方法 分别采用MTT比色法与琼脂集落培养法进行rhSCF生物活性测定。结果 两种方法对同批次rhSCF成品测定结果无显著性差异。结论由于MTT比色法操作简便、稳定性好,可以替代琼脂集落培养法,使rhSCF测定更加准确、可行。 展开更多
关键词 重组人干细胞生长因子 rhSCF 生物活性 测定方法 MTT比色法
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微小RNA-29a在膝骨关节炎兔子中的表达及其对干细胞生长因子β、血管内皮生长因子表达和炎症反应的影响 被引量：1
8
作者 李冕 刘宣毅 +1 位作者 董朝军 东彬 《广西医学》 CAS 2022年第3期289-295,共7页
目的探讨微小RNA(miRNA)-29a在膝骨关节炎(KOA)兔子中的表达水平及其对干细胞生长因子β(SCGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)表达水平及炎症反应的影响。方法(1)在48只新西兰兔中取8只作为空白对照组,另外40只用于建立KOA模型,建模成功... 目的探讨微小RNA(miRNA)-29a在膝骨关节炎(KOA)兔子中的表达水平及其对干细胞生长因子β(SCGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)表达水平及炎症反应的影响。方法(1)在48只新西兰兔中取8只作为空白对照组,另外40只用于建立KOA模型,建模成功后随机平均分为非干预组、SCGF-β组、VEGF组和SCGF-β+VEGF组。SCGF-β组、VEGF组和SCGF-β+VEGF组分别采用相应抗体干预,空白对照组与非干预组采用等量生理盐水干预。干预1周后,检测各组血清miRNA-29a、SCGF-β、VEGF、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和C反应蛋白(CRP)的表达水平。(2)取非干预组兔子的软骨组织制备KOA软骨细胞,利用miRNA-29a模拟物(Mimic组)、miRNA-29a阴性对照物(NC组)和miRNA-29a抑制物(Inhibitor组)转染细胞。正常组不予干预。7 d后检测各组软骨细胞miRNA-29a的表达水平及SCGF-β、VEGF mRNA和蛋白的相对表达水平。结果(1)与空白对照组相比,非干预组、SCGF-β组、VEGF组及SCGF-β+VEGF组的血清miRNA-29a表达水平均降低,而血清SCGF-β、VEGF、TNF-α和CRP水平均升高(均P<0.05)。SCGF-β组和SCGF-β+VEGF组的血清SCGF-β表达水平均低于VEGF组与非干预组,VEGF组和SCGF-β+VEGF组的血清VEGF表达水平均低于SCGF-β组与非干预组;SCGF-β组、VEGF组和SCGF-β+VEGF组的血清TNF-α和CRP表达水平均低于非干预组,且SCGF-β+VEGF组的血清TNF-α和CRP表达水平均低于SCGF-β组与VEGF组(均P<0.05)。(2)正常组及NC组miRNA-29a相对表达水平低于Mimic组,高于Inhibitor组;且Inhibitor组miRNA-29a相对表达水平低于Mimic组(均P<0.05);3组转染后的软骨细胞SCGF-β、VEGF的蛋白及mRMA相对表达水平均为Inhibitor组>NC组>Mimic组(均P<0.05)。结论KOA兔子血清miRNA-29a的表达水平降低,血清SCGF-β、VEGF、TNF-α和CRP的表达水平升高,下调SCGF-β和VEGF表达可抑制KOA兔子体内的炎症反应。上调miRNA-29a表达水平可抑制KOA软骨细胞SCGF-β、VEGF的表达,这有助于减轻KOA� 展开更多
关键词 膝骨关节炎 微小RNA-29a 人干细胞生长因子β 血管内皮生长因子 肿瘤坏死因子α C反应蛋白 新西兰兔
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人干细胞生长因子cDNA克隆、表达和纯化及其造血种属特异性
9
作者 原野 张云生 +5 位作者 李秀森 郭子宽 刘晓丹 侯春梅 唐佩弦 毛宁 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第2期379-383,共5页
人干细胞生长因子(humanstemcellgrowthfactor,hSCGF)是一种早期造血调控因子。已知人干细胞生长因子具有两种形式,包括全长分子hSCGF以及在Ca2+依赖糖识别结构域(calcium-dependentcarbohydraterecognitiondomain,CRD)内缺失78氨基酸... 人干细胞生长因子(humanstemcellgrowthfactor,hSCGF)是一种早期造血调控因子。已知人干细胞生长因子具有两种形式,包括全长分子hSCGF以及在Ca2+依赖糖识别结构域(calcium-dependentcarbohydraterecognitiondomain,CRD)内缺失78氨基酸的截短型分子hSCGFβ。hSCGFβ的造血刺激活性具有严格的种属特异性。本研究目的在于探讨hSCGF能否协同刺激小鼠粒/单系祖细胞增殖。为克服hSCGF的cDNAGC含量较高的困难,本研究以两步PCR的方法从人胎肝cDNA文库(Clontech)中成功克隆hSCGFcDNA,进而将hSCGF成熟肽编码序列亚克隆于原核表达载体pGEX4T-2中,融合表达。研究结果表明,通过低温诱导(28℃),重组表达产物主要以可溶蛋白的形式存在于裂解上清中,利用亲和层析纯化融合表达蛋白。对重组蛋白的造血刺激活性分析表明,不同于截短型分子hSCGFβ,全长分子hSCGF能够刺激小鼠骨髓粒/单系造血祖细胞增殖。结论:hSCGFCRD不直接结合受体,可能具有其他生物学功能。 展开更多
关键词 人干细胞生长因子 CRD区 CDNA克隆 融合表达 造血种属特异性
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检测重组人干细胞生长因子生物活性方法的改进
10
作者 赖春宁 黎燕 +1 位作者 洪海燕 沈倍奋 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期72-74,共3页
目的　比较检测重组人干细胞生长因子生物学活性的方法。方法　应用Mo7e细胞系MTT(四甲基偶氮唑盐 )比色、3H TdR掺入方法和CFU GM半固体检测技术 ,检测rhSCF和rhGM CSF生物学活性。结果　Mo7e细胞系MTT比色方法检测重组人SCF生物学活... 目的　比较检测重组人干细胞生长因子生物学活性的方法。方法　应用Mo7e细胞系MTT(四甲基偶氮唑盐 )比色、3H TdR掺入方法和CFU GM半固体检测技术 ,检测rhSCF和rhGM CSF生物学活性。结果　Mo7e细胞系MTT比色方法检测重组人SCF生物学活性与半固体集落培养技术以及3H TdR掺入具有同样的灵敏度。结论　该方法为研究SCF作用于造血干细胞的机理、信号传导以及临床前期的研究 。 展开更多
关键词 重组人干细胞生长因子 Mo7e细胞系 MTT比色 SCF生物学检测
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人干细胞相关中国专利申请概况及其审查基准探讨——由杰龙公司终止干细胞疗法研究谈起
11
作者 冯怡 马文霞 《中国发明与专利》 2012年第3期89-91,共3页
本文从杰龙公司终止干细胞疗法研究的事件出发,以专利的视角分析人干细胞相关技术应用前景,以及该领域专利审查标准施行中存在的问题,为相关从业人员提供意见和建议。
关键词 人干细胞专利申请审查基准
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人神经干细胞移植治疗重度新生儿缺氧缺血性脑病一例 被引量：72
12
作者 栾佐 尹国才 +6 位作者 胡晓红 屈素清 吴南海 严凤清 钱阳明 金慧玉 龚晓军 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期580-583,共4页
目的探讨人神经干细胞移植方法治疗重度新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)的可行性。方法一例出生75天的重度HIE后遗症患儿,智力运动发育严重滞后,肌张力异常,磁共振图像显示脑实质多发软化灶和萎缩。取孕11周人胚胎前脑细胞,经体外培养扩增为... 目的探讨人神经干细胞移植方法治疗重度新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)的可行性。方法一例出生75天的重度HIE后遗症患儿,智力运动发育严重滞后,肌张力异常,磁共振图像显示脑实质多发软化灶和萎缩。取孕11周人胚胎前脑细胞,经体外培养扩增为人神经干细胞(neuralstemcells,NSCS),并经患儿脑室穿刺注入。结果移植28天后患儿不仅肌张力显著改善,智力运动发育迅速追赶、接近正常同龄水平。PET显示顶颞叶放射性增加,细胞代谢明显增强,提示植入的细胞存活。结论本例人胚胎来源NSCS移植治疗重度新生儿HIE后遗症,近期临床疗效显著,远期疗效有待进一步观察。 展开更多
关键词 婴儿 新生 缺氧缺血 脑 干细胞移植 重度新生儿缺氧缺血性脑病 神经干细胞移植治疗 人神经干细胞 肌张力异常 体外培养扩增 新生儿HIE 运动发育
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培养角膜干细胞羊膜片移植治疗角膜缘功能障碍 被引量：22
13
作者 潘志强 张文华 《中国实用眼科杂志》 CSCD 2000年第9期524-526,共3页
临床观察培养的角膜干细胞羊膜移植片治疗角膜缘功能障碍的效果。方法 :人角膜缘干细胞原代培养后接种生长于羊膜上 ,临床选择角膜缘烧伤后 (碱烧伤、酸烧伤、其他化学烧伤等 )角膜新生血管的患者进行干细胞羊膜片移植 ,术后观察角膜上... 临床观察培养的角膜干细胞羊膜移植片治疗角膜缘功能障碍的效果。方法 :人角膜缘干细胞原代培养后接种生长于羊膜上 ,临床选择角膜缘烧伤后 (碱烧伤、酸烧伤、其他化学烧伤等 )角膜新生血管的患者进行干细胞羊膜片移植 ,术后观察角膜上皮、组织浸润和新生血管情况。结果 :术后患者自觉症状轻 ,视力有一定提高 ,角膜缘移植片紧密贴附 ,角膜上皮完整 ,轻度基质炎性浸润 ,浅层新生血管减少 ,深层新生血管充盈减轻 ,睑球粘连得到松解。结论 展开更多
关键词 人角膜干细胞 羊膜同种异体移植 角膜缘功能障碍
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I型胶原支架材料与人脂肪干细胞体外生物相容性研究 被引量：24
14
作者 张云松 高建华 +2 位作者 鲁峰 朱茗 廖云君 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期223-225,共3页
目的观察人脂肪干细胞与I型胶原支架材料的生物相容性,为脂肪组织工程选择适宜的种子细胞载体。方法将人脂肪干细胞与I型胶原支架体外培养复合,采用倒置相差显微镜和扫描电镜,观察细胞在支架上黏附、生长及增殖情况并计算细胞黏附率,XT... 目的观察人脂肪干细胞与I型胶原支架材料的生物相容性,为脂肪组织工程选择适宜的种子细胞载体。方法将人脂肪干细胞与I型胶原支架体外培养复合,采用倒置相差显微镜和扫描电镜,观察细胞在支架上黏附、生长及增殖情况并计算细胞黏附率,XTT比色法检测细胞增殖率。结果脂肪干细胞能良好的在支架上黏附、生长和增殖。结论I型胶原支架材料具有良好的细胞相容性,可作为脂肪组织工程的种子细胞载体。 展开更多
关键词 人脂肪干细胞 组织工程 支架 细胞相容性
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成体人牙髓干细胞的分离与鉴定 被引量：22
15
作者 杨雪超 樊明文 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期244-247,共4页
目的从成体人牙髓组织中分离培养牙髓干细胞,初步探讨其分化潜能。方法选取年轻患者因正畸或阻生拔除的健康第三磨牙,取出牙髓,采用酶消化及过滤法得到单细胞悬液,有限稀释法原代培养。扩大培养细胞克隆,检测STRO1的表达。体外诱导分化... 目的从成体人牙髓组织中分离培养牙髓干细胞,初步探讨其分化潜能。方法选取年轻患者因正畸或阻生拔除的健康第三磨牙,取出牙髓,采用酶消化及过滤法得到单细胞悬液,有限稀释法原代培养。扩大培养细胞克隆,检测STRO1的表达。体外诱导分化后对各克隆从碱性磷酸酶(ALP)活性、矿化结节形成、牙本质涎蛋白(DSP)表达、OilRedO染色、PPARr2基因表达等方面进行检测。结果克隆来源细胞STRO1表达阳性。在矿化液诱导下,克隆细胞呈现明显高的ALP活性;能够形成矿化结节;可以分泌表达DSP,已向成牙本质细胞方向发生了分化。成脂肪诱导后,OilRedO染色阳性,可检测到PPARr2基因表达。结论从成体人牙髓组织中可以分离培养出干细胞,在体外能有效增殖并保持低分化状态。 展开更多
关键词 人牙髓干细胞 分离与鉴定 成体 人牙髓组织 体外诱导分化 牙本质涎蛋白 成牙本质细胞 分离培养 基因表达 单细胞悬液 有限稀释法 碱性磷酸酶 ALP活性 分化潜能 初步探讨 第三磨牙 年轻患者 原代培养 细胞克隆 扩大培养
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胰蛋白酶消化法和组织块法原代培养人包皮成纤维细胞的比较 被引量：21
16
作者 王志强 梁锐 +5 位作者 陈明清 邓俊 李文亮 陈天星 文政琦 杨军 《生命科学研究》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期242-247,共6页
小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)是目前国际上公认的人胚胎干细胞(hESCs)体外培养的饲养层细胞,但MEFs存在寿命短、动物源性污染等问题,需要探索适于hESCs体外培养且寿命长的人源性饲养层.采用胰蛋白酶消化法和组织块法分别原代培养人包皮成... 小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)是目前国际上公认的人胚胎干细胞(hESCs)体外培养的饲养层细胞,但MEFs存在寿命短、动物源性污染等问题,需要探索适于hESCs体外培养且寿命长的人源性饲养层.采用胰蛋白酶消化法和组织块法分别原代培养人包皮成纤维细胞(hFFs),探索hFFs原代培养的最佳方法,为hFFs作为饲养层在hESCs研究中的应用提供可靠的科学依据;通过倒置显微镜下观察其生长状态和免疫细胞化学染色鉴定,结果显示两种原代培养方法获得的hFFs的形态及生物学特性均符合成纤维细胞;通过测定细胞生长曲线及MTT法检测,结果显示两种原代培养方法获得的不同代数的hFFs均具有较高的增殖活性,传代10余代仍能保持较好的细胞形态,可以制备成饲养层用于hESCs的研究. 展开更多
关键词 人包皮成纤维细胞 原代培养 胰蛋白酶消化法 组织块法 饲养层 人胚胎干细胞
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bFGF、TGF-β对人牙髓干细胞增殖和分化能力的影响 被引量：17
17
作者 贺慧霞 金岩 +4 位作者 史俊南 刘源 胡世颉 董蕊 雷娟 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2004年第7期359-363,共5页
目的 :探讨 b FGF和 TGF-β对体外培养的人牙髓干细胞增殖和分化能力的影响。方法 :采用 MTT法分别测定了 b FGF和 TGF-β作用不同浓度、不同时间单独或联合作用对人牙髓干细胞增殖能力的影响。通过碱性磷酸酶活性检测、细胞形态学观察... 目的 :探讨 b FGF和 TGF-β对体外培养的人牙髓干细胞增殖和分化能力的影响。方法 :采用 MTT法分别测定了 b FGF和 TGF-β作用不同浓度、不同时间单独或联合作用对人牙髓干细胞增殖能力的影响。通过碱性磷酸酶活性检测、细胞形态学观察及 DSP、DMP-1免疫组化染色来检测这两种因子对人牙髓干细胞分化能力的影响。结果 :0～ 40 ng/ m L范围内 ,b FGF单独作用能显著促进人牙髓干细胞的增殖 ,且具有浓度和时间依赖性 ,而 TGF-β促增殖作用较弱 ;两者联合作用 ,促增殖作用无显著提高 ,而促分化作用显著增强 ,不仅细胞形态明显改变 ,而且碱性磷酸酶活性显著提高 ,DSP、DMP-1呈阳性表达 ,向成牙本质细胞样细胞分化。结论 :b FGF和 TGF-β对体外培养的人牙髓干细胞增殖和分化具有重要作用 ,为对探讨影响人牙髓干细胞增殖和分化的因素提供参考依据。 展开更多
关键词 碱性成纤维生长因子(bFGF) 转化生长因子(TGF-β) 人牙髓干细胞
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人胚胎干细胞的研究 被引量：14
18
作者 胡显文 陈昭烈 黄培堂 《生物技术通讯》 CAS 2000年第2期135-140,共6页
来自着床前的囊胚和早期人胚胎的人胚胎干细胞是未分化的多能干细胞 ,具有无限增殖和分化的潜力 ,这种特性使之在基础研究和移植治疗中具有广泛的应用。尤其是胚胎干细胞可以产生任何类型的可供临床使用的细胞、组织和器官的潜力 ,将会... 来自着床前的囊胚和早期人胚胎的人胚胎干细胞是未分化的多能干细胞 ,具有无限增殖和分化的潜力 ,这种特性使之在基础研究和移植治疗中具有广泛的应用。尤其是胚胎干细胞可以产生任何类型的可供临床使用的细胞、组织和器官的潜力 ,将会带来一场医学革命。 展开更多
关键词 人胚胎干细胞 核移植 组织工程
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人脂肪干细胞的分离培养与生物学特性 被引量：19
19
作者 田霖 孙筱放 +3 位作者 刘海波 骆玉梅 陈欣洁 黄东健 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2012年第32期5946-5952,共7页
背景:高效、稳定地获得大量较高纯度的人脂肪干细胞,是其在组织工程学及再生医学中广泛应用的基础和前提。目的:探索体外培养脂肪干细胞的适宜条件,从而提高其增殖能力。方法:采用胶原酶消化的方法,从人腹部皮下块状脂肪中分离出脂肪干... 背景:高效、稳定地获得大量较高纯度的人脂肪干细胞,是其在组织工程学及再生医学中广泛应用的基础和前提。目的:探索体外培养脂肪干细胞的适宜条件,从而提高其增殖能力。方法:采用胶原酶消化的方法,从人腹部皮下块状脂肪中分离出脂肪干细胞,经贴壁筛选法纯化细胞、低糖培养基体外培养扩增。Giesam染色后观察细胞形态;绘制细胞生长曲线并进行细胞周期分析,观察分析传代后染色体核型改变;选取第3代脂肪干细胞做流式细胞鉴定、EdU细胞增殖能力检测以及克隆形成实验。结果与结论:分离培养的原代脂肪干细胞形态不一,经传代后的细胞形态趋于长梭形,排列紧密呈漩涡状生长。细胞生长曲线呈S形,细胞周期分析及EdU掺入法结果显示体外培养的脂肪干细胞具有较强的增殖能力。经染色体核型分析结果提示,体外培养不会引起脂肪干细胞的核型改变。第3代脂肪干细胞经流式细胞仪检测CD29,CD44,CD90,CD105均呈阳性表达,而CD34和CD45呈阴性;克隆形成率为8.8%;在一定的诱导条件下,脂肪干细胞能够向脂肪细胞及成骨细胞分化。结果说明采用胶原酶消化法可成功分离培养人脂肪干细胞,且具有较强的增殖能力。 展开更多
关键词 人脂肪干细胞 分离 体外扩增培养 鉴定 染色体核型 生物学特性
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人脐带干细胞外周静脉移植治疗失代偿期肝硬化的临床疗效 被引量：16
20
作者 翁敬飚 阮海兰 +1 位作者 韦玲 陈长智 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2010年第4期541-543,共3页
目的:探讨人脐带间充质干细胞(HUCMSCs)移植治疗失代偿期肝硬化的临床效果。方法:20例肝硬化失代偿期患者,采用人脐带血干细胞移植治疗,移植术后3 d,7 d,14 d、4周,8周,12周观察血清转氨酶(ALT)、总胆红素(TB)、凝血酶原时间(PT)和白蛋... 目的:探讨人脐带间充质干细胞(HUCMSCs)移植治疗失代偿期肝硬化的临床效果。方法:20例肝硬化失代偿期患者,采用人脐带血干细胞移植治疗,移植术后3 d,7 d,14 d、4周,8周,12周观察血清转氨酶(ALT)、总胆红素(TB)、凝血酶原时间(PT)和白蛋白(ALB)水平变化,同时观察临床症状的改善情况。结果:术后3,7 d,各项肝功能指标无显著性差异(P>0.05),术后14 d、4周,除外ALT有所改善(P<0.05),其余指标无明显改善,8周各项肝功能指标均有改善(P<0.05)。12周有显著的改善(P<0.01),腹水减轻75.0%(15/20),乏力好转占80%(16/20)。食欲改善者占65%(13/20),移植术中和术后未见明显不良反应。结论:HUCMSCs体外培养诱导、扩充后外周静脉移植是治疗失代偿期肝硬化一种安全有效的方法,可以显著改善失代偿期肝硬化患者肝功能及临床症状。 展开更多
关键词 人脐带干细胞 移植 肝硬化
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