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“生物钢性及弹性蛋白”——蜘蛛丝研究进展 被引量:3
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作者 王晓玉 柳增善 任洪林 《医学争鸣》 CAS 北大核心 2002年第S1期31-34,共4页
0 引言 蜘蛛丝是由蜘蛛丝腺体分泌的蛋白质遇空气凝结而成,蜘蛛从受精卵孵出到死亡,终生都分泌蜘蛛丝,它是自然选择留给蜘蛛的一种生存、繁衍的工具,离开了蛛丝,蜘蛛也就无法在这个世上存在,所以蜘蛛丝特别是拖丝又被称为蜘蛛的“命绳”... 0 引言 蜘蛛丝是由蜘蛛丝腺体分泌的蛋白质遇空气凝结而成,蜘蛛从受精卵孵出到死亡,终生都分泌蜘蛛丝,它是自然选择留给蜘蛛的一种生存、繁衍的工具,离开了蛛丝,蜘蛛也就无法在这个世上存在,所以蜘蛛丝特别是拖丝又被称为蜘蛛的“命绳”,生物进化赋予了这种生物蛋白丝,有着其他现有的任何纤维无可比拟的力学特性,被誉为“生物钢蛋白”,由于其特殊的性质,所以蜘蛛丝受到人们越来越多的广泛关注。 展开更多
关键词 生物钢性蛋白 蜘蛛丝 基因克隆 人工表达
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体外合成朊病毒的研究进展 被引量:1
2
作者 刘东 卢士英 +3 位作者 周玉 宫彬彬 任洪林 柳增善 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期74-78,共5页
朊蛋白疾病是人类和动物中枢神经变性的神经退行性疾病,严重威胁人类的健康。朊病毒(Prion)引发疾病的致病机理尚未十分清楚,常采用体外合成Prion的方法研究其致病机理,但体外研究朊蛋白的主要困难在于建立一个合适的系统模拟体内环境,... 朊蛋白疾病是人类和动物中枢神经变性的神经退行性疾病,严重威胁人类的健康。朊病毒(Prion)引发疾病的致病机理尚未十分清楚,常采用体外合成Prion的方法研究其致病机理,但体外研究朊蛋白的主要困难在于建立一个合适的系统模拟体内环境,以便研究正常朊蛋白转化为致病性朊病毒的发病机制。综述了无细胞转化分析,细胞裂解液转化分析,蛋白质错折叠循环扩增,自催化转化分析等至今普遍采用的几种Prion体外合成方法,并讨论了这些方法是否适合用于模拟Prion在体内合成并聚集的过程,为研究朊病毒疾病提供了丰富的研究资源,为深入研究朊蛋白致病性转化提供参考。 展开更多
关键词 朊蛋白 朊病毒 人工表达 体外 转化
原文传递
促黄体激素释放激素在大肠杆菌中的表达
3
作者 孟锐奇 甄英凯 +1 位作者 朱平 姚湘燕 《生物技术通讯》 CAS 1997年第Z1期109-109,共1页
促黄体激素释放激素(LRH)是动物下丘脑分泌的一种十肽,分子量为1180,通过调节脑垂体分泌LH和FSH以及直接作用于性腺发挥生理作用,在控制机体生长发育和性周期活动中具有重要作用。在畜牧业生产上,促黄体激素释放激素能有效诱导和加速排... 促黄体激素释放激素(LRH)是动物下丘脑分泌的一种十肽,分子量为1180,通过调节脑垂体分泌LH和FSH以及直接作用于性腺发挥生理作用,在控制机体生长发育和性周期活动中具有重要作用。在畜牧业生产上,促黄体激素释放激素能有效诱导和加速排卵,促进发情,提高动物繁殖率,能有效治疗卵巢囊肿。目前生产普遍使用化学合成的LRH类似物,但成本高。如果能人工表达LRH。 展开更多
关键词 促黄体激素 释放激素 大肠杆菌中表达 卵巢囊肿 机体生长发育 大学研究 人工表达 畜牧业生产 化学合成 动物繁殖
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新型人工miRNA表达框架的构建及其有效性验证 被引量:2
4
作者 徐慧 范张玲 +2 位作者 张旺 杨伦宇 彭剑雄 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期939-943,共5页
目的构建针对EGFP基因的人工miRNA表达框架并验证其有效性。方法用融合PCR技术在体外构建针对EGFP基因的人工miRNA表达框架。经测序比对后,以该表达框架与报告基因质粒p EGFP-N2分别共转染人肝癌细胞系Hep G2、人宫颈癌细胞系He La和人... 目的构建针对EGFP基因的人工miRNA表达框架并验证其有效性。方法用融合PCR技术在体外构建针对EGFP基因的人工miRNA表达框架。经测序比对后,以该表达框架与报告基因质粒p EGFP-N2分别共转染人肝癌细胞系Hep G2、人宫颈癌细胞系He La和人肺腺癌细胞系A549,48 h后用倒置荧光显微镜观察增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达情况并用流式细胞仪定量检测其抑制效率。结果构建的人工miRNA表达框架经测序比对正确;共转染该表达框架和报告基因质粒p EGFP-N2后,倒置荧光显微镜观察结果显示,3种细胞中发出荧光的细胞数量减少,荧光强度明显降低。流式细胞术检测结果显示,Hep G2细胞、He La细胞和A549细胞中共转染组和单独转染组的细胞荧光表达率差异均有统计学意义(t分别为20.80、30.35和20.34,P均<0.01)。结论成功构建靶向EGFP的人工miRNA表达框架,且此表达框架能有效而特异地抑制EGFP蛋白在Hep G2细胞、He La细胞和肺癌A549细胞中的表达。 展开更多
关键词 人工miRNA表达框架 EGFP基因 HEP G2细胞 HE La细胞 A549细胞
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基于miRNA-30的RNAi表达框架的构建及其有效性验证 被引量:1
5
作者 李亚红 赵丹丹 +3 位作者 李思佳 覃淇 邱彤彤 彭剑雄 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2016年第8期625-629,共5页
目的构建基于人源性miRNA-30,针对EGFP基因的RNAi表达框架并验证其有效性。方法融合PCR构建RNAi表达框架,经凝胶电泳、测序比对及二级结构预测后,将该表达框架与p EGFP-N2质粒共转染A549、HCT116及HEK-293细胞,48 h后倒置荧光显微镜观察... 目的构建基于人源性miRNA-30,针对EGFP基因的RNAi表达框架并验证其有效性。方法融合PCR构建RNAi表达框架,经凝胶电泳、测序比对及二级结构预测后,将该表达框架与p EGFP-N2质粒共转染A549、HCT116及HEK-293细胞,48 h后倒置荧光显微镜观察EGFP的表达情况并用流式细胞仪检测平均荧光强度。结果凝胶电泳和测序比对均显示RNAi表达框架与设计的相符,二级结构预测显示,新型RNAi表达框架与人源性miRNA-30的二级结构高度相似;共转染该表达框架与p EGFP-N2质粒48 h后,倒置荧光显微镜观察结果显示,3种细胞的荧光强度均明显减弱,流式细胞仪检测结果显示,3种细胞中共转染组与单独转染组相比平均荧光强度的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论新型RNAi表达框架构建成功,且能有效干扰EGFP在A549,HCT116和HEK-293细胞中的表达。 展开更多
关键词 RNAI 人工miRNA表达框架 A549细胞 HCT116细胞 HEK-293细胞
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