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多色荧光原位杂交技术的建立及其在早先受照射者剂量重建中的应用 被引量:14
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作者 刘青杰 陈德清 +2 位作者 陈晓宁 Julie R.Korenberg 姜恩海 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期77-82,共6页
目的 建立多色荧光原位杂交方法 ,并探讨用该方法进行早先辐射受照射者的剂量重建的可行性。方法 筛选 8对染色体端粒和着丝粒特异性人工细菌染色体 (BAC)克隆 ,建立多色荧光原位杂交方法 ,用该方法分析60 Coγ射线离体照射的新生儿... 目的 建立多色荧光原位杂交方法 ,并探讨用该方法进行早先辐射受照射者的剂量重建的可行性。方法 筛选 8对染色体端粒和着丝粒特异性人工细菌染色体 (BAC)克隆 ,建立多色荧光原位杂交方法 ,用该方法分析60 Coγ射线离体照射的新生儿脐带血淋巴细胞染色体畸变 ,并建立相应的标准剂量 效应曲线 ,参照标准剂量 效应曲线来估算两例早先受照射者的累积吸收剂量。结果 本研究中建立的多色荧光原位杂交方法用生物素和 (或 )地高辛将端粒和着丝粒BACDNA标记成绿、红、黄 (绿 +红 ) 3种荧光染色 ,使得 1 ,2 ,3 ,7,8,9,1 4和 1 5号染色体很容易辨认。用该方法分析受60 Coγ射线照射的新生儿脐带血淋巴细胞染色体畸变 ,除断片外 ,其他染色体畸变的剂量 效应曲线均为线性二次剂量反应模式。用所有细胞或稳定性细胞中的完全相互易位率作指标 ,估算了两例早先受射照者的吸收剂量。 展开更多
关键词 多色荧光原位杂交技术 早先辐射受照射 剂量重建 染色体端粒 染色体着丝粒 人工细菌染色体
原文传递
中国南荻基因组大片段人工细菌染色体文库的构建
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作者 姚瑶 崔腾腾 +1 位作者 张丽敏 陈翠霞 《中国科技论文》 北大核心 2017年第12期1427-1433,共7页
以二倍体中国南荻为实验材料,以pIndigoBAC536-S为载体,以HindIII为限制性内切酶,经过载体的制备、高质量大片段DNA的获得、部分酶切最佳条件的确定、2次大片段选择和连接转化等过程,成功构建了中国南荻人工细菌染色体(bacterial artifi... 以二倍体中国南荻为实验材料,以pIndigoBAC536-S为载体,以HindIII为限制性内切酶,经过载体的制备、高质量大片段DNA的获得、部分酶切最佳条件的确定、2次大片段选择和连接转化等过程,成功构建了中国南荻人工细菌染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)文库。该文库共包含130 560个克隆,空载率为2%,同时构建了340个超级池,便于以后针对目的基因片段的BAC筛选。对随机挑取的100个单克隆检测,结果显示,插入片段分布集中,平均大小为106kb,覆盖了南荻基因组的5.6倍。随机挑取的5个克隆经过100代左右的繁殖,DNA的酶切图谱保持一致,表明BAC克隆的稳定性良好。该文库能够为该品种的基因组研究提供1个有效的平台,将对芒属植物优良基因的克隆、基因组物理图谱的构建以及比较基因组学等方面的研究发挥重要作用。 展开更多
关键词 作物遗传育种 南荻 基因组 人工细菌染色体文库
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