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肌肉特异性基因启动子的上游转录调控元件研究进展 被引量:6
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作者 赵丹丹 刘聪聪 +3 位作者 贾明玉 杨悦 叶枫 严云勤 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期500-505,共6页
真核生物启动子位于基因5’端上游转录起始位点附近,是包含核心启动子以及上游转录调控元件的一段DNA序列,这些转录调控元件控制着基因表达的强度和特异性。肌肉特异性启动子的上游调控元件种类、数量和排列顺序决定着基因在肌肉中的特... 真核生物启动子位于基因5’端上游转录起始位点附近,是包含核心启动子以及上游转录调控元件的一段DNA序列,这些转录调控元件控制着基因表达的强度和特异性。肌肉特异性启动子的上游调控元件种类、数量和排列顺序决定着基因在肌肉中的特异性表达。深入研究肌肉启动子的上游调控元件,可以进一步了解肌肉基因表达机制,从而为肌肉性状的改良、增殖分化的机理和疾病的基因治疗等研究提供重要依据。该文回顾了近年来肌肉特异性启动子研究领域中的新发现,包括肌肉特异性启动子转录调控元件的分子机制、建立人工合成肌肉启动子的方法及应用,并探讨该领域中急需解决的问题和发展前景。 展开更多
关键词 肌肉特异性启动子 转录调控元件 人工合成启动子
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人工合成启动子特异启动IGF-1真核载体的构建与绵羊成纤维细胞转染 被引量:1
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作者 袁建龙 王玮 +4 位作者 金永 肖红 梁伟 郭旭东 仓明 《内蒙古大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期678-682,共5页
构建了肌肉特异表达IGF-1载体,并转染绵羊成纤维细胞获得了稳定整合外源基因可用于细胞核移植的转基因细胞.通过人工合成骨骼肌特异启动子SP片段,与羊IGF-1相连,最终连接到骨架载体pCDsRed2中构建成骨骼肌特异表达IGF-的真核表达载体pSP... 构建了肌肉特异表达IGF-1载体,并转染绵羊成纤维细胞获得了稳定整合外源基因可用于细胞核移植的转基因细胞.通过人工合成骨骼肌特异启动子SP片段,与羊IGF-1相连,最终连接到骨架载体pCDsRed2中构建成骨骼肌特异表达IGF-的真核表达载体pSPICDS.使用脂质体法转染绵羊成纤维细胞,通过红色荧光与G418双重选择,获得了转基因细胞.经PCR检测证实得到的细胞克隆外源基因稳定整合,可以作为供体细胞用于体细胞核移植. 展开更多
关键词 人工合成启动子 胰岛素样生长因 绵羊成纤维细胞 基因转染
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人工合成启动子的应用 被引量:1
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作者 肖红庆 李晓薇 +4 位作者 Jameel Aysha 刘伟灿 章婷婷 王一帆 李海燕 《农业与技术》 2018年第9期20-23,共4页
随着现代生物技术的发展,天然启动子已不能满足对基因进行精细调控的需求。人工合成启动子是指人为的设计合成一段能够满足实践需求的启动子序列。人工合成启动子能够调节基因的表达水平,使基因的表达达到最佳水平。文章综述了人工合成... 随着现代生物技术的发展,天然启动子已不能满足对基因进行精细调控的需求。人工合成启动子是指人为的设计合成一段能够满足实践需求的启动子序列。人工合成启动子能够调节基因的表达水平,使基因的表达达到最佳水平。文章综述了人工合成启动子的研究现状,讨论了人工合成启动子在工业生产、基因治疗、植物抗逆及病原体检测方面的应用,展望了人工合成启动子未来的发展趋势。 展开更多
关键词 人工合成启动子 构建方式 基因治疗 植物抗逆 病原体检测
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基因诱变、重组、克隆
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《生物技术通报》 CAS CSCD 1992年第1期29-35,共7页
关键词 基因克隆 人工合成启动子 外源基因 重链 基因转移 表达系统 芽抱杆菌 位点特异性 酵母基因组 转座
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Synthetic promoters consisting of defined cis-acting elements link multiple signaling pathways to probenazole-inducible system
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作者 Zheng ZHU Jiong GAO +4 位作者 Jin-xiao YANG Xiao-yan WANG Guo-dong REN Yu-long DING Ben-ke KUAI 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2015年第4期253-263,共11页
Probenazole (3-allyloxy-l,2-benzisothiazole-1,1-dioxide, PBZ), the active component of Oryzemate, could induce systemic acquired resistance (SAR) in plants through the induction of salicylic acid (SA) biosynthes... Probenazole (3-allyloxy-l,2-benzisothiazole-1,1-dioxide, PBZ), the active component of Oryzemate, could induce systemic acquired resistance (SAR) in plants through the induction of salicylic acid (SA) biosynthesis. As a widely used chemical inducer, PBZ is a good prospect for establishing a new chemical-inducible system. We first designed artificially synthetic promoters with tandem copies of a single type of cis-element (SARE, JERE, GCC, GST1, HSRE, and W-box) that could mediate the expression of the tS-glucuronidase (GUS) reporter gene in plants upon PBZ treatment. Then we combined different types of elements in order to improve inducibility in the PBZ-inducible system. On the other hand, we were surprised to find that the cis-elements, which are responsive to jasmonic acid (JA) and ethylene, also responded to PBZ, implying that SA, JA, and ethylene pathways also would play important roles in PBZ's action. Further analysis demonstrated that PBZ also induced early events of innate immunity via a signaling pathway in which Ca2+ influx and mitogen-activated protein kinase (MAPK) activity were involved. We constructed synthesized artificial promoters to establish a PBZ chemical-inducible system, and preliminarily explored SA, JA, ethylene, calcium, and MAPK signaling pathways via PBZ-inducible system, which could provide an insight for in-depth study. 展开更多
关键词 PROBENAZOLE Systemic acquired resistance (SAR) Cis-acting element Chemical-inducible system Synthetic promoter
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谷氨酸棒杆菌人工合成启动子文库的构建及应用 被引量:7
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作者 刘莫识 刘娇 +4 位作者 孙冠男 路福平 王钰 郑平 孙际宾 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期831-842,共12页
启动子是实现基因精细表达调控的重要工具,广泛应用于微生物的代谢工程改造。谷氨酸棒杆菌是重要的工业底盘,已报道的启动子文库较少且主要是基于完全人工设计的突变序列构建获得。本研究对谷氨酸棒杆菌odhA基因天然启动子的–10区及附... 启动子是实现基因精细表达调控的重要工具,广泛应用于微生物的代谢工程改造。谷氨酸棒杆菌是重要的工业底盘,已报道的启动子文库较少且主要是基于完全人工设计的突变序列构建获得。本研究对谷氨酸棒杆菌odhA基因天然启动子的–10区及附近序列进行随机突变,借助rfp报告基因和荧光成像系统进行高通量筛选,构建了包含57个相对强度为2.4–16.7倍的人工启动子文库,最高强度可达强诱导型启动子P_(trc)的2.3倍。分析文库的突变序列,发现55个启动子突变体的–10区保守序列“TANNNT”均向3′端移动1–4个碱基,其中移动4个碱基的突变体占68%;同时发现强、中、弱启动子突变体在不同位置还呈现T或G保守碱基。选择5个不同强度的启动子应用于L-脯氨酸合成途径γ-谷氨酰激酶(ProB)的表达调控,结果显示,L-脯氨酸产量随着启动子强度增强逐渐提高,相对强度为9.8倍的启动子达到最高产量(6.4 g/L),更高强度的启动子将不再提高L-脯氨酸的产量。本研究基于谷氨酸棒杆菌天然启动子P_(odhA)构建文库,成功获得1个强度增强显著、分布均匀的新型启动子文库,可用于谷氨酸棒杆菌的系统代谢工程改造,还可为更多启动子文库的构建提供思路和方法借鉴。 展开更多
关键词 谷氨酸棒杆菌 人工合成启动子文库 P_(odhA)启动子 L-脯氨酸
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转卵泡抑制素基因对绵羊肌源性细胞中肌肉抑制素基因的调控 被引量:2
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作者 岳群华 袁建龙 +5 位作者 郝斐 靳木子 王景园 杨文亮 刘东军 仓明 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期385-393,共9页
【目的】构建骨骼肌特异表达目的基因卵泡抑制素(follistatin,FST)的真核表达载体pCFCDs-red和pSPFCDs-red,分别转染到不同细胞系中,检测FST及下游基因在RNA和蛋白水平的表达情况,同时测定骨骼肌特异启动子SP和α-actin的启动效率,以研... 【目的】构建骨骼肌特异表达目的基因卵泡抑制素(follistatin,FST)的真核表达载体pCFCDs-red和pSPFCDs-red,分别转染到不同细胞系中,检测FST及下游基因在RNA和蛋白水平的表达情况,同时测定骨骼肌特异启动子SP和α-actin的启动效率,以研究FST的特异表达对肌肉发育的影响。【方法】利用脂质体分别将真核表达载体pCFCDs-red和pSPFCDs-red转染到绵羊胎儿成纤维细胞(SFFCs)、骨骼肌卫星细胞(SMSCs)和SMSCs诱导肌管中,获得转基因细胞;对获得细胞的生长状况、细胞周期、细胞形态大小以及目的基因和下游基因的表达情况,分别用流式细胞仪、实时定量PCR和western blotting等方法进行检测分析。【结果】①转基因细胞系的生长趋势与非转基因细胞相似,转基因SMSCs细胞增殖的速度高于转基因SFFCs细胞;②流式细胞仪分析表明,转基因细胞系转染后70%以上细胞均处于G0/G1期,保持旺盛的分裂能力、具有单一峰值、细胞的整倍性好、细胞电子体积显著增大;③实时定量PCR及western blotting检测结果表明,转基因细胞系中FST的RNA及蛋白水平相比非转基因细胞系均上调;④转基因SMSCs和肌管相比转基因SFFCs细胞的FST表达量高,转pSPFCDs-red转基因细胞中FST的表达水平比转pCFCDs-red细胞系高。【结论】骨骼肌特异性启动子SP及α-actin能够在SMSCs及肌管中有效启动FST目的基因的表达,且在肌管中具有较高的表达量,SP启动子的启动效率较高于α-actin。在肌源性细胞中,FST的上调可以引起MSTN蛋白水平的下调,FST对骨骼肌细胞的生长发育具有一定促进作用。 展开更多
关键词 FST 人工合成启动子SP 骨骼肌特异表达启动子α-actin 骨骼肌卫星细胞 肌管
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