肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因沉默CD24^-CD44^+人喉鳞癌干细胞生物学特性的改变 被引量：1

1

作者 苏静 薛海涛 +1 位作者 田君海 张继华 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2017年第5期663-668,共6页

背景:肿瘤坏死因子受体相关蛋白1的异常表达与多种肿瘤的发生、发展密切相关。因此靶向抑制肿瘤坏死因子受体相关蛋白1的表达成为治疗或干预肿瘤生长的重要靶点。目的:观察肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因沉默对人喉鳞癌干细胞生长及凋... 背景:肿瘤坏死因子受体相关蛋白1的异常表达与多种肿瘤的发生、发展密切相关。因此靶向抑制肿瘤坏死因子受体相关蛋白1的表达成为治疗或干预肿瘤生长的重要靶点。目的:观察肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因沉默对人喉鳞癌干细胞生长及凋亡的影响。方法:采用流式细胞技术特异性分离出CD24-CD44+喉鳞癌干细胞。设计及合成肿瘤坏死因子受体相关蛋白1的si RNA序列,脂质体TM2000转染CD24-CD44+喉鳞癌干细胞。流式细胞仪、MTT实验、细胞克隆形成实验、TUNEL凋亡实验评价沉默肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因对CD24-CD44+喉鳞癌干细胞增殖、凋亡的影响。结果与结论:(1)相关因子表达:相比于CD24+CD44-的人喉鳞癌细胞,CD24-CD44+人喉鳞癌干细胞内干性基因OCT4,SOX2,NANOG,肿瘤坏死因子受体相关蛋白1的表达均上调(P<0.05)。RNA干扰后,肿瘤坏死因子受体相关蛋白1的表达显著降低(P<0.05);(2)细胞周期及增殖:肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因沉默后人喉鳞癌干细胞的生长速度明显减慢(P<0.05),细胞停滞在G0/G1期,在S期细胞数减少(P<0.05),M期细胞无明显变化。肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因沉默后人喉鳞癌干细胞的增殖受到明显的抑制(P<0.05);(3)细胞克隆形成能力:相比于未经转染的人喉鳞癌干细胞,肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因沉默后人喉鳞癌干细胞克隆形成能力显著下调(P<0.05);(4)细胞凋亡:相比于未经转染的人喉鳞癌干细胞,肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因沉默后人喉鳞癌干细胞的凋亡基因BAD及BAX表达上调(P<0.05);(5)结果表明,特异性干扰肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因表达可抑制人喉鳞癌干细胞增殖并促进其凋亡。 展开更多

关键词 喉肿瘤 肿瘤干细胞 细胞增殖 细胞凋亡 RNA 小分子干扰 干细胞 肿瘤坏死因子受体相关蛋白1 人喉鳞癌 化疗耐药 基因沉默 细胞数量 克隆形成 组织工程

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建立人喉鳞癌裸鼠移植模型两种方法的比较 被引量：1

2

作者 王伟锋 周福祥 +3 位作者 於海军 黄成虎 谢丛华 周云峰 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第2期205-208,I0001,共5页

目的:建立人喉鳞癌(Hep-2)裸鼠移植模型,比较两种建模方法成瘤效果。方法:将裸鼠随机分成两组,每组8只,两组分别于皮下接种人喉鳞癌细胞悬液和改良法皮下接种瘤块建立动物模型,观察接种成瘤率、肿块大小、生长速度;免疫组化检测人端粒... 目的:建立人喉鳞癌(Hep-2)裸鼠移植模型,比较两种建模方法成瘤效果。方法:将裸鼠随机分成两组,每组8只,两组分别于皮下接种人喉鳞癌细胞悬液和改良法皮下接种瘤块建立动物模型,观察接种成瘤率、肿块大小、生长速度;免疫组化检测人端粒酶逆转录酶(hTERT)蛋白表达。结果:接种3d后,改良瘤块接种法组裸鼠可见皮下隆起瘤体,接种1周后,皮下接种瘤细胞法和改良瘤块接种法成瘤率分别为75%、87.5%,比较第1周瘤体体积,P<0.05,但成瘤后肿瘤生长方面无明显的差别(比较第3周瘤体体积,P>0.05),两种方法成瘤后的瘤块hTERT蛋白表达阳性率相同。结论:采用改良瘤块接种法成瘤率高,生长速度快,且裸鼠皮下肿瘤较好的继承了人喉鳞癌细胞的重要生物学特点,该法能较好建立了人喉鳞癌裸鼠移植模型,为后续以端粒酶为靶点的体内抗肿瘤研究奠定良好基础。 展开更多

关键词 人喉鳞癌 裸鼠 移植瘤 人端粒酶逆转录酶

原文传递

人喉鳞癌裸鼠移植瘤株建立及初步鉴定

3

作者 叶京英 李晓丹 +6 位作者 王久莉 肖占荣 申玉山 史历 董春梅 张颖 陈光义 《中国实验动物学杂志》 CAS 1994年第4期234-235,共2页

人喉鳞癌裸鼠移植瘤株建立及初步鉴定叶京英，李晓丹，王久莉，肖占荣，申玉山（哈尔滨医科大学附属二院耳鼻咽喉科）史历黑龙江省肿瘤研究所董春梅黑龙江省电力局医院张颖，陈光义哈尔滨医科大学附属二院病理科长期以来，国内、外学者... 人喉鳞癌裸鼠移植瘤株建立及初步鉴定叶京英，李晓丹，王久莉，肖占荣，申玉山（哈尔滨医科大学附属二院耳鼻咽喉科）史历黑龙江省肿瘤研究所董春梅黑龙江省电力局医院张颖，陈光义哈尔滨医科大学附属二院病理科长期以来，国内、外学者对恶性肿瘤的异种移植进行了许多研究... 展开更多

关键词 人喉鳞癌 裸鼠 移植 恶性肿瘤 动物模型

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人喉鳞癌细胞增殖及其放射敏感性异质性的实验研究

4

作者 韩光 肖创映 +3 位作者 彭敏 谢丛华 周福祥 周云峰 《数理医药学杂志》 2005年第3期229-230,共2页

目的:探讨人喉鳞癌细胞增殖速度的异质性和放射敏感性的异质性。方法:体外长期传代的人喉鳞癌细胞系Hep-2经0、2、4、8、12Gy剂量前后照射3次的存活后代体外培养20代,测定其群体倍增时间(PDT)和放射敏感性参数SF2。结果:Hep-2细胞系相... 目的:探讨人喉鳞癌细胞增殖速度的异质性和放射敏感性的异质性。方法:体外长期传代的人喉鳞癌细胞系Hep-2经0、2、4、8、12Gy剂量前后照射3次的存活后代体外培养20代,测定其群体倍增时间(PDT)和放射敏感性参数SF2。结果:Hep-2细胞系相对高剂量(12Gy组)照射存活后代的PDT延长(P<0.05),相对低剂量(2、4、8Gy组)照射存活后代PDT无明显变化(P>0.05)。Hep-2细胞系随着受照剂量的增加,其放射存活后代的SF2逐渐升高(P<0.05),且存活后代的SF2与PDT具有一定的正相关关系(r=0.798,P<0.01)。结论:体外长期传代的Hep-2细胞系具有增殖速度和放射敏感性方面的异质性,且它们之间具有较好的对应关系。 展开更多

关键词 HEP-2细胞系 人喉鳞癌 细胞增殖 放射敏感性 异质性

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Cbl-b基因沉默增强T细胞对人喉鳞癌细胞Hep-2的免疫杀伤效果

5

作者 陈赛明 李智群 +1 位作者 周利民 张云霞 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期554-560,共7页

目的研究泛素连接酶(Cbl-b)基因沉默对H9人T淋巴细胞免疫杀伤人喉鳞癌细胞Hep-2作用的影响和相关机制。方法选择12例喉鳞癌患和12例健康对照者,用磁性细胞分离技术分离外周血CD4+T细胞应用RT-PCR法检测Cbl-b的表达水平。同时,将人T淋巴... 目的研究泛素连接酶(Cbl-b)基因沉默对H9人T淋巴细胞免疫杀伤人喉鳞癌细胞Hep-2作用的影响和相关机制。方法选择12例喉鳞癌患和12例健康对照者,用磁性细胞分离技术分离外周血CD4+T细胞应用RT-PCR法检测Cbl-b的表达水平。同时,将人T淋巴细胞H9接种培养于96孔板,分为4组:以脂质体转染法将Cbl-b-siRNA重组序列转染人T淋巴细胞H9,作为Cbl-b-siRNA组;Cbl-b-siRNA重组序列转染T细胞成功后,在其培养液中加入IL-2中和抗体,作为anti-IL-2+Cbl-bsiRNA组;以脂质体转染法将随机阴性对照序列转染的人T淋巴细胞H9作为阴性组(NC组);以不做任何处理人T淋巴细胞H9为空白组(BC组)。采用倒置荧光显微镜观察人T淋巴细胞H9的转染效率、以实时荧光定量PCR法和蛋白免疫印迹法检测各组人T淋巴细胞H9中Cbl-b mRNA和蛋白表达情况。以细胞计数试剂盒(CCK-8)检测各组人T淋巴细胞H9对Hep-2细胞的杀伤作用;流式细胞仪检测各组人T淋巴细胞H9表面活化分子CD69、CD25阳性表达率;采用ELISA法检测T细胞上清液中白介素-2(IL-2)、γ干扰素(INF-γ)水平。结果 Cbl-b mRNA在喉鳞癌患者CD4+T细胞中表达升高,与健康对照差异有显著性(P<0.05)。Cbl-b-siRNA组和阴性组的转染效率分别为(78.30±6.06)%、(77.25±6.38)%,转染效果良好;Cbl-b-siRNA组人T淋巴细胞H9的Cbl-b mRNA和蛋白相对表达量与anti-IL-2+Cbl-b-siRNA组无显著差异(P>0.05),但显著低于空白组和阴性组(P<0.05);不同效靶比时,Cbl-b-siRNA组Hep-2肿瘤细胞杀伤率均显著高于anti-IL-2+Cbl-b-siRNA组、阴性组和空白组(P<0.05)。Cbl-b-siRNA组人T淋巴细胞H9表面活化分子CD69、CD25阳性表达率均显著高于anti-IL-2+Cbl-b-siRNA组、空白组和阴性组(P<0.05);Cbl-b-siRNA组人T淋巴细胞H9上清液中INF-γ、IL-2水平均显著高于空白组和阴性组(P<0.05);空白组与阴性组人T淋巴细胞H9的Cbl-b mRNA和蛋白相对表达量、肿瘤细胞杀伤率、表面活化 展开更多

关键词 基因沉默 泛素连接酶 人喉鳞癌 免疫杀伤

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SIX1和TGF-β在人喉鳞癌上皮-间质转化中的作用

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作者 张继华 米楠楠 +2 位作者 崔旭媛 苏静 梅文华 《河北医药》 CAS 2021年第10期1479-1483,共5页

目的检测人喉鳞状细胞癌组织中同源异形框基因(sine oculis homeobox homolog 1,SIX1)、转化生长生子-β(TGF-β)以及E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达,探讨SIX1和TGF-β共同作用对人喉鳞癌上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transitio... 目的检测人喉鳞状细胞癌组织中同源异形框基因(sine oculis homeobox homolog 1,SIX1)、转化生长生子-β(TGF-β)以及E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达,探讨SIX1和TGF-β共同作用对人喉鳞癌上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响及相关作用机制。方法收集术后病理学确诊的人喉鳞癌组织标本96例,瘤体周围正常喉黏膜组织标本32例。应用免疫组织化学方法和蛋白印记Western Blot法检测人喉鳞癌组织及瘤体周围正常喉黏膜组织中SIX1、TGF-β以及E-cadherin蛋白的表达情况,PCR方法检测组织细胞中SIX1、TGF-β以及E-cadherin mRNA表达。分析人喉鳞癌患者临床特征同组织SIX1、TGF-β及E-cadherin蛋白及mRNA表达的关系。结果免疫组化、western Blot、PCR检测均发现,喉鳞状细胞癌SIX1、TGF-β阳性表达率和表达水平均高于癌旁正常黏膜,E-cadherin低于癌旁正常黏膜,差异均有统计学意义(P<0.05)。在低分化、有淋巴结转移的喉鳞癌患者组织中E-cadherin蛋白及其mRNA的阳性表达率较低(P<0.05);在低分化、有淋巴结转移的喉鳞癌患者组织中SIX1蛋白及其mRNA表达率较高(P<0.05);在有淋巴结转移的喉鳞癌患者组织中TGF-β蛋白及其mRNA表达率较高(P<0.05);相关性分析结果显示,人喉鳞癌组织中E-cadherin蛋白及其mRNA的表达与SIX1蛋白及其mRNA表达呈负相关(P<0.05);E-cadherin蛋白及其mRNA与TGF-β蛋白及其mRNA表达呈负相关(P<0.05)。结论SIX1及TGF-β可能是调节人喉鳞状细胞癌上皮-间质转化的重要影响因子,二者的高表达可能共同促进了喉鳞癌的上皮-间质转化,联合检测IX1、TGF-β及E-cadherin对判断人喉鳞癌的转移及预后有重要临床意义。 展开更多

关键词 EMT SIX1 TGF-Β 人喉鳞癌

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沉默T细胞Cbl-b基因对人喉鳞癌细胞株Hep-2体外免疫杀伤作用探讨

7

作者 程卫英 胥冰 《武警后勤学院学报（医学版）》 CAS 2018年第12期973-978,共6页

【目的】观察沉默T细胞泛素连接酶(casitas B-lineage lymphoma-b,Cbl-b)基因对喉鳞癌细胞株Hep-2体外免疫的杀伤作用,并初步探讨其调控机制。【方法】采用脂质体转染法将Cbl-b-siRNA重组序列和随机阴性对照序列转染H9人T淋巴细胞,分别... 【目的】观察沉默T细胞泛素连接酶(casitas B-lineage lymphoma-b,Cbl-b)基因对喉鳞癌细胞株Hep-2体外免疫的杀伤作用,并初步探讨其调控机制。【方法】采用脂质体转染法将Cbl-b-siRNA重组序列和随机阴性对照序列转染H9人T淋巴细胞,分别设为沉默组、阴性组,以不做任何处理T淋巴细胞为空白组。采用倒置荧光显微镜观察转染6 h时转染效率;分别采用实时荧光定量PCR法和蛋白免疫印迹法检测并对比3组细胞中Cbl-b mRNA和蛋白表达情况;细胞计数试剂盒检测3组不同浓度对Hep-2细胞的杀伤作用;流式细胞仪检测并对比3组T淋巴细胞表面活化分子CD69、CD25阳性表达率;采用ELISA法检测并对比3组T淋巴细胞上清液中IL-2、INF-γ水平。【结果】沉默组和阴性组转染H9 T淋巴细胞6 h后转染效率为(78.30±6.06)%、(77.25±6.38)%,沉默组T淋巴细胞中Cbl-b mRNA和蛋白相对表达量均显著高于空白组和阴性组(P<0.05);各组肿瘤细胞杀伤率随效靶比增加呈显著增加趋势(P<0.05),沉默组不同效靶比肿瘤杀伤率均显著高于空白组和阴性组(P<0.05),沉默组效靶比为40∶1时肿瘤细胞杀伤率最高,达(61.83±7.26)%。沉默组T淋巴细胞表面活化分子CD69、CD25阳性表达率均显著高于空白组和阴性组(P<0.05);沉默组T淋巴细胞上清液中IL-2、INF-γ水平均显著高于空白组和阴性组(P<0.05);空白组与阴性组T淋巴细胞中Cbl-b mRNA和蛋白相对表达量、肿瘤细胞杀伤率、表面活化分子CD69和CD25阳性表达率、上清液中IL-2及INF-γ水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。【结论】应用siRNA技术沉默T细胞Cbl-b基因可有效增强T细胞对人喉鳞癌细胞株Hep-2体外免疫杀伤作用,其中40∶1靶效比杀伤效果最佳,推测与下调Cbl-b mRNA和蛋白表达、促进T细胞表面活化分子表达及其细胞因子IL-2、INF-γ分泌有关。 展开更多

关键词 基因沉默 泛素连接酶 人喉鳞癌 免疫杀伤

原文传递

尼美舒利对人喉鳞癌Hep-2细胞祼鼠移植瘤CD44和MMP-7表达的影响 被引量：2

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作者 覃纲 刘文军 +3 位作者 梁灼萍 陈祖尧 余玲 黎万荣 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期490-494,共5页

目的探讨尼美舒利对喉鳞状细胞癌裸鼠皮下移植模型的抑瘤作用及机制。方法建立人喉鳞癌Hep-2细胞株裸鼠移植瘤模型,应用尼美舒利处理裸鼠,观察肿瘤生长情况并绘制生长曲线,免疫组织化学技术检测移植瘤组织中COX-2、CD44和MMP-7蛋白表达,... 目的探讨尼美舒利对喉鳞状细胞癌裸鼠皮下移植模型的抑瘤作用及机制。方法建立人喉鳞癌Hep-2细胞株裸鼠移植瘤模型,应用尼美舒利处理裸鼠,观察肿瘤生长情况并绘制生长曲线,免疫组织化学技术检测移植瘤组织中COX-2、CD44和MMP-7蛋白表达,RT-PCR技术检测移植瘤组织中COX-2、CD44和MMP-7 mRNA表达情况。结果与对照组相比,治疗组肿瘤体积增长较对照组缓慢,体积抑瘤率为63.36%,重量抑瘤率达51.81%,肿瘤体积和重量均明显低于对照组(P均<0.05)。实验组和对照组治疗前后裸鼠体重增长值差异无统计学意义(P>0.05)。实验组COX-2、CD44和MMP-7蛋白及mRNA表达明显低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论尼美舒利可有效抑制人喉鳞癌细胞系Hep-2裸鼠移植瘤的生长,其机制可能与抑制COX-2、CD44及MMP-7表达有关。 展开更多

关键词 选择性环氧化酶-2抑制剂 喉肿瘤 细胞黏附分子-44 基质金属蛋白酶-7 人喉鳞癌细胞系

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miR-21对人喉鳞癌Hep2细胞增殖与凋亡的影响 被引量：2

9

作者 曲莉 《重庆医学》 CAS 北大核心 2016年第24期3411-3413,共3页

目的探讨miR-21对人喉鳞癌Hep2细胞增殖与凋亡的影响。方法脂质体LipofectamineTM2000将miR-21inhibitor和miR-21阴性对照(NC)转入Hela细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活力,克隆实验及Hoechst染色分别检测细胞增殖与凋亡情况,Wester... 目的探讨miR-21对人喉鳞癌Hep2细胞增殖与凋亡的影响。方法脂质体LipofectamineTM2000将miR-21inhibitor和miR-21阴性对照(NC)转入Hela细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活力,克隆实验及Hoechst染色分别检测细胞增殖与凋亡情况,Western blot检测人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)、程序化死亡蛋白4基因(PDCD4)、Bax、Bcl-2表达及蛋白激酶B(AKT)磷酸化水平。结果与miR-21NC比较,miR-21inhibitor能显著抑制细胞活力[(0.728±0.045)vs.(0.393±0.018),P<0.01],降低细胞克隆数目[(158.38±14.47)vs.(65.52±6.86),P<0.01],提高细胞凋亡率[(8.45±0.67)%vs.(40.23±3.46)%,P<0.01],并上调PTEN、PDCD4、Bax表达,下调Bcl-2表达及降低AKT磷酸化水平(P<0.01)。结论 miR-21inhibitor通过PTEN/AKT信号通路抑制人喉鳞癌Hep2细胞增殖和诱导凋亡,并调节细胞凋亡相关蛋白的表达。 展开更多

关键词 MIR-21 人喉鳞癌Hep2细胞 细胞增殖 细胞凋亡

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miR-21对人喉鳞癌细胞Hep2迁移侵袭能力的影响 被引量：2

10

作者 刘永军 管艳飞 常顺 《重庆医学》 CAS 北大核心 2016年第21期2906-2908,2913,共4页

目的探讨微小RNA-21(miR-21)对人喉鳞癌细胞Hep2迁移、侵袭能力的影响。方法用脂质体LipofectamineTM2000将miR-21抑制剂和miR-21NC转入人喉鳞癌细胞Hep2中,48h后,运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力,划痕实验检测细胞迁移能力,... 目的探讨微小RNA-21(miR-21)对人喉鳞癌细胞Hep2迁移、侵袭能力的影响。方法用脂质体LipofectamineTM2000将miR-21抑制剂和miR-21NC转入人喉鳞癌细胞Hep2中,48h后,运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell小室法检测细胞侵袭能力,蛋白质印迹法检测人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)/磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)的激活情况,以及基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9与伴有kazal域的富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白(RECK)的表达。结果与miR-21NC比较,miR-21抑制剂能明显降低Hep2细胞活力[(0.688±0.043)vs.(0.375±0.012)],抑制细胞迁移能力[(6.57±0.02)μmvs.(20.49±2.18)μm]及细胞侵袭能力[(100.7±10.2)vs.(46.8±4.3)],差异均有统计学意义(P<0.01);同时miR-21抑制剂能明显下调PI3K、MMP2及MMP9的表达(P<0.01),降低Akt的磷酸化水平(P<0.01),并上调PTEN及RECK的表达(P<0.01)。结论 miR-21抑制剂能明显抑制人喉鳞癌细胞Hep2的迁移、侵袭能力,可能与PTEN/PI3K/Akt信号通路有关。 展开更多

关键词 微小RNA-21 人喉鳞癌Hep2细胞 迁移 侵袭

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颈、甲状腺

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《中国癌症防治杂志》 CAS 1994年第2期100-103,共4页

关键词 人喉鳞癌细胞系 滤泡状癌 头颈部鳞癌 未分化癌 滤泡状腺癌 功能性颈廓清术 杀伤活性 术中冰冻切片 乳头状癌 陈铭忠

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感染人乳头状瘤病毒的人喉咽鳞癌FaDu细胞系的建立 被引量：1

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作者 路武豪 郭文涛 +1 位作者 冯龙 娄卫华 《中国医药指南》 2016年第18期36-37,共2页

目的建立稳定感染人乳头状瘤病毒(HPV)阳性的人喉咽鳞癌FaDu细胞系,为体外研究下咽鳞癌提供理想的实验模型。方法重组HPV-16 E6-E7慢病毒,并用其感染人喉咽鳞癌FaDu细胞。RT-PCR和Western blot检测慢病毒稳定感染的FaDu细胞E6、E7m RNA... 目的建立稳定感染人乳头状瘤病毒(HPV)阳性的人喉咽鳞癌FaDu细胞系,为体外研究下咽鳞癌提供理想的实验模型。方法重组HPV-16 E6-E7慢病毒,并用其感染人喉咽鳞癌FaDu细胞。RT-PCR和Western blot检测慢病毒稳定感染的FaDu细胞E6、E7m RNA和蛋白表达情况。结果获得稳定感染重组HPV-16 E6-E7慢病毒的FaDu细胞。结论成功建立人乳头状瘤病毒感染的人喉咽鳞癌FaDu细胞系。 展开更多

关键词 感染 人乳头状瘤病毒 人喉咽鳞癌 FA Du细胞

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稳定感染HPV-16 E6-E7的人喉咽鳞癌FaDu细胞生物学特性观察 被引量：1

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作者 路武豪 郭文涛 +1 位作者 冯龙 娄卫华 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2016年第3期320-324,共5页

目的:观察稳定感染HPV-16 E6-E7对Fa Du细胞生物学行为的影响和调控。方法:全基因合成HPV-16E6-E7基因,将其与慢病毒载体p LV-EGFP-C在T4连接酶作用下连接。制备重组HPV-16 E6-E7慢病毒并感染Fa Du细胞。将细胞分3组:实验组(重组HPV-16 ... 目的:观察稳定感染HPV-16 E6-E7对Fa Du细胞生物学行为的影响和调控。方法:全基因合成HPV-16E6-E7基因,将其与慢病毒载体p LV-EGFP-C在T4连接酶作用下连接。制备重组HPV-16 E6-E7慢病毒并感染Fa Du细胞。将细胞分3组:实验组(重组HPV-16 E6-E7慢病毒稳定感染的Fa Du细胞)、载体对照组(慢病毒空载体稳定感染的Fa Du细胞)和空白对照组(未感染慢病毒的Fa Du细胞)。分别用CCK-8试剂盒检测各组细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况,Transwell侵袭实验检测细胞的体外侵袭能力。结果:获得稳定感染重组HPV-16 E6-E7慢病毒的Fa Du细胞,荧光显微镜下可见明亮的绿色荧光蛋白EGFP表达。整合HPV-16 E6-E7基因的Fa Du细胞增殖能力和侵袭力均增强,细胞凋亡率降低,S期和G_2/M期细胞增加,G_0/G_1期细胞减少(P<0.05)。结论:成功建立了HPV-16 E6-E7基因整合的Fa Du细胞。 展开更多

关键词 感染 HPV-16 人喉咽鳞癌 Fa Du细胞

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