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人参皂苷Rh_(2)抑制人非小细胞肺癌细胞增殖的机制研究 被引量：23
1
作者 孙小单 王天鸣 +3 位作者 李慧 赵沛妍 刘岩 程颖 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期441-448,共8页
目的考察人参皂苷Rh_(2)对人非小细胞肺癌A549及H460细胞增殖的影响,并进一步探讨其作用机制。方法人参皂苷Rh_(2)处理A549及H460细胞,采用CCK-8法及克隆形成实验检测药物对细胞增殖的作用;观察药物对细胞形态的影响,利用Annexin V-FITC... 目的考察人参皂苷Rh_(2)对人非小细胞肺癌A549及H460细胞增殖的影响,并进一步探讨其作用机制。方法人参皂苷Rh_(2)处理A549及H460细胞,采用CCK-8法及克隆形成实验检测药物对细胞增殖的作用;观察药物对细胞形态的影响,利用Annexin V-FITC/碘化丙啶(PI)双染法检测细胞凋亡情况;利用乳酸检测试剂盒检测药物对细胞糖酵解产物即乳酸生成的影响;采用Western blotting法检测药物对线粒体凋亡蛋白[B淋巴细胞瘤2 (B-cell lymphoma 2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3 (Caspase-3)],糖酵解调节通路信号传导与转录激活因子3 (signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)/c-myc及糖酵解途径关键酶丙酮酸激酶M2 (pyruvate kinase M2,PKM2)、乳酸脱氢酶A (lactate dehydrogenase A,LDHA)表达的影响。上调c-myc表达后,观察人参皂苷Rh;对A549及H460细胞乳酸水平的影响。结果人参皂苷Rh;可明显抑制A549及H460细胞的增殖能力及克隆形成能力(P<0.05、0.01、0.001),呈剂量和时间相关性。人参皂苷Rh;明显改变A549及H460细胞形态并诱导细胞凋亡(P<0.05),显著降低乳酸生成量(P<0.05、0.01)。人参皂苷Rh;可显著下调Bcl-2/Bax、PKM2、LDHA蛋白表达水平(P<0.05、0.01),上调Caspase-3蛋白表达水平(P<0.05),并抑制STAT3/c-myc通路活性(P<0.05、0.01)。上调c-myc表达后,人参皂苷Rh_(2)对A549及H460细胞乳酸水平的抑制作用减弱(P<0.05、0.01)。结论人参皂苷Rh_(2)显著抑制A549及H460细胞的增殖,其机制可能是通过调控线粒体凋亡蛋白、抑制STAT3/c-myc通路及糖酵解关键酶的表达干扰糖酵解,最终导致细胞凋亡。 展开更多
关键词 人参皂苷rh_(2) 非小细胞肺癌 增殖 凋亡 糖酵解 信号传导与转录激活因子3/c-myc通路
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不同干燥方式对人参果浆中稀有皂苷生成的影响 被引量：1
2
作者 莫秀丽 任红红 +4 位作者 高晴晴 闫永涛 程天宇 李晓敏 赵余庆 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第24期8200-8205,共6页
目的 研究采不同干燥方法对人参Panax ginseng果浆中原型皂苷降解和稀有皂苷生成的影响。方法 采用HPLC建立了同步检测11种人参皂苷含量的分析方法,对采用冷冻、电热、汽热3种方法干燥的人参果浆样品中原型皂苷和稀有皂苷的含量进行了... 目的 研究采不同干燥方法对人参Panax ginseng果浆中原型皂苷降解和稀有皂苷生成的影响。方法 采用HPLC建立了同步检测11种人参皂苷含量的分析方法,对采用冷冻、电热、汽热3种方法干燥的人参果浆样品中原型皂苷和稀有皂苷的含量进行了测定。结果 与未干燥处理的人参果浆进行对比,冷冻干燥样品中11种人参皂苷含量变化较小;人参果浆电热干燥和汽热干燥样品中原型皂苷发生降解,稀有皂苷生成出现不同程度增加。结论 人参果浆经电热干燥和汽热干燥后原型人参皂苷Re、Rg_(1)、Rb_(1)、Rc、Rb_(2)、Rb_(3)发生降解,稀有人参皂苷F_(1)、Rh_(1)、Rg_(3)、Rk_(1)、Rh_(2)含量增加。 展开更多
关键词 人参 人参果浆 冷冻、电热、汽热干燥 稀有皂苷 人参皂苷Re 人参皂苷Rg_(1) 人参皂苷Rb_(1) 人参皂苷Rc 人参皂苷Rb_(2) 人参皂苷Rb_(3) 人参皂苷F_(1) 人参皂苷rh_(1) 人参皂苷Rg_(3) 人参皂苷Rk_(1) 人参皂苷rh_(2)
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创建酿酒酵母细胞工厂发酵生产人参皂苷Rh_(2) 被引量：5
3
作者 石玉松 王冬 +2 位作者 李荣生 张学礼 戴住波 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期651-658,共8页
人参皂苷Rh_(2)是人参、三七、西洋参等名贵中药材中珍稀活性成分,具有抗癌、提高人体免疫力等多种重要药理活性。然而人参皂苷Rh_(2)在源植物中含量极低,传统的获取方式有较大的局限性。该研究拟应用合成生物学技术开发酿酒酵母细胞工... 人参皂苷Rh_(2)是人参、三七、西洋参等名贵中药材中珍稀活性成分,具有抗癌、提高人体免疫力等多种重要药理活性。然而人参皂苷Rh_(2)在源植物中含量极低,传统的获取方式有较大的局限性。该研究拟应用合成生物学技术开发酿酒酵母细胞工厂来低成本发酵生产人参皂苷Rh_(2),首先以高产原人参二醇(protopanaxadiol,PPD)的菌株LPTA为底盘菌,将三七来源的3位糖基转移酶基因Pn1-31,与酵母UDP-葡萄糖供给模块基因:磷酸葡萄糖变位酶1(PGM1)、α-磷酸葡萄糖变位酶(PGM2)和尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UGP1)一同插入酵母染色体的EGH1位点,成功获得生产17.10 mg·g^(-1)人参皂苷Rh_(2)的工程菌LPTA-RH2。通过对菌株的代谢物检测,发现目标产物人参皂苷Rh_(2)的合成前体PPD存在大量积累。为了进一步提高工程菌人参皂苷Rh_(2)的产量,研究对UDP-葡萄糖供给模块及人参皂苷Rh_(2)合成模块进行强化,构建出人参皂苷Rh_(2)摇瓶产量可达36.26 mg·g^(-1),含量占酵母细胞干重的3.63%的工程菌株LPTA-RH2-T,相较于最初改造的菌株LPTA-RH2,最终人参皂苷Rh_(2)的产量提升了112.11%,转化效率提升65.14%。该研究为进一步获得产业级人参皂苷Rh_(2)细胞工厂提供重要基础。 展开更多
关键词 人参皂苷rh_(2) 三萜皂苷 合成生物学 酿酒酵母
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人参皂苷Rh_(2)对胶质瘤细胞增殖、凋亡的影响及机制 被引量：2
4
作者 刘滢 谭辉 +2 位作者 夏菁 熊伟 邓雪松 《中国药房》 CAS 北大核心 2023年第20期2471-2475,共5页
目的探讨人参皂苷Rh_(2)对人胶质瘤U87、U251细胞增殖、凋亡的影响及可能机制。方法以人胶质瘤U87、U251细胞为对象,经不同浓度的人参皂苷Rh_(2)作用后,检测细胞的增殖、凋亡情况以及细胞中组蛋白脱乙酰酶1(HDAC1)蛋白和凋亡相关蛋白[B... 目的探讨人参皂苷Rh_(2)对人胶质瘤U87、U251细胞增殖、凋亡的影响及可能机制。方法以人胶质瘤U87、U251细胞为对象,经不同浓度的人参皂苷Rh_(2)作用后,检测细胞的增殖、凋亡情况以及细胞中组蛋白脱乙酰酶1(HDAC1)蛋白和凋亡相关蛋白[B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、切割型胱天蛋白酶3(cleaved caspase-3)]的表达情况。结果10、20、30、40、50、60、70、80μmol/L的人参皂苷Rh_(2)均能显著升高U87、U251细胞的增殖抑制率(P<0.05或P<0.01),该成分对2种细胞作用48 h的半数抑制浓度分别为51.34、55.84μmol/L;30、50μmol/L的人参皂苷Rh_(2)均能显著升高2种细胞的总凋亡率,能显著降低HDAC1、Bcl-2蛋白的表达水平,并显著升高Bax、cleaved caspase-3蛋白的表达水平(P<0.05或P<0.01)。结论人参皂苷Rh_(2)可抑制2种人胶质瘤细胞增殖并促进其凋亡,其作用可能与下调HDAC1蛋白的表达和激活Bcl-2家族蛋白介导的凋亡途径有关。 展开更多
关键词 人参皂苷rh_(2) 胶质瘤 组蛋白脱乙酰基酶1 U87细胞 U251细胞 增殖 凋亡
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人参皂苷Rh_(2)在卵巢颗粒细胞炎性反应中的作用及作用机制网络药理学与分子生物学研究 被引量：1
5
作者 王文芳 海鑫 《中国药业》 CAS 2023年第1期46-51,共6页
目的探讨西洋参中人参皂苷Rh(2简称Rh_(2))在脂多糖(LPS)致人卵巢颗粒细胞瘤细胞系KGN细胞炎性反应中的作用及作用机制。方法通过网络药理学方法筛选西洋参治疗多囊卵巢综合征(PCOS)的潜在活性成分及靶点。以200 ng/mL LPS作用KGN细胞6 ... 目的探讨西洋参中人参皂苷Rh(2简称Rh_(2))在脂多糖(LPS)致人卵巢颗粒细胞瘤细胞系KGN细胞炎性反应中的作用及作用机制。方法通过网络药理学方法筛选西洋参治疗多囊卵巢综合征(PCOS)的潜在活性成分及靶点。以200 ng/mL LPS作用KGN细胞6 h诱导炎性反应,采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定KGN细胞中炎性因子白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,采用2',7'-二氯双氢荧光素双乙酸酯(DCFH-DA)染色法测定活性氧(ROS)的水平;40µmol/L Rh_(2)作用KGN细胞24 h后,采用免疫印迹(Western blot)法测定哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在LPS诱导的KGN细胞中的表达水平。结果网络药理学分析结果显示,共筛选出西洋参的主要化学成分11个、潜在靶点144个、治疗PCOS的靶点13个,其中Rh_(2)与下游靶基因mTOR是西洋参抗PCOS的关键活性成分及潜在作用靶点。分子生物学研究结果显示,Rh_(2)能抑制LPS导致的KGN细胞中ROS和mTOR表达水平的升高,下调IL-1β和TNF-α的表达;低表达(50 nmol/L)mTOR能促进Rh_(2)缓解LPS导致的KGN细胞炎性反应,过表达(3µg)mTOR能逆转此现象。结论Rh_(2)通过调控mTOR的表达水平参与LPS导致的卵巢颗粒细胞炎性反应。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 卵巢颗粒细胞 人参皂苷rh_(2) 西洋参 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 炎性反应 网络药理学 分子生物学
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