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人凝血酶原复合物的临床前药物安全性评价 被引量：1
1
作者 余伟 牟蕾 +5 位作者 吴佳君 鲁涛 黄琰 洪树青 王黔川 李伟 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期594-597,602,共5页
目的评价人凝血酶原复合物(human prothrombin complex,简称PCC)制品的临床前药物安全性。方法采用体外试管法进行兔红细胞体外溶血试验;采用同体自身对照法进行兔血管刺激性试验;按照《中国药典》三部(2010版)方法对PCC进行异常毒性试... 目的评价人凝血酶原复合物(human prothrombin complex,简称PCC)制品的临床前药物安全性。方法采用体外试管法进行兔红细胞体外溶血试验;采用同体自身对照法进行兔血管刺激性试验;按照《中国药典》三部(2010版)方法对PCC进行异常毒性试验、人凝血酶活性检查、肝素含量、活化的人凝血因子活性检查及磷酸三丁酯和聚山梨酯80残留量检测。结果体外溶血试验未观察到兔红细胞溶血,也未见红细胞聚集;人凝血酶原复合物静脉输注给予新西兰兔,给药局部未见与供试品相关的刺激性反应;小鼠和豚鼠经腹腔注射本品30 min后均无异常反应,观察期结束时,小鼠体重平均增加>50%,豚鼠体重平均增加>10%;肉眼观察供试品无凝块或纤维蛋白原析出;肝素含量和活化的人凝血因子活性检查均符合质量要求;聚山梨酯80残留量≤100μg/mL,磷酸三丁酯残留量≤10μg/mL。结论成都蓉生药业有限责任公司生产的PCC是安全的,可用于临床。 展开更多
关键词 人凝血酶原复合物 溶血刺激性 异常毒性 肝素 人凝血因子活性 聚山梨酯80 磷酸三丁酯
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人凝血因子Ⅸ-R338A高活性突变体在毕赤酵母中的表达及活性测定 被引量：1
2
作者 戴永刚 尹胜菊 +5 位作者 程凤凤 程世亮 张艳丽 李萌 王园 刘新风 《中国输血杂志》 北大核心 2017年第3期276-278,共3页
目的人凝血因子Ⅸ(hFⅨ)在人类内源性凝血过程中起着非常重要的作用。hFⅨ表达量绝对或相对不足会导致B型血友病。本研究用毕赤酵母生产重组高活性突变体hFⅨ-R338A。方法首先构建pPICZaA-hFⅨ-R338A酵母分泌表达载体,其次将其用电转化... 目的人凝血因子Ⅸ(hFⅨ)在人类内源性凝血过程中起着非常重要的作用。hFⅨ表达量绝对或相对不足会导致B型血友病。本研究用毕赤酵母生产重组高活性突变体hFⅨ-R338A。方法首先构建pPICZaA-hFⅨ-R338A酵母分泌表达载体,其次将其用电转化入毕赤酵母SMD1168中,再次利用G418抗药性的能力筛选表达量高的单克隆重组菌株,培养并将表达产物纯化,稀释后检测其凝血活性。结果通本研究获得的重组SMD1168-hFⅨ-R338A表达量达到(90-120)mg/L;比活力约为人血中野生型hFⅨ凝血活性的(38.93±5.1)%,比野生型的酵母重组hFⅨ高6.85倍。结论人凝血因子Ⅸ高活性突变体R338A是潜在的天然凝血因子替代品。 展开更多
关键词 人凝血因子Ⅸ高活性突变体 毕赤酵母 蛋白表达
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人凝血因子Ⅸ-V107A-R338A高活性突变体在毕赤酵母中的表达及活性测定
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作者 戴永刚 《临床输血与检验》 CAS 2019年第3期305-308,共4页
目的人凝血因子Ⅸ(hFⅨ)在人类内源性凝血过程中起着非常重要的作用。hFⅨ表达量绝对或相对不足会导致B型血友病。本研究用毕赤酵母生产重组高活性突变体hFⅨ-V107A-R338A。方法首先构建pPICZaA-hFⅨ-V107A-R338A酵母分泌表达载体,其次... 目的人凝血因子Ⅸ(hFⅨ)在人类内源性凝血过程中起着非常重要的作用。hFⅨ表达量绝对或相对不足会导致B型血友病。本研究用毕赤酵母生产重组高活性突变体hFⅨ-V107A-R338A。方法首先构建pPICZaA-hFⅨ-V107A-R338A酵母分泌表达载体,其次将其用电转化入毕赤酵母SMD1168中,再次利用G418抗药性的能力筛选表达量高的单克隆重组菌株,培养并将表达产物纯化,稀释后检测其凝血活性。结果通过本研究获得的重组SMD1168-hFⅨ-V107A-R338A表达量达到80-120mg/L;活力约为人血中野生型hFⅨ凝血活性的(44.06±2.3)%,比野生型的酵母重组hFⅨ高7.75倍,比单突变R338A高13.17%。结论人凝血因子Ⅸ高活性突变体V107A-R338A是潜在的天然凝血因子替代品。 展开更多
关键词 人凝血因子Ⅸ高活性突变体 毕赤酵母 蛋白表达
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