川崎病内皮细胞模型及其发病机制研究进展 被引量：8

1

作者 郑小兰 张怡 《医学研究杂志》 2019年第6期11-13,104,共4页

川崎病(Kawasaki disease,KD)是一种急性自限性血管炎症,主要发生于6个月~5岁儿童,其发病机制尚不清楚.研究发现KD患儿存在血管内皮细胞损伤及功能紊乱,因此目前有许多KD体外研究以内皮细胞为模型,其中又以人脐静脉内皮细胞(human umbil... 川崎病(Kawasaki disease,KD)是一种急性自限性血管炎症,主要发生于6个月~5岁儿童,其发病机制尚不清楚.研究发现KD患儿存在血管内皮细胞损伤及功能紊乱,因此目前有许多KD体外研究以内皮细胞为模型,其中又以人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)与人冠状动脉内皮细胞(human coronary artery endothelial cells,HCAEC)为主,为KD发病机制研究提供了重要线索.本文就KD体外研究的内皮细胞模型及其在发病机制上的研究现状做了系统性阐述. 展开更多

关键词 川崎病人 脐静脉内皮细胞 人冠状动脉 内皮细胞 细胞模型

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人冠状动脉内膜增厚与核因子-κb信号通路激活的相关性

2

作者 周明 路艳林 +4 位作者 彭进 万昌武 戴佳琳 王杰 夏冰 《贵州医科大学学报》 CAS 2023年第8期895-900,共6页

目的探讨人冠状动脉内膜增厚与核因子-κb(NF-κb)信号通路激活的相关性。方法收集尸检案例的冠状动脉标本45例,分为对照组(CON组,非冠心病死亡并无明显动脉粥样硬化者)16例、冠心病组(CHD组,非冠心病猝死但明确诊断为冠心病患者)组10... 目的探讨人冠状动脉内膜增厚与核因子-κb(NF-κb)信号通路激活的相关性。方法收集尸检案例的冠状动脉标本45例,分为对照组(CON组,非冠心病死亡并无明显动脉粥样硬化者)16例、冠心病组(CHD组,非冠心病猝死但明确诊断为冠心病患者)组10例、冠心病猝死组(SCD组,冠状动脉粥样硬化性心脏病猝死者)19例,采用苏木精-伊红(HE)染色观察3组冠状动脉的组织学特征,采用免疫荧光技术检测3组冠状动脉内膜处磷酸化NF-κb p65(NF-κb p-p65)入核数量百分比并测量冠状动脉内膜厚度,采用Pearson相关系数检验分析NF-κb p-p65入核数量百分比与冠状动脉内膜厚度的相关性。结果CON组冠状动脉标本内膜厚度低于CHD组及SCD组;与CON组比较,CHD组和SCD组冠状动脉标本冠脉内膜处NF-κb p-p65蛋白的入核百分比增高(P<0.05),并与冠状动脉内膜的厚度呈正相关关系(r=0.345,P<0.05)。结论人冠状动脉内膜增厚与内膜处NF-κb信号通路激活的水平存在正相关。 展开更多

关键词 动脉粥样硬化 冠心病 猝死 人冠状动脉 NF-κb信号通路激活 内膜厚度

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三氧化二砷对人冠状动脉平滑肌细胞及基质作用的实验研究 被引量：2

3

作者 栾天竹 季洪亮 +3 位作者 傅松滨 周立君 李为民 黄永麟 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期253-256,共4页

目的 研究三氧化二砷对人冠状动脉平滑肌细胞（HCASMC）转录因子E2F-1及基质内皮单核细胞激动肽Ⅱ（EMAP-Ⅱ）的作用,从而揭示该药物促HCASMC凋亡及其抑制HCASMC增殖和迁移的机制.方法 将4.0μmol/L三氧化二砷与HCASMC共育12,24,48 h,... 目的 研究三氧化二砷对人冠状动脉平滑肌细胞（HCASMC）转录因子E2F-1及基质内皮单核细胞激动肽Ⅱ（EMAP-Ⅱ）的作用,从而揭示该药物促HCASMC凋亡及其抑制HCASMC增殖和迁移的机制.方法 将4.0μmol/L三氧化二砷与HCASMC共育12,24,48 h,设空白对照组,应用流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR检测三氧化二砷对E2F-1的作用,Western blot检测该药物对EMAP-Ⅱ的作用.结果 HCASMC与4.0μmol/L三氧化二砷共育12,24,48 h后细胞凋亡率于48 h最高（P〈0.05）.RT-PCR可见E2F-1 mRNA表达于48 h最少（P〈0.05）.Western blot可见48 h组EMAP-Ⅱ表达最少,细胞黏附率最低（P〈0.05）.结论 三氧化二砷能够促进HCASMC的凋亡,降低HCASMC转录因子E2F-1 nnqNA表达,减少基质EMAP-Ⅱ的表达,从而抑制HCASMC的过度增殖、迁移和黏附. 展开更多

关键词 三氧化二砷 人冠状动脉 平滑肌细胞 基质 再狭窄

原文传递

人冠状动脉粥样硬化斑块内细胞成分与斑块稳定性之间的相关性分析

4

作者 余丽菲 卢世文 《中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生》 2022年第3期32-36,共5页

分析人冠状动脉粥样硬化斑块内细胞成分与斑块稳定性之间的相关性 。方法 本次研究对象为本院63例人冠状动脉粥尸检组织蜡块标本,时间2015年10月-2021年10月,63例患者均经病理检查确诊为冠状动脉粥样硬化,对每位患者的冠状动脉展开取材... 分析人冠状动脉粥样硬化斑块内细胞成分与斑块稳定性之间的相关性 。方法 本次研究对象为本院63例人冠状动脉粥尸检组织蜡块标本,时间2015年10月-2021年10月,63例患者均经病理检查确诊为冠状动脉粥样硬化,对每位患者的冠状动脉展开取材制片,利用光学显微镜对HE染色冠状动脉组织切片进行常规观察,同时通过Smart Scape图像分析系统测量分析冠状动脉粥样硬化斑块面积、纤维帽厚度和脂核面积,根据检查结果将63例患者划分为17例稳定斑块组、11例不稳定斑块组和35例血管正常组。应用免疫组织化学技术,获取到肥大细胞类胰蛋白酶(mast cell tryptase)、人类白细胞抗原-DR(HLA-DR),白介素-18(IL-18)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞分化抗原CD20,CD68,CD3和鼠抗人(α-smooth muscIe actin,SMA),分析人冠状动脉粥样硬化斑块内细胞成分与斑块稳定性之间的相关性。结果 不稳定和稳定斑块组的冠状动脉粥样硬化斑块面积基本一致(P>0.05),不稳定斑块组的脂核面积明显高于稳定斑块组,纤维帽厚度明显低于稳定斑块组(P<0.05);血管正常组、稳定斑块组和不稳定斑块组的SMA表达呈现出明显降低趋势,IL-18、IL-6、TNF-α、mast ceII tryptase、CD3和 CD68均呈现出明显升高趋势(P<0.05);SMA表达和IL-18、IL-6、TNF-α、mast ceII tryptase、CD3和CD68均呈现出负相关(P<0.05)。 结论 斑块不稳定发生的主要病理机制为平滑肌细胞含量显著降低,肥大细胞、T淋巴细胞、巨噬细胞含量大幅度提升,而平滑肌细胞含量降低与肥大细胞、T淋巴细胞、巨噬细胞含量之间具有密切联系。 展开更多

关键词 人冠状动脉 粥样硬化 斑块 细胞成分 斑块稳定性 相关性

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紫杉醇水蛭素支架涂层复合物对HCASMC炎性活化过程中TLR4-MyD88信号通路的影响 被引量：12

5

作者 李红梅 王显 《中国循证心血管医学杂志》 2019年第1期94-98,共5页

目的探讨支架涂层复合物紫杉醇水蛭素对脂多糖(LPS)诱导人冠状动脉平滑肌细胞(HCASMC)炎性活化过程中TLR4-MyD88信号通路的影响。方法选用4-6代的HCASMC,用四唑盐(MTT)比色法筛选出紫杉醇水蛭素支架涂层复合物干预HCASMC的无毒性大、小... 目的探讨支架涂层复合物紫杉醇水蛭素对脂多糖(LPS)诱导人冠状动脉平滑肌细胞(HCASMC)炎性活化过程中TLR4-MyD88信号通路的影响。方法选用4-6代的HCASMC,用四唑盐(MTT)比色法筛选出紫杉醇水蛭素支架涂层复合物干预HCASMC的无毒性大、小两个浓度,使细胞活力保持在90%以上。进而将细胞分为空白对照组、脂多糖(LPS)造模组、LPS造模+紫杉醇水蛭素大浓度组、LPS造模+紫杉醇水蛭素小浓度组,其中大、小浓度紫杉醇水蛭素复合物处理组在LPS造模前预处理细胞4 h,继而用Q-PCR法对TLR4和MyD88 mRNA进行检测,并用Western blotting法检测对应蛋白表达的变化。结果 1μmol/L的紫杉醇配比0.8 mg/ml水蛭素对HCASMC生长有明显的抑制作用,细胞活力与空白对照组相比差异明显(P<0.05)。1μmol/L的紫杉醇配比0.4 mg/ml水蛭素干预后细胞活力降低为78.7%,对细胞生长产生了一定影响,其余各浓度组细胞活力均能保持在90%以上。紫杉醇水蛭素复合物预处理细胞4 h后,Q-PCR结果显示,与空白对照组相比,LPS造模后可同时激活TLR4、MyD88的mRNA表达(P<0.05),HCASMC炎症模型构建成功。各干预组经紫杉醇水蛭素处理后,与单纯LPS模型组相比,TLR4的mRNA基因表达量显著降低(P<0.05),但不影响MyD88基因表达(P>0.05)。Western blotting结果显示:与空白对照组相比,LPS模型组TLR4、MyD88蛋白表达明显升高(P<0.05),成功构建了稳定的HCASMC炎症模型。经紫杉醇水蛭素处理后,各干预组TLR4、MyD88蛋白表达较LPS模型组显著降低(P<0.05),其中紫杉醇水蛭素大浓度组的抗炎作用相对更强。结论紫杉醇水蛭素支架涂层复合物对LPS诱导的HCASMC细胞炎性活化过程中TLR4-MyD88通路的激活具有明显的抑制作用,此抑制作用不通过影响MyD88基因表达来产生,而可能与其对MyD88蛋白水平的调控有关。 展开更多

关键词 紫杉醇水蛭素支架涂层复合物 脂多糖 炎性活化 TLR4-MyD88信号通路 人冠状动脉平滑肌细胞

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紫杉醇水蛭素支架涂层复合物对LPS诱导的HCASMC炎性活化过程中核转录因子NF-κ B p65及其下游炎症因子的调控作用 被引量：10

6

作者 李红梅 王显 《中国循证心血管医学杂志》 2018年第2期203-206,217,共5页

目的探讨支架涂层复合物紫杉醇水蛭素对脂多糖(LPS)诱导人冠状动脉平滑肌细胞(HCASMC)炎性活化过程中核转录因子NF-κ B p65及其下游炎症因子表达的影响。方法选用4~6代的HCASMC,将细胞分为空白对照组(正常HCASMC,未做任何处理)、LPS模... 目的探讨支架涂层复合物紫杉醇水蛭素对脂多糖(LPS)诱导人冠状动脉平滑肌细胞(HCASMC)炎性活化过程中核转录因子NF-κ B p65及其下游炎症因子表达的影响。方法选用4~6代的HCASMC,将细胞分为空白对照组(正常HCASMC,未做任何处理)、LPS模型组(LPS干预)、紫杉醇水蛭素高浓度组(1μmol/L紫杉醇+0.2 mg/ml水蛭素+LPS干预)、紫杉醇水蛭素低浓度组(1μmol/L紫杉醇+0.0125 mg/ml水蛭素+LPS干预)。每组设置3个复孔。ELISA法检测细胞上清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)和白介素-1β(IL-1β)的表达水平,用Q-PCR法对各组细胞NF-κ B p65、TNF-α、IL-6和IL-1βm RNA进行检测,用Western Blotting检测NF-κ B p65蛋白表达水平。结果与空白对照组比较,LPS模型组NF-κ B p65、TNF-α、IL-6和IL-1β的m RNA表达水平明显升高,差异有统计学意义(P均<0.05);HCASMC经高、低浓度紫杉醇水蛭素复合物预处理,LPS刺激后,上述指标低于LPS模型组,差异有统计学意义(P均<0.05)。LPS模型组NF-κ B p65蛋白表达水平明显高于空白对照组,而紫杉醇水蛭素预处理组NF-κ B p65蛋白表达水平较LPS模型组明显降低,其中高浓度处理组降低更为显著。与空白对照组比较,LPS模型组TNF-α、IL-1β和IL-6表达水平升高,差异有统计学意义(P均<0.05)。与LPS模型组比较,紫杉醇水蛭素低浓度与高浓度组TNF-α、IL-1β和IL-6水平明显降低,差异有统计学意义(P均<0.05)。其中高浓度紫杉醇水蛭素干预后IL-1β表达下降较低浓度更为显著,差异有统计学意义(P<0.05)。结论紫杉醇水蛭素支架涂层复合物对LPS诱导的HCASMC炎性活化过程中NF-κ B p65的激活具有明显的抑制作用,有效下调核转录因子NF-κ B p65的转录活性,显著抑制下游炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β的表达。 展开更多

关键词 紫杉醇水蛭素复合物 支架涂层药物 脂多糖 NF-κBp65信号通路 人冠状动脉平滑肌细胞

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川崎病冠状动脉内皮细胞损伤的定量蛋白组学研究与生物信息学分析 被引量：7

7

作者 郭鑫 刘琮 +1 位作者 王国兵 徐明国 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期796-803,共8页

目的通过同位素标记相对与绝对定量(iTRAQ)蛋白质组学技术鉴定川崎病(KD)冠状动脉内皮细胞损伤的蛋白标记物。方法采用KD患儿血清培育的人冠状动脉内皮细胞(HCAECs)作为KD组,健康儿童血清培育的HCAECs作为健康对照组。利用iTRAQ检测两... 目的通过同位素标记相对与绝对定量(iTRAQ)蛋白质组学技术鉴定川崎病(KD)冠状动脉内皮细胞损伤的蛋白标记物。方法采用KD患儿血清培育的人冠状动脉内皮细胞(HCAECs)作为KD组,健康儿童血清培育的HCAECs作为健康对照组。利用iTRAQ检测两组细胞蛋白质的表达情况;采用生物信息学手段分析蛋白质数据;使用Western blot法进行蛋白标记物的验证。结果本研究共鉴定出518个显著差异表达蛋白(差异倍数的绝对值>1.2且P<0.05)。GO分析显示差异蛋白明显富集的生物过程有细胞过程、代谢过程、生物调节等;细胞组分有细胞部分、细胞、细胞器等;分子功能有结合、催化活性、分子功能调节剂等。KEGG分析显示明显富集的信号通路是核糖体、PI3K-Akt信号通路、癌症中的转录失调等。根据PPI网络结果将关系密集程度排在前9的蛋白标记物PWP2、MCM4、MCM7、MCM5、MCM3、MCM2、SLD5、HDAC2、MCM6筛选出来作为KD冠状动脉内皮细胞损伤的蛋白标记物。Western blot法验证KD组蛋白标记物HDAC2、PWP2、MCM2表达水平低于健康对照组(P<0.05)。结论KD患儿血清显著改变了HCAECs的蛋白表达模式并影响与心血管系统相关的信号通路,为KD的病理机制和治疗靶标提供了新的依据。 展开更多

关键词 川崎病 同位素标记相对与绝对定量 蛋白标记物 人冠状动脉内皮细胞

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血管紧张素Ⅱ通过抑制原癌基因c-SKI表达促进小鼠高血压性心肌纤维化 被引量：2

8

作者 吕忠英 李红建 +1 位作者 张颖 王娟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1738-1745,共8页

目的:探讨原癌基因c-SKI (cellular Sloan-Kettering Institute)表达变化对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ, Ang Ⅱ)诱导的小鼠高血压性心肌纤维化的影响。方法:将12只雄性C57BL/6小鼠随机分成PBS组(n=6)和Ang Ⅱ组(n=6),利用渗透压微泵... 目的:探讨原癌基因c-SKI (cellular Sloan-Kettering Institute)表达变化对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ, Ang Ⅱ)诱导的小鼠高血压性心肌纤维化的影响。方法:将12只雄性C57BL/6小鼠随机分成PBS组(n=6)和Ang Ⅱ组(n=6),利用渗透压微泵皮下植入小鼠慢性持续给予等体积的PBS和Ang Ⅱ,给药4周,测定小鼠血压。取小鼠心脏组织进行HE和Masson染色检测病理学变化;免疫组织化学染色和Western blot检测c-SKI、CD31、平滑肌蛋白22(smooth muscle protein 22, SM22)、Ⅰ型胶原(collagen type Ⅰ, Col Ⅰ)和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)水平。用不同浓度的AngⅡ处理人冠状动脉内皮细胞(humancoronaryarteryendothelialcells,HCAECs),显微镜观察细胞形态,CCK-8法检测细胞活力;用最低有效剂量的Ang Ⅱ处理HCAECs,免疫荧光染色和Western blot检测c-SKI、CD31、α-SMA、Col Ⅰ和上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)通路蛋白水平。过表达c-SKI和Ang Ⅱ联合处理HCAEC,CCK-8法和流式细胞术分别检测细胞活力和凋亡情况,免疫荧光染色和Western blot检测α-SMA、c-SKI、CD31、Col Ⅰ、EMT通路蛋白和EMT标志因子的表达。结果:Ang Ⅱ处理后小鼠尾动脉收缩压升高,心室壁增厚,Col Ⅰ和α-SMA表达显著上调(P<0.01),c-SKI、CD31和SM22表达显著下调(P<0.01)。10μmol/L Ang Ⅱ处理HCAECs后,细胞连接松散,细胞形态改变,且48 h细胞活力显著降低(P<0.01);免疫荧光染色和Western blot结果显示,Ang Ⅱ组Col Ⅰ、α-SMA、Twist、Snail和p-Smad2/3蛋白水平显著升高(P<0.01),cSKI和CD31表达显著下调(P<0.01)。与Ang Ⅱ+vector组相比,过表达c-SKI联合Ang Ⅱ处理显著促进HCAECs活力(P<0.01),显著抑制细胞凋亡(P<0.01),显著上调c-SKI、CD31和E-cadherin表达(P<0.05),显著下调α-SMA、Col Ⅰ、Twist、Snail、p-Smad2/3、N-cadherin和vimentin表达(P<0.01)。结论:Ang Ⅱ可能通过调控c-SKI表达,促进小鼠高血压性心肌纤维化。 展开更多

关键词 血管紧张素Ⅱ 高血压 心肌纤维化 原癌基因c-SKI 人冠状动脉内皮细胞 小鼠

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脂质运载蛋白2通过介导焦亡加重人冠状动脉内皮细胞炎症损伤

9

作者 杨轶童 王妮莎 +4 位作者 王臻熠 孙媛 赵苗苗 陈露萍 石曌玲 《中国小儿急救医学》 CAS 2024年第4期256-261,共6页

目的探讨脂质运载蛋白2(LCN2)在人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)炎症损伤中的作用。方法HCAEC随机分为4组:对照组、LCN2特异性抑制剂ZINC00640089处理(对照+ZINC)组、肿瘤坏死因子(TNF)-α组和TNF-α+ZINC00640089(TNF-α+ZINC)组。对照+ZIN... 目的探讨脂质运载蛋白2(LCN2)在人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)炎症损伤中的作用。方法HCAEC随机分为4组:对照组、LCN2特异性抑制剂ZINC00640089处理(对照+ZINC)组、肿瘤坏死因子(TNF)-α组和TNF-α+ZINC00640089(TNF-α+ZINC)组。对照+ZINC组及TNF-α+ZINC组使用ZINC00640089(10μM)预处理12 h,再使用TNF-α(40 ng/mL)处理TNF-α组及TNF-α+ZINC组细胞24 h。CCK-8法检测各组HCAEC细胞活力,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测各组细胞培养基中LDH的活性,DCFH-DA染色观察细胞活性氧(ROS)含量变化,TUNEL染色法观察细胞凋亡率变化,免疫荧光染色法检测LCN2表达,Western blot法检测LCN2及含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase 1)、Gasdermin D、白细胞介素(IL)-1β、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)的表达。结果与对照组相比,对照+ZINC组各项指标差异均无统计学意义;TNF-α组细胞活力明显降低(P<0.05),培养基中LDH活性明显升高(P<0.05),ROS含量与TUNEL染色阳性细胞数增加(P均<0.05),LCN2及Caspase 1、Gasdermin D、IL-1β、NLRP3表达显著增加(P均<0.05);而使用ZINC00640089干预TNF-α+ZINC组HCAEC后可明显增加细胞活力(P<0.05),降低培养基中LDH活性、ROS含量及TUNEL染色阳性细胞数(P均<0.05),降低LCN2及Caspase 1、Gasdermin D、IL-1β、NLRP3表达(P均<0.05)。结论LCN2可以通过介导焦亡参与TNF-α诱导的HCAEC炎症损伤。 展开更多

关键词 脂质运载蛋白2 焦亡 肿瘤坏死因子 人冠状动脉内皮细胞 炎症损伤

原文传递

晚期糖基化终末产物受体在波动性高糖致人冠状动脉内皮细胞凋亡中的作用

10

作者 庄微 孔娜娜 +1 位作者 刘挺松 王磊 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2024年第5期482-487,共6页

目的研究持续性高糖(CHG)和波动性高糖(IHG)环境下,人冠状动脉内皮细胞(HCAECs)的细胞凋亡情况,并探索HCAECs细胞凋亡是否由晚期糖基化终末产物受体(RAGE)介导发生。方法取对数生长期的HCAECs分为4组:①正常血糖组(CNG组,5 mmol/L葡萄... 目的研究持续性高糖(CHG)和波动性高糖(IHG)环境下,人冠状动脉内皮细胞(HCAECs)的细胞凋亡情况,并探索HCAECs细胞凋亡是否由晚期糖基化终末产物受体(RAGE)介导发生。方法取对数生长期的HCAECs分为4组:①正常血糖组(CNG组,5 mmol/L葡萄糖);②持续性高糖组(CHG组,20 mmol/L葡萄糖);③波动性高糖组(IHG组,5 mmol/L和20 mmol/L葡萄糖每8 h波动1次);④波动性甘露醇对照组(IM组,5 mmol/L和20 mmol/L甘露醇每8小时波动1次,保持与波动性高糖相同的波动性渗透压环境)。不同条件处理后的HCAECs,采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞活力,流式细胞术检测HCAECs细胞凋亡情况,Westernblot检测Caspase-3、RAGE的蛋白表达水平变化,qRT-PCR检测RAGE的转录水平变化情况。用靶向RAGE的shRNA慢病毒敲低HCAECs中RAGE的表达量,观察IHG中Caspase-3的活化表达情况。结果与CNG组相比,CHG组和IHG组细胞活力均降低(P<0.05),但IHG组细胞活力更低(P=0.035);IHG组细胞凋亡率增加(P=0.028),Caspase-3活化状态(P=0.037)和RAGE表达量显著增加(P<0.05)。用靶向RAGE的shRNA慢病毒敲低RAGE表达水平,发现波动性高糖导致的细胞凋亡情况得到明显改善(P<0.05)。结论波动性高糖可通过增强RAGE表达,促进细胞凋亡,引起HCAECs损伤。 展开更多

关键词 波动性高糖 晚期糖基化终末产物受体 人冠状动脉内皮细胞 细胞凋亡

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红景天苷通过激活PI3K/Akt和抑制NF⁃κB信号通路改善川崎病冠状动脉损伤 被引量：5

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作者 胡琳 杨艳娟 +3 位作者 李洁滢 周忠 田正 焦蓉 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第21期2657-2662,2669,共7页

目的观察红景天苷(Salidroside,Sal)对川崎病冠状动脉炎症反应和氧化应激的影响并探讨其作用机制。方法将细胞分为正常对照组、TNF⁃α组、50μmol/L Sal组和100μmol/L Sal组。用CCK⁃8法检测不同浓度Sal和肿瘤坏死因子⁃α(TNF⁃α)对HCAE... 目的观察红景天苷(Salidroside,Sal)对川崎病冠状动脉炎症反应和氧化应激的影响并探讨其作用机制。方法将细胞分为正常对照组、TNF⁃α组、50μmol/L Sal组和100μmol/L Sal组。用CCK⁃8法检测不同浓度Sal和肿瘤坏死因子⁃α(TNF⁃α)对HCAEC增殖活性的影响;通过Western blot法检测各组细胞中磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p⁃PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p⁃Akt)、磷酸化核转录因子⁃κBp65(p⁃P65)、白细胞介素6(IL⁃6)、白细胞介素⁃1β(IL⁃1β)、紧密连接蛋白(ZO⁃1)及血管内皮钙黏蛋白(VE⁃cadherin)的蛋白表达水平;通过RT⁃qPCR法检测各组炎症因子和黏附分子mRNA的表达水平;利用DCFH⁃DA荧光探针观察细胞内活性氧(ROS)的生成情况;分光光度仪检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH⁃Px)的含量。结果与对照组相比,TNF⁃α组p⁃PI3K、p⁃Akt、ZO⁃1、VE⁃cadherin的蛋白表达水平降低(P<0.05),p⁃P65、IL⁃6和IL⁃1β蛋白表达水平升高(P<0.05),IL⁃6、IL⁃8、IL⁃1β、ICAM⁃1、VCAM⁃1的mRNA表达水平显著升高(P<0.05),ROS的生成增加,SOD和GSH⁃Px的活性显著下降,而Sal可显著逆转上述作用(P<0.05)。结论Sal能减轻TNF⁃α诱导的HCAEC细胞炎症反应和氧化应激水平,其机制可能与激活PI3K/Akt和抑制NF⁃κB信号通路有关。 展开更多

关键词 川崎病 红景天苷 炎症反应 氧化应激 肿瘤坏死因子⁃α 人冠状动脉内皮细胞

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早期生长反应因子3对高脂诱导冠状动脉内皮细胞炎症及凋亡的影响

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作者 王思晴 祖姆热提·阿布都克依木 +3 位作者 刘芳 马燕玲 田惠铭 李霞 《中华实用诊断与治疗杂志》 2024年第2期119-122,共4页

目的观察高脂损伤冠状动脉内皮细胞早期生长反应因子3(Egr3)表达变化,探讨Egr3对高脂诱导冠状动脉内皮细胞炎症及凋亡的影响。方法对数生长期人冠状动脉内皮细胞分为对照组(正常培养)、高脂损伤组(氧化低密度脂蛋白处理)、Egr3空载组(si... 目的观察高脂损伤冠状动脉内皮细胞早期生长反应因子3(Egr3)表达变化,探讨Egr3对高脂诱导冠状动脉内皮细胞炎症及凋亡的影响。方法对数生长期人冠状动脉内皮细胞分为对照组(正常培养)、高脂损伤组(氧化低密度脂蛋白处理)、Egr3空载组(siRNA-NC慢病毒转染+氧化低密度脂蛋白处理)、Egr3敲低组(siRNA-Egr3慢病毒转染+氧化低密度脂蛋白处理)。转染后取4组细胞,采用实时荧光定量PCR法检测细胞Egr3 mRNA相对表达量,采用Western blot法检测Egr3、caspase-3蛋白相对表达量,采用ELISA法检测细胞上清液肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平,采用CCK-8法检测细胞凋亡率。结果高脂损伤组、Egr3空载组细胞Egr3 mRNA相对表达量(1.56±0.48、1.53±0.56),Egr3(1.65±0.35、1.55±0.45)、caspase-3(2.43±0.43、2.36±0.29)蛋白相对表达量,细胞上清液TNF-α[(55.33±4.76)、(57.85±2.92)ng/L]、IL-6[(36.34±1.60)、(31.69±1.83)ng/L]水平及细胞凋亡率[(186.08±20.84)%、(174.34±29.98)%]均高于对照组[1.04±0.20、0.51±0.26、1.60±0.22、(46.10±1.52)ng/L、(23.35±1.69)ng/L、(100.01±8.64)%]、Egr3敲低组[0.16±0.03、0.23±0.07、1.05±0.29、(33.67±3.26)ng/L、(19.75±1.54)ng/L、(12.24±7.51)%](P<0.05),对照组均高于Egr3敲低组(P<0.05),高脂损伤组与Egr3空载组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论高脂可诱导冠状动脉内皮细胞炎症和凋亡,可能与Egr3表达增高有关;敲低Egr3表达可抑制冠状动脉内皮细胞炎症和凋亡。 展开更多

关键词 动脉粥样硬化 早期生长反应因子3 肿瘤坏死因子-Α 白细胞介素-6 CASPASE-3 人冠状动脉内皮细胞

原文传递

水蛭素对体外培养的人冠状动脉平滑肌细胞和内皮细胞生长的影响 被引量：5

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作者 李红梅 王显 《中国循证心血管医学杂志》 2015年第6期792-794,797,共4页

目的 探讨水蛭素对体外培养的人冠状动脉平滑肌细胞（HCASMC）和人冠状动脉内皮细胞（HCAEC）生长的影响及剂量依赖关系,明确水蛭素抗再狭窄的有效性和可行性。方法 用体外培养的HCASMC和HCAEC 3-5代,加入96孔细胞培养板,设置调零孔、... 目的 探讨水蛭素对体外培养的人冠状动脉平滑肌细胞（HCASMC）和人冠状动脉内皮细胞（HCAEC）生长的影响及剂量依赖关系,明确水蛭素抗再狭窄的有效性和可行性。方法 用体外培养的HCASMC和HCAEC 3-5代,加入96孔细胞培养板,设置调零孔、对照孔、加药孔（6.25、3.13、1.56、0.78、0.39、0.2、0.1、0.05、0.025 mg/ml不同浓度水蛭素共9组,每组6个复孔）,培养48 h后用噻唑蓝比色试验（MTT法）检测不同浓度水蛭素干预下两种细胞的活力和抑制率变化。结果 与对照组相比,低浓度（0.025-0.1 mg/ml）水蛭素在对HCASMC增殖的影响方面无统计学差异（P均〉0.05）,而中高浓度（0.2-6.25 mg/ml）的水蛭素抑制HCASMC增殖,差异有统计学意义（P均〈0.05）,且其抑制率随水蛭素浓度升高而增加。与对照组相比,0.025-3.13 mg/ml的水蛭素在对HCAEC增殖的影响差异无统计学意义（P均〉0.05）,但0.05-0.2 mg/ml的水蛭素对HCAEC有一定的促增殖作用;而高浓度（6.25 mg/ml）的水蛭素对HCAEC增殖的抑制增加,差异有统计学意义（P均〈0.05）,其抑制率达到44.6%。结论 中高浓度水蛭素可呈剂量依赖性抑制HCASMC的生长,低中浓度水蛭素对HCAEC无明显抑制作用,且能在抗血栓的同时保护HCAEC甚至促进HCAEC生长。 展开更多

关键词 水蛭素 人冠状动脉平滑肌细胞 人冠状动脉内皮细胞 抑制率

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川芎嗪通过miR-34a对氧化型低密度脂蛋白诱导的冠状动脉内皮细胞损伤的保护作用 被引量：1

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作者 顾民华 顾勇 《陕西中医》 CAS 2023年第9期1169-1172,共4页

目的:探讨川芎嗪是否通过miR-34a影响氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人冠状动脉内皮细胞(HCAECs)损伤。方法:正常培养人HCAECs,作为Con组;用50 mg/L的ox-LDL干预HCAECs,建立细胞损伤模型,作为ox-LDL组。并设立1、10、100 mmol/L组(HC... 目的:探讨川芎嗪是否通过miR-34a影响氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人冠状动脉内皮细胞(HCAECs)损伤。方法:正常培养人HCAECs,作为Con组;用50 mg/L的ox-LDL干预HCAECs,建立细胞损伤模型,作为ox-LDL组。并设立1、10、100 mmol/L组(HCAECs用1、10、100 mmol/L川芎嗪处理+ox-LDL干预),ox-LDL+anti-miR-NC组、ox-LDL+anti-miR-34a组、ox-LDL+miR-NC组、ox-LDL+miR-34a组、ox-LDL+miR-NC+100 mmol/L组、ox-LDL+miR-34a+100 mmol/L组。分别采用试剂盒、酶联免疫吸附法(ELISA)和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测HCAECs中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)水平和微小核糖核酸34a(miR-34a)表达。结果:ox-LDL组HCAECs的MDA含量、TNF-α、IL-1β水平、miR-34a表达水平比Con组显著升高,SOD活力比Con组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);与ox-LDL组比较,川芎嗪显著降低细胞MDA含量、TNF-α、IL-1β水平以及miR-34a表达水平,显著升高SOD活力,差异有统计学意义(P<0.05)。与ox-LDL+anti-miR-NC组比较,ox-LDL+anti-miR-34a组细胞MDA含量以及TNF-α、IL-1β水平显著降低,SOD活力显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。ox-LDL+miR-34a+100 mmol/L组HCAECs的MDA含量以及TNF-α、IL-1β水平显著高于ox-LDL+miR-NC+100 mmol/L组,SOD活力显著低于ox-LDL+miR-NC+100 mmol/L组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:川芎嗪通过抑制miR-34a降低ox-LDL诱导的人HCAECs炎症反应和氧化应激。 展开更多

关键词 川芎嗪 MIR-34A 人冠状动脉内皮细胞 炎症反应 氧化应激 氧化型低密度脂蛋白

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小檗碱对波动性高糖诱导的人冠状动脉内皮细胞凋亡的影响 被引量：5

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作者 庄微 刘挺松 +1 位作者 张成成 宫剑滨 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1365-1371,共7页

目的研究小檗碱对波动性高糖所致人冠状动脉内皮细胞(HCAECs)凋亡的影响。方法分离、鉴定并培养HCAECs,将HCAECs分为5组:正常葡萄糖组(5.5 mmol/L葡萄糖)、持续性高糖组(25 mmol/L葡萄糖)、波动性高糖组(5.5、25 mmol/L葡萄糖每24小时波... 目的研究小檗碱对波动性高糖所致人冠状动脉内皮细胞(HCAECs)凋亡的影响。方法分离、鉴定并培养HCAECs,将HCAECs分为5组:正常葡萄糖组(5.5 mmol/L葡萄糖)、持续性高糖组(25 mmol/L葡萄糖)、波动性高糖组(5.5、25 mmol/L葡萄糖每24小时波动1次)、波动性高渗环境(不加入葡萄糖,加入与波动性高糖组相同浓度的甘露醇,保持与波动性高糖组相同的波动性高渗环境)、波动性高糖+小檗碱干预组(5.5、25mmol/L葡萄糖+50μmol/L小檗碱每24小时波动1次),各组细胞每24小时换液1次,共培养7 d后进行后期实验。检测各组HCAECs的细胞活力及凋亡情况,利用实时荧光定量(q RT-PCR)及Western blotting技术检测细胞凋亡相关蛋白Caspase-3表达量。结果与持续性高糖组相比,波动性高糖组HCAECs凋亡更显著(P<0.05),波动性高糖组Caspase-3蛋白及m RNA表达水平明显增加(P<0.05);但波动性高糖+小檗碱干预组较波动性高糖组HCAECs凋亡明显减弱(P<0.05),小檗碱可以明显下调波动性高糖诱导的Caspase-3表达(P<0.05)。结论波动性高糖较持续性高糖更易降低HCAECs活力,促进HCAECs凋亡,但小檗碱显著减弱波动性高糖环境下HCAECs凋亡,对HCAECs具有明显的保护作用。 展开更多

关键词 小檗碱 波动性高糖 人冠状动脉内皮细胞 凋亡 CASPASE-3

原文传递

紫杉醇/比伐卢定球囊涂层复合物对HCASMC和HCAEC体外增殖活性的影响

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作者 王凯 王显 +1 位作者 王渊 王宁勃 《中国循证心血管医学杂志》 2023年第7期781-784,共4页

目的探讨紫杉醇/比伐卢定复合物(络风宁0号)对体外培养的人冠状动脉平滑肌细胞(HCASMC)和人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)增殖的影响,为新一代中药单体复合药物涂层球囊(DCB)的研发提供依据。方法将HCASMC和HCAEC体外培养并传代至4~6代,根据... 目的探讨紫杉醇/比伐卢定复合物(络风宁0号)对体外培养的人冠状动脉平滑肌细胞(HCASMC)和人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)增殖的影响,为新一代中药单体复合药物涂层球囊(DCB)的研发提供依据。方法将HCASMC和HCAEC体外培养并传代至4~6代,根据药物干预分为紫杉醇(1μmol/L)组和紫杉醇/比伐卢定(PB)组,其中PB组所采用为1μmol/L紫杉醇配伍不同浓度比伐卢定(1/256、1/128、1/64、1/32、1/16、1/8、1/4、1/2和1 mg/ml),48 h后用MTT法检测各组HCASMC和HCAEC细胞的增殖活力,以筛选出紫杉醇与比伐卢定之间的最佳配比,抑制HCASMC增殖的同时不影响甚至促进HCAEC增殖,为内皮友好型中药单体复合DCB的研发提供实验数据支持。结果同紫杉醇组相比,PB组中紫杉醇配伍低浓度比伐卢定(1/256 mg/ml)即可增强紫杉醇对HCASMC增殖的抑制作用,该作用随比伐卢定浓度增高而增强,呈浓度依赖关系,差异有统计学意义(P<0.05);紫杉醇配伍低浓度比伐卢定(1/256和1/128 mg/ml)时对HCAEC增殖无影响(P>0.05),但比伐卢定浓度>1/128 mg/ml时对HCAEC的抑制作用较紫杉醇组增强,呈浓度依赖关系,差异有统计学意义(P<0.05)。结论1μmol/L紫杉醇配伍1/128 mg/ml比伐卢定相较于单纯应用紫杉醇,体外培养的HCASMC相对增殖活性进一步下降至75%左右,同时HCAEC增殖活性不受影响,二者合用体现了中药配伍增效减毒的作用,可为新型内皮友好型中药单体复合DCB的研发提供思路和依据。 展开更多

关键词 紫杉醇 比伐卢定 人冠状动脉平滑肌细胞 人冠状动脉内皮细胞 增殖活性

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雷公藤甲素诱导人冠状动脉平滑肌细胞凋亡的实验研究 被引量：4

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作者 罗小平 徐朝军 +1 位作者 宋岚 乔新惠 《实用临床医学（江西）》 CAS 2007年第8期6-9,共4页

目的:研究雷公藤甲素对人冠状动脉平滑肌细胞凋亡的影响。方法:采用MTT实验检测雷公藤甲素对体外培养的人冠状动脉平滑肌细胞增殖的影响,运用流式细胞术、基因组DNA电泳观察凋亡特征性"梯状"条带检测细胞凋亡,采用Western-blo... 目的:研究雷公藤甲素对人冠状动脉平滑肌细胞凋亡的影响。方法:采用MTT实验检测雷公藤甲素对体外培养的人冠状动脉平滑肌细胞增殖的影响,运用流式细胞术、基因组DNA电泳观察凋亡特征性"梯状"条带检测细胞凋亡,采用Western-blot检测P53蛋白表达变化。结果:雷公藤甲素对体外培养的人冠状动脉平滑肌细胞具有明显的抑制作用。流式细胞仪检测显示雷公藤甲素可以显著诱导人冠状动脉平滑肌细胞凋亡,DNA电泳显示雷公藤甲素作用于人冠状动脉平滑肌细胞后出现凋亡细胞特有的DNA阶梯状条带。P53蛋白表达水平呈浓度依赖性表达上调。结论:雷公藤甲素可能通过激活P53基因表达抑制人冠状动脉平滑肌细胞的生长并诱导其凋亡。 展开更多

关键词 雷公藤甲素 人冠状动脉平滑肌细胞 细胞凋亡 P53

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泽兰对人冠状动脉平滑肌细胞增殖的影响 被引量：5

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作者 聂波 李佳彦 +4 位作者 王硕仁 朱陵群 孙逸坤 崔巍 牛福玲 《中西医结合心脑血管病杂志》 2010年第9期1078-1080,共3页

目的研究中药泽兰对人冠状动脉平滑肌细胞(HCASMC)增殖的影响。方法利用体外细胞实验,通过人碱性成纤维生长因子和人表皮生长因子刺激细胞增殖,随机分为空白组、不同浓度泽兰水提物(LLST)组(320μg/mL、640μg/mL、1 280μg/mL、2 560μ... 目的研究中药泽兰对人冠状动脉平滑肌细胞(HCASMC)增殖的影响。方法利用体外细胞实验,通过人碱性成纤维生长因子和人表皮生长因子刺激细胞增殖,随机分为空白组、不同浓度泽兰水提物(LLST)组(320μg/mL、640μg/mL、1 280μg/mL、2 560μg/mL、5120μg/mL)和不同浓度泽兰醇洗脱物(LLCX)组(40μg/mL、80μg/mL、160μg/mL、320μg/mL、640μg/mL)。采用MTT法和流式细胞术分别测定细胞OD值、G0/G1期、S期、G2/M期和apoptosis期细胞百分比,观察泽兰不同浓度药液对细胞增殖的影响。结果 MTT结果显示泽兰LLST和LLCX 10个剂量均可抑制细胞增殖(P<0.05)。细胞周期结果显示:泽兰LLST 320μg/mL、640μg/mL、1 280μg/mL浓度组和泽兰LLCX40μg/mL、80μg/mL、160μg/mL浓度组的G0/G1期细胞百分比较空白组增高(P<0.05);S期细胞百分比较空白组降低(P<0.05)。抑制增殖作用的最佳药物浓度分别为1 240μg/mL和160μg/mL。结论中药泽兰具有抑制HCASMC增殖的活性。 展开更多

关键词 泽兰 人冠状动脉平滑肌细胞 细胞增殖

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白细胞介素37对Toll样受体4激活人冠状动脉内皮细胞核因子κB和细胞间黏附分子1表达的影响 被引量：4

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作者 谢康琪 谢燕丹 +1 位作者 林玲 李吉林 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2018年第3期227-231,236,共6页

目的探讨抗炎症因子白细胞介素37（IL-37）对人冠状动脉内皮细胞（HCAEC）中Toll样受体4（TLR4）激活后下游信号核因子κB（NF-κB）及细胞间黏附分子1（ICAM-1）表达的影响及机制。方法将HCAEC培养3~5代后进行实验,分为3组：对照组、IL... 目的探讨抗炎症因子白细胞介素37（IL-37）对人冠状动脉内皮细胞（HCAEC）中Toll样受体4（TLR4）激活后下游信号核因子κB（NF-κB）及细胞间黏附分子1（ICAM-1）表达的影响及机制。方法将HCAEC培养3~5代后进行实验,分为3组：对照组、IL-37干扰组、IL-37过表达组。利用脂质体转染将IL-37干扰序列加入IL-37干扰组,IL-37 DNA过表达质粒加入IL-37过表达组;孵育24 h后,用实时荧光定量PCR检测基因转染效率以确定转染成功。各组给予TLR4激活剂脂多糖（200μg/L）进行干预。Western blot检测干预24 h后ICAM-1蛋白的表达及干预30、60、120 min时磷酸化NF-κB蛋白的表达。结果对照组在TLR4激活后ICAM-1蛋白表达升高,与之相比,IL-37干扰组在TLR4激活后ICAM-1蛋白明显升高（P〈0.05）,但在IL-37过表达组中没有升高（P〉0.05）。与对照组相比,IL-37干扰组TLR4激活后30、60、120 min各时间点磷酸化NF-κB的蛋白表达明显升高（P〈0.05）,而IL-37过表达组磷酸化NF-κB蛋白表达并没有明显升高（P〉0.05）。结论 IL-37可以抑制TLR4激活HCAEC中炎症因子ICAM-1的升高,其机制可能是通过抑制NF-κB磷酸化的程度。IL-37的抗炎作用可以防治动脉粥样硬化。 展开更多

关键词 白细胞介素37 人冠状动脉内皮细胞 TOLL样受体4 核因子ΚB 细胞间黏附分子1 动脉粥样硬化

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PPAR-γ激动剂干预TLR4/PI3K通路对脂多糖诱导人冠状动脉血管内皮细胞Cx43表达的影响 被引量：4

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作者 吴立晗 巫相宏 +1 位作者 闭奇 文伟明 《广西医科大学学报》 CAS 2021年第6期1124-1128,共5页

目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(RRAR-γ)激动剂罗格列酮干预Toll样受体4/磷脂酰肌醇3-激酶(TLR4/PI3K)信号通路对脂多糖(LPS)诱导人冠状动脉血管内皮细胞(HCAEC)缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响。方法:用LPS诱导建立HCAEC炎症... 目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(RRAR-γ)激动剂罗格列酮干预Toll样受体4/磷脂酰肌醇3-激酶(TLR4/PI3K)信号通路对脂多糖(LPS)诱导人冠状动脉血管内皮细胞(HCAEC)缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响。方法:用LPS诱导建立HCAEC炎症模型,将细胞分为模型组、TLR4激动剂KLA组、PI3K抑制剂LY294002组、罗格列酮组、KLA+罗格列酮组、LY294002+罗格列酮组,另设空白组(不作任何处理)。分别采用实时荧光定量PCR(qPCR)、Western blotting法检测细胞中Cx43、TLR4、PI3K m RNA和蛋白表达。结果:KLA+罗格列酮组TLR4表达明显低于KLA组(P<0.05)。LY294002+罗格列酮组PI3K表达明显低于LY294002组(P<0.05)。模型组Cx43表达明显低于空白组(P<0.05),KLA+罗格列酮组Cx43表达明显高于KLA组(P<0.05),LY294002+罗格列酮组Cx43表达明显高于LY294002组(P<0.05)。结论:PPAR-γ激动剂罗格列酮可抑制TLR4/PI3K信号通路并上调HCAEC中Cx43的表达。 展开更多

关键词 罗格列酮 过氧化物酶体增殖物激活受体Γ Toll样受体4 磷脂酰肌醇3-激酶 CX43 人冠状动脉内皮细胞

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