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产志贺样毒素大肠杆菌的实验室诊断方法进展 被引量:1
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作者 李婷 叙黎明 《国外医学(临床生物化学与检验学分册)》 2005年第8期553-555,559,共4页
近年来,人们逐渐认识到包括O157:H7在内的产志贺样毒素大肠杆菌(STEC)的重要性,并且认识到对人致病的STEC包括多种血清型,其致病性已逐渐成为研究热点。而对STEC疾病的快速诊断、治疗和控制则取决于检测方法的敏感性和特异性。现就其分... 近年来,人们逐渐认识到包括O157:H7在内的产志贺样毒素大肠杆菌(STEC)的重要性,并且认识到对人致病的STEC包括多种血清型,其致病性已逐渐成为研究热点。而对STEC疾病的快速诊断、治疗和控制则取决于检测方法的敏感性和特异性。现就其分子生物学检测方法、志贺毒素(STX)的测定,以及直接分离STEC的方法等进行阐述,并比较各种方法的优劣。 展开更多
关键词 志贺毒素大肠杆菌 实验室诊断 O157:H7 分子生物学 血清型
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陕西部分地区不同食源性大肠杆菌耐药性检测 被引量:21
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作者 只帅 席美丽 +5 位作者 刘攻关 吴淑鹏 殷童 姚远 杨保伟 孟江洪 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第1期196-201,共6页
对陕西西安市和杨凌示范区超级市场及农贸市场零售肉及凉拌菜中的大肠杆菌耐药性及肠产志贺样毒素大肠杆菌进行检测。采用美国临床实验室标准化委员会(National Committee of Clinical Laboratory Standard,NCCLS)推荐的琼脂稀释法,以... 对陕西西安市和杨凌示范区超级市场及农贸市场零售肉及凉拌菜中的大肠杆菌耐药性及肠产志贺样毒素大肠杆菌进行检测。采用美国临床实验室标准化委员会(National Committee of Clinical Laboratory Standard,NCCLS)推荐的琼脂稀释法,以大肠埃希氏菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923及粪肠球菌ATCC29212为质控菌株,对来源于不同食品的748株大肠杆菌进行15种抗生素药敏性检测。发现大肠杆菌分离株对链霉素的抗性最高(88.2%),其次为四环素(84.4%)、甲氧苄啶-新诺明(64.4%)、萘啶酮酸(62.6%)、氨苄西林(56.0%)、环丙沙星(39.2%)、氯霉素(37.6%)、卡那霉素(34.9%)、庆大霉素(34.2%)、阿莫西林-克拉维酸(28.9%)、加替沙星(26.9%)。所有受试菌株对阿米卡星的敏感性最高(8.3%),其次为头孢西丁(11.5%)、头孢曲松(13.8%)、头孢哌酮(19.5%)。多重耐药大肠杆菌分离率为73.9%。从猪肉及羊肉源样品中分离到肠产志贺样毒素大肠杆菌2株。陕西西安地区食品中大肠杆菌耐药性比较严重。 展开更多
关键词 食品 大肠杆菌 多重耐药性 志贺毒素大肠杆菌
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河北省部分地区肉、蛋食品大肠杆菌污染状况的检测 被引量:13
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作者 史秋梅 张艳英 +3 位作者 高桂生 高光平 程淑琴 裴玉欣 《河北科技师范学院学报》 CAS 2012年第4期7-11,共5页
为了解河北省肉食品大肠杆菌污染状况,从河北省内不同地区集贸市场和超市随机采集了生活用肉、蛋类等105个样品,采用国家标准法和PCR方法对样品进行了大肠杆菌的检测与鉴定。结果表明,从105个样品中检测到大肠杆菌19株,大肠杆菌总阳性率... 为了解河北省肉食品大肠杆菌污染状况,从河北省内不同地区集贸市场和超市随机采集了生活用肉、蛋类等105个样品,采用国家标准法和PCR方法对样品进行了大肠杆菌的检测与鉴定。结果表明,从105个样品中检测到大肠杆菌19株,大肠杆菌总阳性率18.1%。其中,生鸡肉、生猪肉、生鸡蛋的大肠杆菌阳性率分别为35.3%,23.8%,16.7%;生羊肉、生牛肉、生鸭蛋、生虾没有检出大肠杆菌。19株大肠杆菌中从生鸡肉样品中检出产志贺样毒素大肠杆菌2株。河北省肉类食品总体上大肠杆菌污染程度较轻,但生鸡肉中大肠杆菌的检出率较高。 展开更多
关键词 食品 大肠杆菌 志贺毒素大肠杆菌
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产志贺样毒素和肠毒素大肠杆菌分子流行病学(英文) 被引量:5
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作者 冉雪琴 林尖兵 王嘉福 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期796-799,共4页
【目的】人和动物腹泻的主要病原菌为大肠杆菌,本文主要研究贵州省致腹泻大肠杆菌毒力因子的分布类型。【方法】采用PCR技术对各毒力因子的基因分布进行研究。【结果】共分离到333株大肠杆菌,其中产肠毒素大肠杆菌(ETEC)在腹泻的人、猪... 【目的】人和动物腹泻的主要病原菌为大肠杆菌,本文主要研究贵州省致腹泻大肠杆菌毒力因子的分布类型。【方法】采用PCR技术对各毒力因子的基因分布进行研究。【结果】共分离到333株大肠杆菌,其中产肠毒素大肠杆菌(ETEC)在腹泻的人、猪、牛群中占优势,分别为:人群73(n=112),猪群82(n=106),牛群18(n=115)。在ETEC菌株中检测到热敏肠毒素(lt)和不耐热肠毒素(st)基因,还存在lt/st并存现象。从人、猪、牛群中还检测到产志贺样毒素大肠杆菌(STEC),其中源自猪的STEC的检出率最高。大部分STEC同时携带lt、st或lt和st同时并存。编码F18菌毛的主亚基由fedA基因编码。对所分离大肠杆菌F18菌毛进行的研究结果表明,fedA基因主要与肠毒素基因共存,与stx基因并存的类型较少,25份猪源STEC菌株中仅有4份检测到fedA基因。【结论】贵州省人群、猪群和牛群致腹泻病原菌中以带F18菌毛的ETEC为主,STEC主要分布在腹泻的猪群中。 展开更多
关键词 流行病学 志贺毒素大肠杆菌(STEC) 毒素大肠杆菌(ETEC) fedA基因 毒素基因
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猪源大肠杆菌(ETEC、STEC、AEEC)毒力基因及其与O抗原型的关系 被引量:29
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作者 陈祥 赵李祥 +3 位作者 高崧 苗晓青 焦新安 刘秀梵 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期857-862,共6页
【目的】揭示从我国部分地区仔猪腹泻或水肿病病猪体内分离到的300个大肠杆菌分离株所属病原型(pathotype)、毒力基因及其与O血清型的关系。【方法】O血清型采用常规的凝集试验进行测定,毒力基因采用PCR方法检测。【结果】通过对这300... 【目的】揭示从我国部分地区仔猪腹泻或水肿病病猪体内分离到的300个大肠杆菌分离株所属病原型(pathotype)、毒力基因及其与O血清型的关系。【方法】O血清型采用常规的凝集试验进行测定,毒力基因采用PCR方法检测。【结果】通过对这300个分离株的O血清型及其毒素、紧密素和黏附素基因进行鉴定,结果显示除50株未定型、17株自凝外,测定出233个分离株的血清型,这些分离株覆盖了45个血清型,其中以O149、O107、O139、O93和O91为主,共133株,占定型菌株的57.1%;拥有estⅠ、estⅡ、elt、stx2e和eaeA基因的菌株分别为102(34.0%)、190(63.3%)、81(27.0%)、57(19.0%)和54(18.0%)株;分离株中有51株K88基因阳性(其中菌毛表达率为100%),75株F18基因阳性(其中菌毛表达率为50.7%),在K88菌株中,O149血清型与estⅠ或estⅡ+elt密切相关,在F18菌株中,O107血清型与estⅠ或estⅡ、O139血清型与stx2e紧密相关。依其毒力特征可将这些分离株分为以下6种类型:ETEC、STEC、AEEC、ETEC/STEC、AEEC/ETEC和AEEC/ETEC/STEC,分别拥有190、24、36、32、17和1个菌株,占分离株的63.3%、8.0%、12.0%、10.7%、5.7%和0.3%。通过分析这些分离株的O血清型、毒素类型和黏附素型之间的相关性:猪源ETEC以O149、O107、O93和O98等血清型为主,O149:K88菌株主要与estⅡ或estⅡ+elt肠毒素相关,O107:F18菌株主要与estⅡ相关,O93和O98血清型菌株主要与estⅡ肠毒素相关;STEC菌株以O139:F18血清型为主,拥有stx2e;AEEC菌株拥有紧密素,无明显优势血清型;ETEC/STEC菌株以O107:F18和O116:F18血清型为主,主要与estⅠ+stx2e或estⅡ+stx2e密切相关,ETEC/AEEC菌株以O91和O107血清型为主,全部拥有肠毒素estⅠ和紧密素基因。【结论】我国至少存在6种病原型的猪肠道致病性大肠杆菌,其中ETEC为我国部分地区猪大肠杆菌病的主要病原,同时其病原型日益复杂。 展开更多
关键词 仔猪 大肠杆菌 血清型 毒力基因 毒素大肠杆菌 志贺毒素大肠杆菌 黏附与脱落性大肠杆菌
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食源性产志贺毒素大肠杆菌的分离及菌株特征分析 被引量:17
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作者 白向宁 王红 +3 位作者 赵爱兰 张正东 李群 熊衍文 《中国食品卫生杂志》 北大核心 2014年第4期312-317,共6页
目的了解不同食品中产志贺毒素大肠杆菌的流行情况、菌株特征及潜在致病性。方法对我国不同地区采集的355份食品样品进行产志贺毒素大肠杆菌分离鉴定,对菌株进行stx1/stx2基因分型、eae等毒力基因检测,并对菌株进行多位点序列分型(MLST... 目的了解不同食品中产志贺毒素大肠杆菌的流行情况、菌株特征及潜在致病性。方法对我国不同地区采集的355份食品样品进行产志贺毒素大肠杆菌分离鉴定,对菌株进行stx1/stx2基因分型、eae等毒力基因检测,并对菌株进行多位点序列分型(MLST)分析。结果 355份样品中44份stx2基因阳性,共分离出11株非O157产志贺毒素大肠杆菌,其中3株携带stx2a亚型,3株携带stx2e亚型,1株携带stx2b亚型,4株不能分型;5株携带ehxA、saa毒力基因,2株携带subA基因,1株携带katP基因;MLST将11株菌分为7个不同的ST型,存在与溶血性尿毒综合症患者肠出血性大肠杆菌分离株(HUS-associated enterohemorrhagic E.coli,HUSEC)及主要流行血清群产志贺毒素大肠杆菌亲缘关系较近的ST型别。结论我国食品中存在一定程度的非O157产志贺毒素大肠杆菌污染,部分菌株具有潜在致病性,应加强对食品中STEC的监测。 展开更多
关键词 志贺毒素大肠杆菌 食品 毒力基因 多位点序列分型 食品安全 食源性致病菌 大肠杆菌 分型
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聚焦当今传染病 被引量:16
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作者 张玲霞 王永怡 +3 位作者 王姝 李军 孟立珊 徐漠研 《传染病信息》 2012年第1期1-6,共6页
本文针对当今传染病疫情,从流感病毒的危害、O104∶H4新病原、霍乱现状、结核病防控、3种蚊媒传染病(登革热、疟疾和基孔肯雅热)流行特点、我国野生脊髓灰质炎感染复燃、西尼罗病毒感染洲际传播、HBV和HCV引发的肝细胞癌的防治新理念、... 本文针对当今传染病疫情,从流感病毒的危害、O104∶H4新病原、霍乱现状、结核病防控、3种蚊媒传染病(登革热、疟疾和基孔肯雅热)流行特点、我国野生脊髓灰质炎感染复燃、西尼罗病毒感染洲际传播、HBV和HCV引发的肝细胞癌的防治新理念、狂犬病预防及幽门螺杆菌根治10个方面进行评述,提示积极应对传染病的必要性和可能性。 展开更多
关键词 传染病 疾病报告 流感 志贺毒素大肠杆菌 霍乱 结核 登革出血热 疟疾 疾病媒介 脊髓灰质炎 西尼罗病毒 乙型肝炎 丙型肝炎 肝肿瘤 狂犬病 幽门螺杆菌 死亡原因
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产志贺毒素大肠杆菌的流行病学及致病因子的研究进展 被引量:12
8
作者 刘飞 宋定州 +1 位作者 李键 于学辉 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第1期187-191,共5页
产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)是一类危害严重的食源性病原菌,能引起人类的严重疾病,如出血性结肠炎、溶血性尿毒症等,牛、羊等反刍动物是引起人类发病的主要宿主来源。作者总结了产志贺毒素大肠杆... 产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)是一类危害严重的食源性病原菌,能引起人类的严重疾病,如出血性结肠炎、溶血性尿毒症等,牛、羊等反刍动物是引起人类发病的主要宿主来源。作者总结了产志贺毒素大肠杆菌病的流行病学现状,就产志贺毒素大肠杆菌染色体和毒性质粒上的主要毒力因子的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 志贺毒素大肠杆菌 流行病学 致病因子
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江苏某奶牛场健康奶牛体内产志贺毒素大肠杆菌的分离鉴定及其对小鼠致病性的研究 被引量:12
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作者 薛涛 顾丛丛 +4 位作者 高崧 焦新安 周琼 张文俊 刘秀梵 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期830-837,共8页
通过对江苏省某奶牛场连续6个月的定群、定畜跟踪调查,获得产志贺毒素大肠杆菌(STEC)在该牛场分布的广泛性、持续性和血清型多样化的资料,并对一些重要血清型分离株作致病性的鉴定。基于本实验室已经建立的多重PCR方法对stx1、stx2、eae... 通过对江苏省某奶牛场连续6个月的定群、定畜跟踪调查,获得产志贺毒素大肠杆菌(STEC)在该牛场分布的广泛性、持续性和血清型多样化的资料,并对一些重要血清型分离株作致病性的鉴定。基于本实验室已经建立的多重PCR方法对stx1、stx2、eaeA、ehxA共4个基因进行检测,对检测出的阳性样品,非O157STEC采用多重PCR结合CT-SMAC平板的分离方法,而O157STEC通过免疫磁珠结合O157显色平板的分离方法。结果表明,该奶牛场STEC的初筛率为16.1%(112/696),分离率为11.1%(77/696)。分离株属于35种O血清型和60种O∶H血清型。该场的优势血清型为O4、O26和O93,O157在该场存在,但并非优势血清型。77个分离株中,stx2基因的检出率为68.8%,远远高于其它毒力基因,如stx1(19.5%)、eaeA(11.7%)和ehxA(20.8%)。该场分离到一些O157和O26血清型的菌株,对小鼠具有较强的致病性。奶牛是STEC的天然宿主,可健康带菌。除了O157STEC外,非O157STEC中一些高致病力菌株对人类的健康也存在威胁。 展开更多
关键词 志贺毒素大肠杆菌 奶牛 多重PCR O抗原 H抗原 毒力基因
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人源与牛源非O157产志贺毒素大肠杆菌耐药性分析及脉冲场凝胶电泳分子分型 被引量:11
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作者 施旭辉 于婷婷 +6 位作者 王芋丹 陈文霞 黄顺敏 王磊 郑晓风 谢金鑫 佟盼盼 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1224-1229,共6页
为了解人源和牛源非O157产志贺毒素大肠杆菌(STEC)的耐药表型、耐药基因、质粒复制子类型及其之间的同源性,本研究采用K-B纸片法对3株人源非O157 STEC和14株牛源非O157 STEC耐药株进行药敏试验,结果显示3株人源非O157 STEC均耐药,其中2... 为了解人源和牛源非O157产志贺毒素大肠杆菌(STEC)的耐药表型、耐药基因、质粒复制子类型及其之间的同源性,本研究采用K-B纸片法对3株人源非O157 STEC和14株牛源非O157 STEC耐药株进行药敏试验,结果显示3株人源非O157 STEC均耐药,其中2株呈多重耐药(MDR);14株牛源非O157 STEC耐药株中有9株呈MDR。11株MDR-非O157 STEC对4~13种抗生素耐药,包括β-内酰胺类、四环素类、磺胺类、氯霉素类和氨基糖苷类药物,其中10株(1株人源和9株牛源)非O157 STEC的耐药谱中出现氯霉素-链霉素-复方新诺明-四环素组合。通过PCR方法检测非O157 STEC耐药基因floR(氯霉素类)、mph(A)(大环内酯类)、strA、strB(氨基糖苷类)、sulR(磺胺类)和tet(A)、tet(G)(四环素类)和质粒复制子分型,结果显示17株非O157 STEC中有7株携带floR-mph(A)strA-strB-sulR-tet(A)-tet(G),2株携带floR-strA-strB-sulR-tet(A)-tet(G),2株携带tet(A)-tet(G),1株携带floR-mph(A)-tet(A)-tet(G),1株携带floR-mph(A),4株未携带检测的耐药基因;质粒复制子分型显示,IncFIB质粒检测率最高为82%(14/17),IncC和IncW质粒次之(47%,8/17)。通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)对人源和牛源非O157 STEC耐药株进行同源性分析,结果显示,人源与牛源非O157 STEC耐药株的相似度低于80%。本研究上述结果表明人源和牛源非O157 STEC均出现了MDR,同源性不高,但这些菌株携带多个耐药基因和质粒,且呈现相似的耐药模式,并且本研究首次在我国新疆地区非O157 STEC中检测出mph(A)基因,提示在动物生产中需谨慎用药,以防止同时具有耐药性和毒力的菌株感染人类。 展开更多
关键词 志贺毒素大肠杆菌 耐药性 质粒 腹泻患者 脉冲场凝胶电泳
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山东省动物粪便中非O157产志贺毒素大肠埃希菌菌株特征及耐药性分析 被引量:11
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作者 胡彬 寇增强 +8 位作者 邵纯纯 尹海英 刘宗东 徐雪华 房明 陈保立 魏昌印 李贵锋 毕振旺 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期271-276,共6页
目的分析山东省动物粪便中非0157产志贺毒素大肠埃希菌(STEC)的菌株特征及耐药状况。方法于2015--2016年,采用方便抽样方法在山东省微山县、莱州市共采集1022份新鲜动物粪便标本,共分离到24株非0157STEC。通过血清凝集实验进行血清... 目的分析山东省动物粪便中非0157产志贺毒素大肠埃希菌(STEC)的菌株特征及耐药状况。方法于2015--2016年,采用方便抽样方法在山东省微山县、莱州市共采集1022份新鲜动物粪便标本,共分离到24株非0157STEC。通过血清凝集实验进行血清分型,采用微量肉汤稀释法进行药物敏感性试验,后采用双纸片协同试验进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测。采用PCR方法检测耐药基因。采用PFGE进行分子分型并采用多位点序列分型(MLST)确定等位基因谱及菌株序列型。使用CLC Sequence Viewer及Conting Express生物信息软件分析不同sT序列群及菌株问的进化关系。结果24株非0157型STEC菌株中23株来自猪粪,1株来自牛粪;毒力基因均为stx2型;对磺胺异噁唑耐药的菌株较多,为22株,对复方磺胺异噁唑和萘啶酸耐药的菌株均为18株,对氯霉素耐药菌株为13株,对四环素耐药菌株为19株。存在多重耐药现象,耐药谱为:磺胺异嗯唑.四环素一复方磺胺异嗯唑.萘啶酸一氯霉素,对头孢吡肟和亚胺培南均为敏感。ESBLs确证实验表明,有4株非0157型STEC产ESBLs。PCR检测7种耐药基因,4种四环素类耐药基因(tetA、tetB、tetC、tetD)均有检出,ESBLs类耐药基因(blaSHV-1、blaCTX-M、bla TEM)均为阴性。24株菌分成15个PFGE型别,其聚类结果比较分散,无优势PFGE型别。MLST型别有11种,其中ST540、ST5133型别的菌株最多,各为4株菌,聚类为1个MLST基因组。结论山东省部分地区在动物粪便中检出的非0157STEC血清型比较分散,对常见的抗生素耐药率比较高,具有明显的分子多态性,应重点加强对这类菌株的监测和管理。 展开更多
关键词 志贺毒素大肠杆菌 电泳 凝胶 脉冲场 菌株特征 耐药监测
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产志贺毒素大肠杆菌噬菌体vB_EcoM_PHB05的生物学特性及全基因组分析 被引量:11
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作者 陈义宝 孙二超 +3 位作者 杨斓 童贻刚 宋娇阳 吴斌 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期428-437,共10页
产志贺毒素大肠杆菌又称产Vero细胞毒素大肠杆菌,是一种可引起水样腹泻、溶血性尿毒综合征、出血性结肠炎等的人兽共患肠道致病菌。以一株产志贺毒素大肠杆菌为宿主菌,从湖北桌规模化养猪场的污水中分离得到一株烈性产志贺毒素大肠杆... 产志贺毒素大肠杆菌又称产Vero细胞毒素大肠杆菌,是一种可引起水样腹泻、溶血性尿毒综合征、出血性结肠炎等的人兽共患肠道致病菌。以一株产志贺毒素大肠杆菌为宿主菌,从湖北桌规模化养猪场的污水中分离得到一株烈性产志贺毒素大肠杆茵噬茵体,命名为vB_EcoM_PHB05。采用双层平板法筛选并纯化得到一株噬菌体.采用透射电镜观察噬菌体颗粒:使用Ion Torrent测序平台进行噬菌体全基因组测序,同时对噬菌体最佳感染复数(MOI)、一步生长曲线、裂解谱等生物学特性进行研究。结果表明,噬茵体vB_EcoM_PHB05在电镜下可见有一正多面体立体对称头部(直径约72nm),含收缩性尾部(尾长约45nm,尾宽20nm).为肌尾科噬菌体;提取基因组,酶切鉴定该噬菌体核酸类型为双链DNA;其最佳感染复数为0.1;一步生长曲线试验结果显示,噬菌体vB_EcoM_PHB05潜伏期约为20min,平均裂解量约58PFU/cell;基因测序结果表明.该噬菌体全基因组全长147659bp,G+C含量37.5%。噬菌体vB_EcoM_PHB05除对本身宿主茵产志贺毒素大肠杆菌(Escherichia coli034)产生裂解外,还裂解其它产志贺毒素大肠杆菌和沙门茵。噬菌体vB_EcoM_PHB05为一株广谱烈性噬菌体,其基因组中不合耐药基因及毒力基因,具有开发为抗产志贺毒素大肠杆菌制剂的潜力。 展开更多
关键词 志贺毒素大肠杆菌噬菌体 分离鉴定 生物学特征 全基因组测序 基因组分析
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产志贺毒素大肠杆菌流行病学及主要毒力因子研究进展 被引量:9
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作者 旷代 潘海建 +2 位作者 杨筱薇 李赞阳 张建民 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第8期180-184,共5页
产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)是一类能引起包括水样腹泻、出血性结肠炎、尿毒综合症等一系列人体疾病的人畜共患肠道致病菌,其感染在世界范围内包括中国都有过暴发流行。文章阐述了STECO157血清型... 产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)是一类能引起包括水样腹泻、出血性结肠炎、尿毒综合症等一系列人体疾病的人畜共患肠道致病菌,其感染在世界范围内包括中国都有过暴发流行。文章阐述了STECO157血清型和非O157血清型的分布特征及流行趋势,同时还对该病的主要毒力因子进行了综述,以期为该病的防控提供科学依据。 展开更多
关键词 志贺毒素大肠杆菌 流行病学 毒力因子
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产志贺毒素大肠杆菌的分子生物学检测方法研究 被引量:8
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作者 李晓虹 许学斌 +1 位作者 蒋琴娣 韩伟 《检验检疫科学》 2006年第1期61-63,共3页
[目的]建立快速准确检测食品中产志贺毒素大肠杆菌的分子生物学方法。[方法]针对产志贺毒素大肠杆菌(STEC)的stx1、stx2、eaeA、hlyA4种毒力基因,设计了4对特异性引物。[结果]采用多重PCR(multiplexPCR)方法,得到614bp、779bp、450bp和3... [目的]建立快速准确检测食品中产志贺毒素大肠杆菌的分子生物学方法。[方法]针对产志贺毒素大肠杆菌(STEC)的stx1、stx2、eaeA、hlyA4种毒力基因,设计了4对特异性引物。[结果]采用多重PCR(multiplexPCR)方法,得到614bp、779bp、450bp和300bp4条片断。[结论]实验结果表明,本文建立的mPCR方法较常规的大肠杆菌检测方法简便、快速、灵敏度高,灵敏度可达15cfu/mL。 展开更多
关键词 多重PCR 志贺毒素大肠杆菌
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山东省微山县动物粪便中产志贺毒素大肠埃希菌血清型鉴定及耐药性分析 被引量:8
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作者 邵纯纯 胡彬 +4 位作者 毕振旺 寇增强 房明 陈保立 毕振强 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期70-75,共6页
目的分析山东省微山县动物粪便中的产志贺毒素大肠埃希菌(STEC)的血清型及耐药状况。方法于2015年9月,采集山东省微山县共500份新鲜动物粪便样本(猪粪便145份,牛粪便140份,羊粪便130份,鸡粪便61份,鸭粪便10份,狗粪便8份,鹅粪... 目的分析山东省微山县动物粪便中的产志贺毒素大肠埃希菌(STEC)的血清型及耐药状况。方法于2015年9月,采集山东省微山县共500份新鲜动物粪便样本(猪粪便145份,牛粪便140份,羊粪便130份,鸡粪便61份,鸭粪便10份,狗粪便8份,鹅粪便6份),从中共分离出16株STEC。采用血清凝集试验对STEC分离株进行血清分型,采用抗菌药物敏感性试验探讨其药敏性及耐药性。采用PCR方法检测四环素类耐药基因(tetA、tetB、tetC、tetD)以及β-内酰胺类耐药基因(blaSHV-1、blaCTX-M、6如删)共7种耐药基因。结果16株STEC中,13株来自猪粪便样本,2株来自牛粪便样本,1株来自羊粪便样本。O157:H7型STEC为2株,非O157型STEC为14株;非O157型STEC的血清型分布较为分散。在检测的16种抗生素中,对萘啶酸、磺胺异噁唑、复方磺胺甲噁唑、强力霉素、阿奇霉素、四环素、链霉素、氯霉素等8种抗菌药的耐药率分别为12/16、11/16、11/16、9/16、9/16、9/16、8/16、8/16,对萘啶酸耐药率最高(12/16),其次为磺胺异噁唑和复方磺胺甲噁唑(11/16、11/16),对头孢吡肟、亚胺培南均不耐药。16株STEC中15株出现了多重耐药性,其中三重耐药菌株5株,四重、五重耐药菌株各4株,六重、七重耐药菌株各1株。16株分离菌株中共检测出3种耐药基因,分别为tetA、tetB、tetC。结论从微山县分离出的STEC菌株血清型多样且分布较为分散,对常见抗生素具有多重耐药性,血清型复杂性及出现多重耐药性可能与菌株变异有关。 展开更多
关键词 志贺毒素大肠杆菌 血清分型 耐药
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新疆牛源产志贺毒素大肠杆菌耐药性及其ESBLs基因鉴定 被引量:8
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作者 佟盼盼 马凯琪 +6 位作者 刘争辉 谢金鑫 苏红 王栋 孙雪 高姣姣 苏战强 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期887-892,共6页
本研究的目的是通过调查新疆地区分离的牛源产志贺毒素大肠杆菌(STEC)的耐药表型和基因型,掌握STEC耐药性的发展和传播规律。本研究对新疆6个地区的牛源(非O157:H7)STEC分离株进行了18种抗生素的药物敏感性试验,并检测菌株中携带的超广... 本研究的目的是通过调查新疆地区分离的牛源产志贺毒素大肠杆菌(STEC)的耐药表型和基因型,掌握STEC耐药性的发展和传播规律。本研究对新疆6个地区的牛源(非O157:H7)STEC分离株进行了18种抗生素的药物敏感性试验,并检测菌株中携带的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因。结果显示:4.31%STEC表现为多重耐药,1.91%为产ESBLs菌株。检测到的主要ESBLs基因包括bla_(TEM)和bla_(CTX-M)。这是首次在新疆STEC中检测到bla_(TEM)和bla_(CTX-M)。本研究分离出的多数多重耐药STEC属于系统发育A群。多重耐药STEC可能是由非致病性大肠杆菌获得毒性和耐药基因而形成的。抗生素的选择压力可能对细菌在牛肠道中的定植表现出一定竞争优势,从而增加了耐药STEC对食物的污染。 展开更多
关键词 志贺毒素大肠杆菌 耐药性 食源性致病菌 抗生素 ESBLS
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江苏某地健康绵羊群产志贺毒素大肠杆菌体内分离株的分子流行病学及致病力 被引量:8
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作者 顾丛丛 薛涛 +3 位作者 徐婷婷 高崧 焦新安 刘秀梵 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期676-683,共8页
【目的】探讨江苏某羊场健康绵羊体内产志贺毒素大肠杆菌的带菌和流行情况,同时就分离株的致病力和对Vero细胞的毒性作用作了研究。【方法】基于本实验室已经建立的EHEC O157:H7 EDL933W株的stx1、stx2、eaeA、hlyA四个基因的多重PCR检... 【目的】探讨江苏某羊场健康绵羊体内产志贺毒素大肠杆菌的带菌和流行情况,同时就分离株的致病力和对Vero细胞的毒性作用作了研究。【方法】基于本实验室已经建立的EHEC O157:H7 EDL933W株的stx1、stx2、eaeA、hlyA四个基因的多重PCR检测并配合选择性增菌、平板筛选等方法对STEC进行分离鉴定。【结果】在为期6个月的连续跟踪调查中,共分离到STEC菌株107株,分离率为19.4%(107/550)。分离株属于41种O血清型、62种O:H血清型,未定型(ONT)有22株,粗糙型(OR)1株。其中属于绵羊STEC的优势血清型有O5(2株)、O91(1株)、O103(1株)。本文检测到的优势血清型为O93,stx2阳性菌株的分离率较stx1阳性菌株的分离率高,LD50测定结果表明分离株对小鼠致病力不高,受试的3个分离株均不能致小鼠死亡。对107株stx阳性分离株噬菌斑试验表明,71株阳性菌株携带噬菌体(66.3%,71/109)。受试分离株进行Vero细胞毒性试验,其中有一个菌株stx基因阳性但不能使Vero细胞产生病变。【结论】绵羊是STEC的天然宿主,可健康带菌。虽然STEC分离株对小鼠的致病力较弱,但不能排除其对人类安全的威胁。STEC携带志贺毒素基因并不意味着一定表达志贺毒素,需对志贺毒素的表达及调控机理做进一步的研究。 展开更多
关键词 志贺毒素大肠杆菌 PCR O抗原 H抗原 半数致死量 VERO细胞
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产志贺毒素大肠杆菌流行病学和stx基因研究进展 被引量:6
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作者 周勇 陈守义 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1130-1134,共5页
感染产志贺毒素大肠埃希菌(Shiga toxin-pro-ducing Escherichia coli,STEC)能引起人严重的疾病,包括:出血性肠炎(Hemorrhagic coltis,HC)、血栓性血小板紫癜(TTP)和溶血性尿毒综合症(He-molyticuremicsyndrome,HUS)甚至死亡。
关键词 志贺毒素大肠杆菌 stx基因 流行病学 志贺毒素大肠埃希菌 出血性肠炎 尿毒综合症 溶血性 血小板
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牦牛携带的产志贺毒素大肠杆菌分离株的多位点序列分型研究 被引量:7
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作者 孙晖 白向宁 +3 位作者 赵爱兰 孟琼 熊衍文 卢珊 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1137-1142,共6页
目的对牦牛携带的产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)进行多位点序列分型(Multilocus sequence typing,MLST)分析,了解菌株的遗传进化关系及致病潜力。方法根据E.coli MLST数据库(http://mlst.ucc.ie/mls... 目的对牦牛携带的产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)进行多位点序列分型(Multilocus sequence typing,MLST)分析,了解菌株的遗传进化关系及致病潜力。方法根据E.coli MLST数据库(http://mlst.ucc.ie/mlst/dbs/Ecoli)提供的MLST方案,对青海玉树牦牛中分离的54株STEC分离株的7个管家基因进行PCR扩增并测序,通过序列比对确定其等位基因及菌株序列型(Sequence type,ST),并使用BioNumerics软件构建最小生成树(Minimum spanning tree,MST),分析牦牛ST型与HUSEC及人源主要流行血清群STEC菌株ST型间的进化关系。结果 54株牦牛STEC菌株呈现高度遗传多态性,可分为31个ST型别,其中包括7个新的等位基因型和17个新的ST型,并存在与HUSEC及主要流行血清群STEC亲缘关系相同或相近的ST型别。结论青藏高原牦牛携带的STEC具有遗传多样性及一定的特异性,部分菌株具有对人致病的潜力。 展开更多
关键词 志贺毒素大肠杆菌 多位点序列分型 序列型 牦牛
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非O157产志贺毒素大肠杆菌分离培养方法研究进展 被引量:7
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作者 白向宁 孟琼 +1 位作者 赵爱兰 熊衍文 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期764-766,共3页
产志贺毒素大肠杆菌(Shigatoxin—producingescherichia coli,STEC)是一类危害人类健康的重要致病菌,可引起出血性肠炎(hemorrhagiccolitis,HC)、溶血性尿毒综合征(hemolyticuremicsyndrome,HUS)等严重疾病。1983年Riley等报... 产志贺毒素大肠杆菌(Shigatoxin—producingescherichia coli,STEC)是一类危害人类健康的重要致病菌,可引起出血性肠炎(hemorrhagiccolitis,HC)、溶血性尿毒综合征(hemolyticuremicsyndrome,HUS)等严重疾病。1983年Riley等报道了第一起由O157:H7STEC引起的食物中毒,之后不同国家相继报道了O157:H7STEC所致的暴发和散发感染。2001年,国际上即已提出了食品和动物饲料中0157STEC菌株分离的标准方法(ISO16654:2001), 展开更多
关键词 志贺毒素大肠杆菌 O157 分离培养方法 溶血性尿毒综合征 出血性肠炎 人类健康 食物中毒 标准方法
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