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题名CPA恒温扩增技术检测炭疽芽胞杆菌方法的建立
被引量：6
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作者
赵婷婷
孙文铮
杨宇
王旺
王静
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机构
中国检验检疫科学研究院卫生检疫研究所
中国人民解放军总医院
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出处
《中国国境卫生检疫杂志》
CAS
2014年第4期247-250,263,共5页
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基金
中国检验检疫科学研究院基本科研业务费专项(2012JK015)
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文摘
目的建立一种简便的新型交叉引物恒温核酸扩增结合层析试纸条方法,快速可视化检测炭疽芽胞杆菌核酸。方法通过序列比对挑选出炭疽芽胞杆菌质粒上的特异性基因pXO2,设计引物、探针并合成标记,建立核酸恒温扩增反应体系,用金标免疫层析试纸条快速检测扩增产物,并测试方法的灵敏度和特异性。结果建立的核酸恒温扩增结合金标条方法检测炭疽芽胞杆菌,采用阳性质粒DNA优化实验条件,灵敏度可达5.4pg/反应体系;建立的检测方法检测炭疽Sterne疫苗株的灵敏度为6×103CFU/ml;与枯草芽胞杆菌、苏云金芽胞杆菌、矮小芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌、蕈状芽胞杆菌等相似菌株无交叉反应。结论本研究建立的方法对炭疽芽胞杆菌检测具有很好的敏感性、特异性,为生物恐怖因子现场检测提供了新方法,在国境检疫及公共卫生安全领域有较好的应用前景。
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关键词
炭疽芽胞杆菌
交叉引物(cpa)
恒温扩增技术
核酸试纸条检测方法
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Keywords
Bacillus anthracis
Cross priming amplification
Thermostatic expansion technique
Nucleic acid test strip
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分类号
R517.2
[医药卫生—内科学]
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题名交叉引物扩增法快速检测牛病毒性腹泻病毒
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作者
贺泂杰
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机构
中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所
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出处
《中国乳业》
2023年第7期30-34,39,共6页
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基金
甘肃省科技计划项目-重点研发计划(21YF5NA143)。
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文摘
[目的]牛病毒性腹泻病毒(BVDV)是一种可以引起牛腹泻的病原体,在中国分布广泛,给养牛业造成了巨大损失。快速发现和准确鉴定BVDV对后续管理和流行病学调查至关重要。[方法]本研究以5'UTR基因为靶点,应用交叉引物扩增(CPA)与免疫层析试纸相结合的检测方法对BVDV进行检测。[结果]CPA检测限为每次反应640 fg,温度为62℃,反应时间为60 min。未观察到与牛感染的其他病原体发生交叉反应。此外,使用CPA测定法对100份感染BVDV的现场样本进行准确评估。将CPA与常规PCR检测结果进行比较,结果显示,CPA比常规PCR具有更高的检出率。[结论]CPA检测是一种实用、有效的BVDV诊断工具。
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关键词
牛病毒性腹泻病毒(BVDV)
交叉引物扩增(cpa)
免疫层析
诊断
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Keywords
bovine viral diarrhea virus(BVDV)
cross-priming amplification(cpa)
vertical flow assay
diagnose
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分类号
S858.23
[农业科学—临床兽医学]
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