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在线二维液相色谱法同时测定婴幼儿和成人配方营养品中的维生素A、D_3和E 被引量:38
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作者 张艳海 其布勒哈斯 +2 位作者 金燕 王佳 马文丽 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期291-297,共7页
建立了在线二维液相色谱同时快速测定婴幼儿配方乳品和成人强化乳品中维生素A、D3和E含量的方法。首先,依据疏水减法模型,选择C8柱和极性嵌合的反相C18柱分别作为一维和二维分离柱,构成正交分离体系,并均以甲醇、乙腈和水作为流动相,检... 建立了在线二维液相色谱同时快速测定婴幼儿配方乳品和成人强化乳品中维生素A、D3和E含量的方法。首先,依据疏水减法模型,选择C8柱和极性嵌合的反相C18柱分别作为一维和二维分离柱,构成正交分离体系,并均以甲醇、乙腈和水作为流动相,检测波长设为263 nm(维生素D3)、296 nm(维生素E)和325 nm(维生素A)。采用双三元液相色谱的左泵作为一维分析泵,完成维生素A、E的定量和维生素D3的净化;根据维生素D3在一维色谱柱上的保留时间,确定切割时间窗口,并以500μL定量环收集含有维生素D3的馏分,由双三元液相色谱的右泵将馏分带到二维色谱柱中,以维生素D2作为内标物,采用内标法完成维生素D3的定量分析,整个过程在密闭系统中自动化完成。在上述优化条件下测定了婴幼儿和成人奶粉、奶酪及酸奶等强化乳品中3种维生素的含量。经过1.25 kg/L KOH溶液的热皂化和石油醚的萃取,样品萃取液直接进样分析,得到维生素D3的加标回收率为75.50%~85.00%,并通过配对t检验法与标准方法测定结果进行比较分析,结果差异无统计学意义,表明本方法可同时快速、准确测定婴幼儿及其他配方营养品中维生素A、D3、E的含量,提高了样品分析效率。 展开更多
关键词 二维相色谱 在线分离 维生素D3 维生素A 维生素E 婴幼儿配方营养品 成人营养品
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二维液相色谱切换技术及其应用 被引量:20
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作者 王智聪 张庆合 +2 位作者 赵中一 张维冰 李彤 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2005年第5期722-728,共7页
多维液相色谱已成为复杂样品研究的重要工具。本文在介绍多维液相色谱原理与方法的基础上,重点讨论了二维液相色谱接口切换技术的近期发展,并对其应用现状进行了总结分析。
关键词 二维相色谱 切换技术 蛋白质组 分离方法 化学分析方法
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六味地黄丸组分的二维液相色谱分离 被引量:16
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作者 唐涛 张维冰 +1 位作者 李彤 王风云 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1767-1771,共5页
以1个常规六通阀直接连接两支常规尺寸的色谱柱(250 mm×4.6 mm i.d.),构建简单的SCX/RP在线二维液相色谱系统,对中成药六味地黄丸组分进行了优化分离。样品经过第一维阳离子交换色谱(Hypersil SCX),洗脱产物分离后通过六通阀直接... 以1个常规六通阀直接连接两支常规尺寸的色谱柱(250 mm×4.6 mm i.d.),构建简单的SCX/RP在线二维液相色谱系统,对中成药六味地黄丸组分进行了优化分离。样品经过第一维阳离子交换色谱(Hypersil SCX),洗脱产物分离后通过六通阀直接富集到反相分析柱(C18)顶端,被转移到第二维色谱柱上继续进行分离。经过11步不连续的线性梯度洗脱,二维分离系统出峰数量达到550多个,峰容量达到2266。构建的二维液相色谱系统结构简单,与一维色谱相比,具有分辨率高、峰容量大的特点。 展开更多
关键词 二维相色谱 六味地黄丸 峰容量
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二维液相色谱技术在药物分析中的应用 被引量:19
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作者 高辉 温学森 +2 位作者 马小军 陈迪华 斯建勇 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期616-620,共5页
二维液相色谱联用(2D-LC)技术作为一项新的分析技术,已在复杂样品的分离分析中发挥了巨大作用。2D-LC提供了一个真正的正交分离系统,使其分辨率达到最大。它把分离机理不同而又互相独立的两支色谱柱以串联方式结合组成二维液相色谱,在... 二维液相色谱联用(2D-LC)技术作为一项新的分析技术,已在复杂样品的分离分析中发挥了巨大作用。2D-LC提供了一个真正的正交分离系统,使其分辨率达到最大。它把分离机理不同而又互相独立的两支色谱柱以串联方式结合组成二维液相色谱,在这两支色谱柱之间的接口起捕集再传送的作用。本文简单介绍了该技术的原理和方法,并对其在天然药物和体内药物分析中的应用进行了总结分析。 展开更多
关键词 在线接口 二维相色谱 药物分析
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在线二维液相色谱法快速测定桂枝茯苓胶囊中芍药苷、丹皮酚、苦杏仁苷和肉桂酸的含量 被引量:20
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作者 张艳海 张大伟 +2 位作者 孟兆青 刘绿叶 金燕 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第23期4088-4093,共6页
使用双梯度液相色谱系统和紫外检测器,建立在线二维液相色谱方法,同时测定桂枝茯苓胶囊中芍药苷、丹皮酚、苦杏仁苷和肉桂酸的含量。采用双梯度液相色谱的其中一个泵为一维分离泵,以乙腈为有机相,0.08%磷酸+0.08%三乙胺为水相... 使用双梯度液相色谱系统和紫外检测器,建立在线二维液相色谱方法,同时测定桂枝茯苓胶囊中芍药苷、丹皮酚、苦杏仁苷和肉桂酸的含量。采用双梯度液相色谱的其中一个泵为一维分离泵,以乙腈为有机相,0.08%磷酸+0.08%三乙胺为水相,梯度洗脱,采用C-18色谱柱(3.0mm×150mm,3μm),流速0.5mL·min-1;利用双梯度液相色谱的另外一个泵为二维分离泵,以乙腈为有机相,以20mmol,pH3.0的磷酸二氢钾为水相,梯度洗脱,采用PA1IC18色谱柱(4.6mm×150mm,3Ixm),流速0.8mL·min-1;检测波长218,230,275nm,采用波长切换方式。芍药苷、丹皮酚、苦杏仁苷和肉桂酸的线性范围分别为5.55~222,6.6~264,3.3~132,0.315~12.6mg·L-1;r分别为0.9997,0.9995,0.9998,0.9997;4个成分的平均回收率在96.12%~103.9%。该方法快速,测定结果准确可靠,可用于评价药物质量。 展开更多
关键词 二维相色谱 双梯度相色谱 桂枝茯苓胶囊 苦杏仁苷 肉桂酸
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尖吻蝮蛇毒素组双向电泳和二维液相色谱研究 被引量:17
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作者 黄春洪 孔毅 +2 位作者 吴杰连 刘睿 吴梧桐 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期169-173,共5页
目的:初步研究尖吻蝮蛇蛇毒的蛋白质组分及其活性。方法:利用双向电泳和二维色谱(IEX+HPLC)分析尖吻蝮蛇蛇毒蛋白质组,并制备分离样品研究蛇毒中酶和毒素活性。结果:双向电泳分离检测得到128种蛋白质,其中24种蛋白质丰度较高,73种为酸... 目的:初步研究尖吻蝮蛇蛇毒的蛋白质组分及其活性。方法:利用双向电泳和二维色谱(IEX+HPLC)分析尖吻蝮蛇蛇毒蛋白质组,并制备分离样品研究蛇毒中酶和毒素活性。结果:双向电泳分离检测得到128种蛋白质,其中24种蛋白质丰度较高,73种为酸性蛋白质,20种为碱性蛋白质。二维色谱展现58种蛋白质,其中26种蛋白质丰度较高。初步活性研究表明,尖吻蝮蛇蛇毒蛋白质多数属于丝氨酸蛋白酶、金属蛋白酶和磷脂酶A2家族,部分蛋白质可能属于去整合素家族。结论:双向电泳和二维色谱相互结合,有效分析了尖吻蝮蛇毒的蛋白质组成和生物活性。 展开更多
关键词 双向电泳 二维相色谱 毒素组学 尖吻蝮蛇
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在线净化二维液相色谱快速检测食品中维生素A、D、E 被引量:19
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作者 陈建彪 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第6期1726-1733,共8页
目的 利用三泵两阀二维液相色谱系统,建立食品中维生素A、D、E在线二维液相色谱快速检测方法。方法 采用中心切割方法搭建在线二维液相色谱分离系统,以高聚合物为填料的具有耐强碱溶液能力的PLRP-S色谱柱作为净化样品皂化液的固相萃叐... 目的 利用三泵两阀二维液相色谱系统,建立食品中维生素A、D、E在线二维液相色谱快速检测方法。方法 采用中心切割方法搭建在线二维液相色谱分离系统,以高聚合物为填料的具有耐强碱溶液能力的PLRP-S色谱柱作为净化样品皂化液的固相萃叐(solid phase extraction,SPE)柱,以C_18为一维色谱柱分离维生素A和E,以多环芳烃(polycyclic aromatic hydrocarbon, PAH)色谱柱为二维色谱柱分离维生素D2和D3。一维色谱确立维生素D的切割时间,由C_18小柱捕获维生素D,建立在线二维液相色谱分析方法。利用样品和标品液对建立的方法进行方法学验证,同时比较该方法与GB 5009.82-2016对实际样品的测试结果。结果 维生素A、D、E在试验标准曲线范围内线性系数r>0.999,定量限分别为30μg/100g, 2μg/100 g和120μg/100 g,与国标一致;该方法 3水平加标回收率为90.4%~101.7%,可以满足目前食品中维生素A、D、E的检测需求。结论本文建立的测试方法操作简单高效、自动化程度高、准确度高、重复性好,适合于大批量样品的测试。 展开更多
关键词 维生素 在线净化 二维相色谱
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在线二维反相色谱法快速测定维生素AD制剂中维生素A、D的含量 被引量:19
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作者 张艳海 张大伟 +1 位作者 曹莹 金燕 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期28-34,共7页
建立了在线二维液相色谱法快速同时测定维生素AD制剂中维生素A和D的含量。依据药典对系统适应性的要求,选择一种极性嵌合的C_(18)柱(Accucore polar premium)作为二维色谱柱,再依据疏水减法模型原理和待测样品的脂溶性特点,选择C_8... 建立了在线二维液相色谱法快速同时测定维生素AD制剂中维生素A和D的含量。依据药典对系统适应性的要求,选择一种极性嵌合的C_(18)柱(Accucore polar premium)作为二维色谱柱,再依据疏水减法模型原理和待测样品的脂溶性特点,选择C_8柱作为一维色谱柱,一维和二维分离均采用甲醇、乙腈和水作为流动相。样品经乙醇提取后直接进样分析,采用双梯度液相色谱右泵作为一维分析泵,完成含量较高的维生素A定量及维生素D的净化;采用左泵作为二维分析泵,维生素D及前维生素D在二维色谱柱上实现分离和定量。根据维生素D在一维色谱上的出峰起止时间,确定切割时间窗口,以500μL定量环收集含有目标物的馏分,检测波长分别为264 nm和325 nm。采用外标法完成对维生素D和前维生素D的定量。整个过程在密闭系统中自动化完成。维生素A在0.1~250 mg/L,维生素D在0.02~50.0 mg/L范围内线性关系较好,相关系数(r)大于0.999;维生素D的回收率为89.9%~98.9%,连续进样的精密度和重现性的RSD分别为0.48%和1.2%,表明方法的精密度和重现性较好。 展开更多
关键词 二维相色谱 在线分离 维生素D 维生素A 前维生素D 维生素AD滴剂
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固相萃取-二维液相色谱法测定婴幼儿配方食品中的维生素B_(12) 被引量:16
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作者 储小军 陶保华 +3 位作者 赖世云 张京顺 宋亿文 任一平 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期185-190,共6页
采用固相萃取(solid phase extraction,SPE)与二维液相色谱联用技术测定婴幼儿配方食品中的维生素B12;试样经淀粉酶酶解、HLB SPE净化,以双三元液相色谱仪用双柱切换法经ZORBAX GF-250柱进一步净化和浓缩样品,用ZORBAX Bonus-RP柱分析,... 采用固相萃取(solid phase extraction,SPE)与二维液相色谱联用技术测定婴幼儿配方食品中的维生素B12;试样经淀粉酶酶解、HLB SPE净化,以双三元液相色谱仪用双柱切换法经ZORBAX GF-250柱进一步净化和浓缩样品,用ZORBAX Bonus-RP柱分析,在550nm波长处进行检测,外标法定量.结果表明,维生素B12在2~40ng/mL范围内线性良好,其线性决定系数大于0.999,方法检出限为1.0μg/kg,定量下限为2.5μg/kg,在加标量为5.0、10.0和50.0μg/kg时的回收率为88.0%~94.8%.本方法定量准确、重现性好、灵敏度高、实验成本小,为婴幼儿配方食品中维生素B12的定量测定提供了较为灵敏、实用的方法. 展开更多
关键词 维生素B12 萃取 二维相色谱 婴幼儿配方食品
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全自动在线固相萃取-二维高效液相色谱与质谱联用测定辣椒油中苏丹红 被引量:15
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作者 陈静 刘召金 +2 位作者 安宝超 许群 张祥民 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1418-1422,共5页
建立了全自动在线固相萃取-二维高效液相色谱与质谱联用快速测定辣椒油中的苏丹红Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ的方法。样品经乙腈和二氯甲烷萃取后,在一维色谱柱(Acclaim PAⅡ,150 mm×3.0 mm×3μm)上分离出苏丹红,通过阀的分段切换,依次富集... 建立了全自动在线固相萃取-二维高效液相色谱与质谱联用快速测定辣椒油中的苏丹红Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ的方法。样品经乙腈和二氯甲烷萃取后,在一维色谱柱(Acclaim PAⅡ,150 mm×3.0 mm×3μm)上分离出苏丹红,通过阀的分段切换,依次富集在SPE柱(Acclaim 120 C18,10 mm×4.6 mm×5μm)上,在线完成净化和萃取富集;再通过阀切换将它们转移至二维色谱流路,在Acclaim 120 C18色谱柱(100 mm×2.1 mm×2.2μm)上分离检测。一维色谱以水-乙腈-甲醇/四氢呋喃(1∶1,V/V)为流动相,进样体积20μL,0.6 mL/min流速梯度洗脱和紫外-可见检测器(λ=254 nm)监测分离状况;二维色谱以水-乙腈-甲酸/乙腈(1∶1000,V/V)为流动相,0.3 mL/min流速梯度洗脱,采用单四极质谱仪,选择离子方式检测。整个分析流程27 min即可完成。4种苏丹红的保留时间的相对标准偏差均小于0.1%,色谱峰面积的相对标准偏差均小于2%(n=7);在0.6~60μg/L范围内峰面积与进样质量浓度的线性相关系数均大于0.9958;加标回收率为50%~97%;方法检出限均小于0.2μg/L(S/N=3)。测定结果令人满意。 展开更多
关键词 苏丹红 高效相色谱 二维相色谱 在线固萃取 辣椒油
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二维液相色谱接口技术 被引量:13
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作者 丁坤 吴大朋 关亚风 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1117-1122,共6页
二维液相色谱具有峰容量大、分辨率高、分析速度快等优点,已经成为复杂样品分离分析的重要工具。两种分离模式的转换通常需要经过一个特殊接口来完成,接口是二维液相色谱系统的核心,也是限制二维液相色谱应用的瓶颈;两种流动相不互溶时... 二维液相色谱具有峰容量大、分辨率高、分析速度快等优点,已经成为复杂样品分离分析的重要工具。两种分离模式的转换通常需要经过一个特殊接口来完成,接口是二维液相色谱系统的核心,也是限制二维液相色谱应用的瓶颈;两种流动相不互溶时,接口尤为重要。本文针对二维液相色谱接口技术近期的发展和应用进行总结。引用文献51篇。 展开更多
关键词 二维相色谱 接口 复杂样品
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二维液相色谱在中药分析的应用 被引量:14
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作者 黄竞怡 佟玲 丁黎 《药学进展》 CAS 2015年第5期357-363,共7页
中药的物质体系复杂,对其组分的分离、鉴定和制备需要更高的分离度,二维液相色谱能将分离机理不同而又相互独立的两支色谱柱串联构成分离系统,应用于复杂基质的中药材及中药复方制剂的分析,可显著提高峰容量和色谱峰鉴定的可靠性,降低... 中药的物质体系复杂,对其组分的分离、鉴定和制备需要更高的分离度,二维液相色谱能将分离机理不同而又相互独立的两支色谱柱串联构成分离系统,应用于复杂基质的中药材及中药复方制剂的分析,可显著提高峰容量和色谱峰鉴定的可靠性,降低色谱峰重叠,使分离效率与分析通量大为提高。综述二维液相色谱基本原理及其在中药分析中的应用研究新进展。 展开更多
关键词 二维相色谱 中药分析 分离度 峰容量
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二维液相色谱同时测定婴幼儿配方乳粉中多种脂溶性维生素 被引量:13
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作者 赵玉富 刘晓玲 +2 位作者 咸伟玥 王剑飞 单艺 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2019年第6期37-40,共4页
建立二维液相色谱法同时测定婴幼儿配方乳粉中维生素A、维生素E、维生素D2、维生素D3及β-胡萝卜素含量的方法。样品经皂化后以石油醚提取,经旋转蒸发浓缩后以乙腈/甲醇/四氢呋喃(75∶25∶5,体积比)定容,以二维液相色谱同时分析维生素A... 建立二维液相色谱法同时测定婴幼儿配方乳粉中维生素A、维生素E、维生素D2、维生素D3及β-胡萝卜素含量的方法。样品经皂化后以石油醚提取,经旋转蒸发浓缩后以乙腈/甲醇/四氢呋喃(75∶25∶5,体积比)定容,以二维液相色谱同时分析维生素A、维生素E、维生素D2、维生素D3及β-胡萝卜素,以InfinityLab Poroshell 120 EC-C8(3.0 mm×150 mm,2.7μm)为一维色谱柱,流动相乙腈/甲醇/四氢呋喃(75∶25∶5,体积比)-水/四氢呋喃(95/5,体积比)0.6 mL/min梯度洗脱,以Zorbax Eclipse PAH(4.6 mm×250 mm,5μm)为二维色谱柱,流动相甲醇0.3 mL/min,柱温25℃,一维DAD检测器采用波长切换方式检测(VA∶325 nm;VE∶294 nm;β-胡萝卜素:450 nm),二维DAD检测器检测((维生素D2与维生素D3∶264 nm)。)。结果维生素A在0.0945μg/mL^14.17μg/mL浓度范围内线性关系良好,维生素E在1.21μg/mL^181.5μg/mL浓度范围内线性关系良好,β-胡萝卜素在0.0163μg/mL^2.445μg/mL浓度范围内线性关系良好,维生素D3在0.0163μg/mL^2.445μg/mL浓度范围内线性关系良好,维生素D3在0.0150μg/mL^2.500μg/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数r大于0.999。分析时间为25 min。本方法可快速准确测定婴幼儿配方乳粉维生素A、维生素E、维生素D2、维生素D3及β-胡萝卜素。 展开更多
关键词 中心切割法 二维相色谱 配方乳粉 维生素A 维生素E 维生素D2 维生素D3 β-胡萝卜素
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超高效二维液相色谱法测定复方南星止痛膏中双酯型乌头生物碱的含量 被引量:12
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作者 李郭帅 马阳 +5 位作者 耿婷 王伟 黄文哲 肖伟 曹亮 王振中 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期249-256,共8页
目的:采用在线中心切割超高效二维液相色谱(2D-UPLC)法,建立同时测定复方南星止痛膏中3个双酯型乌头生物碱(新乌头碱、乌头碱和次乌头碱)的含量测定方法。方法:一维UPLC采用Waters XBridgeBEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm 1.7μm),... 目的:采用在线中心切割超高效二维液相色谱(2D-UPLC)法,建立同时测定复方南星止痛膏中3个双酯型乌头生物碱(新乌头碱、乌头碱和次乌头碱)的含量测定方法。方法:一维UPLC采用Waters XBridgeBEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm 1.7μm),以甲醇-0.008%二乙胺为流动相,梯度洗脱,流速0.1 mL·min^(-1),柱温18℃;二维UPLC采用Waters XBridge BEH C_(18)色谱柱(3.0 mm×100 mm 1.7μm),以乙腈-0.01%磷酸为流动相,梯度洗脱,流速0.7 mL·min^(-1),柱温40℃。进样量1μL,检测波长235 nm。结果:新乌头碱、乌头碱和次乌头碱的线性范围分别为0.66~9.90、0.55~8.20和0.91~13.72μg·mL^(-1),R2分别为0.999 5、0.999 9和0.999 6,线性关系良好;3个成分的平均加样回收率在82.5%~88.8%之间,方法的准确度和稳定性均较好;复方南星止痛膏中新乌头碱、乌头碱和次乌头碱含量分别在3.2~5.0、0.9~1.3、8.5~10.4μg·g^(-1)范围内。结论:该方法有效改善了复方南星止痛膏中待测组分的分离度,极大提高了检测灵敏度,对制剂中的3个双酯型乌头生物碱进行准确定量分析,提高产品的质量控制水平,并为临床用药提供理论支持。 展开更多
关键词 在线中心切割 二维相色谱 复方南星止痛膏 双酯型乌头生物碱 新乌头碱 乌头碱 次乌头碱
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多维液相色谱分离技术在复杂蛋白质组学样品鉴定中的应用 被引量:11
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作者 张罗敷 胡晓芳 徐学敏 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第1期161-166,共6页
目的:随着蛋白组学技术的发展,液相色谱-串联质谱的联用技术(液质联用)逐渐成为蛋白组学的主流技术。方法:通过结合各种不同原理的色谱分离类型,多维液相色谱分离技术能够极大的提高分离系统的峰容量,达到有效分离复杂程度很高的蛋白质... 目的:随着蛋白组学技术的发展,液相色谱-串联质谱的联用技术(液质联用)逐渐成为蛋白组学的主流技术。方法:通过结合各种不同原理的色谱分离类型,多维液相色谱分离技术能够极大的提高分离系统的峰容量,达到有效分离复杂程度很高的蛋白质组学样品的目的。结果:最广泛使用的多维液相色谱分离系统是离子交换色谱(IEX)和反相色谱(RP)的二维结合,近年来又发展出了分离能力更强的三维液相色谱分离系统,并且已经在蛋白质组学研究中得到了应用。结论:本文综述了多种多维液相色谱分离方法,在这些方法中,不同的分离原理的色谱类型被用于肽段或蛋白混合物的预分离中,有效促进了样品的充分分离,极大地提高了复杂样品的蛋白组学鉴定能力。 展开更多
关键词 蛋白质组 复杂样品 质联用 二维相色谱 三维相色谱
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小麦叶片蛋白质组的2D-LC分离及Nano LC-MS/MS分析 被引量:9
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作者 刘静 潘映红 +3 位作者 徐琴 罗继 徐世昌 赵奎军 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期772-780,共9页
【目的】二维液相色谱(2D-LC)与双向电泳(2-DE)技术具有互补性,本文旨在探讨利用2D-LC和纳升级液相色谱串联质谱(Nano LC-MS/MS)技术分离鉴定小麦叶片蛋白质组的新方法。【方法】小麦叶片蛋白经提取、脱盐后,进行第一维阴离子交换分离;... 【目的】二维液相色谱(2D-LC)与双向电泳(2-DE)技术具有互补性,本文旨在探讨利用2D-LC和纳升级液相色谱串联质谱(Nano LC-MS/MS)技术分离鉴定小麦叶片蛋白质组的新方法。【方法】小麦叶片蛋白经提取、脱盐后,进行第一维阴离子交换分离;收集洗脱组分进行SDS-PAGE分析,并对非高丰度蛋白组分进行第二维反相液相色谱分离;随机选择含较低吸收峰的部分组分经胰蛋白酶水解后进行Nano LC-MS/MS分析;将串联质谱数据通过MASCOT搜索NCBInr和EST数据库,并对二级质谱获得的蛋白序列进行MSBLAST分析。【结果】经第一维阴离子交换色谱分离,收集得到15个组分,其中第15组分包含小麦叶片丰度最高的蛋白——1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(RuBisCO);其余14个组分经反相液相色谱分离,共收集1551个组分,获得1867个色谱峰;随机对其中6个含较低吸收峰的收集组分酶解和Nano LC-MS/MS检测,9种蛋白得到鉴定。【结论】结果初步表明,利用2D-LC和Nano LC-MS/MS技术可有效地分离和鉴定小麦叶片蛋白质组,为更深入全面地研究小麦叶片蛋白质组奠定基础。 展开更多
关键词 蛋白质组学 小麦叶片 二维相色谱 纳升级相色谱串联质谱
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应用iTRAQ结合2D LC-MS/MS技术分析草菇同核和异核菌丝蛋白质组 被引量:11
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作者 刘靖宇 江玉姬 +4 位作者 谢宝贵 陈炳智 廖伟 邓优锦 刘朋虎 《食用菌学报》 北大核心 2012年第1期1-12,F0003,共13页
首次利用同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantification,iTRAQ)技术结合二维液相色谱串联质谱对草菇(Volvariella volvacea)同核和异核菌丝蛋白质组进行研究。采用QExactive质谱鉴定并经MASCOT软... 首次利用同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantification,iTRAQ)技术结合二维液相色谱串联质谱对草菇(Volvariella volvacea)同核和异核菌丝蛋白质组进行研究。采用QExactive质谱鉴定并经MASCOT软件搜库,对所有鉴定蛋白进行主成分分析(principal component analysis,PCA)、层次聚类(hierarchical clustering)分析和GO(gene ontology)注释,并进行生物信息学分析。结果共获得2335个不同肽段,鉴定到1039个蛋白,其中1030个蛋白具有定量信息。在同核菌丝中显著上调蛋白83个,下调蛋白97个,表明iTRAQ标记技术结合二维液相色谱串联质谱可有效地分离和鉴定草菇菌丝蛋白质组。该研究结果为更深入全面地研究草菇菌丝蛋白质组学奠定基础。 展开更多
关键词 草菇 蛋白质组 ITRAQ 二维相色谱 串联质谱
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反相/亲水色谱法分析糖苷类化合物 被引量:11
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作者 金高娃 丁俊杰 +4 位作者 陈雪 闫竞宇 郭志谋 张秀莉 梁鑫淼 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期133-137,共5页
根据皂苷、黄酮苷等糖苷类化合物的结构特点,采用亲水色谱模式分析该类化合物,以弥补反相色谱模式分离结构类似糖苷类化合物选择性的不足。首先选择14个糖苷类化合物,比较了反相色谱柱(XAqua C18)和亲水色谱柱(Click XIon)的分离效果,... 根据皂苷、黄酮苷等糖苷类化合物的结构特点,采用亲水色谱模式分析该类化合物,以弥补反相色谱模式分离结构类似糖苷类化合物选择性的不足。首先选择14个糖苷类化合物,比较了反相色谱柱(XAqua C18)和亲水色谱柱(Click XIon)的分离效果,评价了反相/亲水色谱的正交性,并构建了反相/亲水二维体系用于西洋参样品的分离。结果表明,糖苷类化合物在反相及亲水色谱柱上均有很好的保留,但两者具有不同的分离选择性,14种物质在反相和亲水柱的出峰顺序有较大差异,在反相色谱中不易分离的人参皂苷Rg1和Re在亲水色谱柱可获得很好的分离,反相/亲水模式分离糖苷化合物具有很好的正交性。以构建的RPLC/HILIC二维色谱体系分离西洋参样品,有效地提高了分离能力及峰容量,有利于后续更多极性及微量化合物的制备、结构表征与活性研究,且该方法操作简便、流动相兼容性好,可作为糖苷分离分析、制备的有效手段,也可以为其他中药复杂体系的分析提供参考。 展开更多
关键词 糖苷 皂苷 亲水色谱 二维相色谱
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活性蛋白液相色谱快速分离新方法 被引量:4
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作者 柯从玉 耿信笃 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第5期614-616,共3页
提出了用一根色谱柱来实现离子交换和疏水色谱快速分离整体蛋白的新方法.在选择合适的固定相、流动相、缓冲液交换方法及二次进样的条件下,在1h内用同一根色谱柱完成了通常用两根色谱柱和在两种流动相条件才能实现的"二维色谱"... 提出了用一根色谱柱来实现离子交换和疏水色谱快速分离整体蛋白的新方法.在选择合适的固定相、流动相、缓冲液交换方法及二次进样的条件下,在1h内用同一根色谱柱完成了通常用两根色谱柱和在两种流动相条件才能实现的"二维色谱"分离,并且能维持蛋白原有的三维和四维分子结构.预计该法能用于未知样品中蛋白的快速预分离,特别是为在蛋白组学研究中,在样品来源极其有限的情况下,进行活性蛋白预分离提供了一种新的解决思路. 展开更多
关键词 蛋白质组学 蛋白预分离 二维相色谱 疏水互作用色谱 离子交换色谱
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蛋白质组学研究中的多维液相分离系统 被引量:6
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作者 张洁 张丽华 +1 位作者 张维冰 张玉奎 《现代仪器》 2004年第1期1-6,共6页
在后基因组时代,蛋白质组学成为新的研究热点。多维液相分离系统具有分离样品动态范围宽、分辨率高、峰容量大、分析速度快、自动化程度高等优点,因而近年来在蛋白质组学的研究中受到了越来越多的关注。本文根据目前已发表的文章,对二... 在后基因组时代,蛋白质组学成为新的研究热点。多维液相分离系统具有分离样品动态范围宽、分辨率高、峰容量大、分析速度快、自动化程度高等优点,因而近年来在蛋白质组学的研究中受到了越来越多的关注。本文根据目前已发表的文章,对二维液相色谱(2D-LC)、二维液相色谱-毛细管电泳(2D-LC-CE)、二维毛细管电泳(2D-CE)以及它们在蛋白质组学中的应用进行了系统的综述。 展开更多
关键词 蛋白质组学 多维分离系统 综述 二维相色谱 毛细管电泳 二维毛细管电泳
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