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2DE中IPG胶条转移到SDS-PAGE中的技术改进 被引量：4
1
作者 张丽军 谢锦云 +1 位作者 张健 梁宋平 《生命科学研究》 CAS CSCD 2004年第3期225-230,共6页
2-维凝胶电泳(Two-dimensionalgelelectrophoresis,2DE)因其高通量、高分辨率等特点,被广泛用于蛋白质组的分离.然而,在蛋白质从第一向-固相(ImmobilizedpHgradients,IPG)胶条转移到第二向-十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶(Sodiumdodecyls... 2-维凝胶电泳(Two-dimensionalgelelectrophoresis,2DE)因其高通量、高分辨率等特点,被广泛用于蛋白质组的分离.然而,在蛋白质从第一向-固相(ImmobilizedpHgradients,IPG)胶条转移到第二向-十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶(Sodiumdodecylsulfate,SDS;Polyacrylamidegelelectrophoresis,PAGE)时,常会引起蛋白质的损失.尤其是当将IPG胶条放入浓缩胶上时,在胶面不平、技术不熟练等情况下,常会在IPG胶条下引入气泡,导致蛋白质更多的损失.现将IPG胶条转移过程进行改进:先在第二向的十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶上加上薄薄的一层(约1～2mm厚)琼脂糖溶液,然后将IPG胶条转移上去,最后再封住胶条的上面.这样的转移不会引起气泡,可以大大提高实验的成功率及重复性,有利于蛋白质的转移(尤其是相对分子质量大于40kDa的蛋白质),提高质谱鉴定的准确性.此法操作简便,可以减少因操作不熟练而带来的麻烦. 展开更多
关键词 2-维凝胶电泳(2DE) 蛋白质转移 改进 乳腺癌变组织
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