HIV-1型gp41抗原蛋白在大肠杆菌无细胞体系中的表达和免疫反应性检测 被引量：2

1

作者 来力 杨修亮 +3 位作者 盛嘉元 黄磊 蔡谨 徐志南 《药物生物技术》 CAS 2016年第1期7-11,共5页

HIV-1型gp41抗原蛋白在HIV初筛诊断中有重要应用。该研究合成了gp41全长基因序列,将其与p IVEX2.4c酶切连接构建表达载体,在大肠杆菌无细胞体系中实现了目标蛋白的全长可溶表达。考察了添加不同浓度非离子型去污剂Brij78对蛋白可溶性的... HIV-1型gp41抗原蛋白在HIV初筛诊断中有重要应用。该研究合成了gp41全长基因序列,将其与p IVEX2.4c酶切连接构建表达载体,在大肠杆菌无细胞体系中实现了目标蛋白的全长可溶表达。考察了添加不同浓度非离子型去污剂Brij78对蛋白可溶性的影响,在0.2%Brij78条件下,可溶性gp41重组蛋白的表达水平达到650μg/m L。Ni2+亲和层析纯化目标蛋白,纯度达到95.6%;超滤浓缩后,蛋白浓度为0.9 mg/m L,总回收率为70.8%。免疫反应性检测结果显示该gp41重组抗原制备的乳胶HIV抗体诊断试纸能与不同滴度的HIV-1型阳性标本反应,在检测线位置出现红色条带,而与HIV-1型阴性标本无反应。该研究制备了具有完整氨基酸序列的HIV-1型gp41重组抗原,为进一步提高HIV抗体诊断试剂的质量打下了基础。 展开更多

关键词 人类免疫缺陷病毒 跨膜蛋白gp41 无细胞体系 去污剂 亲和层析 乳胶免疫层析 试纸 免疫反应性

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乳胶免疫层析法检测阴道炎三种病原的临床应用评价 被引量：7

2

作者 樊晓东 张成伟 +5 位作者 李官玺 蔡德康 王成丽 杨生仙 邓秀春 雷爱林 《现代检验医学杂志》 CAS 2020年第5期124-127,共4页

目的评估乳胶免疫层析法联合检测阴道炎三种病原的诊断效果并对其临床应用进行评价。方法收集2019年1~12月在妇科门诊接受阴道分泌物检查的288例标本,分别用乳胶免疫层析法、湿片镜检法、唾液酸苷酶法以及革兰氏染色镜检法检测。根据临... 目的评估乳胶免疫层析法联合检测阴道炎三种病原的诊断效果并对其临床应用进行评价。方法收集2019年1~12月在妇科门诊接受阴道分泌物检查的288例标本,分别用乳胶免疫层析法、湿片镜检法、唾液酸苷酶法以及革兰氏染色镜检法检测。根据临床症状、体征、实验室结果做出临床诊断。记录乳胶免疫层析法与湿片镜检法、染色镜检法诊断阴道炎三种病原的敏感度、特异度、Kappa系数和约登指数,并进行统计分析。结果与湿片镜检法相比,乳胶免疫层析法诊断阴道炎三种病原的敏感度、Kappa系数和约登指数较高,差异有统计学意义(χ^2=6.11~30.13,P=0.01~0.04);与染色镜检法相比,乳胶免疫层析法对诊断细菌性阴道病、外阴阴道假丝酵母菌病的敏感度、约登指数较高,诊断细菌性阴道病的Kappa系数也较高,差异均有统计学意义(χ^2=2.66~30.13,P均<0.05);乳胶免疫层析法在诊断混合感染方面具备明显优势,对细菌性阴道病、外阴阴道假丝酵母菌、滴虫性阴道炎的检测特异度均达到90%以上,敏感度、Kappa系数及约登指数均高于湿片镜检法和染色镜检法,差异均有统计学意义(χ^2=4.66~9.12,均P<0.05)。结论与传统的湿片镜检法和染色镜检法相比,乳胶免疫层析法对于阴道炎三种病原的检测敏感度高,与临床诊断结果的一致性高,且对混合感染的检测有明显优势。 展开更多

关键词 乳胶免疫层析法 阴道炎

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三种甲型流感病毒抗原POCT的应用比较

3

作者 丁信 刘勇 +7 位作者 黄文靖 吴秋保 伍时冠 潘思华 陈立 杨子峰 邓小燕 关文达 《热带医学杂志》 CAS 2024年第2期176-180,共5页

目的比较甲型流感病毒抗原即时检验(POCT)免疫荧光法、乳胶免疫层析法和免疫胶体金法的临床诊断效能。方法以q RT-PCR为诊断标准,比较3种甲型流感病毒抗原POCT对甲型流感病毒的检出限、分析特异性和在临床样本检测中的诊断灵敏度和诊断... 目的比较甲型流感病毒抗原即时检验(POCT)免疫荧光法、乳胶免疫层析法和免疫胶体金法的临床诊断效能。方法以q RT-PCR为诊断标准,比较3种甲型流感病毒抗原POCT对甲型流感病毒的检出限、分析特异性和在临床样本检测中的诊断灵敏度和诊断特异性。结果免疫荧光法、乳胶免疫层析法和免疫胶体金法对H1N1pdm09的检出限分别为1∶10000、1∶1000和1∶100,对季节性流感H1N1、H1N1(PR8株)、H3N2(Aichi株)、禽流感病毒H6N2和H7N3的检出限分别为1∶100000、1∶10000和1∶1000。检出限从低到高依次为免疫荧光法、乳胶免疫层析法和免疫胶体金法。3种甲型流感病毒抗原POCT对除甲流外的25种临床呼吸道感染常见病原体均无交叉反应。与qRT-PCR相比,免疫荧光法、乳胶免疫层析法、免疫胶体金法的诊断灵敏度分别为74.63%、56.72%和40.30%,免疫荧光法的诊断灵敏度高于乳胶免疫层析法,差异有统计学意义(χ^(2)=46.13,P<0.05),免疫荧光法的诊断灵敏度高于免疫胶体金法,差异有统计学意义(χ^(2)=71.94,P<0.05),乳胶免疫层析法的诊断灵敏度高于免疫胶体金法,差异有统计学意义(χ^(2)=103.54,P<0.05)。免疫荧光法、乳胶免疫层析法、免疫胶体金法的诊断特异性分别为96.41%、100.00%、100.00%,受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)分别为0.86、0.78和0.70。结论免疫荧光法在3种甲型流感病毒抗原POCT中表现最佳,具有最低的检出限、最高的诊断灵敏度和AUC,以及较好的分析特异性和诊断特异性,可满足临床对甲型流感病毒抗原的快速检测需求。 展开更多

关键词 甲型流感病毒 即时检验 免疫荧光法 乳胶免疫层析法

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直接涂片法、乳胶免疫层析法检测淋球菌效果比较

4

作者 谭翁 邹明君 《中国计划生育学杂志》 2024年第3期553-557,共5页

目的:比较直接涂片法、乳胶免疫层析检测淋球菌效果。方法:收集2017年8月-2022年8月本院就诊临床疑似淋球菌感染的患者216例标本,其中男性尿道分泌物标本115例、女性宫颈分泌物标本101例。以细菌培养法检测为金标准,比较直接涂片法和乳... 目的:比较直接涂片法、乳胶免疫层析检测淋球菌效果。方法:收集2017年8月-2022年8月本院就诊临床疑似淋球菌感染的患者216例标本,其中男性尿道分泌物标本115例、女性宫颈分泌物标本101例。以细菌培养法检测为金标准,比较直接涂片法和乳胶免疫层析法检测淋球菌效果。结果:细菌培养法显示,216例临床样本中,淋球菌阳性173例(80.1%)、阴性43例(19.9%),115例男性标本中淋球菌阳性96例(83.5%)、阴性19例(16.5%),101例女性标本中,淋球菌阳性77例(76.3%)、阴性24例(23.8%)。与金标准比较,直接涂片法216例样本检出淋球菌阳性154例(71.3%),115例男性样本中检出淋球菌阳性85例(82.6%),101例女性样本中检出淋球菌阳性59例(58.4%);乳胶免疫层析法216例样本中检出淋球菌阳性177例(81.9%),115例样本中检出淋球菌阳性96例(87.8%),101例女性样本中检出淋球菌阳性76例(75.3%)。乳胶免疫层析法对所有样本、男性样本、女性样本中检出淋球菌的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度均高于直接涂片法。直接涂片法与乳胶免疫层析法检出所有样本、男性样本、女性样本中检出淋球菌的Kappa值分别为(0.45±0.07)、(0.67±0.10)、(0.29±0.10),男性样本Kappa值≥0.6,一致性较好。结论:与直接涂片法相比,乳胶免疫层析法检测疑似淋病患者分泌物淋球菌检出效能相对较高,两种方法对男性样本中淋球菌的检出效果相当。 展开更多

关键词 淋球菌 乳胶免疫层析法 直接涂片法 细菌培养法 效果比较

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白带盐水涂片法与白念珠菌/阴道毛滴虫抗原检测的对比分析 被引量：4

5

作者 周丽娟 吴艳凌 《实验与检验医学》 CAS 2014年第3期301-302,共2页

目的比较分析白带盐水涂片法与白念珠菌/阴道毛滴虫抗原二联检测试剂盒(乳胶免疫层析法)检测白念珠菌/阴道毛滴虫的价值。方法采用盐水涂片法与白念珠菌/阴道毛滴虫抗原二联检测试剂盒(乳胶免疫层析法)两种方法对186例阴道分泌物进行检... 目的比较分析白带盐水涂片法与白念珠菌/阴道毛滴虫抗原二联检测试剂盒(乳胶免疫层析法)检测白念珠菌/阴道毛滴虫的价值。方法采用盐水涂片法与白念珠菌/阴道毛滴虫抗原二联检测试剂盒(乳胶免疫层析法)两种方法对186例阴道分泌物进行检测。结果盐水涂片法滴虫、真菌检出率分别为22.6%和47.3%,白念珠菌/阴道毛滴虫抗原二联检测试剂盒(乳胶免疫层析法)滴虫、真菌检出率分别为21.5%和51.6%。两者滴虫检出率之间无统计学意义(P>0.05),真菌检出率差异之间有统计学意义(P<0.05)。结论白念珠菌/阴道毛滴虫抗原二联检测试剂盒采用乳胶免疫层析法检测标本中有白念珠菌及阴道毛滴虫抗原,使阴道分泌物检查及结果更客观,且易于标准化。 展开更多

关键词 白带盐水涂片法 白念珠菌 阴道毛滴虫抗原二联检测试剂盒 乳胶免疫层析法

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ELISA测定HBsAg血清样本经化学发光法定量检测与乳胶免疫层析法两对半检测结果分析 被引量：3

6

作者 李宏杰 应雄江 +3 位作者 鄢姣 王倩倩 陈飞群 王瑛 《中国卫生检验杂志》 CAS 2015年第6期856-859,共4页

目的探讨ELISA测定HBs Ag临界附近样本及其乳胶免疫层析法两对半检测结果综合分析的意义。方法ELISA测定HBs Ag阴性的血清样本并进行复检,临界附近样本以化学发光法(CLIA)定量检测进行结果比对,并进行乳胶免疫层析法两对半检测。结果 EL... 目的探讨ELISA测定HBs Ag临界附近样本及其乳胶免疫层析法两对半检测结果综合分析的意义。方法ELISA测定HBs Ag阴性的血清样本并进行复检,临界附近样本以化学发光法(CLIA)定量检测进行结果比对,并进行乳胶免疫层析法两对半检测。结果 ELISA测定HBs Ag临界附近样本存在一定程度的假阴(阳)性率。乳胶免疫层析法两对半检测在HBs Ag 0.073 5≤A<1.000、0.073 5≤A<0.105一侧以Anti-HBs阳性682/1 020(66.86%)和全阴性345/1 020(33.82%)为主;而在0.105≤A<1.000一侧主要是Anti-HBe或/和Anti-HBc阳性329/333(包括36例HBe Ag阳性者)(99.80%)。结论 ELISA检测HBs Ag临界附近样本可以CLIA定量检测进行结果判断;结合乳胶免疫层析法两对半检测结果综合分析可使绝大部分临界附近样本免做复检。 展开更多

关键词 酶联免疫吸附试验 乙型肝炎病毒表面抗原 复检范围 化学发光免疫法 定量检测 乳胶免疫层析法 两对半检测

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不同方法对细菌性阴道病检出效果的研究 被引量：3

7

作者 董一红 李伟 +7 位作者 杨忱 车冬丽 王芳 张曦 王雪 高萱 王迎辰 谭延国 《国际检验医学杂志》 CAS 2019年第24期2974-2977,共4页

目的研究湿片镜检法、干化学酶法、乳胶免疫层析法、核酸杂交法等方法对检测阴道分泌物标本中细菌性阴道病(BV)检出效果。方法选取妇科门诊有临床症状患者的阴道分泌物分别使用上述方法进行检测,并以革兰染色Nugent评分法为金标准,对数... 目的研究湿片镜检法、干化学酶法、乳胶免疫层析法、核酸杂交法等方法对检测阴道分泌物标本中细菌性阴道病(BV)检出效果。方法选取妇科门诊有临床症状患者的阴道分泌物分别使用上述方法进行检测,并以革兰染色Nugent评分法为金标准,对数据进行汇总统计。结果湿片镜检法、干化学酶法、乳胶免疫层析法及核酸杂交法的灵敏度分别为63.89%、66.67%、52.78%和80.56%;特异度分别为100.00%、100.00%、86.29%和95.43%。这4种方法与革兰染色Nugent评分法相比,Kappa值(一致性检验)分别为0.746、0.768、0.363和0.752;相对于革兰染色Nugent评分法,曲线下面积(AUC)分别为0.819、0.833、0.695和0.880,核酸杂交法AUC值最大,乳胶免疫层析法AUC值最小;诊断符合率分别为93.83%、94.31%、80.57%和92.89%。4种方法与革兰染色Nugent评分法的总符合率为64.90%。结论4种方法中核酸杂交法对BV检出效果最佳,湿片镜检法和干化学酶法次之,乳胶免疫层析法效果很不理想;湿片镜检法与其他3种方法分别联合检测,可提高BV的检出率。 展开更多

关键词 细菌性阴道病 湿片镜检法 干化学酶法 乳胶免疫层析法 核酸杂交法

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基于非洲猪瘟病毒p72蛋白的双抗体夹心ELISA检测方法的建立 被引量：2

8

作者 王彩霞 于浩洋 +5 位作者 林祥梅 仇松寅 刘晓飞 李昊轩 冯春燕 吴绍强 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1223-1229,共7页

为建立非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)p72蛋白的双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)检测方法,本研究以实验室前期制备的ASFV单克隆抗体32H5作为捕获抗体,以HRP标记的MAb 2B2-1作为检测抗体,经条件优化,建立了基于非洲猪瘟病毒p7... 为建立非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)p72蛋白的双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)检测方法,本研究以实验室前期制备的ASFV单克隆抗体32H5作为捕获抗体,以HRP标记的MAb 2B2-1作为检测抗体,经条件优化,建立了基于非洲猪瘟病毒p72蛋白的双抗体夹心ELISA检测方法,并进行了敏感性、特异性和重复性试验,同时初步探索了两种抗体在试纸条方面的应用。结果显示,该夹心ELISA方法的最佳工作条件为:捕获抗体包被浓度为2μg/m L,酶标检测抗体的最适稀释倍数为1∶200;判定标准为:当检测样品D值大于等于0.252时判定为阳性;该方法检测猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒均呈阴性反应,具有良好的特异性;最低可检测到50 ng/m L p72重组蛋白;其批间和批内重复性变异系数均小于10%。利用两种抗体制备的蓝乳胶免疫层析试纸条也取得了较好的检测结果。这些结果表明本研究建立的ASFV p72双抗体夹心ELISA检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好,为非洲猪瘟的快速诊断、p72蛋白的功能研究及检测提供了技术支持。 展开更多

关键词 非洲猪瘟病毒 p72蛋白 双抗体夹心ELISA 蓝乳胶免疫层析试纸条

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HIV-Ⅰ/Ⅱ型抗体双抗原夹心乳胶免疫层析测定方法的建立及应用

9

作者 王拥军 黄伯里 +2 位作者 朱立苇 徐霄勤 李葆华 《临床输血与检验》 CAS 2002年第2期20-21,共2页

关键词 HIV-Ⅰ/Ⅱ抗体 双抗原夹心乳胶免疫层析法 艾滋病 抗体检测 干扰试验

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隐球菌抗原检测试剂盒敏感性和特异性的实验室评价 被引量：1

10

作者 张洁 董家丽 陈东科 《中国热带医学》 CAS 2021年第6期576-582,共7页

目的用比对试剂评价待评价试剂,以了解待评价试剂的敏感性和特异性。方法选取隐球菌31株、隐球菌近缘菌36株及其他肺部感染常见菌种33株,共28属100株菌株作为检测对象,配置0.5麦氏(M)浓度菌液用于检测试剂的特异性,0.5 M阳性的菌株再以1... 目的用比对试剂评价待评价试剂,以了解待评价试剂的敏感性和特异性。方法选取隐球菌31株、隐球菌近缘菌36株及其他肺部感染常见菌种33株,共28属100株菌株作为检测对象,配置0.5麦氏(M)浓度菌液用于检测试剂的特异性,0.5 M阳性的菌株再以10倍连续稀释液作为敏感性检测浓度菌液,以2M和4M浓度菌液作为钩状效应的检测菌液,并以美国Immuno Mycologics公司(IMMY)生产的隐球菌抗原检测(胶体金免疫层析法)试剂盒作为比对试剂,比较南京黎明生物制品有限公司生产的隐球菌抗原检测(乳胶免疫层析法)试剂与IMMY试剂的一致性。结果在31株隐球菌属菌株中,检测阳性25株和检测阴性6株;在16株毛孢子菌属菌株中,检测阳性12株和检测阴性4株;1株Cutaneotrichosporon curvatum检测结果为阳性;52株肺部感染常见菌种的检测结果均为阴性;敏感性实验结果显示隐球菌最低检出限是1.0×1O^(2)CFU/mL;2М和4М浓度菌液均未出现钩状效应;对已知菌株检测的敏感性和特异性与IMMY试剂比对结果高度一致。结论结果表明,待评价试剂对隐球菌检测敏感性高,特异性检测结果显示存在一定的属内和属外交叉反应结果,实验中未发现有钩状效应。待评价试剂与比对试剂的检测结果高度一致。 展开更多

关键词 隐球菌荚膜多糖抗原 乳胶免疫层析法 敏感性 特异性

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3种检测方法对细菌性阴道病诊断价值的比较 被引量：1

11

作者 刘秀英 安新业 《现代临床医学》 2021年第5期347-349,共3页

目的:对比3种检测方法诊断细菌性阴道病(bacterial vaginosis,BV)的价值。方法:选取2019年6—12月期间于无棣县水湾中心卫生院进行阴道分泌物检查的256例患者为研究对象,采集阴道分泌物,以革兰染色Nugent评分法(Nugent法)为金标准,比较... 目的:对比3种检测方法诊断细菌性阴道病(bacterial vaginosis,BV)的价值。方法:选取2019年6—12月期间于无棣县水湾中心卫生院进行阴道分泌物检查的256例患者为研究对象,采集阴道分泌物,以革兰染色Nugent评分法(Nugent法)为金标准,比较唾液酸酶法、核酸杂交法、乳胶免疫层析法对BV的诊断价值差异。结果:唾液酸酶法、核酸杂交法、乳胶免疫层析法对BV的阳性检出率分别为17.58%、16.80%、16.41%,与Nugent法阳性检出率(17.19%)比较差异均无统计学意义(P>0.05);核酸杂交法与Nugent法一致性最高(K=0.820),其次为唾液酸酶法(K=0.660),乳胶免疫层析法一致性最差(K=0.469);核酸杂交法的敏感度、特异度、准确率最高,其次是唾液酸酶法,乳胶免疫层析法最低(P <0.05)。结论:3种方法中,核酸杂交法诊断价值最高,可作为BV诊断的首选检测方法,唾液酸酶法可作为备选检测方法。 展开更多

关键词 细菌性阴道病 唾液酸酶法 核酸杂交法 乳胶免疫层析法

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