黄芪甲苷通过AMPK/ACSS2/PPARα信号通路改善心肌细胞能量代谢的机制研究 被引量：9

1

作者 郭依宁 方崇锴 +8 位作者 王俊岩 张璐 方红城 洪晓华 廖蔚茜 冼绍祥 杨忠奇 王陵军 黄育生 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期4389-4393,共5页

目的:探讨黄芪甲苷对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的HL-1心肌细胞肥大的作用机制。方法:将HL-1心肌细胞分为空白组,AngⅡ组,黄芪甲苷低、中、高剂量组,共同培养24 h。收集各组细胞,CCK8检测细胞活性,检测细胞ATP含量,免疫荧光检测细胞ACSS2... 目的:探讨黄芪甲苷对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的HL-1心肌细胞肥大的作用机制。方法:将HL-1心肌细胞分为空白组,AngⅡ组,黄芪甲苷低、中、高剂量组,共同培养24 h。收集各组细胞,CCK8检测细胞活性,检测细胞ATP含量,免疫荧光检测细胞ACSS2的表达情况,RT-PCR、Western Blot检测细胞心肌肥大相关指标mRNA及蛋白表达情况。结果:与AngⅡ组比较,黄芪甲苷各剂量组细胞活力显著增加(P<0.01),细胞内ATP含量显著升高(P<0.01),ANP、BNP、Myh7 mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.01),AMPK、ACSS2、PPARαmRNA水平显著升高(P<0.01),p-AMPK/AMPK、ACSS2、PPARα、PGC-1α蛋白表达显著增加(P<0.01)。结论:黄芪甲苷可以抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大,改善心肌细胞能量代谢,其机制可能与激活AMPK/ACSS2/PPARα信号通路有关。 展开更多

关键词 黄芪甲苷 心肌细胞 血管紧张素Ⅱ 乙酰辅酶A合成酶2 能量代谢

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乙酰辅酶A合成酶2低表达人胃癌细胞株MGC80-3的顺铂敏感性观察 被引量：4

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作者 糜磊 武丹 +2 位作者 陶清 周月鹏 陈德玉 《山东医药》 CAS 2019年第18期32-35,共4页

目的观察乙酰辅酶A合成酶2(ACSS2)低表达人胃癌细胞株MGC80-3的顺铂敏感性,并进一步探讨其可能作用机制。方法 采用Western blotting法检测人胃癌细胞株MGC80-3、AGS、SGC-7901、NCI-N87以及正常胃黏膜上皮细胞系RGM-1中ACSS2蛋白。对... 目的观察乙酰辅酶A合成酶2(ACSS2)低表达人胃癌细胞株MGC80-3的顺铂敏感性,并进一步探讨其可能作用机制。方法 采用Western blotting法检测人胃癌细胞株MGC80-3、AGS、SGC-7901、NCI-N87以及正常胃黏膜上皮细胞系RGM-1中ACSS2蛋白。对数生长期MGC80-3细胞分为A、B、C、D组,B及D组分别加入10 μL脂质体Lipofectamine 2000+5 μL siRNA-ACSS2转染, C组加入及A组分别加入50 μL无血清纯RPMI1640培养基+5 μL 阴性对照(NC);A组、B组均培养72 h,C组培养48 h时加入5 μg/mL的顺铂(DDP),D组转染48 h时加入5 μg/mL的DDP。培养24 h时,CCK8法检测各组细胞增殖活力,培养48、72 h时流式细胞分析术测算各组细胞早晚期凋亡率,Western blotting法检测各组细胞ACSS2、p65、p-p65、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤-特大型蛋白(Bcl-xL)、凋亡蛋白Bcl-2相关的X蛋白(Bax)。结果 MGC80-3、AGS、SGC-7901、NCI-N87及RGM-1细胞ACSS2蛋白相对表达量分别为0.80± 0.03 、0.62±0.04、0.60±0.04、0.72±0.05、0.41±0.04。与RGM-1细胞比较,MGC80-3、AGS、SGC-7901、NCI-N87细胞ACSS2相对表达量升高( P 均<0.01)。A、B、C、D组细胞增殖活力分别为98.67%±4.89%、92.67%±7.86%、62.67%± 4.05%、34.67%±7.61%,A组与B组相比无明显差异( P >0.05);与A组比较,C组细胞增殖活力下降( P < 0.001 );与B、C组比较,D组细胞增殖活力均下降( P 均< 0.001 )。A、B、C、D组早期细胞凋亡率分别为1.06%±0.02%、1.13%±0.08%、7.62%±0.55%、14.33%±0.21%,晚期细胞凋亡率分别为8.01%± 0.05%、8.13%±0.06%、10.81%±0.43%、15.98±0.18%。与A组比较,C、D组细胞早、晚期凋亡率均升高( P 均<0.05);与B组比较,D组早、晚期凋亡率均升高( P 均<0.05);与C组比较,D组细胞早、晚期凋亡率均升高( P 均< 0.05 )。与A组比较,C组p-p65、Bax蛋白相对表达量升高,Bcl-2、Bcl-xL相对表达量降低( P 均<0.05);与B组比较,D组细胞p65、p-p65、Bcl-2、Bcl-xL相对表达量均降低、Bax相� 展开更多

关键词 乙酰辅酶A合成酶2 核因子κB B淋巴细胞瘤-2蛋白 B细胞淋巴瘤-特大型蛋白 Bcl-2相关的X蛋白 胃癌 顺铂 化疗敏感性

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乙酰辅酶A合成酶2对海马记忆的影响及潜在应用前景

3

作者 何财军 马宾 袁梅 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期565-570,共6页

乙酰辅酶A合成酶2(acetyl coenzyme A synthe⁃tase 2,ACSS2)是乙酰辅酶A合成酶家族的重要成员,由ACSS2基因转录而来。ACSS2具有脂肪合成酶和应激反应调节剂的双重性质[1]。ACSS2定位于细胞质和细胞核,定位于胞质的ACSS2主要参与肿瘤的... 乙酰辅酶A合成酶2(acetyl coenzyme A synthe⁃tase 2,ACSS2)是乙酰辅酶A合成酶家族的重要成员,由ACSS2基因转录而来。ACSS2具有脂肪合成酶和应激反应调节剂的双重性质[1]。ACSS2定位于细胞质和细胞核,定位于胞质的ACSS2主要参与肿瘤的发生发展,而定位于胞核的ACSS2在组蛋白乙酰化和组织特异性基因表达调控中发挥重要作用,以调控生物表观遗传。 展开更多

关键词 乙酰辅酶A合成酶2 记忆 乙酰化 自噬

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ACSS2上调参与食管鳞癌细胞缺氧诱导的放疗抵抗 被引量：4

4

作者 朱宇 胡格 +3 位作者 凌锐 周玲 周月鹏 陈德玉 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2017年第3期200-204,共5页

目的:研究乙酰辅酶A合成酶2(ACSS2)上调对食管鳞癌细胞缺氧诱导的放疗抵抗效应形成的影响及潜在的分子作用机制。方法:免疫组化及免疫荧光技术细胞共定位检测65例食管鳞癌患者组织切片中ACSS2和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)的... 目的:研究乙酰辅酶A合成酶2(ACSS2)上调对食管鳞癌细胞缺氧诱导的放疗抵抗效应形成的影响及潜在的分子作用机制。方法:免疫组化及免疫荧光技术细胞共定位检测65例食管鳞癌患者组织切片中ACSS2和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)的表达和活化水平;将食管鳞癌ECA-109细胞分为对照组、ACSS2 siRNA组、缺氧组和缺氧+ACSS2 siRNA组,利用克隆形成实验检测不同处理组细胞对不同照射剂量(0、2、4、6、8 Gy)的放射敏感性;选择8 Gy照射处理后,采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡,蛋白质印迹法检测各组细胞凋亡相关蛋白cleaved-caspase 3/caspase 3、Bcl-2的表达及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p-mTOR、核糖体蛋白S6激酶(p70S6)等信号通路蛋白的表达。结果:食管鳞癌病理切片中ACSS2高表达,细胞密集区域尤为明显,与p-mTOR呈显著正相关(r=0.707,P<0.01);细胞克隆实验表明缺氧组细胞的存活分数比对照组明显下降(P<0.01),放疗敏感性降低,下调ACSS2可以逆转这一趋势;缺氧环境诱导的ACSS2升高促进了ECA-109细胞Bcl-2表达上调、抑制了cleaved-caspase 3的表达,同时细胞凋亡率下降(P<0.01);在缺氧条件下,下调ACSS2可以抑制mTOR信号通路相关蛋白mTOR、p-mTOR、p70S6的活化。结论:缺氧条件下的ACSS2累积通过活化mTOR通路促进放疗抵抗效应。 展开更多

关键词 乙酰辅酶A合成酶2 电离辐射 食管鳞状细胞癌 放疗抵抗 MTOR信号通路

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乙酰辅酶A合成酶2在胰腺癌的表达及意义

5

作者 周文 刘雪英 +2 位作者 周显飞 杨帆 聂寒秋 《江苏医药》 CAS 2023年第7期668-672,F0003,共6页

目的探讨乙酰辅酶A合成酶2(ACSS2)在胰腺癌中的表达及意义。方法采用免疫组织化学染色法检测ACSS2在胰腺癌组织及其癌旁正常组织中的表达,RT-PCR法检测胰腺癌组织和细胞中ACSS2mRNA表达。将ACSS2干扰RNA(si-ACSS2组)及阴性对照(NC组)均... 目的探讨乙酰辅酶A合成酶2(ACSS2)在胰腺癌中的表达及意义。方法采用免疫组织化学染色法检测ACSS2在胰腺癌组织及其癌旁正常组织中的表达,RT-PCR法检测胰腺癌组织和细胞中ACSS2mRNA表达。将ACSS2干扰RNA(si-ACSS2组)及阴性对照(NC组)均分别转染胰腺癌细胞系PANC-1和MIAPaCa-2后,采用CCK-8法检测胰腺癌细胞增殖,Transwell实验检测胰腺癌细胞侵袭和迁移,Westernblot法检测胰腺癌细胞中上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的蛋白表达。结果ACSS2在胰腺癌组织中的表达高于癌旁正常组织(P<0.05)。胰腺癌组织中ACSS2mRNA表达高于癌旁正常组织(P<0.01);胰腺癌细胞系PANC-1、BxPC-3、MIAPaCa-2、AsPC-1中ACSS2mRNA表达亦高于人胰腺导管上皮细胞(P<0.05或P<0.01)。与NC组相比,si-ACSS2组PANC-1和MIAPaCa-2细胞增殖、侵袭和迁移减少,E-cadherin蛋白表达增加,而Vimentin蛋白表达减少(P<0.05)。结论ACSS2高表达于胰腺癌组织和细胞,下调ACSS2表达可抑制胰腺癌细胞增殖、侵袭和迁移。ACSS2与上皮-间质转化通路相关,有望成为胰腺癌生物治疗的潜在靶点。 展开更多

关键词 胰腺癌 乙酰辅酶A合成酶2 增殖 侵袭 迁移

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乙酰辅酶A合成酶2在结直肠癌中的表达及生物学功能 被引量：3

6

作者 于童 崔龙 +3 位作者 刘辰莹 王光辉 吴庭玉 黄雨霁 《中华胃肠外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1174-1179,共6页

目的探讨乙酰辅酶A合成酶2（ACSS2）在结直肠癌中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学方法检测比较组织芯片上74例结直肠癌组织与40例正常结直肠上皮组织标本中ACSS2的表达，并分析其与结直肠癌患者的临床病理特点的关系。同时应用RN... 目的探讨乙酰辅酶A合成酶2（ACSS2）在结直肠癌中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学方法检测比较组织芯片上74例结直肠癌组织与40例正常结直肠上皮组织标本中ACSS2的表达，并分析其与结直肠癌患者的临床病理特点的关系。同时应用RNA干扰技术下调肠癌细胞系中ACSS2的表达，检测ACSS2-siRNA（ACSS2-siA和ACSS2-siB，分别为实验组A和实验组B）干扰后结直肠癌细胞株Lovo和HCT116细胞的增殖、侵袭迁移和上皮间质转化（上皮间质转化标志物钙黏附蛋白E-cadherin和Snail）情况。结果74例结直肠癌组织中，ACSS2表达程度（6．284比3．625）与阳性细胞百分比（69．9％比45．1％）高于40例正常组织（均P〈0．01）。使用RNA干扰降低Lovo与HCTI16中ACSS2的表达后，增殖实验显示，等量细胞铺板生长5d后，实验组细胞计数均低于对应对照组（A450值分别为：Lovo对照组：1．758±0．041；Lovo实验组A：1．485±10．026；Lovo实验组B：1．371±0．049。HCT116对照组：2．609±0．038；HCT116实验组A：2．260±0．042，HCT116实验组B：2．295±0．029）。侵袭实验显示，Lovo和HCT116实验组穿膜的细胞数目均低于对应细胞系的对照组（每个视野下细胞数分别为：Lovo对照组：225±5；Lovo实验组A：40±5；Lovo实验组B：79±3，P〈0．05。HCT116对照组：198±7；HCT116实验组A：96±7；HCT116实验组B：77±9，P〈0．05）。定量PCR检测显示，在Lovo细胞系中，ACSS2RNA干扰后，E—eadherin的mRNA水平显著上调（对照组：1．000±0．211；实验组A：3．403±0．207；实验组B：2．658±0．420，P〈0．05），Snail的mRNA水平显著下调（对照组：1．000±0．085；实验组A：0．468±0．030；实验组B：0．499±0．088．P〈0．05）：HCT116细胞系中结果类似，Snail的mRNA水平显著下调（对照组：1．000±0．118；实验组A：0．265±0．020：实验组B：0．194±0．017，P〈0．05） 展开更多

关键词 结直肠肿瘤 乙酸 乙酰辅酶A合成酶2 细胞迁移

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降调ACSS2对非小细胞肺癌A549细胞增殖、凋亡和迁移的影响 被引量：3

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作者 卢晓霞 常淑 +1 位作者 毕明宏 王雅萍 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期974-980,共7页

背景与目的:代谢水平的改变是肿瘤细胞生长的主要特征之一,有研究证实,乙酰辅酶A合成酶2(cytosolic acetyl-Co A synthetase 2,ACSS2)在肿瘤细胞的代谢中起着至关重要的作用。本研究拟通过RNA干扰技术抑制非小细胞肺癌(non-small cell l... 背景与目的:代谢水平的改变是肿瘤细胞生长的主要特征之一,有研究证实,乙酰辅酶A合成酶2(cytosolic acetyl-Co A synthetase 2,ACSS2)在肿瘤细胞的代谢中起着至关重要的作用。本研究拟通过RNA干扰技术抑制非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)A549细胞中ACSS2的表达,探讨ACSS2对A549细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法:设计并合成针对ACSS2的特异性干扰片段ACSS2-si RNA及与ACSS2没有同源性的阴性对照,瞬时转染NSCLC A549细胞,通过实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测ACSS2 mRNA的表达情况,四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)实验检测转染组与对照组细胞的增殖情况,流式细胞仪检测细胞的凋亡率,细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果:通过转染体外合成的干扰片段ACSS2-siRNA,NSCLC A549细胞中ACSS2 mRNA呈显著低表达。ACSS2-siRNA干扰组的细胞较对照组增殖活性明显减弱,凋亡增加,迁移能力减弱。结论:降调ACSS2表达能显著抑制A549细胞增殖、迁移能力,促进凋亡尤其是早期凋亡明显增加。 展开更多

关键词 肺肿瘤 乙酰辅酶A合成酶2 RNA干扰

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干扰乙酰辅酶A合成酶2对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞增殖及凋亡的影响 被引量：3

8

作者 傅聪 周月鹏 +4 位作者 尹超云 凌锐 浦希 汤翔 陈德玉 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2021年第5期374-379,共6页

目的:研究乙酰辅酶A合成酶2(acetyl-CoA synthase 2,ACSS2)对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞增殖和凋亡的影响及可能的机制。方法:选用正常乳腺上皮MCF-10A细胞与三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹法... 目的:研究乙酰辅酶A合成酶2(acetyl-CoA synthase 2,ACSS2)对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞增殖和凋亡的影响及可能的机制。方法:选用正常乳腺上皮MCF-10A细胞与三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹法分别检测及比较两者ACSS2 mRNA和蛋白表达差异;设计并合成针对ACSS2的特异性干扰RNA(siRNA-ACSS2)及无序序列的阴性对照(siRNA-NC),分别瞬时转染MDA-MB-468细胞并采用qRT-PCR和蛋白质印迹法鉴定其干扰效果;采用CCK-8法检测转染后MDA-MB-468细胞增殖能力;流式细胞术检测MDA-MB-468细胞转染后细胞凋亡水平;蛋白质印迹法检测MDA-MB-468细胞中PI3K/AKT信号通路以及凋亡相关蛋白cleaved-caspase-3、Bcl-2、Bax和增殖相关蛋白Ki-67等表达。结果:MDA-MB-468细胞中ACSS2 mRNA和蛋白表达水平明显高于MCF-10A细胞(P<0.01);与阴性对照组细胞相比,靶向干扰MDA-MB-468细胞ACSS2表达后细胞增殖活力明显下降(P<0.01),细胞凋亡水平明显上升(P<0.01),p-PI3K、p-AKT、Ki-67和Bcl-2表达明显降低(P均<0.01),cleaved-caspase-3、Bax表达明显上升(P均<0.01)。结论:干扰ACSS2表达可能通过PI3K/AKT信号通路抑制MDA-MB-468细胞增殖和促进凋亡发生。 展开更多

关键词 三阴性乳腺癌 乙酰辅酶A合成酶2 RNA干扰 增殖 凋亡

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下调乙酰辅酶A合成酶2通过诱导自噬抑制非小细胞肺癌细胞增殖

9

作者 范学宇 张峰 +3 位作者 翁媛媛 王思为 杨利萍 祝进 《温州医科大学学报》 CAS 2022年第11期868-875,共8页

目的:探讨乙酰辅酶A合成酶2(ACSS2)在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞中的表达及其对细胞增殖、侵袭的调控机制。方法:采用蛋白质印迹(Western blot)实验检测并分析NSCLC细胞系A549和H1299与人成纤维细胞HFF-1中ACSS2表达的差异。利用慢病毒在N... 目的:探讨乙酰辅酶A合成酶2(ACSS2)在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞中的表达及其对细胞增殖、侵袭的调控机制。方法:采用蛋白质印迹(Western blot)实验检测并分析NSCLC细胞系A549和H1299与人成纤维细胞HFF-1中ACSS2表达的差异。利用慢病毒在NSCLC细胞系中构建ACSS2敲低(ACSS2 KD组)和对照细胞系(NC组)。采用MTT实验及细胞克隆形成实验分析ACSS2对NSCLC细胞增殖的影响。采用划痕实验和Transwell实验分析ACSS2对NSCLC细胞的迁移和侵袭能力的影响。Western blot及免疫荧光实验分析敲低ACSS2对细胞自噬的影响。结果:与人成纤维细胞HFF-1相比,NSCLC细胞中ACSS2的蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与NC组相比,ACSS2 KD组细胞增殖能力和细胞活力显著降低,ACSS2 KD组细胞的迁移和侵袭能力均明显降低(均P<0.01)。Western blot和免疫荧光实验显示,敲低ACSS2细胞自噬活性明显增加,自噬小体增多(P<0.01)。但是,敲低ACSS2几乎不影响caspase3和caspase8的蛋白表达水平(P>0.05)。ACSS2-sh RNA+Beclin1/Atg7-sh RNA共转染A549细胞(ACSS2+Beclin1/Atg7 KD组),结果显示与ACSS2KD组比,ACSS2 KD+Beclin1/Atg7 KD组细胞增殖能力有所增强,克隆形成数目明显增多(P<0.05)。结论:ACSS2在NSCLC细胞中高表达,促进细胞的增殖、侵袭。下调ACSS2可诱导NSCLC细胞发生自噬性细胞死亡,抑制细胞增殖。 展开更多

关键词 乙酰辅酶A合成酶2 非小细胞肺癌 细胞增殖 自噬

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乙酰辅酶A合成酶2在肿瘤发生发展中的研究进展 被引量：1

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作者 杨赟 陈德玉 《新医学》 CAS 2021年第4期234-238,共5页

乙酰辅酶A是肿瘤快速生长过程中不可或缺的合成代谢原料,根据瓦伯格效应,肿瘤细胞无法通过丙酮酸氧化脱羧产生乙酰辅酶A,其乙酰辅酶A主要由乙酰辅酶A合成酶2(ACSS2)催化短链脂肪酸所合成,即乙酸+辅酶A+ATP=乙酰辅酶A+二磷酸+AMP,表明了A... 乙酰辅酶A是肿瘤快速生长过程中不可或缺的合成代谢原料,根据瓦伯格效应,肿瘤细胞无法通过丙酮酸氧化脱羧产生乙酰辅酶A,其乙酰辅酶A主要由乙酰辅酶A合成酶2(ACSS2)催化短链脂肪酸所合成,即乙酸+辅酶A+ATP=乙酰辅酶A+二磷酸+AMP,表明了ACSS2在维持肿瘤细胞生长方面至关重要。近年来,越来越多的证据表明,ACSS2活性和表达异常与肿瘤增殖、侵袭、转移、抗凋亡和耐药性等密切相关,该文围绕ACSS2在肿瘤中的相关作用及机制的研究进展进行了综述。 展开更多

关键词 乙酰辅酶A合成酶2 肿瘤侵袭 肿瘤迁移 肿瘤治疗抵抗

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藏系绵羊乙酰辅酶A合成酶2基因的生物信息学分析 被引量：1

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作者 陈志成 梁婧娴 +1 位作者 金红 徐亚欧 《西南民族大学学报（自然科学版）》 CAS 2012年第2期228-234,共7页

对藏系绵羊乙酰辅酶A合成酶基因进行测序和序列分析,以期为近一步研究该基因及相关基因家族功能等研究提供素材.用Illumina HiSeq 2000测序技术获得ACSS2基因,进行生物信息学分析.结果显示:藏系绵羊ACSS2编码基因全长2106个bp,编码701... 对藏系绵羊乙酰辅酶A合成酶基因进行测序和序列分析,以期为近一步研究该基因及相关基因家族功能等研究提供素材.用Illumina HiSeq 2000测序技术获得ACSS2基因,进行生物信息学分析.结果显示:藏系绵羊ACSS2编码基因全长2106个bp,编码701个氨基酸。将测序获得的藏系绵羊ACSS2编码核苷酸及氨基酸序列分别与GeneBank中公布的牛、人、野猪、小鼠、大鼠这5种动物进行序列同源性比对,发现核苷酸序列同源性分别为97.9%,91.3%,90.9%,88.3%,88.1%,相应的氨基酸序列同源性分别为98.7%,93.7%,91.3%,92.2%,92.3%.表明动物的ACSS2基因具有高度保守性,种间差异较小. 展开更多

关键词 藏系绵羊 乙酰辅酶A合成酶2 序列分析 系统进化

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ACSS2通过PI3K/AKT信号通路调控食管鳞癌细胞的顺铂敏感性 被引量：1

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作者 高星宇 王景芝 +3 位作者 凌锐 周月鹏 毛朝明 陈德玉 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2020年第6期486-492,共7页

目的:探讨乙酰辅酶A合成酶2(acetyl-CoA synthetase 2,ACSS2)表达对食管鳞癌细胞顺铂(cisplatin,DDP)敏感性的影响和可能机制。方法:通过免疫组化和蛋白质印迹法检测40对食管鳞癌瘤体和癌旁组织中ACSS2蛋白的表达。蛋白质印迹法验证食... 目的:探讨乙酰辅酶A合成酶2(acetyl-CoA synthetase 2,ACSS2)表达对食管鳞癌细胞顺铂(cisplatin,DDP)敏感性的影响和可能机制。方法:通过免疫组化和蛋白质印迹法检测40对食管鳞癌瘤体和癌旁组织中ACSS2蛋白的表达。蛋白质印迹法验证食管鳞癌细胞株TE-1、ECA-109和KY-SE150与正常食管鳞状细胞Het-1A中ACSS2的表达差异;利用脂质体转染siRNA-ACSS2或者慢病毒转染LV-ACSS2至TE-1细胞构建ACSS2下调或过表达细胞株;CCK8实验检测下调ACSS2对顺铂IC50值的改变;顺铂处理(5μg/mL)前后,流式细胞术检测ACSS2干扰处理对TE-1细胞凋亡水平的影响;蛋白质印迹检测PI3K/AKT信号通路及凋亡相关蛋白cleaved-Caspase-3的表达。结果:免疫组化及蛋白质印迹结果显示,食管鳞癌组织中ACSS2蛋白表达显著高于癌旁组织(P<0.001),食管鳞癌细胞株中ACSS2表达水平明显高于正常鳞状上皮细胞Het-1A。CCK8结果显示siRNA-ACSS2处理显著下调TE-1细胞对顺铂的IC50值(P值均<0.05);流式细胞术结果证实,抑制ACSS2表达可显著上调食管鳞癌细胞凋亡率(P<0.01);结合5μg/mL顺铂处理,ACSS2干扰后TE-1细胞凋亡率明显上升(P值均<0.001);蛋白质印迹结果表明,顺铂处理上调TE-1细胞中ACSS2及p-PI3K、p-AKT的表达;顺铂作用下,靶向抑制ACSS2后可见p-PI3K、p-AKT的显著降低而凋亡相关蛋白cleaved-Caspase-3表达量明显升高,过表达ACSS2在维持PI3K/AKT信号活化的同时可有效逆转cleaved-Caspase-3的形成。结论:ACSS2通过调控PI3K/AKT信号通路活化以及cleaved-Caspase-3表达参与食管鳞癌细胞顺铂敏感性调节。 展开更多

关键词 乙酰辅酶A合成酶2 顺铂 食管鳞癌 化疗敏感性 PI3K/AKT

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牛ACAS2基因的克隆、序列分析及染色体物理定位 被引量：1

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作者 马云 许尚忠 +4 位作者 高雪 张英汉 辛亚平 高树新 任红艳 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2006年第10期21-26,共6页

以中国西门塔尔牛肝脏组织为材料,运用同源序列克隆技术并结合RT-PCR技术,对牛ACAS 2基因的部分cDNA进行了克隆与序列分析,应用SUN bRH 7000型辐射杂种板对分离的牛ACAS 2基因进行了染色体定位。结果显示,本研究所获得的长为1 535 bp的c... 以中国西门塔尔牛肝脏组织为材料,运用同源序列克隆技术并结合RT-PCR技术,对牛ACAS 2基因的部分cDNA进行了克隆与序列分析,应用SUN bRH 7000型辐射杂种板对分离的牛ACAS 2基因进行了染色体定位。结果显示,本研究所获得的长为1 535 bp的cDNA序列为牛ACAS 2基因的部分编码序列,该段序列与人(G enB ank登录号:NM-139274)和小鼠(G enB ank登录号:NM-019811)的ACAS 2基因mRNA序列的相似性分别为91%和88%;牛ACAS 2基因被定位于牛的13号染色体上,与该染色体上的标记D IK 4350的距离为1.51 cR。 展开更多

关键词 牛 乙酰辅酶A合成酶2基因 基因克隆 辐射杂种板 染色体定位

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牛ACAS2基因的电子克隆与序列分析 被引量：1

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作者 马云 盛熙雯 +1 位作者 曹宝红 朱克华 《中国牛业科学》 2008年第3期61-67,共7页

本研究以牛的乙酰辅酶A合成酶2（ACAS2）基因为研究对象，利用生物信息学方法和同源序列克隆技术，对牛的ACAS2基因进行了电子克隆和序列分析，并对推导出的ACAS2蛋白结构与性质进行了初步分析。实验结果：牛ACAS2基因的eDNA序列长2726... 本研究以牛的乙酰辅酶A合成酶2（ACAS2）基因为研究对象，利用生物信息学方法和同源序列克隆技术，对牛的ACAS2基因进行了电子克隆和序列分析，并对推导出的ACAS2蛋白结构与性质进行了初步分析。实验结果：牛ACAS2基因的eDNA序列长2726 bp，包括了2106 bp的开放阅读框序列（ORF），54 bp的5非翻译区序列（5 UTR）和566 bp的3非翻译区序列（3′UTR），由702个氨基酸组成。该基因cDNA核苷酸编码区序列与人，猕猴，小鼠，黑猩猩，家犬ACAS2基因的相似性分别为91％，90％，87％，899，6，90％，90％，推导的氨基酸序列与人，猕猴，小鼠，黑猩猩，家犬的相似性分别为94％，94％，92％，94％，87％。以ACAS2基因eDNA编码区序列构建的分子进化树研究结果表明，牛的ACAS2基因在人，猕猴，小鼠，黑猩猩，家犬等物种中，与家犬的亲缘关系特别近。牛的ACAS2蛋白的三级结构包含7个跨膜结构-Cutoff模体，三个比较大的分别位于169～199位氨基酸，170-191位氨基酸和326—345位氨基酸处。 展开更多

关键词 牛 乙酰辅酶A合成酶2基因(ACAS2基因) 电子克隆 序列分析

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