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PTEN在主动脉夹层病变组织中的表达变化及与血管平滑肌细胞收缩表型蛋白的关系
1
作者 刘恒娟 王苏 +2 位作者 李博文 闵兴平 刘敏 《山东医药》 CAS 2024年第14期27-30,35,共5页
目的 观察磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)在主动脉夹层(AD)患者及AD小鼠病变组织中的表达变化,并探讨其表达与血管平滑肌细胞收缩表型蛋白的关系。方法 收集6例Stanford A型患者术中切除的病变主动脉(AD组)和6例供体心脏相应正常节段(对... 目的 观察磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)在主动脉夹层(AD)患者及AD小鼠病变组织中的表达变化,并探讨其表达与血管平滑肌细胞收缩表型蛋白的关系。方法 收集6例Stanford A型患者术中切除的病变主动脉(AD组)和6例供体心脏相应正常节段(对照组),采用HE染色观察主动脉结构,EVG染色观察主动脉弹力纤维,Western blotting法检测主动脉组织PTEN及血管收缩表型蛋白MYH11、α-SMA。另取3~4周龄C57BL/6J雄性小鼠12只,随机分为对照组和AD组各6只;取血管平滑肌细胞特异性敲除PTEN雄性小鼠6只作为PTENCKO组。AD组和PTENCKO组给予0.25%的β-氨基丙腈饲料喂养用于诱导AD,4周后给予血管紧张素Ⅱ1 000 ng/(kg·min)皮下泵注,连续2 d,构建AD模型;对照组给予正常饲料喂养,4周后给予等量生理盐水皮下泵注。处死小鼠,取主动脉组织,采用Western blotting法检测PTEN、MYH11、α-SMA及自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、p62。结果 对照组血管壁组织层次清晰,细胞排列整齐,血管壁弹性纤维排列整齐;AD组血管壁结构层次不清,部分细胞丢失、排列不齐,血管壁弹性纤维崩解断裂,胶原沉积增多。与对照组相比,AD组主动脉组织PTEN蛋白表达升高,MYH11、α-SMA蛋白表达降低(P均<0.05)。与对照组相比,AD组小鼠主动脉组织PTEN、LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1蛋白表达升高,MYH11、α-SMA、p62蛋白表达降低(P均<0.05);与AD组相比,PTENCKO组小鼠主动脉组织PTEN、LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1蛋白表达降低,MYH11、α-SMA、p62蛋白表达升高(P均<0.05)。结论 PTEN在AD患者及AD小鼠病变组织中高表达;抑制PTEN可减轻细胞自噬,恢复血管收缩表型蛋白表达,可能有助于缓解主动脉中层退行性变。 展开更多
关键词 磷酸酶和张力蛋白同源物 主动脉夹层 主动脉中层退行性变 细胞自噬
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铁缺乏对主动脉中层退行性变小鼠主动脉壁和人主动脉血管平滑肌细胞骨架结构的影响及可能机制 被引量：1
2
作者 王苏 刘敏 +3 位作者 李博文 刘恒娟 闵心平 赵博 《中华实用诊断与治疗杂志》 2023年第9期880-885,共6页
目的观察铁缺乏(ID)对主动脉中层退行性变(AMD)小鼠主动脉壁、人主动脉血管平滑肌细胞(HASMCs)骨架结构的影响,探讨其可能机制。方法(1)ApoE^(-/-)小鼠48只随机分为AMD组、ID组、ID+AMD组和对照组各12只。AMD组皮下泵注血管紧张素Ⅱ(Ang... 目的观察铁缺乏(ID)对主动脉中层退行性变(AMD)小鼠主动脉壁、人主动脉血管平滑肌细胞(HASMCs)骨架结构的影响,探讨其可能机制。方法(1)ApoE^(-/-)小鼠48只随机分为AMD组、ID组、ID+AMD组和对照组各12只。AMD组皮下泵注血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)1μg/(kg·min)连续24 d制备AMD模型,同时饲喂正常铁含量饲料;ID组饲喂低铁含量饲料构建ID模型;ID+AMD组AMD模型制备同AMD组,ID模型制备同ID组;对照组饲喂正常铁含量饲料。造模第4天测量4组小鼠收缩压(SBP);造模第24天处死小鼠,应用血清铁检测试剂盒检测铁含量,采用免疫组织化学SP法检测主动脉转铁蛋白(TF)、转铁蛋白受体1(TFR1)、磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)、细胞分裂周期因子42(Cdc42)、Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)表达。(2)取对数生长期HASMCs分为AngⅡ组(0.1μmol/L AngⅡ)、ID细胞组(20μmol/L去铁胺)、ID+AngⅡ组(0.1μmol/L AngⅡ+20μmol/L去铁胺)和对照细胞组(正常培养基)。处理48 h取4组细胞,采用Western blot法检测TF、TFR1、p-MLC、Cdc42、Rac1蛋白相对表达量。结果(1)造模第4天AMD组、ID+AMD组小鼠SBP[(171.17±7.73)、(168.00±3.41)mmHg]高于ID组[(115.00±2.00)mmHg]和对照组[(105.17±10.57)mmHg](P<0.05),对照组与ID组,AMD组与ID+AMD组SBP比较差异均无统计学意义(P>0.05)。(2)4组小鼠血清铁含量及主动脉TF、TFR1、p-MLC、Cdc42、Rac1表达量比较差异均有统计学意义(P<0.05)。ID组小鼠血清铁含量[(3.67±1.37)μmol/L]及主动脉TF(3.17±0.75)、p-MLC(3.83±1.17)、Cdc42(4.00±1.27)表达量均低于AMD组[(7.67±1.37)μmol/L、8.50±0.55、8.17±2.23、8.83±1.94]和对照组[(9.83±1.72)μmol/L、10.33±1.86、9.83±1.72、9.67±1.75](P<0.05),TFR1(9.67±1.86)及Rac1(6.17±2.04)表达量均高于AMD组(6.00±1.79、3.83±1.84)和对照组(4.50±1.23、2.50±1.05)(P<0.05);AMD组小鼠血清铁含量及主动脉TF、p-MLC、Cdc42表达量均高于ID+AMD组[(3.17±1.60)μmol/L、2.83±0.75、3.67±1.21、3.8 展开更多
关键词 主动脉中层退行性变 铁缺乏 人主动脉平滑肌细胞 细胞骨架 小鼠
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