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题名大豆异黄酮生物合成串联基因簇及其表达载体的构建
被引量:3
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作者
夏循礼
杨广笑
何光源
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机构
华中科技大学中英HUST-RRes基因工程和基因组学联合实验室
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出处
《大豆科学》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期7-10,20,共5页
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基金
国家重点基础研究发展计划(973计划)前期专项资助项目(2005CCA1900)
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文摘
植物异黄酮是一种重要的次级代谢产物,在植物的生理活动以及人类健康方面具有重要作用。植物异黄酮生物合成途径有三个调控酶:查尔酮合酶(Chalcone synthase,CHS),查尔酮异构酶(Chalcone Isomerase,CHI)和异黄酮合酶(Isoflavone synthase,IFS)。以大豆为材料,利用RT-PCR方法克隆到查尔酮合酶基因(CHS),查尔酮异构酶基因(CHIⅡ)和异黄酮合酶基因(IFS)的cDNA(Genebank登记号分别为EU526827,EU526829,EU526830)经过NCBI在线Blast比对,相似度均在98%以上,确认克隆的目标基因是正确的;将这三种基因顺序连接,构建成串联基因簇CHS-CHIⅡ-IFS(命名为rIFS),并且构建了rIFS的原核表达载体,进行了初步的表达研究。为进一步研究植物异黄酮的生物合成以及进行异黄酮生物工程奠定了基础。
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关键词
大豆异黄酮
生物合成
串联基因簇
表达载体
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Keywords
Soybean isoflavones
Biosynthesis
Tandem genes cluster
Expression vector
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分类号
S565.1
[农业科学—作物学]
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题名大豆血红蛋白串联基因簇转化根瘤菌工程菌株的构建
被引量:2
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作者
于海鹏
潘钰
李海英
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机构
黑龙江大学生命科学学院黑龙江省普通高等学校分子生物学重点实验室
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出处
《黑龙江大学自然科学学报》
CAS
北大核心
2011年第2期233-236,共4页
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基金
黑龙江省科技攻关项目(GA08B101)
哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目(RC2009XK001004)
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文摘
研究提取大豆根瘤总RNA并将其反转录成cDNA,以其为模板采用同源序列克隆法,利用PCR技术获得大豆血红蛋白基因lbc3、lbc2、lbc1、lba的编码区序列;利用DNA重组技术,将4个血红蛋白基因顺序连接,构建成串联基因簇lbc3-lbc2-lbc1-lba(命名为lbX),并构建了lbX的原核表达载体pTR-Plac-lbX;采用三亲本杂交的方法,将原核表达载体pTR-Plac-lbX转化土著大豆根瘤菌,构建转基因根瘤菌工程菌株SFH(pTR-Plac-lbX),为研究转基因工程菌株对大豆根瘤固氮能力的影响奠定基础。
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关键词
大豆根瘤菌
大豆血红蛋白基因
串联基因簇
DNA重组技术
三亲本杂交
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Keywords
native Rhizobium japonicum
glycine max leghemoglobin gene
tandem genes cluster
DNA recombinant technology
triparental hybridization
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分类号
S566.3
[农业科学—作物学]
S188
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