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江浙蝮蛇毒中性磷脂酶A_2的荧光光谱学研究 被引量：4
1
作者 郑乐 阮康成 +2 位作者 林南琴 钱嵘 周元聪 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第3期347-352,共6页
用荧光光谱方法研究了江浙蝮蛇毒中性磷脂酶A_2(NPLA_2).研究结果表明NPLA_2分子中确实含有一个色氨酸残基.且位于NPLA_2分子表面;我们还发现荧光探针bis-ANS在NPLA_2分子上有一结合区,其解离平衡常数为11.6μmol/L ;利用结合了的bis-AN... 用荧光光谱方法研究了江浙蝮蛇毒中性磷脂酶A_2(NPLA_2).研究结果表明NPLA_2分子中确实含有一个色氨酸残基.且位于NPLA_2分子表面;我们还发现荧光探针bis-ANS在NPLA_2分子上有一结合区,其解离平衡常数为11.6μmol/L ;利用结合了的bis-ANS与NPLA_2分子中色氨酸残基之间的能量传递计算出两者之间的距离为17.7(?). 展开更多
关键词 中性磷脂酶A2 荧光 蝮蛇 蛇毒
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江浙蝮蛇毒中性磷脂酶A_2的免疫学研究 被引量：1
2
作者 杜晓燕 路英华 +2 位作者 顾培忠 朱洪 周元聪 《华东师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期99-103,共5页
用江浙蝮蛇毒中纯化的中性磷脂酶A2（NPL2）免疫家兔，获得了多克隆抗体.抗体与抗原结合后，抑制了该抗原的神经毒性，而对其催化活力无影响，表明NPLA2有两个活性结构域，即神经毒性与催化活性分别位于两个活性位点上。利用免疫亲和层... 用江浙蝮蛇毒中纯化的中性磷脂酶A2（NPL2）免疫家兔，获得了多克隆抗体.抗体与抗原结合后，抑制了该抗原的神经毒性，而对其催化活力无影响，表明NPLA2有两个活性结构域，即神经毒性与催化活性分别位于两个活性位点上。利用免疫亲和层析纯化了NPLA2的多抗，经ELISA检测，与酸性PLA2和碱性PLA2均有免疫交叉反应，这提示了NPLA2与酸性PLA2及碱性PLA2的抗原决定簇有同源性。 展开更多
关键词 江浙蝮蛇 中性磷脂酶A2 抗体 蛇毒 免疫学
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雷公藤甲素调控nSMase2-Cer鞘脂代谢信号通路发挥抗胰腺癌的作用及其相关机制研究
3
作者 唐科 罗余琴 谭亲友 《中南药学》 CAS 2024年第3期598-605,共8页
目的探究雷公藤甲素抑制胰腺癌细胞系PANC-1细胞增殖的作用机制,揭示其抗胰腺癌的作用与神经鞘脂之间的相互联系。方法用不同浓度梯度的雷公藤甲素处理胰腺癌PANC-1细胞后,检测细胞增殖、迁移能力及凋亡情况。通过PCR array实验筛选给药... 目的探究雷公藤甲素抑制胰腺癌细胞系PANC-1细胞增殖的作用机制,揭示其抗胰腺癌的作用与神经鞘脂之间的相互联系。方法用不同浓度梯度的雷公藤甲素处理胰腺癌PANC-1细胞后,检测细胞增殖、迁移能力及凋亡情况。通过PCR array实验筛选给药后PANC-1细胞上有变化的神经鞘脂基因,并通过q-PCR和Western blot实验验证所筛选基因的转录翻译情况。构建PANC-1细胞相关基因的过表达模型并进行细胞功能性实验验证。Western blot实验检测瞬时转染的PANC-1细胞给药前后及不同药物浓度下nSMase2蛋白水平的变化及Caspase-3蛋白水平的变化。免疫荧光实验检测不同药物梯度和过表达模型下神经酰胺(Cer)含量的变化。建立BALB/C裸鼠PANC-1皮下成瘤模型,在体内验证雷公藤甲素对裸鼠肿瘤大小的影响。提取肿瘤组织进行Western blot实验,肝组织进行HE染色实验。结果雷公藤甲素呈浓度梯度抑制PANC-1细胞的增殖、迁移能力并促进细胞凋亡。神经鞘脂相关基因SMPD3与雷公藤甲素抑制PANC-1细胞活力相关性最强,且雷公藤甲素可下调其在PANC-1细胞中的表达。过表达SMPD3后PANC-1细胞增殖、迁移能力明显增强,细胞凋亡减少。雷公藤甲素可促使PANC-1细胞内Cer含量的升高,而过表达SMPD3后是可以降低PANC-1细胞内Cer的含量,此外,雷公藤甲素还能够促进PANC-1细胞Caspase家族蛋白Caspase-3表达的上调。体内实验表明雷公藤甲素能够下调SMPD3蛋白的表达,促进Caspase-3活化进而促进肿瘤发生细胞凋亡,发挥抑制裸鼠体内肿瘤生长的作用。结论体内外实验均表明雷公藤甲素通过下调SMPD3的表达,影响nSMase2-Cer信号通路抑制PANC-1细胞的生长。 展开更多
关键词 雷公藤甲素 PANC-1细胞 中性鞘磷脂酶2 细胞凋亡
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SMPD3在肿瘤中生物学作用的研究进展
4
作者 赵婧菲 杨露勇 +1 位作者 阮柏 郑建勇 《国际生物医学工程杂志》 CAS 2024年第3期281-287,共7页
鞘磷脂磷酸二酯酶3(SMPD3)编码的中性鞘磷脂酶2(nSMase2)作为调节细胞生长变异、诱导细胞凋亡的重要信使分子神经酰胺的关键酶,在肿瘤的发生发展中发挥重要作用。一方面常见的表观遗传学改变SMPD3甲基化通过调控细胞增殖、分化及凋亡等... 鞘磷脂磷酸二酯酶3(SMPD3)编码的中性鞘磷脂酶2(nSMase2)作为调节细胞生长变异、诱导细胞凋亡的重要信使分子神经酰胺的关键酶,在肿瘤的发生发展中发挥重要作用。一方面常见的表观遗传学改变SMPD3甲基化通过调控细胞增殖、分化及凋亡等过程使基因表达紊乱介导癌症发生,同时SMPD3还通过其水解产物诱导肿瘤细胞凋亡与生长周期停滞。另一方面,SMPD3还与外泌体分泌、炎症反应及肿瘤细胞增殖等促癌过程密切相关。主要对SMPD3在肿瘤疾病中生物学作用的研究进展进行综述,以期加强对SMPD3在不同肿瘤发生发展中扮演角色的认识,为肿瘤疾病的基础研究与临床诊疗提供更广阔的思路。 展开更多
关键词 鞘磷脂磷酸二酯酶3 中性鞘磷脂酶2 肿瘤 神经酰胺
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丹皮酚通过抑制p38 MAPK/N-SMase2通路减少脂多糖诱导的THP-1细胞外泌体分泌 被引量：4
5
作者 谢先梅 李超 +1 位作者 孙颖 戴敏 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2019年第1期11-17,共7页
目的探讨丹皮酚抑制脂多糖诱导后THP-1细胞分泌外泌体的作用及机制。方法超速离心法提取外泌体,透射电镜(TEM)观察外泌体形态,Western blot检测标志蛋白Alix、TSG101、CD9和CD63,动态光散射检测外泌体粒径。CCK-8检测细胞存活率,BCA法... 目的探讨丹皮酚抑制脂多糖诱导后THP-1细胞分泌外泌体的作用及机制。方法超速离心法提取外泌体,透射电镜(TEM)观察外泌体形态,Western blot检测标志蛋白Alix、TSG101、CD9和CD63,动态光散射检测外泌体粒径。CCK-8检测细胞存活率,BCA法检测外泌体蛋白量,Western blot检测N-SMase2、p-p38 MAPK蛋白水平。结果超速离心法获得的微囊泡结构物具有完整清晰茶托样膜,直径众数为130 nm,含标志性蛋白Alix、TSG101、CD9和CD63,鉴定为外泌体。丹皮酚(120、60及30μmol/L)可降低脂多糖(1 mg/L)诱导的THP-1细胞分泌外泌体,减少N-SMase2蛋白表达,抑制p38 MAPK磷酸化。结论丹皮酚抑制THP-1细胞外泌体分泌,该作用与抑制p38 MAPK/N-SMase2通路有关。 展开更多
关键词 丹皮酚 外泌体 中性鞘磷脂酶2 P38丝裂原活化蛋白激酶 THP-1细胞
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中性鞘磷脂酶2对缺氧预处理间充质干细胞来源的外泌体生物学特性的影响 被引量：1
6
作者 卢凯 王香云 罗玉寅 《中国心血管杂志》 2020年第3期253-257,共5页
目的探讨中性鞘磷脂酶2对缺氧预处理骨髓间充质干细胞来源的外泌体生物学特性的影响。方法分离并体外扩增6周龄C57BL/6小鼠来源的骨髓间充质干细胞,收集细胞上清,分离来自缺氧处理的外泌体(ExoH)和常氧下培养来源的外泌体(ExoN),并鉴定... 目的探讨中性鞘磷脂酶2对缺氧预处理骨髓间充质干细胞来源的外泌体生物学特性的影响。方法分离并体外扩增6周龄C57BL/6小鼠来源的骨髓间充质干细胞,收集细胞上清,分离来自缺氧处理的外泌体(ExoH)和常氧下培养来源的外泌体(ExoN),并鉴定其生物学特性。比较ExoH和ExoN在体内实验中对心肌细胞保护作用的差异,同时收集在缺氧预处理状态下加入中性鞘磷脂酶2抑制剂GW4869来源的外泌体(ExoH+GW),并在体外实验中比较ExoN、ExoH和ExoH+GW对心肌细胞抗凋亡及血管新生能力的作用。结果ExoH组小鼠心肌梗死后28 d的射血分数显著高于ExoN组(44.12%±8.12%比20.73%±7.32%,n=20,t=11.95,P<0.05)。同时发现,缺氧增加中性鞘磷脂酶2的表达,而ExoH+GW组在体外管腔形成及心肌细胞保护方面明显弱于ExoH组,并且其微小RNA-210含量显著减低。结论缺氧预处理骨髓间充质干细胞来源的外泌体拥有更好的心脏保护能力,中性鞘磷脂酶2可能是主要的作用机制,可能通过影响外泌体内有益微小RNA的含量来发挥生物学作用。 展开更多
关键词 中性鞘磷脂酶2 间充质干细胞 外泌体 心肌保护
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中性鞘磷脂酶-2的调控机制与功能研究进展
7
作者 张澜 郭军 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期581-585,共5页
中性鞘磷脂酶-2主要分布于哺乳动物细胞质膜,能水解神经鞘磷脂生成神经酰胺,参与细胞凋亡、生长抑制、炎症反应等多种生理病理活动调节,并与阿尔茨海默病的发展、骨骼生长有关。在生理pH值和钙、镁、锰阳离子环境下,氧化应激能诱导中性... 中性鞘磷脂酶-2主要分布于哺乳动物细胞质膜,能水解神经鞘磷脂生成神经酰胺,参与细胞凋亡、生长抑制、炎症反应等多种生理病理活动调节,并与阿尔茨海默病的发展、骨骼生长有关。在生理pH值和钙、镁、锰阳离子环境下,氧化应激能诱导中性鞘磷脂酶-2磷酸化调节其活性,鞘磷脂等阴离子脂质以及受体活化的蛋白激酶C1/胚胎外胚层发展蛋白等信号分子的诱导结合也是其活性的重要调节途径。本文主要综述中性鞘磷脂酶-2的结构、功能及其分子机制,揭示其当前研究进展。 展开更多
关键词 中性鞘磷脂酶-2 功能 调控机制
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