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褪黑素对长期接受己烯雌酚(DES)大鼠垂体非组织特异性calpains表达及活性调节
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作者 赵炜疆 师忠芳 +3 位作者 袁芳 李桂林 张亚卓 王忠诚 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期624-628,共5页
目的研究褪黑素(melatonin)对长期接受己烯雌酚(DES)大鼠垂体非组织特异性calpains表达及活性变化的影响。方法30只♀Wistar大鼠,实验分5组:组1:腹腔注射葵花油(1ml.kg-1,每周两次)共计16wk;组2:腹腔注射己烯雌酚(DES,5mg.kg-1,每周两... 目的研究褪黑素(melatonin)对长期接受己烯雌酚(DES)大鼠垂体非组织特异性calpains表达及活性变化的影响。方法30只♀Wistar大鼠,实验分5组:组1:腹腔注射葵花油(1ml.kg-1,每周两次)共计16wk;组2:腹腔注射己烯雌酚(DES,5mg.kg-1,每周两次),共计16wk;组3:腹腔注射DES(5mg.kg-1,每周两次),连续12wk,之后停止给予DES至第16周结束;组4和组5:腹腔注射己烯雌酚溶液(1mg·kg-1,每周两次),连续16wk,并于实验第13周开始分别同时给予皮下注射褪黑素(0.25mg.d-1和1.0mg.d-1),至第16周结束。使用蛋白质印迹(Westernblot)法检测垂体组织μ-和m-calpains表达,采用酪蛋白酶谱法观察不同组别垂体组织胞质及膜成分中μ-和m-calpains的活性变化。结果长期给予DES垂体组织μ-和m-calpain水平升高,膜成分活性增高,而停止给予DES或同时应用不同剂量褪黑素可不同程度降低μ-和m-calpain水平,抑制两种非组织特异性calpains的激活。结论长期给予♀性Wistar大鼠DES可使垂体组织中calpains表达及激活明显增高,并具有一定的雌激素依赖性。不同剂量的褪黑素可减少cal-pains表达,稳定胞质中calpains,抑制其转膜激活。 展开更多
关键词 Wistar大鼠 己烯雌酚 褪黑素 泌乳素腺瘤 中性半胱氨酸蛋白酶 酪蛋白酶谱法
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Ezrin基因沉默通过降低Calpain-1活性抑制血管紧张素Ⅱ诱导的ABCA1降解
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作者 王兰 郭静 +3 位作者 莫显刚 安静 张莉 洪伟 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2018年第3期217-221,共5页
目的探讨埃兹蛋白（Ezrin）基因表达降低对RAW264.7钙激活中性半胱氨酸蛋白酶（Calpain-1）活性及三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ABCA1）蛋白表达的影响。方法实时荧光定量PCR及Western blot法分别检测靶向作用于Ezrin基因的小干扰RNA（si... 目的探讨埃兹蛋白（Ezrin）基因表达降低对RAW264.7钙激活中性半胱氨酸蛋白酶（Calpain-1）活性及三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ABCA1）蛋白表达的影响。方法实时荧光定量PCR及Western blot法分别检测靶向作用于Ezrin基因的小干扰RNA（siRNA）的抑制效率。Western blot法检测血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）及联合加入Ezrin siRNA后Calpain-1的蛋白表达水平变化。Western blot法检测AngⅡ及联合加入Calpain抑制剂N-乙酰基-L-亮氨酰-L-亮氨酰-L-正亮氨酸（ALLN）、Ezrin siRNA后对ABCA1蛋白表达水平的影响。结果 Ezrin siRNA转染组较对照组Ezrin的mRNA和蛋白表达均下调（P〈0.05）。Western blot结果显示AngⅡ可上调Calpain-1的活性（4.92±0.23比1.00±0.17,P〈0.05）,而Ezrin siRNA可逆转Calpain-1的活性上调（0.23±0.21比4.92±0.23,P〈0.05）。此外,AngⅡ处理后ABCA1蛋白表达下调（0.167±0.055比0.732±0.072,P〈0.05）,这种作用可被Ezrin siRNA逆转（0.611±0.048比0.167±0.055,P〈0.05）,而给予Calpain抑制剂ALLN干预未能进一步提高ABCA1蛋白水平。结论Ezrin可能通过Calpain-1途径在AngⅡ诱导的ABCA1表达降低过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 埃兹蛋白 钙激活中性半胱氨酸蛋白酶 三磷酸腺苷结合盒转运体A1 血管紧张素Ⅱ
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